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A Protocol for a Highly Consistent, High Level Production <i>in Vivo</i>of <i>Plasmodium falciparum</i>Oocysts and Sporozoites 被引量:2
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作者 Martin Looker Andrew W. Taylor-Robinson 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2014年第13期985-993,共9页
Investigation of the intimate relationship between the human malaria parasite Plasmodium falciparum and its Anopheles vector requires the reliable production and isolation of successive sexual stages of the parasite f... Investigation of the intimate relationship between the human malaria parasite Plasmodium falciparum and its Anopheles vector requires the reliable production and isolation of successive sexual stages of the parasite from infected mosquitoes. Such an advance in propagation would benefit a range of molecular, cellular, immunochemical and transmission-blocking research studies. Parasite cultivation, mosquito rearing, infection and subsequent dissection of mosquitoes are all highly technical procedures that require both skill and experience to perform with competence. Furthermore, to produce mosquitoes of an appropriate age to infect during the short period in which parasites are viable for infection demands precise planning in order to coordinate the interacting life cycles of the parasite and vector. Here, a protocol is described for the complete development of P. falciparum within Anopheles stephensi. A very consistent, high level production in vivo of P. falciparum oocysts and sporozoites is demonstrable by dissection of the mosquito midgut and salivary glands, respectively. 展开更多
关键词 Malaria Plasmodium falciparum Cultivation oocyst SPOROZOITE Infectivity
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Effects of mosquito hemocytes on normal and degenerated oocysts of Plasmodium yoelii and their role in oocyst melanization
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作者 黄复生 王兴相 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1994年第2期120-122,共3页
Anopheles stephenst, infected with Plasinodium yoelii, was fed with 10% sucrose solution contatning 1% difluoromethylornithine (DFMO) to induce oocyst degeneration of the malaria parasites. On the 11th day after infec... Anopheles stephenst, infected with Plasinodium yoelii, was fed with 10% sucrose solution contatning 1% difluoromethylornithine (DFMO) to induce oocyst degeneration of the malaria parasites. On the 11th day after infection, the effects of mosquito hemocytes On the normal and degenerated oocysts were observed under transmission electron microscope. In the control group, no hemocyte could be found around the normally-developed oocysts. In the DFMO-treated group, all the oocysts underwent degeneration in various degrees and some of them were melanized. All the oocysts were attached by one or more hemocytes of the kind of granulocytes.There were many granules with microtubular structure in the cytoplasm of the hemocytes and in the space between the hemocyte and the oocyst. The findings suggest that the degeneration of oocysts can attract the hemocytes to attach around them and the latter can release granules and possibly other substances to cause encapsulation and melanization of the oocvsts. 展开更多
关键词 PLASMODIUM yoelii oocyst Anopheles STEPHENSI hemocyte MELANIZATION DIFLUOROMETHYLORNITHINE
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Prevalence of Cryptosporidial Oocysts in Soil of Recreational Parks in Abuja, Nigeria
3
作者 Idowu Oluwabukola Olufemi Otalu Otalu Jr. +2 位作者 Mohammed Bello Idris Alao Lawal Jacob Kwada Pajhi Kwaga 《Open Journal of Medical Microbiology》 2014年第4期224-227,共4页
Contamination of soil with cryptosporidial oocysts poses a great health risk to people especially in individuals who are immune-compromised. Exposure to contaminated soil can cause diarrhoea in humans especially in ch... Contamination of soil with cryptosporidial oocysts poses a great health risk to people especially in individuals who are immune-compromised. Exposure to contaminated soil can cause diarrhoea in humans especially in children who play around the parks and may not wash their hands before handling food. The prevalence of cryptosporidial oocyst in soils of 4 recreational parks in Abuja, Nigeria was investigated. Four hundred soil samples were collected from various locations within the recreational parks and examined for the presence of cryptosporidial oocyst using modified acid fast staining technique. In nine (2.3%) of the samples, 8 were from park A and 1 was from park B contained cryptosporidial oocyst. There was significant association (χ2 = 20.1;df = 2;p = 0.00004) between prevalence of Cryptosporidium oocysts and level of hygiene of the parks. It was concluded that soil in recreational parks may be a source of infection with Cryptosporidium oocysts. 展开更多
关键词 Cryptosporidial oocyst RECREATIONAL Parks Abuja HEALTH Risk
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The Effects of Washing Conditions on the Coccidian Oocyst Collection in Chicken Manure
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作者 JIANG Shan 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2013年第4期204-205,共2页
To optimize the production process of occidium vaccine and provide the basis and methods for the production of live vaccine,this experiment uses the collected liquid with different centrifugal forces and centrifugatio... To optimize the production process of occidium vaccine and provide the basis and methods for the production of live vaccine,this experiment uses the collected liquid with different centrifugal forces and centrifugation time,to measure and compare the recovery,purity,collection time and costs of coccidian oocyst,for the purpose of exploring the impact of washing conditions on coccidian oocyst collection in chicken manure.The results show that for the centrifugal machine with the radius of 17.2 cm,the best washing centrifugal rotational speed is 2500 rpm /min,that is,the best washing centrifugal force RCF = 1201.85 g,and the centrifugation time is 12 min. 展开更多
关键词 Washing conditions oocysts Recovery Centrifugal force
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Occurrence of Cryptosporidium oocysts in edible frogs (Rana species) sold for human consumption in Hanwa frog market, Zaria, Kaduna State, Nigeria
5
作者 Grace Sabo Nok Kia Blessing Iveren Ukuma +1 位作者 Mathias Bello Odoba Jerome Unubi Okpanachi 《Journal of Coastal Life Medicine》 CAS 2017年第5期202-205,共4页
Objective: To determine the occurrence of Cryptosporidium oocysts in edible frogs (Rana spp.) sold at the Hanwa frog market, Zaria, Kaduna State, Nigeria. Methods: A total of 117 frogs (Rana spp.) were randomly collec... Objective: To determine the occurrence of Cryptosporidium oocysts in edible frogs (Rana spp.) sold at the Hanwa frog market, Zaria, Kaduna State, Nigeria. Methods: A total of 117 frogs (Rana spp.) were randomly collected based on consent and availability at the market. The intestinal contents from the frogs were examined by staining flotation and sedimentation smears with modified Ziehl-Neelsen staining technique and microscopy of the oocysts. Results: Overall, 35.9% of frogs sampled from the Hanwa frog market were positive for Cryptosporidium oocysts. There were more Cryptosporidium oocysts detected by sedimentation test (28.2%) than flotation test (23.9%). There was no significant statistical association between sex of frogs and oocyst detection (χ2 = 0.5349, P > 0.05). Also, there was no correlation between the weights of frogs and the sizes of the Cryptosporidium oocysts detected (r = 0.0109, P > 0.05). Nevertheless, female frogs (40%) and frogs within the weight range 170–219 g were more infected with Cryptosporidium (66.7%). Oocysts size range 6.10–7.00 μm had the highest frequency of 10 (23.8%). By size 28.2% of the oocysts detected suggested infection with Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium maleagridis. Conclusions: This study has established that edible frogs (Rana spp.) sold at the Hanwa frog market for human consumption were infected with Cryptosporidium spp. which constitutes a valid public health risk especially for immunocompromised individuals. 展开更多
关键词 Cryptosporidium oocystS EDIBLE FROGS (Rana spp.) Frog market ZOONOTIC potential NIGERIA
原文传递
基于血球计数板法的球虫卵囊计数方法研究
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作者 李建 辛凌翔 +11 位作者 王秀丽 任小侠 刘元杰 姚文生 张一帜 魏津 马欣 王甲 冯妍 赵浩然 刘燕 朱良全 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第3期74-80,共7页
本试验旨在基于血球计数板法探究影响球虫卵囊计数准确性的因素,评价相关因素对结果准确性的影响程度,从而对目前广泛应用的球虫活疫苗卵囊计数方法进行改进。试验中对比不同放大倍数视野、不同生产厂家血球计数板、不同球虫孢子化卵囊... 本试验旨在基于血球计数板法探究影响球虫卵囊计数准确性的因素,评价相关因素对结果准确性的影响程度,从而对目前广泛应用的球虫活疫苗卵囊计数方法进行改进。试验中对比不同放大倍数视野、不同生产厂家血球计数板、不同球虫孢子化卵囊浓度和助悬剂对球虫卵囊计数结果准确性的影响。结果显示,视野放大倍数、血球计数板、球虫孢子化卵囊浓度和助悬剂对球虫卵囊计数结果均有一定影响,其中,视野放大倍数有显著影响。添加助悬剂,调整样品球虫孢子化卵囊数量至181~343个/0.4μL,用改良Neubauer血球计数板在10×20倍显微镜下进行计数,结果较为准确,连续6次计数结果的变异系数基本控制在20%以内。结果表明,限定视野放大倍数、血球计数板和球虫孢子化卵囊浓度及添加助悬剂,可有效降低球虫卵囊计数结果的变异系数,提高计数结果的准确性,降低人员误差,为《中华人民共和国兽药典》改版修订提供了试验依据和理论参考。 展开更多
关键词 卵囊计数 助悬剂 孢子化卵囊 球虫 血球计数板
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巨型艾美耳球虫卵囊壁蛋白的富集和鉴定
7
作者 曹俊琴 肖琴 +7 位作者 曲自刚 李文卉 张念章 刘万荣 肖光峰 高生智 马永华 付宝权 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第12期1662-1672,共11页
采用蔗糖密度梯度离心法从破碎的巨型艾美耳球虫卵囊中分离出卵囊壁,通过LC-MS/MS技术鉴定出3398个蛋白质和8228个肽段;并且成功表达了由XP013338282.1和XP013337465.1基因编码的2种卵囊壁蛋白,用间接免疫荧光法证实前者定位于卵囊壁和... 采用蔗糖密度梯度离心法从破碎的巨型艾美耳球虫卵囊中分离出卵囊壁,通过LC-MS/MS技术鉴定出3398个蛋白质和8228个肽段;并且成功表达了由XP013338282.1和XP013337465.1基因编码的2种卵囊壁蛋白,用间接免疫荧光法证实前者定位于卵囊壁和孢子囊,后者定位于卵囊壁,这2种蛋白都可作为潜在的卵囊壁表面标志物。本研究解析了巨型艾美耳球虫卵囊壁的组成,有助于探究卵囊在生活史中的作用机制,为挖掘检测和药物靶标奠定了基础。 展开更多
关键词 巨型艾美耳球虫 卵囊壁 蛋白质组学 Β-微管蛋白 SAG2蛋白
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基于重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条的猫粪便刚地弓形虫快速检测方法的建立
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作者 邓鳗琴 伍孟琛 +3 位作者 曾建露 陈学秋 马光旭 杨怡 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第6期981-987,共7页
为建立一种用于猫粪便样本中刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)卵囊的重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification-lateral flow strip,RPA-LF)快速检测方法,首先根据刚地弓形虫RE-529序列进行RPA引物和探针设... 为建立一种用于猫粪便样本中刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)卵囊的重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification-lateral flow strip,RPA-LF)快速检测方法,首先根据刚地弓形虫RE-529序列进行RPA引物和探针设计,构建RPA-LF检测体系;其次,通过检测刚地弓形虫、微小隐孢子虫、毕氏肠微孢子虫、芽囊原虫、贾第鞭毛虫的基因组对建立的检测方法进行特异性分析;然后,利用系列质量浓度梯度的刚地弓形虫基因组DNA对建立的检测方法进行灵敏度分析;最后,通过对比RPA-LF与聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)2种方法对52份猫粪便临床样本的检测结果来验证RPA-LF的临床检测效果。结果显示:所建立的RPA-LF检测方法与微小隐孢子虫、毕氏肠微孢子虫、芽囊原虫、贾第鞭毛虫这4种常见的猫肠道内寄生原虫均无交叉反应,特异性好;该方法的灵敏度高,检出限为1 pg/µL;在对临床样本的检测中,RPA-LF与PCR的结果一致。综上所述,本研究建立的RPA-LF检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便、检测快速等优点,适用于猫刚地弓形虫病的临床筛查,对猫刚地弓形虫感染的早期防控具有重要意义。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 卵囊 猫粪便样本 重组酶聚合酶扩增 侧流层析试纸条
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柔嫩艾美耳球虫湖南株的分离和鉴定
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作者 胡盼 陈旭芳 +4 位作者 王晓蕾 李玄 刘伟 蔡鹏 曾建国 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期53-59,共7页
为了鉴定造成湖南省长沙市某黄羽肉鸡养殖场6周龄肉鸡死亡的鸡球虫种类,本试验采用饱和食盐水漂浮法和单卵囊分离技术,从病死鸡的粪便和盲肠内容物中成功分离出1株球虫,通过观察该虫株卵囊的形态和大小,初步鉴定其种类。通过聚合酶链式... 为了鉴定造成湖南省长沙市某黄羽肉鸡养殖场6周龄肉鸡死亡的鸡球虫种类,本试验采用饱和食盐水漂浮法和单卵囊分离技术,从病死鸡的粪便和盲肠内容物中成功分离出1株球虫,通过观察该虫株卵囊的形态和大小,初步鉴定其种类。通过聚合酶链式反应(PCR)技术进一步确定了该球虫的种类,随后检测了该虫株的潜隐期、裂殖体寄生部位和大小、致病力和最短孢子化时间,明确其生物学特性。结果显示,该球虫寄生于盲肠,卵囊平均大小为22.2μm×19.0μm,卵囊指数为1.17;对PCR扩增产物进行测序,比对分析核苷酸同源性,结果显示,该虫株与GenBank中登录的7株柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)的同源性为96.44%~100%,将其命名为E.tenella-TCS2404-01;生物学特性鉴定结果显示,该虫株潜隐期为124 h,最短孢子化时间为16 h,接种1.2×10^(4)个卵囊/羽的分离虫株可导致鸡只相对增重率下降至73.8%,平均肠道病变评分达到3.7分,死亡率达到30%。结果表明,本试验分离出1株致病力较强的E.tenella虫株,该发现对于了解湖南省鸡球虫病的流行情况及其防控具有重要意义,为未来针对该虫株的疫苗研发和药物开发提供了基础信息。 展开更多
关键词 湖南省 同源性 柔嫩艾美耳球虫 单卵囊分离技术 PCR鉴定 生物学特性
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1种保留柔嫩艾美耳球虫完整形态的新型破壁技术
10
作者 邢涛 沈辉 +1 位作者 李静敏 姜逸 《现代畜牧科技》 2025年第5期18-20,共3页
该试验旨在研究保留未成熟柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊壁完整形态的破壁技术和球虫原生质体的染色方法。采用冻融循环技术和浓盐酸—乙醇预处理未成熟E.tenella卵囊,后加入Hoechst 33258染料,进行E.tenella原生质体的荧光染色。结果... 该试验旨在研究保留未成熟柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊壁完整形态的破壁技术和球虫原生质体的染色方法。采用冻融循环技术和浓盐酸—乙醇预处理未成熟E.tenella卵囊,后加入Hoechst 33258染料,进行E.tenella原生质体的荧光染色。结果显示,冻融循环和盐酸—乙醇处理组可以明显看到卵囊壁完好的整体形态结构、细胞核被浓染,而对照组和仅冻融循环处理组并未看到核浓染,这说明卵囊壁的组织结构被破坏,使得Hoechst 33258染料渗入卵囊壁、穿透细胞膜,可以荧光染色球虫原生质体。结果表明,该研究成功建立了一种保存未成熟E.tenella卵囊壁完整形态的新型破壁技术,首次报道了球虫原生质体的染色方法。对球虫卵囊进行标记和示踪,可以直观地观察到卵囊的形态变化和数量变化,有助于更好地理解球虫病的发病机理,为进一步开发抗球虫药提供新思路。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 卵囊 原生质体 荧光染色
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鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术的构建及致病性研究 被引量:41
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作者 林青 于三科 +3 位作者 陈秀荔 潘广林 王建锋 李涛 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第3期35-37,共3页
构建了一种新的鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术 ,并对杨陵柔嫩艾美耳球虫地理株进行了分离 ,对继代增殖的纯种卵囊进行了致病性试验。结果表明 ,该单卵囊分离技术简单易行 ,单卵囊感染成功率可达4 0 % ;该虫株对雏鸡有很强的致病性 ,... 构建了一种新的鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术 ,并对杨陵柔嫩艾美耳球虫地理株进行了分离 ,对继代增殖的纯种卵囊进行了致病性试验。结果表明 ,该单卵囊分离技术简单易行 ,单卵囊感染成功率可达4 0 % ;该虫株对雏鸡有很强的致病性 ,经口接种 1× 10 5个孢子化卵囊 ,致死率高达 80 %。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 单卵囊 分离技术 致病性
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不同剂量和免疫次数对鸡毒害艾美耳球虫免疫保护力的影响 被引量:17
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作者 卞国志 蔡建平 +3 位作者 谢明权 翁亚标 覃宗华 叶秀华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期39-42,共4页
以相对增重率(RBWG)、饲料转化率(FCR)和盲肠相对卵囊产量(ROP)为指标,评价了1次或2次分别以1×103个或3×103个毒害艾美耳球虫(E.necatrix)孢子化卵囊(SO)/鸡剂量免疫接种后特异性免疫力的产生和持续时间。笼养岭南黄肉雏鸡于... 以相对增重率(RBWG)、饲料转化率(FCR)和盲肠相对卵囊产量(ROP)为指标,评价了1次或2次分别以1×103个或3×103个毒害艾美耳球虫(E.necatrix)孢子化卵囊(SO)/鸡剂量免疫接种后特异性免疫力的产生和持续时间。笼养岭南黄肉雏鸡于3日龄1次或3日龄和10日龄2次分别接种不同剂量的E.necatrix SO后,于17日龄(2次免疫组为24日龄)、34日龄和50日龄时以14×104SO/鸡剂量的同源卵囊攻虫,结果表明,免疫后2周卵囊接种鸡已产生坚强免疫力,1次免疫接种者(17日龄)高、低2个不同剂量组的RBWG、FCR和ROP分别为95.5%、2.32、24.54%和101.4%、2.32、21.1%;而2次免疫组(24日龄)的上述指标则分别为106.5%、2.44、9.3%和98.2%、2.38、7.48%。至34日龄和50日龄攻虫时,这些指标均有不同程度的下降,且随着时间延长,下降更为明显,但2次免疫处理组的这些指标均明显优于1次免疫者;同一次处理的不同剂量组间无明显差异。结果揭示,雏鸡口服免疫接种一定剂量的E.necatrix孢子化卵囊后可迅速诱导鸡体特异性免疫力的产生,但免疫保护力在笼养条件下持续时间较短。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫(E.necatrix) 卵囊 免疫接种 免疫力
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用PCR技术检测水中隐孢子虫 被引量:13
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作者 宗祖胜 胡洪营 +3 位作者 张金松 卢益新 余道坚 邓中平 《中国给水排水》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期91-93,共3页
 介绍了一种检测水中隐孢子虫的巢式PCR方法:根据Cryptosporidiumparvum18srRNA基因序列选用了两对引物,特异性扩增了该基因可变区中1056bp和435bp目标片段。加标试验表明,该方法的检测限为10个卵囊。
关键词 隐孢子虫卵囊 巢式PCR 免疫磁珠分离 免疫荧光分析
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家鹅球虫种类调查及人工感染试验 被引量:7
14
作者 戴亚斌 刘梅 +3 位作者 陶建平 李文良 丁铲 刘学贤 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期260-264,共5页
对江苏省扬州、盐城地区的鹅球虫种类进行了调查和人工感染试验.结果表明,鹅球虫感染率为74.4%.共鉴定出6种球虫,即:Eimeriaanseris、E.fulva、E.hermani、E.nocens、E.stigmosa、Tyzzeriaparvula.12日龄无球虫感染仔鹅感染5×104... 对江苏省扬州、盐城地区的鹅球虫种类进行了调查和人工感染试验.结果表明,鹅球虫感染率为74.4%.共鉴定出6种球虫,即:Eimeriaanseris、E.fulva、E.hermani、E.nocens、E.stigmosa、Tyzzeriaparvula.12日龄无球虫感染仔鹅感染5×104个混合卵囊即发生死亡.通过单种卵囊接种试验获得了5种球虫的纯种卵囊并对它们的一些生物学特征进行了观察,为这些球虫的生活史和致病性研究奠定了基础. 展开更多
关键词 鹅球虫 种类 人工感染 纯种卵囊 饲养 致病性
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微小隐孢子虫卵囊DNA提取及用于PCR检测 被引量:12
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作者 沈玉娟 曹建平 +6 位作者 卢潍媛 李小红 刘海鹏 徐馀信 周晓农 汤林华 刘述先 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期228-230,共3页
目的采用3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并用于PCR检测以进行比较。方法微小隐孢子虫卵囊经多次冻融加热破壁后,采用螯合树脂(Chelex-100)、酚/氯仿和基因组DNA纯化系统试剂盒3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并根据微小隐孢子虫基因... 目的采用3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并用于PCR检测以进行比较。方法微小隐孢子虫卵囊经多次冻融加热破壁后,采用螯合树脂(Chelex-100)、酚/氯仿和基因组DNA纯化系统试剂盒3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并根据微小隐孢子虫基因序列(L16996)设计一对寡核苷酸引物,分别对3种方法制备模板进行PCR扩增分析。Chelex-100提取的DNA也用于观察PCR检测的敏感性。结果3种方法制备的微小隐孢子虫卵囊模板用于PCR检测均获得1条446 bp条带,Chelex-100提取的DNA用于PCR检测的敏感性至少达0.5个卵囊。结论3种方法提取的微小隐孢子虫卵囊DNA均可用于PCR检测,Chelex-100法是一种高效而快速的微量提取DNA方法,适用于对隐孢子虫DNA的检测。 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 卵囊 脱氧核精核酸 分离和提纯 螯合树脂法 聚合酶链反应
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隐孢子虫牛源分离株的分离和鉴定 被引量:17
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作者 刘海鹏 曹建平 +8 位作者 沈玉娟 陈有贵 李小红 卢潍媛 徐馀信 刘宜升 刘述先 周晓农 汤林华 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期81-86,共6页
目的分离和鉴定采自徐州自然感染奶牛粪便中的隐孢子虫卵囊。方法在徐州某奶牛场采集经改良抗酸染色镜检确认为隐孢子虫感染的奶牛粪便,用不连续Sheather’s蔗糖密度梯度离心法纯化卵囊。采用Chelex-100方法提取卵囊基因组DNA,设计引物... 目的分离和鉴定采自徐州自然感染奶牛粪便中的隐孢子虫卵囊。方法在徐州某奶牛场采集经改良抗酸染色镜检确认为隐孢子虫感染的奶牛粪便,用不连续Sheather’s蔗糖密度梯度离心法纯化卵囊。采用Chelex-100方法提取卵囊基因组DNA,设计引物扩增小亚基核糖体RNA(SSU rRNA)基因和卵囊囊壁蛋白(COWP)基因,分别克隆到pGEM-T和pGEM-T Easy载体,测定核苷酸序列,运用BLAST和MEGA软件进行序列同源性和种系发生分析。结果分离的隐孢子虫卵囊个体大小为(7.4±0.32)μm×(5.4±0.21)μm,长宽比为1.3±0.07(n=20)。徐州牛源隐孢子虫与Gen- Bank公布的安氏隐孢子虫比较,SSU rRNA和COWP基因序列同源性分别为100%和99%。种系发生分析显示该株隐孢子虫与安氏隐孢子虫处于同一分支。结论由徐州自然感染奶牛粪便中分离获得的隐孢子虫是安氏隐孢子虫。 展开更多
关键词 安氏隐孢子虫 小亚基核糖体RNA 卵囊囊壁蛋白 种系发生分析
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柔嫩艾美耳球虫孢子发育阶段虫体抑制性消减文库的构建 被引量:5
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作者 韩红玉 林矫矫 +5 位作者 赵其平 董辉 姜连连 王鑫 韩静芳 黄兵 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1005-1010,共6页
为了分离鉴定柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子发育阶段虫体的差异表达基因,分别以柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊为驱动组、子孢子为实验组,或未孢子化卵囊为驱动组、孢子化卵囊为实验组,利用抑制性消减杂交(SSH)技术,构... 为了分离鉴定柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子发育阶段虫体的差异表达基因,分别以柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊为驱动组、子孢子为实验组,或未孢子化卵囊为驱动组、孢子化卵囊为实验组,利用抑制性消减杂交(SSH)技术,构建了2个子孢子cDNA消减文库和1个孢子化卵囊cDNA消减文库。随机从3个cDNA消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定2个子孢子cDNA消减文库的重组率都为96%,孢子化卵囊cDNA消减文库的重组率为98%。从每个文库中随机挑取50个克隆测序,并进行同源性比较分析,结果显示:从孢子化卵囊cDNA消减文库中获得了13个单一有效序列,其中8个EST与已知蛋白同源性很高;从2个子孢子cDNA消减文库中共获得了40个单一有效序列,其中9个EST与已知蛋白同源,其余可能为柔嫩艾美耳球虫的新基因。这些结果为分离柔嫩艾美耳球虫新功能基因和进一步探索防治球虫病的方法提供了理论基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 未孢子化卵囊 孢子化卵囊 子孢子 抑制性消减杂交
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球虫消毒剂的筛选及氨水对艾美耳球虫卵囊抑杀条件的优化 被引量:8
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作者 韩利方 闫文朝 +5 位作者 李亚云 杜婷婷 钱伟锋 张旻 位治国 王天奇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第12期3601-3607,共7页
为了筛选有效的球虫消毒剂,本研究将柔嫩艾美耳球虫卵囊分别与16种常用消毒剂和1种高效抗球虫药物溶液(250mg/L妥曲珠利溶液)混合作用2h然后在2.5%重铬酸钾溶液中孢子化培养,或混合作用4h后接种14日龄雏鸡,根据卵囊孢子化率、孢子化抑... 为了筛选有效的球虫消毒剂,本研究将柔嫩艾美耳球虫卵囊分别与16种常用消毒剂和1种高效抗球虫药物溶液(250mg/L妥曲珠利溶液)混合作用2h然后在2.5%重铬酸钾溶液中孢子化培养,或混合作用4h后接种14日龄雏鸡,根据卵囊孢子化率、孢子化抑制率、每克粪便卵囊数量(oocysts per gram of feces,OPG)、病变计分和血便情况评价消毒剂和抗球虫药物抑杀球虫卵囊效果。结果显示,8%氨水对未孢子化卵囊和孢子化卵囊均表现为100%的抑杀效果;250mg/L妥曲珠利、3%甲醛、4%苯酚、0.5%过氧乙酸、5%NaOH+10%NaCl和5%NaOH对球虫卵囊活性具有一定的抑制作用,孢子化抑制率超过10%,但是对孢子化卵囊抑杀作用不明显;而剩余10种常用消毒剂对球虫卵囊没有明显的抑杀作用。氨水抑杀球虫卵囊条件优化的试验结果显示,1%~8%氨水与未孢子化卵囊作用1h以上,均可100%抑杀球虫卵囊活性。粪便干扰试验结果显示,粪便不影响2%和4%氨水对球虫卵囊的抑杀效果。本研究结果说明常用消毒剂和抗球虫药物不能有效杀灭球虫卵囊的活性,而氨水是一种高效球虫消毒剂。本研究结果可为开发新型高效球虫消毒剂和球虫病控制提供参考。 展开更多
关键词 球虫卵囊 常用消毒剂 氨水 卵囊孢子化率 孢子化抑制率
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隐孢子虫卵囊纯化方法的改进研究 被引量:8
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作者 黄磊 安春霞 +2 位作者 张素梅 宁长申 张龙现 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期79-80,共2页
用蒸馏水代替PBS稀释Sheather's蔗糖溶液,并测定不同稀释度的蔗糖溶液密度,使用不同密度的蔗糖溶液分离纯化安氏隐孢子虫、贝氏隐孢子虫和猪隐孢子虫卵囊,计算纯化后的卵囊回收率和卵囊活性。安氏隐孢子虫、贝氏隐孢子虫和猪隐孢子... 用蒸馏水代替PBS稀释Sheather's蔗糖溶液,并测定不同稀释度的蔗糖溶液密度,使用不同密度的蔗糖溶液分离纯化安氏隐孢子虫、贝氏隐孢子虫和猪隐孢子虫卵囊,计算纯化后的卵囊回收率和卵囊活性。安氏隐孢子虫、贝氏隐孢子虫和猪隐孢子虫卵囊纯化后的总回收率分别为47.5%、49.6%和41.7%;孔雀绿染色活性检测的活性率分别为97.9%、96.7%和95.1%;37℃水浴1h后的脱囊率分别为87.9%、80.0%和81.7%。 展开更多
关键词 隐孢子虫卵囊 纯化 蔗糖溶液
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E.tenella吉林株单卵囊的分离及PCR鉴定 被引量:17
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作者 杨桂连 李建华 +4 位作者 张西臣 赵权 宫鹏涛 蔡亚南 张国才 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第19期8893-8894,8900,共3页
[目的]为了获得E.tenella纯株,进行相关的分子生物学研究。[方法]对已经建立的球虫单卵囊分离技术进行改进,用分离的单卵囊胶囊接种雏鸡。同时应用PCR方法对收集的单卵囊分离株进行球虫种类鉴定。[结果]20只试验鸡中有15只粪便中分离到... [目的]为了获得E.tenella纯株,进行相关的分子生物学研究。[方法]对已经建立的球虫单卵囊分离技术进行改进,用分离的单卵囊胶囊接种雏鸡。同时应用PCR方法对收集的单卵囊分离株进行球虫种类鉴定。[结果]20只试验鸡中有15只粪便中分离到卵囊,感染成功率为75%。PCR扩增结果表明该单卵囊分离株为E.tenella。[结论]采用单卵囊胶囊进行接种,操作简便,既节省了接种时间,又降低了接种难度,且大大提高了接种成功率,为球虫的分子生物学研究提供了材料。 展开更多
关键词 E.TENELLA 单卵囊 PCR鉴定
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