目的探究乳腺癌源性LncRNA OIP5-AS1经肿瘤相关巨噬细胞(TAM)M2型极化调控乳腺癌细胞迁移、侵袭及上皮—间质转化的机制。方法MDA-MB-231细胞分设Control组(空白对照)、NC组(转染NC si RNA)和si-OIP5组(转染Lnc RNAOIP5-AS1 si RNA)。RT...目的探究乳腺癌源性LncRNA OIP5-AS1经肿瘤相关巨噬细胞(TAM)M2型极化调控乳腺癌细胞迁移、侵袭及上皮—间质转化的机制。方法MDA-MB-231细胞分设Control组(空白对照)、NC组(转染NC si RNA)和si-OIP5组(转染Lnc RNAOIP5-AS1 si RNA)。RT-qPCR检测Lnc RNA OIP5-AS1、IL-4和IL-13 m RNA表达;ELISA检测培养基上清IL-4和IL-13蛋白表达。Control组培养上清按不同体积比加入RPMI1640培养基中诱导M0巨噬细胞向TAM极化,RT-qPCR检测TAM中CD206 m RNA的表达;以NC组/si-OIP5组培养基上清诱导M0型巨噬细胞,Western blot检测CD206表达;继而构建巨噬细胞MDA-MB-231共培养模型,评估MDAMB-231细胞迁移侵袭能力并检测Vimentin、N-cadherin、Ecadherin表达变化。结果相较于Control及NC组,si-OIP5组Lnc RNAOIP5-AS1表达显著下调(P<0.001),IL-13m RNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05),而IL-4表达在各组间无明显差异。条件培养基呈体积依赖性诱导M0巨噬细胞CD206表达,40%体积比时效应最强(P<0.001)。相较NC组,si-OIP5组CD206蛋白水平显著降低(P<0.01)。共培养体系中,si-OIP5组MDA-MB-231细胞迁移侵袭能力显著减弱(P<0.001),E-cadherin表达上调,N-cadherin及Vimentin表达下调(均P<0.01)。结论乳腺癌源性Lnc RNA OIP5-AS1可经IL-13介导诱导TAM M2型极化,进而促进乳腺癌细胞的迁移、侵袭及EMT。展开更多
文摘目的探究乳腺癌源性LncRNA OIP5-AS1经肿瘤相关巨噬细胞(TAM)M2型极化调控乳腺癌细胞迁移、侵袭及上皮—间质转化的机制。方法MDA-MB-231细胞分设Control组(空白对照)、NC组(转染NC si RNA)和si-OIP5组(转染Lnc RNAOIP5-AS1 si RNA)。RT-qPCR检测Lnc RNA OIP5-AS1、IL-4和IL-13 m RNA表达;ELISA检测培养基上清IL-4和IL-13蛋白表达。Control组培养上清按不同体积比加入RPMI1640培养基中诱导M0巨噬细胞向TAM极化,RT-qPCR检测TAM中CD206 m RNA的表达;以NC组/si-OIP5组培养基上清诱导M0型巨噬细胞,Western blot检测CD206表达;继而构建巨噬细胞MDA-MB-231共培养模型,评估MDAMB-231细胞迁移侵袭能力并检测Vimentin、N-cadherin、Ecadherin表达变化。结果相较于Control及NC组,si-OIP5组Lnc RNAOIP5-AS1表达显著下调(P<0.001),IL-13m RNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05),而IL-4表达在各组间无明显差异。条件培养基呈体积依赖性诱导M0巨噬细胞CD206表达,40%体积比时效应最强(P<0.001)。相较NC组,si-OIP5组CD206蛋白水平显著降低(P<0.01)。共培养体系中,si-OIP5组MDA-MB-231细胞迁移侵袭能力显著减弱(P<0.001),E-cadherin表达上调,N-cadherin及Vimentin表达下调(均P<0.01)。结论乳腺癌源性Lnc RNA OIP5-AS1可经IL-13介导诱导TAM M2型极化,进而促进乳腺癌细胞的迁移、侵袭及EMT。
