用原代大鼠海马神经元为模型,对新型电转染方法Nucleofector^(TM)与脂质体DOTAP和Lipofectaimine^(TM)的转染效率和转染前后细胞存活率进行比较研究,探讨Nucleofector^(TM)的高效性与可靠性。从E18胎鼠海马中取出神经元进行体外培养,并...用原代大鼠海马神经元为模型,对新型电转染方法Nucleofector^(TM)与脂质体DOTAP和Lipofectaimine^(TM)的转染效率和转染前后细胞存活率进行比较研究,探讨Nucleofector^(TM)的高效性与可靠性。从E18胎鼠海马中取出神经元进行体外培养,并用神经微丝(NF)抗体进行免疫细胞化学染色鉴定细胞类型。分别用DOTAP,Lipofectamine^(TM) and Nucleofector^(TM)包裹pCMV-eGFP质粒转染原代大鼠海马神经元。神经元的存活率用流式细胞促检测。实验结果表明:DOTAP和Lipofectamine^(TM)的基因转染效率仅为1.55％和2.45％,而Nucleofector^(TM)的转染效率则超过20％;细胞转染前后的存活率在DOTAP组分别为98.37％和88.35％,Lipofectamine^(TM)组分别为98.37％和90.11％,而在Nucleofector^(TM)组中分别为98.37％和51.82％。上述实验数据表明:Nucleofector^(TM)转染技术能高效并安全地转染原代大鼠海马神经元,但死亡率较高。展开更多
文摘用原代大鼠海马神经元为模型,对新型电转染方法Nucleofector^(TM)与脂质体DOTAP和Lipofectaimine^(TM)的转染效率和转染前后细胞存活率进行比较研究,探讨Nucleofector^(TM)的高效性与可靠性。从E18胎鼠海马中取出神经元进行体外培养,并用神经微丝(NF)抗体进行免疫细胞化学染色鉴定细胞类型。分别用DOTAP,Lipofectamine^(TM) and Nucleofector^(TM)包裹pCMV-eGFP质粒转染原代大鼠海马神经元。神经元的存活率用流式细胞促检测。实验结果表明:DOTAP和Lipofectamine^(TM)的基因转染效率仅为1.55％和2.45％,而Nucleofector^(TM)的转染效率则超过20％;细胞转染前后的存活率在DOTAP组分别为98.37％和88.35％,Lipofectamine^(TM)组分别为98.37％和90.11％,而在Nucleofector^(TM)组中分别为98.37％和51.82％。上述实验数据表明:Nucleofector^(TM)转染技术能高效并安全地转染原代大鼠海马神经元,但死亡率较高。
