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NtMYC2调控烟草表皮毛发育的功能研究 被引量：1
1
作者 季盈彤 高嘉宁 +4 位作者 钱孟英 潘宁 张筠 崔红 闫筱筱 《生物技术通报》 北大核心 2025年第4期278-288,共11页
【目的】研究转录因子NtMYC2在JA介导的烟草表皮毛密度改良过程中的调控机制。【方法】在普通烟草中对NtMYC2进行同源克隆、生物信息学分析和亚细胞定位分析,利用实时荧光定量PCR分析其在不同组织及不同浓度MeJA处理下的表达模式,通过... 【目的】研究转录因子NtMYC2在JA介导的烟草表皮毛密度改良过程中的调控机制。【方法】在普通烟草中对NtMYC2进行同源克隆、生物信息学分析和亚细胞定位分析,利用实时荧光定量PCR分析其在不同组织及不同浓度MeJA处理下的表达模式,通过创制敲除材料对NtMYC2功能进行研究,利用酵母双杂交技术验证其与NtJAZ11的蛋白互作关系。【结果】NtMYC2有2条同源序列NtMYC2a和NtMYC2b,编码区长度分别为2040和2046 bp,分别编码679和681个氨基酸。进化树结果显示,NtMYC2a与祖先种绒毛烟草高度同源,NtMYC2b与祖先种林烟草高度同源,二者与番茄、马铃薯和辣椒中的同源基因亲缘关系较近,与青蒿和拟南芥中的同源基因亲缘关系较远。经蛋白序列比对发现,NtMYC2具有JID、TAD和bHLH保守结构域,属于bHLH基因家族。表达分析发现NtMYC2a与NtMYC2b均在叶中表达量最高,在根中表达量最低,二者均受MeJA的强烈诱导。亚细胞定位结果表明,NtMYC2融合蛋白定位在细胞核。对转基因株系进行观察发现,NtMYC2敲除株系叶面长柄和短柄腺毛密度显著降低,非分泌型表皮毛消失。酵母双杂交结果表明,NtMYC2a和NtMYC2b与JA信号关键抑制子NtJAZ11均存在蛋白互作关系。【结论】NtMYC2通过与NtJAZ11蛋白结合共同参与调控JA介导的烟草表皮毛发育。 展开更多
关键词 烟草 ntmyc2 茉莉酸 表皮毛密度 NtJAZ11
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过表达NtMYC2对烟草多酚物质合成及盐胁迫抗性的影响
2
作者 曲潇玲 陈帅 +5 位作者 李秀春 杨爱国 任民 佟英 武秀明 孙洋洋 《中国烟草科学》 北大核心 2025年第3期29-36,共8页
本研究通过同源克隆法成功克隆到一个NtMYC2转录因子,为分析其在多酚物质合成及盐胁迫抗性方面的生物学功能,采用Realtime PCR技术分析了其对类黄酮合成限速酶NtCHS1基因的调控模式,构建了NtMYC2过表达株系,分析了其多酚类物质及合成关... 本研究通过同源克隆法成功克隆到一个NtMYC2转录因子,为分析其在多酚物质合成及盐胁迫抗性方面的生物学功能,采用Realtime PCR技术分析了其对类黄酮合成限速酶NtCHS1基因的调控模式,构建了NtMYC2过表达株系,分析了其多酚类物质及合成关键酶基因与野生株系的差异,并测定了其烟草种子在盐胁迫下的发芽率及抗性生理指标。结果显示,NtMYC2转录因子定位于细胞核内,能作为正向调控因子激活NtCHS1基因启动子的转录活性;NtMYC2基因过表达会引起苯丙氨酸解氨酶、查尔酮合成酶等多数多酚类物质生物合成途径关键酶基因上调表达,引起转基因烟草叶片内新绿原酸、绿原酸、芸香苷含量显著上升。与野生型对照相比,在100 mmol/L NaCl高盐浓度处理下,NtMYC2过表达转基因株系的发芽率显著升高,200 mmol/L NaCl胁迫下NtMYC2过表达转基因株系的MDA和H_(2)O_(2)含量显著降低,POD和APX活性显著增加。综上所述,NtMYC2正调控多酚合成关键基因而促进多酚物质合成,可能通过增强对氧化胁迫的耐受性,提高植物的盐胁迫抗性。 展开更多
关键词 烟草 ntmyc2 表达调控 多酚合成 盐胁迫抗性
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转录因子NtMYC2b参与烟草烟碱含量杂种优势形成的机制研究 被引量：3
3
作者 吴宇瑶 谢瑞 +2 位作者 杨友成 刘坤华 聂琼 《河南农业科学》 北大核心 2019年第11期45-53,共9页
为探讨bHLH转录因子家族成员MYC2b基因与烟叶中烟碱含量及烟碱含量杂种优势表现的相关性,利用RT-qPCR分析NtMYC 2 b基因与烟碱合成途径关键酶基因的表达,测定烟碱含量和烟碱杂种优势表现。结果表明,移栽后80 d,NtMYC 2 b在烟草亲本GDH8... 为探讨bHLH转录因子家族成员MYC2b基因与烟叶中烟碱含量及烟碱含量杂种优势表现的相关性,利用RT-qPCR分析NtMYC 2 b基因与烟碱合成途径关键酶基因的表达,测定烟碱含量和烟碱杂种优势表现。结果表明,移栽后80 d,NtMYC 2 b在烟草亲本GDH88和巴斯玛根部的表达量较移栽后66 d上调,其根和叶中烟碱含量增加,杂交种根中NtMYC 2 b、鸟氨酸脱羧酶基因(ODC)、精氨酸脱羧酶基因(ADC)、N-甲基转移酶基因(PMT)、N-甲基腐胺氧化酶基因(MPO)的表达量相对于亲本平均表达量均明显上调,且除MPO外,NtMYC 2 b与ODC、ADC、PMT、QPT(喹啉酸磷酸核糖转移酶基因)在强优势组合VA116×巴斯玛中的相对表达量均明显高于弱优势组合VA116×GDH88,根和叶中烟碱含量及其杂种优势表现也具有相同的趋势,表明NtMYC 2 b参与了烟碱的合成,还可能参与了烟碱含量杂种优势的形成。相关性分析表明,在亲本根部,NtMYC 2b表达量与PMT表达量呈显著正相关;在杂交种根部,NtMYC2b表达量与ADC、MPO表达量呈显著正相关;在杂交种叶片中,NtMYC2 b表达量与烟碱含量杂种优势呈显著正相关,PMT表达量与ODC、ADC表达量均呈显著正相关。关键酶基因启动子序列分析表明,ADC中含有1个MYC结合位点和1个G-box元件;PMT中含有7个MYC结合位点和1个G-box元件。推测NtMYC 2 b可能通过与ADC、PMT的顺式元件MYC结合位点或G-box元件特异性结合调控ADC、PMT的表达,进而促进烟碱的合成,且NtMYC 2 b还参与了烟碱含量杂种优势的形成。 展开更多
关键词 烟草 转录因子 ntmyc2b 烟碱 杂种优势
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