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Notch1和Notch2基因对肾小球足细胞增殖和凋亡的作用研究
1
作者 陈捷 雷凤英 +3 位作者 覃兴熹 陈秀奇 覃宣凯 覃远汉 《广西医学》 2025年第6期848-855,共8页
目的探讨Notch1和Notch2基因对肾小球足细胞的增殖和凋亡的作用。方法(1)构建足细胞Notch1和Notch2基因沉默和激活模型。将足细胞分为NC组、Notch1-短发夹RNA(shRNA)组(包括sh1组、sh2组、sh3组)、Notch2-shRNA组(包括sh4组、sh5组、sh6... 目的探讨Notch1和Notch2基因对肾小球足细胞的增殖和凋亡的作用。方法(1)构建足细胞Notch1和Notch2基因沉默和激活模型。将足细胞分为NC组、Notch1-短发夹RNA(shRNA)组(包括sh1组、sh2组、sh3组)、Notch2-shRNA组(包括sh4组、sh5组、sh6组)和沉默阴性对照组(SC313组),以及空载组(VP64组)、Notch1-小向导RNA(sgRNA)组(包括sg1组、sg2组、sg3组)、Notch2-sgRNA组(包括sg4组、sg5组、sg6组)和激活阴性对照组(OC276组)。进行相应转染处理后,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测足细胞系Notch1和Notch2的mRNA和蛋白的表达水平,验证细胞模型,并筛选激活和沉默效率最高的序列用于后续实验。(2)细胞增殖和凋亡检测。将足细胞分为NC组、sh2组(Notch1沉默组)、sh4组(Notch2沉默组)、sg3组(Notch1激活组)、sg5组(Notch2激活组)、SC313组、OC276组、VP64组。进行相应转染处理后,采用CCK-8及TUNEL实验检测足细胞增殖率和凋亡指数。结果成功构建Notch1和Notch2基因沉默或激活的肾小球足细胞系,实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,sh2组、sg3组、sh4组、sg5组的沉默或激活效率最高。与NC组比较,sh2组和sg5组吸光度值升高,sh4组和sg3组吸光度值降低,sh4组和sg3组细胞凋亡指数升高(P<0.05)。结论Notch1基因的过表达和Notch2基因的沉默均可抑制足细胞的增殖,促进足细胞凋亡,两者在足细胞的增殖及凋亡中发挥重要的调控作用。 展开更多
关键词 Notch受体1 Notch受体2 基因干扰技术 CRISPR/dCas9转录激活系统 足细胞 增殖 凋亡
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Notch1和Notch2表达与宣威女性肺癌的关系及意义 被引量：7
2
作者 牛华涛 刘建兴 +5 位作者 周永春 刘馨 胡早秀 赵光强 雷玉洁 黄云超 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期2336-2339,共4页
目的研究Notch1和Notch2在宣威女性肺癌中表达的临床意义。方法采用免疫组化SP法检测54例宣威女性肺癌患者癌组织及远端正常肺组织中Notch1和Notch2表达,结合患者的临床病理特征及随访资料,探讨Notch1和Notch2在宣威女性肺癌患者病情评... 目的研究Notch1和Notch2在宣威女性肺癌中表达的临床意义。方法采用免疫组化SP法检测54例宣威女性肺癌患者癌组织及远端正常肺组织中Notch1和Notch2表达,结合患者的临床病理特征及随访资料,探讨Notch1和Notch2在宣威女性肺癌患者病情评估及预后判断中的作用。结果 Notch1和Notch2蛋白主要表达于细胞质,在宣威女性肺癌中的阳性表达均显著高于远端正常肺组织(P<0.05);Notch1和Notch2蛋白在不同临床分期、分化程度及淋巴结转移与否患者中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。Notch1、Notch2蛋白在宣威女性肺癌中的表达呈正相关(P<0.05)。结论宣威女性肺癌组织中存在Notch1和Notch2基因异常表达升高,Notch1和Notch2蛋白的表达水平结合临床分期作为宣威女性肺癌患者预后判断的参考指标有一定的指导意义。 展开更多
关键词 NOTCH1 notch2 女性 肺肿瘤 宣威
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发酵虫草菌粉和泼尼松对急性马兜铃酸肾病大鼠肾小管Notch2／hes-1信号通路活化的影响 被引量：7
3
作者 黄仁发 梁群卿 +2 位作者 程新 龙韵 吴金玉 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1116-1121,共6页
目的探讨发酵虫草菌粉及泼尼松对急性马兜铃酸肾病(acute aristolochic acid nephropathy,AAAN)大鼠肾小管上皮细胞Notch2/hes-1信号通路的影响。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、发酵虫草菌粉组(CS组)、泼尼松组及CS加泼尼松... 目的探讨发酵虫草菌粉及泼尼松对急性马兜铃酸肾病(acute aristolochic acid nephropathy,AAAN)大鼠肾小管上皮细胞Notch2/hes-1信号通路的影响。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、发酵虫草菌粉组(CS组)、泼尼松组及CS加泼尼松组,每组10只。以马兜铃酸A纯品100mg/(kg·d)连续灌胃3天建立AAAN模型。CS组予发酵虫草菌粉5.0g/(kg·d)灌胃,泼尼松组予泼尼松0.5mg/(kg·d)灌胃,CS加泼尼松组予两药联合灌胃,连续3周。检测各组大鼠肾功能[尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)],HE染色观察肾脏病理改变,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组织化学法及Westernblot法检测大鼠肾组织Notch2、Hes-1蛋白表达。结果 HE染色结果显示,正常组大鼠肾组织结构正常;模型组大鼠出现肾小管坏死改变;泼尼松组、CS组及CS加泼尼松组肾小管病理明显改善。与正常组比较,模型组大鼠BUN和SCr水平、肾小管间质半定量评分、凋亡细胞比例以及Notch2、Hes-1蛋白表达均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,CS组、泼尼松组及CS加泼尼松组上述指标均显著降低(P<0.01)。以CS加泼尼松组降低更明显(P<0.05,P<0.01)。结论 Notch2/hes-1信号通路活化可能参与AAAN肾小管上皮细胞凋亡的发生。CS及泼尼松对AAAN有肾保护作用,但联合干预疗效更佳,其机制可能与抑制肾组织Notch2/hes-1信号通路活化有关。 展开更多
关键词 急性马兜铃酸肾病 notch2 hes-1信号通路 发酵虫草菌粉 泼尼松 细胞凋亡
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Notch2、Notch4在大鼠早期肺发育过程中的动态表达 被引量：9
4
作者 刘春梅 常立文 +2 位作者 李文斌 汪鸿 张谦慎 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期71-73,共3页
目的探讨Notch2、Notch4在SD大鼠肺发育过程中的作用。方法取孕18、202、1 d胎鼠和孕21 d早产鼠(足月为22 d)生后1、7、14、21 d肺组织标本(n=8),HE染色,进行组织形态学观察、免疫组织化学法和半定量RT-PCR法检测Notch2、Notch4的表达... 目的探讨Notch2、Notch4在SD大鼠肺发育过程中的作用。方法取孕18、202、1 d胎鼠和孕21 d早产鼠(足月为22 d)生后1、7、14、21 d肺组织标本(n=8),HE染色,进行组织形态学观察、免疫组织化学法和半定量RT-PCR法检测Notch2、Notch4的表达。结果孕龄18 d的胎肺见支气管树分支形成,间质中毛细血管毗邻呼吸道分布;20 d至早产生后1 d时,肺组织基本结构为终末囊泡,上皮分隔进一步发展,间质减少,毗邻上皮的毛细血管增多;7、14 d肺泡数目增多并渐成熟,气血屏障变薄;21 d肺泡壁进一步变薄,间质细胞少见。免疫组织化学结果显示,Notch2在孕182、0 d即有表达,21 d表达最强,出生后表达逐渐减弱;Notch4在孕18 d表达最明显,以后呈减弱趋势。RT-PCR检测Notch2、Notch4 mRNA变化与多肽变化规律相似。结论Notch2、Notch4参与大鼠早期肺发育过程。 展开更多
关键词 notch2 NOTCH4 早期肺发育 肺血管发育 胎肺
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鹿角脱盘对辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤Notch2基因表达和免疫功能的影响 被引量：5
5
作者 于雷 王蕴龙 +3 位作者 陈志深 王新春 郜玉钢 贾晓晶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期887-891,共5页
目的:观察鹿角脱盘对辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤Notch2基因的表达和免疫功能的影响,探讨其在辐射致癌过程中的作用。方法:将90只近交系BALB/c小鼠随机分成对照组、照射组和照射给药组,每组30只。照射组和照射给药组小鼠采用X射线照射,建立... 目的:观察鹿角脱盘对辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤Notch2基因的表达和免疫功能的影响,探讨其在辐射致癌过程中的作用。方法:将90只近交系BALB/c小鼠随机分成对照组、照射组和照射给药组,每组30只。照射组和照射给药组小鼠采用X射线照射,建立胸腺淋巴瘤动物模型,照射后给予照射给药组小鼠喂饲含鹿角脱盘超微粉的鼠粮。6个月后,取全血和胸腺,采用RT-PCR和Western blotting法分别检测胸腺淋巴瘤组织中Notch2mRNA和蛋白表达水平;采用ELISA法检测血清免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)水平,应用SOD试剂盒检测血清中SOD活性。结果:照射组和照射给药组小鼠胸腺瘤发生率分别为53.33%(16/30)和36.67%(11/30);照射组小鼠胸腺瘤组织中Notch2mRNA和蛋白表达水平较对照组小鼠正常胸腺组织均明显升高(P<0.05),而照射给药组小鼠胸腺瘤组织中Notch2 mRNA和蛋白表达水平均低于照射组(P<0.05);照射组小鼠血清中IgG、IgA和IgM水平均低于对照组(P<0.05),而照射给药组小鼠血清中IgG、IgM和血红蛋白水平及SOD活性均高于照射组(P<0.05)。结论:电离辐射激活Notch2基因和蛋白的高表达及降低小鼠免疫功能可能是辐射诱发胸腺淋巴瘤的发生机制之一;鹿角脱盘可通过抑制Notch2基因和蛋白的表达及提高小鼠免疫功能而降低辐射致癌的发生率,起到抑制肿瘤的作用。 展开更多
关键词 胸腺淋巴瘤 notch2基因 鹿角脱盘 电离辐射
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Notch2/Hes-1信号通路活化参与调控肾缺血-再灌注诱导炎症因子的表达研究 被引量：9
6
作者 黄仁发 赖虹伊 +8 位作者 梁群卿 黄国东 向少伟 汪东涛 马晓露 黄海燕 胡维 林心如 周巧玲 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第17期5-11,共7页
目的观察肾缺血-再灌注(IR)大鼠肾小管Notch2/Hes-1信号通路的活化,及信号通路关键酶γ-泌肽酶抑制剂DAPT对血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法 45只SD大鼠随机分... 目的观察肾缺血-再灌注(IR)大鼠肾小管Notch2/Hes-1信号通路的活化,及信号通路关键酶γ-泌肽酶抑制剂DAPT对血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法 45只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和γ-泌肽酶抑制剂组(DAPT组),每组15只,按先摘除右肾然后夹闭左肾蒂60 min的方法建立肾I/R模型。Sham组和I/R组手术前后灌服生理盐水2 ml/d,DAPT组手术前后灌服DAPT 500μg/(kg·d)。结果HE染色结果显示,Sham组大鼠肾小管间质未见明显病变;I/R组肾小管出现小管扩张、管腔内管型、刷状缘丢失、间质炎症细胞浸润等病变,小管损伤以I/R后24 h最重。I/R组大鼠24、48和72 h的尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)、肾小管间质半定量计分、血清TNF-α和IL-6水平、肾小管Notch2、Hes-1、MCP-1蛋白表达比相同时间Sham组增高(P<0.01);而经DAPT处理后,小管结构较I/R组完整清晰,病理改变明显减轻。DAPT组BUN、Scr、肾小管间质半定量评分、血清TNF-α和IL-6水平、肾小管Notch2、Hes-1、MCP-1蛋白表达比相同时间I/R组大鼠降低(P<0.01)。结论肾I/R可诱导肾小管Notch2/Hes-1信号通路活化,并参与调控炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1表达,γ-泌肽酶抑制剂DAPT可能具有一定的肾保护作用。 展开更多
关键词 肾缺血-再灌注损伤 notch2/Hes-1信号通路 炎症 γ-泌肽酶抑制剂DAPT
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胃癌组织中Notch1、Notch2、COX-2的表达及其与临床病理学参数的关系 被引量：7
7
作者 刘敏 任茜 +2 位作者 李强 叶玉伟 陈兆峰 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2018年第5期531-534,共4页
目的探讨胃癌组织中Notch1、Notch2、COX-2的表达及其与临床病理学参数的关系。方法使用qPCR及Western blotting法检测胃癌及癌旁组织中Notch1、Notch2及COX-2的表达,分析其与胃癌临床病理学参数的关系。结果胃癌组织中Notch1的表达降低... 目的探讨胃癌组织中Notch1、Notch2、COX-2的表达及其与临床病理学参数的关系。方法使用qPCR及Western blotting法检测胃癌及癌旁组织中Notch1、Notch2及COX-2的表达,分析其与胃癌临床病理学参数的关系。结果胃癌组织中Notch1的表达降低,与胃癌的浸润深度、TNM分期有相关性(P<0.05);Notch2在胃癌组织中高表达,可能与胃癌的浸润深度、远处转移相关(P<0.05);COX-2与Notch2表达呈正相关。结论胃癌组织中Notch信号通路可能通过影响COX-2的表达参与胃癌的浸润与转移。 展开更多
关键词 NOTCH1 notch2 COX-2 胃癌
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Notch2胞内段基因过表达对K562细胞增殖的影响及其机制 被引量：3
8
作者 杨春秀 陈建斌 +2 位作者 张树君 李芳菲 杨泽松 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第11期1278-1281,1289,共5页
目的探讨外源性Notch2胞内段基因过表达对慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)细胞株K562增殖的影响及其机制。方法将携带Notch2胞内段(ICN2)基因的质粒转染K562细胞,MTT法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞的细胞周期分布... 目的探讨外源性Notch2胞内段基因过表达对慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)细胞株K562增殖的影响及其机制。方法将携带Notch2胞内段(ICN2)基因的质粒转染K562细胞,MTT法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞的细胞周期分布;RT-PCR检测Notch2基因全长mRNA的转录,Western blot检测Notch2蛋白的表达;RT-PCR检测Notch通路下游靶基因Hes1、Hey1及细胞增殖、凋亡相关基因numb、Bcl-2、NF-κB和TGF-β1的mRNA转录水平。结果与未转染组相比,转染组K562细胞数量减少,增殖显著受抑(P<0.01);转染48 h后的K562细胞G1期细胞比例显著增多(P<0.01),S期细胞比例显著减少(P<0.01);Notch2基因mRNA及下游靶基因Hes1和Hey1 mRNA转录水平均明显增强(P<0.01),Notch2蛋白表达量增加(P<0.01);numb基因mRNA转录水平无变化;Bcl-2表达下调,NF-κB和TGF-β1表达上调。结论Notch2胞内段基因过表达可抑制K562细胞增殖,其机制可能是通过上调TGF-β1和NF-κB基因表达及下调Bcl-2基因表达,将细胞阻滞于G1期来实现的。 展开更多
关键词 notch2 K562细胞 转染 细胞增殖
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Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3在当归补血汤协同肌源性干细胞移植鼠骨髓中的表达和作用 被引量：6
9
作者 窦昊颖 张盼盼 +4 位作者 梁芳芳 陈珊珊 王云云 王晓玲 汪涛 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3059-3061,共3页
目的探讨Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3在当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植小鼠骨髓中的表达和作用。方法将雌性昆明小鼠随机分为6组:照射模型组、骨髓移植组、MDSCs移... 目的探讨Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3在当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植小鼠骨髓中的表达和作用。方法将雌性昆明小鼠随机分为6组:照射模型组、骨髓移植组、MDSCs移植组和当归补血汤不同剂量(1、3和5倍)预处理+MDSCs移植组。各组分别给予生理盐水和不同剂量DBD灌胃1周后,经8Gy^(137)Cs-γ射线照射,尾静脉分别移植骨髓细胞和MDSCs。用Real-time PCR分别检测3周和8周末时小鼠骨髓中Notch2、Notch3、Jagged2和Hes3 mRNA表达量。结果 3周末,骨髓移植组和MDSCs移植组Notch2mRNA上调,给药组下调,组间比较无统计学差异(P>0.05)。Notch3 mRNA均下调(P<0.05),且给药2组下调幅度最大;8周末,除MDSCs移植组外,其余各组Notch2 mRNA均下调(P<0.05),且以给药2组下调幅度最大。各干预组Notch3 mRNA均下调(P<0.05),其中骨髓移植组下调幅度最小;Jagged2和Hes3 mRNA均未见表达。结论 Jagged2配体和Hes3靶基因既不参与造血干细胞向造血前体细胞分化过程,也不参与MDSCs向造血干细胞分化、增殖过程。而Notch2受体和Notch3受体在这些过程中扮演不同的角色。在造血重建后期,5倍当归补血汤可通过上调Notch2和Notch3表达来促进淋巴细胞的发育。 展开更多
关键词 当归补血汤 肌源性干细胞 造血 notch2 NOTCH3 Jagged2 Hes3
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miR-146a-5p通过调控Notch2表达对心肌缺血再灌注模型大鼠心肌损伤的影响 被引量：12
10
作者 牛丹丹 刘振 李方方 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期530-537,554,共9页
目的:探究miR-146a-5p调控Notch2表达对心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤的影响及作用机制。方法:将大鼠分为Control组、MI/R组、MI/R+mimic mock组、MI/R+mimic组,构建MI/R大鼠模型并使用相应的慢病毒处理,检测各组大鼠心脏LVEDD、LVESD和... 目的:探究miR-146a-5p调控Notch2表达对心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤的影响及作用机制。方法:将大鼠分为Control组、MI/R组、MI/R+mimic mock组、MI/R+mimic组,构建MI/R大鼠模型并使用相应的慢病毒处理,检测各组大鼠心脏LVEDD、LVESD和心肌梗死面积,RT-PCR检测miR-146a-5p基因表达水平,ELISA检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、IL-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,TUNEL检测细胞凋亡,免疫组化检测Ki67阳性细胞率,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平,Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Notch2、Hes1蛋白水平。将细胞分为Control组、OGD/R组、OGD/R+mimic mock组、OGD/R+mimic组、OGD/R+pc-Notch2组、OGD/R+mimic+pc-Notch2组,缺糖缺氧复糖复氧诱导心肌细胞损伤并转染对应的mimic,RT-PCR检测miR-146a-5p和Notch2基因表达水平,Western blot检测Notch2蛋白水平,MTT检测细胞活性、Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测SOD和MDA水平,生物信息学及荧光素酶报告实验检测miR-146a-5p和Notch2的靶向关系。结果:在动物实验中,与Control组比较,MI/R组miR-146a-5p基因表达水平降低、LVEDD、LVESD水平升高,心肌梗死面积,CK-MB、CK、LDH水平升高,心肌细胞凋亡率升高,Ki67阳性细胞率升高,SOD、GSH-Px水平降低,MDA水平升高,IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高,Bax、Notch2、Hes1蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低;与MI/R组比较,MI/R+mimic组miR-146a-5p基因表达水平升高、LVEDD、LVESD水平降低,心肌梗死面积、CK-MB、CK、LDH水平降低,心肌细胞凋亡率降低,Ki67阳性细胞率升高,SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平降低,IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低,Bax、Notch2、Hes1蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高。在细胞实验中,与Control组比较,OGD/R组miR-146a-5p基因表达水平降低,Notch2基因和蛋白表达水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,SOD水平降低,MDA水平升高;与OGD/R组比较,OGD/R+mimic组miR-146a-5p基因表达水平升高,Notch2基因和蛋白表达水平降低,细胞活力升高,细胞凋亡率降低,SOD水平升高,MDA水平降低,OGD/R+pc-Notch2组Notch2蛋白表达水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,SOD水平降低,MDA水平升高;与OGD/R+mimic组比较,OGD/R+mimic+pc-Notch2组Notch2蛋白水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,SOD水平降低,MDA水平升高;与OGD/R+pc-Notch2组比较,OGD/R+mimic+pc-Notch2组Notch2蛋白水平降低,细胞活力升高,细胞凋亡率降低,SOD水平升高,MDA水平降低。在荧光素酶报告实验中,与Notch2 wt组比较,Notch2 wt+miR-146a mimic组荧光素酶活性显著降低。结论:miR-146a-5p能够在大鼠心肌缺血再灌注中减轻心肌损伤,其作用机制与抑制Notch2基因的表达有关。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注 miR-146a-5p notch2 MI/R
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Notch2和Notch3对滋养细胞株迁移与侵袭功能的影响 被引量：5
11
作者 赵卫秀 林建华 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1785-1789,共5页
目的探讨Notch2和Notch3对BeWo及JAR人胎盘绒毛癌滋养细胞株迁移和侵袭能力的影响。方法通过对BeWo及JAR细胞Notch2和Notch3基因的过表达及干扰,观察两种滋养细胞株迁移、侵袭生物学功能的变化。结果在BeWo细胞中对Notch2干扰后细胞迁... 目的探讨Notch2和Notch3对BeWo及JAR人胎盘绒毛癌滋养细胞株迁移和侵袭能力的影响。方法通过对BeWo及JAR细胞Notch2和Notch3基因的过表达及干扰,观察两种滋养细胞株迁移、侵袭生物学功能的变化。结果在BeWo细胞中对Notch2干扰后细胞迁移能力在48 h明显减弱,而72 h的迁移能力及Notch2干扰后的细胞侵袭能力无显著变化;Notch3过表达后细胞迁移能力在48 h显著增强,而72 h则显著减弱;Notch3过表达后细胞侵袭能力在48 h、72 h均显著加强。在JAR细胞中对Notch3干扰后细胞迁移能力在48 h、72 h均明显减弱;而Notch3干扰后细胞的侵袭能力及Notch2过表达后细胞迁移能力、侵袭能力均无明显变化。结论 Notch2、Notch3影响BeWo及JAR细胞迁移、侵袭功能。 展开更多
关键词 BE WO JAR notch2 NOTCH3 迁移 侵袭
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基于Midkine/Notch2/Hey1信号通路探讨二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠的抗炎作用 被引量：6
12
作者 胡文豪 尚立芝 +3 位作者 谢文英 李耀洋 刘高阳 陈壮 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第16期12-21,共10页
目的:探讨二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中肝素结合因子(Midkine)/跨膜受体蛋白(Notch2)/Hey1信号通路中的影响及其抗炎的分子机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组(5、10、20 g&#... 目的:探讨二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中肝素结合因子(Midkine)/跨膜受体蛋白(Notch2)/Hey1信号通路中的影响及其抗炎的分子机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组(5、10、20 g·kg^(-1)·d^(-1))和γ-分泌酶抑制剂组(Notch1通路抑制剂,DAPT),每组10只。以烟熏联合脂多糖(LPS)法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味各干预组灌胃(ig)给药;DAPT组ig DAPT(0.02 g·kg^(-1));正常组及模型组ig等体积生理盐水。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中Midkine、中性粒细胞趋化因子-1(CINC-1)、大鼠巨噬细胞来源趋化因子(MDC)、大鼠CXC趋化因子5(CXCL5)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和核转录因子-κB(NF-κB)p65的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织中Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达;免疫组化(IHC)检测大鼠肺组织中Midkine、Notch2和Hey1蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组BALF中Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5、NE和NF-κB p65含量均显著升高(P<0.01);肺组织Midkine、Notch2和Hey1 mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味中、高剂量组和DAPT组BALF中Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5和NF-κB p65含量均显著减少(P<0.01);Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达显著下降(P<0.01)。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能是通过下调Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达,抑制Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5释放有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 二陈汤 肝素结合因子(Midkine)/跨膜受体蛋白(notch2)/Hey1信号通路 趋化因子
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shRNA Notch2对人脑胶质瘤细胞株U251生长及凋亡的影响 被引量：2
13
作者 何心 焦保华 +2 位作者 郑克彬 田伟 梁朝辉 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期310-314,共5页
目的:探讨稳定转染基因Notch2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对胶质瘤细胞株U251生长、增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体法将构建插入Notch2-shRNA和无意义shRNA(Negative-shRNA)的重组表达质粒分别转染人脑胶质瘤U251细胞,建... 目的:探讨稳定转染基因Notch2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对胶质瘤细胞株U251生长、增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体法将构建插入Notch2-shRNA和无意义shRNA(Negative-shRNA)的重组表达质粒分别转染人脑胶质瘤U251细胞,建立稳定长效转染的细胞株;应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Notch2-shRNA对U251细胞中Notch2表达的影响及相关蛋白表达的变化;MTT法检测其细胞增殖的影响;FCM法检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:稳定转染Notch2-shRNA后,U215细胞中Notch2 mRNA和蛋白的表达明显受到抑制;干扰组细胞从第5天开始增殖明显降低(P<0.05);干扰组细胞的凋亡率为(15.14±4.26)%,明显高于Negative-shRNA组的(2.70±1.45)%和未转染组的(2.10±1.72)%(P<0.05);Notch2-shRNA干扰组细胞S期细胞所占百分比为(23.1±3.4)%,明显低于转染Negative-shRNA组的(41.2±6.9)%和未转染组的(53.2±7.8)%(P<0.01),而干扰组G1期细胞所占百分率为(51.8±3.9)%,显著高于转染Negative-shRNA组的(38.9±9.7)%和未转染组的(25.2±7.7)%(P<0.05);与转染Negative-shRNA组和未转染组相比,干扰组细胞中p21和p27蛋白表达量上调,而细胞周期蛋白cyclinD1和微型染色体维持蛋白2(minichromosome maintenance 2 protein,MCM2)的表达量下调。结论:Notch2shRNA能有效抑制U251细胞中Notch2的表达和细胞的增殖,为脑胶质瘤基因治疗提供了新的靶点。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 RNA 小干扰 基因 notch2 U215细胞
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金匮肾气丸对庆大霉素诱导肾损伤大鼠肾组织Notch2/hes1信号通路的影响 被引量：8
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作者 黄飞 刘成福 王小琴 《中国中西医结合肾病杂志》 2013年第1期29-32,I0006,共5页
目的:动态观察肾气丸对Notch2/hes1通路在庆大霉素诱导肾损伤及修复过程中表达的影响。方法:72只大鼠随机分成空白组(生理盐水灌胃,6ml/kg;生理盐水腹腔注射,3ml/kg,1次/d,持继10d)、金匮肾气丸组(金匮肾气丸灌胃:0.6g·kg-1·d... 目的:动态观察肾气丸对Notch2/hes1通路在庆大霉素诱导肾损伤及修复过程中表达的影响。方法:72只大鼠随机分成空白组(生理盐水灌胃,6ml/kg;生理盐水腹腔注射,3ml/kg,1次/d,持继10d)、金匮肾气丸组(金匮肾气丸灌胃:0.6g·kg-1·d-1);Gen,120mg/kg(3ml/kg,1次/d,腹腔注射,持继10d)和模型组(生理盐水灌胃,6ml/kg;Gen,120mg/kg,1次/d,腹腔注射,持继10d)。应用光镜观察肾小管损伤情况;应用免疫印迹蛋白、实时定量PCR观察大鼠Notch2/hes1信号通路在造模后1、14、28d肾脏的动态表达情况。结果:肾脏病理切片显示:在第1、14天,与空白组相比,模型组、肾气丸组造成的肾脏损伤程度有所不同;在第28天,各组肾小管基本恢复正常。免疫印迹蛋白、RT-PCR显示:在第1、14天,与空白组相比,模型组和金匮肾气丸组Notch2/hes1的表达明显增高(P<0.05);在第28天,各组表达差异无统计学意义(P>0.05);在第1、14天,与模型组相比,金匮肾气丸组Notch2/hes1的表达明显减少(P<0.05);在第28天,两组表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Notch2/hes1信号通路可能是庆大霉素诱导肾损伤及修复过程中的重要角色之一,肾气丸可能通过抑制Notch2/hes1信号通路减轻肾脏损伤并促进肾小管上皮细胞修复。 展开更多
关键词 金匮肾气丸 notch2 HES1 庆大霉素 肾损伤
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姜黄素后处理对缺血再灌注肾损伤大鼠Notch2/Hes-1通路的影响 被引量：7
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作者 邹海波 孙晓峰 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第19期17-22,共6页
目的探讨姜黄素后处理大鼠肢体缺血再灌注肾损伤对Notch2/Hes-1通路的影响。方法选取成年雄性SD大鼠80只,体重280~320 g,6~8月龄,采用随机数字表法,将其分成4组(各20例):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、姜黄素后处理组(I/R+Cur... 目的探讨姜黄素后处理大鼠肢体缺血再灌注肾损伤对Notch2/Hes-1通路的影响。方法选取成年雄性SD大鼠80只,体重280~320 g,6~8月龄,采用随机数字表法,将其分成4组(各20例):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、姜黄素后处理组(I/R+Cur组)及抑制剂组(I/R+DAPT组)。采用夹闭双下肢股动脉4 h再灌注4 h复制肢体缺血再灌注肾损伤模型。在大鼠肢体缺血后4 h,I/R+Cur组经腹腔注射姜黄素200 mg/kg;I/R+DAPT组经腹腔注射DAPT 0.5μmol。于再灌注4 h时经颈动脉取血,待检血浆肌酐、尿素氮、丙二醛等指标。随后处死大鼠,采用HE染色检测肾组织病理变化,并对肾小管间质进行半定量评分;应用Western blotting和RT-PCR分别测定Notch2受体蛋白和靶分子Hes-1 mRNA的表达;通过ELISA测定肾组织TNF-α及IL-1β的表达。结果与Sham组比较,I/R组可见肾小管出现小管明显扩张,管腔内可见管型,刷状缘消失、肾间质炎症细胞浸润等病变,肾小管间质半定量评分升高(P <0.05);组织中Notch2、Hes-1 mRNA、TNF-α和IL-1β的表达升高(P <0.05);与I/R组比较,I/R+Cur组肾间质炎症细胞浸润减少,视野内未见肾小管扩张,偶可见少量管型等病理改变,肾小管间质半定量评分下降(P <0.05);组织中Notch2、Hes-1 mRNA、TNF-α和IL-1β的表达升高(P <0.05);I/R+DAPT组各指标与I/R+Cur组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论姜黄素后处理可减轻大鼠肢体缺血再灌注时肾损伤,其作用机制可能与下调Notch2/Hes-1信号通路有关。 展开更多
关键词 再灌注损伤 姜黄素 notch2/Hes-1通路 肢体 肾
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γ分泌酶抑制剂DAPT对庆大霉素致大鼠耳损伤及修复过程中听力及Notch2/hes1信号通路表达的影响 被引量：3
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作者 黄飞 刘成福 王小琴 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期272-276,共5页
目的观察γ分泌酶抑制剂DAPT对庆大霉素致大鼠耳损伤及修复过程中听力变化及Notch2/hes1信号通路表达的影响。方法 72只成熟大鼠随机分成三组,每组24只;对照组给予生理盐水3ml.kg-1.d-1腹腔注射,连继10天,庆大霉素组给予Gen 120mg.kg-1.... 目的观察γ分泌酶抑制剂DAPT对庆大霉素致大鼠耳损伤及修复过程中听力变化及Notch2/hes1信号通路表达的影响。方法 72只成熟大鼠随机分成三组,每组24只;对照组给予生理盐水3ml.kg-1.d-1腹腔注射,连继10天,庆大霉素组给予Gen 120mg.kg-1.d-1腹腔注射,连继10天,DAPT组给予DAPT 5mg.kg-1.d-1腹腔注射,连用5天后停用2天,再用3天,同时腹腔注射Gen 120mg.kg-1.d-1,连继10天。各组注射前及注射后1、14、28天进行ABR检测后处死动物,应用免疫印迹蛋白、实时定量PCR观察大鼠Notch2/hes1信号通路的表达。结果对照组注射前后ABR反应阈无明显变化,与注射前相比,DAPT组和庆大霉素组注射后1、14、28天ABR阈值均明显升高,但随时间的延长阈值有所下降(P<0.05),其中,第28天DAPT组ABR反应阈较庆大霉素组下降明显(P<0.05);与对照组相比,DAPT组和庆大霉素组Notch2/hes1的表达均明显增高(P<0.05);与庆大霉素组相比,DAPT组的Notch2/hes1表达明显降低(P<0.05)。结论在庆大霉素致耳损伤及修复过程中,DAPT可能通过抑制Notch2/hes1信号通路减轻耳蜗毛细胞损伤并促进耳蜗毛细胞修复,进而促进听功能恢复。 展开更多
关键词 γ分泌酶抑制剂 notch2/hes1信号通路 庆大霉素 听力 大鼠
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跨膜受体蛋白Notch2在肺腺癌组织中的表达变化及意义 被引量：3
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作者 张青 刘益飞 +1 位作者 张曙 章建国 《山东医药》 CAS 2018年第12期82-84,共3页
目的探讨跨膜受体蛋白Notch2在肺腺癌发生、发展中的作用。方法收集肺腺癌及其配对癌旁正常肺组织石蜡标本各130例份,采用免疫组化法检测Notch2阳性表达率,分析其与患者临床病理特征的关系;比较Notch2阳性与阴性表达者3年及5年生存率。... 目的探讨跨膜受体蛋白Notch2在肺腺癌发生、发展中的作用。方法收集肺腺癌及其配对癌旁正常肺组织石蜡标本各130例份,采用免疫组化法检测Notch2阳性表达率,分析其与患者临床病理特征的关系;比较Notch2阳性与阴性表达者3年及5年生存率。结果肺腺癌及其配对癌旁正常肺组织石蜡标本Notch2阳性表达率分别为54.6%(71/130)、36.2%(47/130),二者比较P<0.05。肺腺癌组织Notch2阳性表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况有关(P均<0.05),与患者性别、年龄及肿瘤直径无关(P均>0.05)。肺腺癌Notch2阳性表达者与阴性表达者3年生存率分别为57.3%、84.7%,5年生存率分别为14.1%、40.0%;Notch2阳性表达者3年及5年生存率均低于Notch2阴性表达者(P均<0.05)。结论肺腺癌组织Notch2表达升高;Notch2表达升高可能参与了肺腺癌的发生、发展,并提示患者预后不良。 展开更多
关键词 肺腺癌 跨膜受体蛋白 notch2 分化程度 TNM分期 淋巴结转移 预后
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当归补血汤协同肌源性干细胞移植促造血重建的研究:Notch2、Jagged2和Hes5在鼠脾脏中的表达及作用 被引量：2
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作者 窦昊颖 梁芳芳 +3 位作者 张盼盼 陈珊珊 王晓玲 汪涛 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2871-2872,共2页
目的了解Notch2、Jagged2和Hes5在当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植鼠脾脏中的表达及其临床意义。方法根据随机数字表将150只雌性昆明小鼠分成6组,于照射前1周分别给予6... 目的了解Notch2、Jagged2和Hes5在当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)协同肌源性干细胞(Muscle-derived stem cells,MDSCs)移植鼠脾脏中的表达及其临床意义。方法根据随机数字表将150只雌性昆明小鼠分成6组,于照射前1周分别给予6组不同剂量当归补血汤或生理盐水灌胃。在经8Gy 137Cs-γ射线照射后的小鼠尾静脉中移植骨髓细胞或肌源性干细胞。并于3周和8周末时采用实时定量PCR方法检测小鼠脾脏中Notch2、Jagged2和Hes5mRNA表达。结果移植3周末,与照射组相比,各给药组Notch2、Jagged2mRNA及给药3组Hes5mRNA表达上调,给药1组和给药2组的Hes5mRNA表达下调,且组间具有统计学差异(Notch2,F=4.777,P=0.012;Jagged2,F=11.650,P=0.000;Hes5,F=23.229,P=0.000)。移植8周末,与照射组相比,各给药组Notch2、Jagged2mRNA表达上调,Hes5mRNA表达下调,且仅Jagged2mRNA组间存在统计学差异(Notch2,F=2.979,P=0.056;Jagged2,F=18.796,P=0.000;Hes5,F=2.202,P=0.122)。结论在骨髓移植早期和晚期,以及MDSCs移植早期,Notch2和Jagged2均未参与B淋巴细胞的分化发育。Hes5在骨髓移植早期参与了脾脏中B淋巴细胞的发育调控。3倍剂量当归补血汤可在MDSCs移植早期通过调控Notch2及Jagged2来促进B淋巴细胞发育。 展开更多
关键词 当归补血汤 脾脏 notch2 Jagged2 Hes5
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Notch2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义 被引量：1
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作者 丁永军 张建斌 +4 位作者 李曼 陈晨 韩继波 陶泽璋 陈始明 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期180-184,共5页
目的探讨Notch2在喉癌组织及体外培养的喉鳞癌细胞Hep-2中的表达及与喉癌患者临床病理资料之间的关系。方法应用量子点超敏免疫荧光染色法检测95例喉癌组织标本中Notch2蛋白的表达,同时选取31例声带息肉标本作为对照组,结合患者临床病... 目的探讨Notch2在喉癌组织及体外培养的喉鳞癌细胞Hep-2中的表达及与喉癌患者临床病理资料之间的关系。方法应用量子点超敏免疫荧光染色法检测95例喉癌组织标本中Notch2蛋白的表达,同时选取31例声带息肉标本作为对照组,结合患者临床病理资料进行分析;制作细胞爬片并进行量子点(QDs)免疫荧光染色检测Notch2蛋白在喉鳞癌细胞Hep-2中的表达。结果 95例喉癌组织中Notch2阳性表达率为92.6%(88/95),其阳性率与声带息肉中的阳性率(32.3%)相比差异均有统计学意义(P<0.01),其表达主要定位于细胞核。Notch2在喉癌组织中的表达与临床分期显著相关(P<0.05):临床分期越高,表达率越高。Notch2在喉癌组织细胞核中表达阳性与T分级、临床分期、病理分级和淋巴结转移显著相关(P<0.05)。喉癌细胞Hep-2中Notch2表达阳性,其表达主要定位于细胞质和胞膜中。结论 Notch2在喉癌的发生发展中起着重要作用,其可能成为治疗喉癌的分子靶点。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 notch2蛋白 量子点 免疫荧光
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Notch2通过上皮-间质转化促进生长激素腺瘤的侵袭 被引量：2
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作者 李振业 张鹏飞 +4 位作者 高华 桂松柏 李储忠 姚晓辉 龚磊 《临床和实验医学杂志》 2020年第9期897-901,共5页
目的探讨Notch2在生长激素腺瘤侵袭中的作用以及对上皮-间质转化(EMT)相关基因的影响。方法回顾性分析2013年1月至2015年12月首都医科大学附属北京天坛医院收治的62例生长激素腺瘤,按照Knosp分级分为侵袭组(28例)和非侵袭组(34例)。应... 目的探讨Notch2在生长激素腺瘤侵袭中的作用以及对上皮-间质转化(EMT)相关基因的影响。方法回顾性分析2013年1月至2015年12月首都医科大学附属北京天坛医院收治的62例生长激素腺瘤,按照Knosp分级分为侵袭组(28例)和非侵袭组(34例)。应用免疫组织化学染色检测Notch2和Vimentin在生长激素腺瘤中的表达情况,并分析两者的相关性。将小鼠垂体瘤细胞(GT1-1)分为对照组、空载体组和干扰组(Sh-A、Sh-B、Sh-C、ShD)。干扰组使用Sh-A、Sh-B、Sh-C、Sh-D 4种片段在GT1-1细胞中干扰Notch2的表达并选择干扰效果最佳的两种进行后续实验。采用MTS法检测GT1-1细胞增殖能力,采用小室实验检测GT1-1细胞的侵袭能力,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测GT1-1细胞培养上清中生长激素(GH)水平,采用实时定量-PCR(RT-PCR)实验检测EMT相关基因的mRNA水平。结果免疫组织化学染色显示在生长激素腺瘤中,Notch2的表达水平与Vimentin呈正相关(r=0. 456,P=0. 027)。Notch2在侵袭组中的表达水平较非侵袭组明显升高(P <0. 05)。同样,侵袭组Vimentin表达水平较非侵袭组水平明显升高(P <0. 05)。RT-PCR和Western blotting实验筛选出干扰Notch2表达的有效片段为ShB和Sh-C。MTS实验显示,与对照组比较,Sh-B组细胞活力24 h、48 h和72 h时分别下降(6. 8±2. 1)%、(29. 2±4. 1)%和(43. 1±5. 2)%,差异均具有统计学意义(P <0. 05);Sh-C组分别下降(5. 2±2. 3)%、(17±3. 5)%和(26. 9±3. 8)%,差异均具有统计学意义(P <0. 05)。小室实验显示,对照组穿膜阳性细胞为(407±53)个/视野,Sh-B组为(126±35)个/视野,Sh-C组为(163±41)个/视野,差异均具有统计学意义(P <0. 05)。ELISA结果显示,处理72 h后,Sh-B和Sh-C的GH水平分别为对照组的(27. 7±7. 3)%和(36. 4±8. 5)%,差异具有统计学意义(P <0. 05)。Sh-B组及Sh-C组细胞E-cadherin较对照组升高,N-cadherin和Vimentin mRNA水平均较对照组明显降低,差异均具有统计学意义(P <0. 05)。结论 Notch2通过调控E-cadherin、N-Cadherin和vimentin的表达影响EMT,促进生长激素腺瘤侵袭性生长。 展开更多
关键词 生长激素腺瘤 notch2 上皮-间质转化 侵袭 迁移
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