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Targeted inhibition of Notch1 gene enhances the killing effects of Paclitaxel on triple-negative breast cancer cells 被引量:3
1
作者 Yu-Fu Zhou Qian Sun +7 位作者 Ya-Jun Zhang Geng-Ming Wang Bin He Tao Qi Yan Zhou Xing-Wang Li Sheng Li Lin He 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2017年第2期172-176,共5页
Objective:To study the influence of targeted inhibition of Notch1 gene on the killing effects of Paclitaxel on triple-negative breast cancer cells.Methods:The triple-negative [estrogen receptor(ER)/progesterone recept... Objective:To study the influence of targeted inhibition of Notch1 gene on the killing effects of Paclitaxel on triple-negative breast cancer cells.Methods:The triple-negative [estrogen receptor(ER)/progesterone receptor(PR)/human epidermal growth factor receptor 2(Her2)] breast cancer cell line MDA-MB-231 and ER/PR/HER-2-positive breast cancer cell line MCF-7 were cultured,transfected with Notch1-si RNA-overexpression plasmid and blank plasmid,and treated with different concentrations of paclitaxel,and then the cell proliferation activity and apoptosis rate as well as the m RNA expression of Caspase-3,Caspase-9 and Bcl-2 were determined.Results:Paclitaxel could decrease the MDA-MB-231 and MCF-7 cell proliferation activity as well as Bcl-2 mRNA expression,and increase MDA-MB-231 and MCF-7 cell apoptosis rate as well as Caspase-3 and Caspase-9 mRNA expression in dosedependent manners;with the same dose of paclitaxel treatment,the inhibitory effects on MDAMB-231 cell proliferation activity and Bcl-2 m RNA expression as well as the promoting effects on MDA-MB-231 cell apoptosis and mR NA expression of Caspase-3 and Caspase-9 were weaker than those on MCF-7 cell;after 0.5 μM paclitaxel combined with Notch1-siRNA treatment,MDA-MB-231 cell proliferation activity and Bcl-2 mRNA expression were significantly lower than those after 0.5 μM paclitaxel combined with control plasmid treatment while cell apoptosis rate and mR NA expression of Caspase-3 and Caspase-9 were higher than those after 0.5 μM paclitaxel combined with control plasmid treatment.Conclusions:Targeted inhibition of Notch1 gene may enhance the killing effects of paclitaxel on triple-negative breast cancer cells by up-regulating the expression of Caspase-3 and Caspase-9 and inhibiting the expression of Bcl-2. 展开更多
关键词 Triple-negative breast cancer PACLITAXEL notch1 gene Drug resistance Cell apoptosis
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伴SET::NUP214融合与NOTCH1、PHF6基因突变的ETP-ALL 1例并文献复习
2
作者 王文珊 《延边大学医学学报》 2025年第3期1-3,共3页
目的:探讨伴SET::NUP214融合与NOTCH1、PHF6基因突变的早期前体T淋巴母细胞白血病(ETP-ALL)特点和治疗预后。方法:回顾性分析2023年10月收治的1例伴SET::NUP214融合与NOTCH1、PHF6基因突变的ETP-ALL患者临床资料,并复习相关文献。结果:3... 目的:探讨伴SET::NUP214融合与NOTCH1、PHF6基因突变的早期前体T淋巴母细胞白血病(ETP-ALL)特点和治疗预后。方法:回顾性分析2023年10月收治的1例伴SET::NUP214融合与NOTCH1、PHF6基因突变的ETP-ALL患者临床资料,并复习相关文献。结果:39岁男性患者因反复气促、咳嗽入院,检查发现胸腔积液(髓外浸润),经MICM诊断为早期前体(ETP)伴小克隆B细胞增生(正常核型,SET::NUP214阳性,伴NOTCH1、PHF6基因突变),HA方案联合维奈克拉化疗后完全缓解,治疗效果显著。结论:伴SET::NUP214融合与NOTCH1、PHF6基因突变的ETP-ALL与异常B细胞克隆增生病例临床罕见,临床诊疗中应加强SET::NUP214融合基因的筛查,有助于提高检出率,HA方案联合维奈克拉化疗可改善患者预后。 展开更多
关键词 早期前体T淋巴母细胞白血病 免疫分型 SET::NUP214 notch1基因 PHF6基因
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Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706中的表达及其对细胞凋亡的影响 被引量:5
3
作者 鲁照明 刘红涛 +2 位作者 许培荣 侯桂琴 薛乐勋 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1074-1079,共6页
背景与目的:早期的研究显示,Notch1信号途径与肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、增殖、分化和凋亡中起着十分重要的作用。本研究旨在研究Notch1基因在食管鳞癌EC9706细胞中的表达及其对EC9706细胞凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学方... 背景与目的:早期的研究显示,Notch1信号途径与肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、增殖、分化和凋亡中起着十分重要的作用。本研究旨在研究Notch1基因在食管鳞癌EC9706细胞中的表达及其对EC9706细胞凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学方法检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。采用RT-PCR技术扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1(命名为pcNICD),转染EC9706细胞,利用RT-PCR及Western blot检测稳定转染pcNICD载体、转染pcDNA3.1空载体及未处理的EC9706细胞中Notch1的表达,另通过流式细胞仪检测未处理、转染pcDNA3.1和转染pcNICD的EC9706细胞的凋亡。结果:EC9706细胞中发现Notch1基因的表达。与未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,转染pcNICD的EC9706细胞中Notch1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显增加,大约增加3倍(P<0.05);但未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞中Notch1的表达差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测结果显示,在未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞中,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);但与与未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,转染pcNICD的EC9706细胞转染后24h、48h和72h时细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论:Notch信号途径的激活引起食管鳞癌EC9706细胞的凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管鳞癌的新靶点。 展开更多
关键词 notch1基因 食管肿瘤 细胞株EC9706 细胞凋亡
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白英水提物对胃癌细胞凋亡与Notch1信号通路的影响 被引量:11
4
作者 王美凤 万慧芳 +2 位作者 余乐涵 涂硕 万福生 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2011年第11期82-85,共4页
目的:观察白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡及Notch1基因表达的影响。方法:常规法制备白英水提物,实验分正常对照组、白英处理组。白英处理组加入白英水提物终浓度分别为12.5、25mg/mL和50mg/mL。MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪... 目的:观察白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡及Notch1基因表达的影响。方法:常规法制备白英水提物,实验分正常对照组、白英处理组。白英处理组加入白英水提物终浓度分别为12.5、25mg/mL和50mg/mL。MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡,半定量RT-PCR和免疫化学分析细胞中Notch1、caspase-9基因表达。结果:与正常对照组比较,白英处理组SGC-7901细胞增殖有显著性下降,细胞凋亡显著性增多(P<0.05),Notch1基因表达呈显著性的下降(P<0.05)、caspase-9基因表达有明显的上调(P<0.05),并随白英浓度增加而加强。结论:白英水提物能下调人胃癌SGC-7901细胞中Notch1信号蛋白表达和促进细胞凋亡,这可能是其发挥抗癌作用的重要机制之一。 展开更多
关键词 白英 notch1基因 胃癌细胞 凋亡 信号通路 基因表达
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miR-34a靶向调控NOTCH1基因对SW480细胞增殖的影响 被引量:6
5
作者 邵新宏 于游 张才全 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期2297-2301,共5页
目的探讨miR-34a靶向调控NOTCH1基因表达而对结肠癌SW480细胞增殖的影响。方法通过生物信息学预测,NOTCH1为miR-34a特异性靶基因。构建含miR-34a结合位点的NOTCH1基因3'-UTR域荧光素酶报告载体。通过荧光素酶报告载体系统检测miR-34... 目的探讨miR-34a靶向调控NOTCH1基因表达而对结肠癌SW480细胞增殖的影响。方法通过生物信息学预测,NOTCH1为miR-34a特异性靶基因。构建含miR-34a结合位点的NOTCH1基因3'-UTR域荧光素酶报告载体。通过荧光素酶报告载体系统检测miR-34a与NOTCH1的3'-UTR相互作用对荧光素酶活性的影响;免疫印迹技术检测miR-34a对NOTCH1蛋白表达的影响。采用MTT法及流式细胞检测转染miR-34a对SW480细胞增殖的影响。结果经过酶切及基因测序鉴定,NOTCH1基因3'-UTR序列的双荧光素酶报告重组质粒构建成功;荧光素酶结果显示在SW480细胞中加入miR-34a的类似物和重组载体,荧光素酶的活性是只加入空载体的SW480组53.4%(P=0.003 8);而在HEK293细胞中加入miR-34a的抑制物和重组载体,荧光素酶的活性是只加入空载体的HEK293组145%(P=0.002 1),说明miR-34a有与NOTCH1的3'-UTR位点相结合。免疫印迹结果显示在SW480细胞中加入miR-34a的类似物,NOTCH1蛋白的表达水平是未处理SW480组下降53.6%(P<0.05);而在HEK293细胞中加入miR-34a的抑制物,NOTCH1蛋白的表达水平较未处理HEK293组升高78.9%(P=0.03),说明miR-34a负性调控NOTCH1蛋白的表达。miR-34a过表达的SW480细胞较未处理的SW480的生长速度明显减慢(P<0.05),且阻滞在G0~G1期,说明miR-34a过表达后能抑制SW480细胞增殖。结论 miR-34a负性靶向调控NOTCH1基因的表达而抑制SW480细胞的增殖。 展开更多
关键词 微小RNA notch1基因 靶向调节 细胞增殖 结直肠癌
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MicroRNA-34a通过Notch1对膀胱肿瘤细胞株T24增殖的影响 被引量:14
6
作者 张超 姚志勇 +6 位作者 朱鸣阳 史涛坪 司马晋 马鑫 李宏召 张瑜 张旭 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期426-430,共5页
目的探讨膀胱肿瘤细胞株中microRNA-34a(miR-34a)与Notch1的相互作用关系以及过表达miR-34a对T24细胞增殖的影响。方法通过生物信息学软件预测miR-34a与Notch1的作用位点,并通过荧光素酶实验验证两者的直接调控关系。在膀胱癌细胞株T24... 目的探讨膀胱肿瘤细胞株中microRNA-34a(miR-34a)与Notch1的相互作用关系以及过表达miR-34a对T24细胞增殖的影响。方法通过生物信息学软件预测miR-34a与Notch1的作用位点,并通过荧光素酶实验验证两者的直接调控关系。在膀胱癌细胞株T24过表达miR-34a,采用实时定量PCR和蛋白印迹检测Notch1表达水平的变化;分别通过新型四唑氮盐(MTS)实验和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡以及细胞周期的变化。结果 T24细胞中荧光素酶报告基因实验显示,miR-34a在膀胱癌细胞中能与报告基因结合,使萤火虫荧光强度减弱(P=0.006)。过表达miR-34a后,T24细胞内源性Notch1的mRNA水平和蛋白水平均明显下调;T24细胞生长明显受抑(P<0.001),并呈现一定时间依赖性;凋亡率增加(P=0.003),G0-G1期细胞显著增多(P=0.002)。结论过表达miR-34a能通过降低靶基因Notch1的表达,抑制膀胱肿瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 移行细胞 细胞增殖 基因 notch1
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Notch1在GES-1和其他胃癌细胞中表达差异性的比较 被引量:6
7
作者 贾桂枝 李红 勾朝阳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期426-427,430,共3页
目的探讨Notch 1在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823中的表达差异性。方法采用real time RT-PCR技术和Western blot方法研究Notch 1在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823细胞mRNA和蛋白质水平上的表达。结果与GES-1相比较,Notch 1 mRNA和NOTC... 目的探讨Notch 1在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823中的表达差异性。方法采用real time RT-PCR技术和Western blot方法研究Notch 1在GES-1、AGS、SGC-7901和BGC-823细胞mRNA和蛋白质水平上的表达。结果与GES-1相比较,Notch 1 mRNA和NOTCH 1蛋白在AGS,SGC-7901和BGC-823中表达显著降低,差异均具有显著性(P<0.01)。结论Notch 1在胃癌的发生中可能作为抑癌基因起作用。 展开更多
关键词 胃癌 实时定量-PCR 蛋白免疫印迹法 notch1基因
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Notch1基因在淋巴细胞肿瘤中的表达变化及其意义 被引量:3
8
作者 郑海涛 李扬秋 +2 位作者 陈少华 杨力建 钟立业 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1140-1143,共4页
目的了解Notch1基因在淋巴细胞肿瘤中的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测43例淋巴细胞肿瘤患者(T细胞急性淋巴细胞白血病7例、T细胞非霍奇金淋巴瘤6例、B细胞急性淋巴细胞白血病9例、B细胞慢性淋巴细胞白... 目的了解Notch1基因在淋巴细胞肿瘤中的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测43例淋巴细胞肿瘤患者(T细胞急性淋巴细胞白血病7例、T细胞非霍奇金淋巴瘤6例、B细胞急性淋巴细胞白血病9例、B细胞慢性淋巴细胞白血病5例和B细胞非霍奇金淋巴瘤16例)和20例健康人外周血单个核细胞的Notch1基因表达水平,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-ΔCt×100%计算Notch1基因表达水平。结果 T细胞肿瘤组(中位数0.897%)与B细胞肿瘤组(中位数0.726%)患者外周血单个核细胞Notch1基因表达均比健康对照组(中位数0.288%)明显上升(P<0.01,P<0.01)。T细胞肿瘤组Notch1基因表达水平与B细胞肿瘤组的差异无统计学意义(P>0.05)。但五种类型淋巴细胞肿瘤Notch1基因表达水平有所不同,其中以B细胞慢性淋巴细胞白血病组最高,其次是T细胞非霍奇金淋巴瘤组,而B细胞非霍奇金淋巴瘤组的Notch1基因表达水平最低。结论异常高表达的Notch1基因可能与参与淋巴细胞肿瘤的发生发展过程,研究结果为靶向抑制Notch1的基因治疗提供初步依据。 展开更多
关键词 notch1基因 实时定量PCR 淋巴细胞肿瘤
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乳腺癌组织Notch1信号的表达及其临床意义 被引量:3
9
作者 牛焕付 李瑞梅 +1 位作者 李德军 王文龙 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第10期736-738,共3页
目的检测乳腺癌组织中Notch1受体的表达水平,为乳腺癌的防治提供新的靶点。方法分别应用荧光定量PCR(FQ-PCR)和免疫组化技术检测60份乳腺癌组织中的Notch1受体蛋白及基因表达情况。实验设25份正常乳腺组织作对照。结果 FQ-PCR检测60份... 目的检测乳腺癌组织中Notch1受体的表达水平,为乳腺癌的防治提供新的靶点。方法分别应用荧光定量PCR(FQ-PCR)和免疫组化技术检测60份乳腺癌组织中的Notch1受体蛋白及基因表达情况。实验设25份正常乳腺组织作对照。结果 FQ-PCR检测60份乳腺癌组织Notch1基因表达阳性,阳性率为87.5%,对照组为12.0%,DNA拷贝数分别为(3.66±0.37)×106拷贝/ml和(0.57±0.76)×102拷贝/ml,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学染色检测乳腺癌组织中Notch1分子表达阳性率为81.0%,正常乳腺组织阳性率为12.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌组织高表达Notch1受体,表明Notch1受体与乳腺癌的发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 乳腺癌 notch1 基因表达 免疫组化
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Notch1基因在神经干细胞分化过程中的表达 被引量:4
10
作者 王飞 李世亭 +3 位作者 潘庆刚 刘宁涛 海舰 沈峰 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2004年第4期283-285,289,共4页
目的 研究Notch1基因在全反式维甲酸 (all trans retinoic acid ,ATRA)诱导人胚胎神经干细胞分化为神经元过程中的表达及其发挥的作用。方法 用 1 μmol/L的ATRA在体外诱导人胚胎神经干细胞 ,诱导 7d后 ,做神经元特异性烯醇化酶 (neur... 目的 研究Notch1基因在全反式维甲酸 (all trans retinoic acid ,ATRA)诱导人胚胎神经干细胞分化为神经元过程中的表达及其发挥的作用。方法 用 1 μmol/L的ATRA在体外诱导人胚胎神经干细胞 ,诱导 7d后 ,做神经元特异性烯醇化酶 (neuronspecificendase,NSE)免疫荧光染色 ,计数分化为神经元的比例。于诱导前、诱导 3d和诱导 7d ,提取细胞的总RNA。用半定量RT PCR法检测Notch1基因的表达。结果 与对照组相比 ,ATRA能显著提高人胚胎神经干细胞分化为神经元的比例 (P <0 .0 1 )。Notch1基因在ATRA诱导后明显下调 (P <0 .0 0 1 )。结论 ATRA能显著提高人胚胎神经干细胞分化为神经元的比例 ,Notch1基因在人胚胎神经干细胞分化为神经元的过程中起负调控作用。 展开更多
关键词 神经干细胞 Notchl基因 表达 分化
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下调Notch1信号抑制人神经母细胞瘤SH-SY5Y的增殖能力 被引量:3
11
作者 郑志竑 林玲 +1 位作者 张燕 郑莺凤 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第5期578-583,共6页
目的探讨Notch1基因与人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖能力的关系。方法应用-分泌酶抑制剂DAPT或表达Notch1-shRNA慢病毒载体阻断SH-SY5Y细胞Notch1信号的活化,RT-PCR和Western blot法行Notch1及Hes1表达水平的检测,MTT法和裸鼠体内种植... 目的探讨Notch1基因与人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖能力的关系。方法应用-分泌酶抑制剂DAPT或表达Notch1-shRNA慢病毒载体阻断SH-SY5Y细胞Notch1信号的活化,RT-PCR和Western blot法行Notch1及Hes1表达水平的检测,MTT法和裸鼠体内种植检测瘤细胞体内外增殖能力的变化。结果 DAPT处理和表达Notch1-shR-NA慢病毒载体转染均能减少细胞内NICD和Hes1表达,其细胞体外增殖能力受到明显抑制(P<0.01),Notch1 RNAi细胞体内种植瘤重为0.20±0.13 g,明显轻于对照组的0.89±0.58 g(P<0.01)。结论 Notch1信号的活化与人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的增殖能力密切相关,有望成为神经母细胞瘤基因治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 notch1基因 RNA干扰 DAPT 细胞增殖
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人胚胎神经干细胞向神经元分化过程中Notch1基因的表达 被引量:2
12
作者 王飞 李世亭 +1 位作者 黄强 兰青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期769-772,共4页
目的 :探讨Notch1基因在全反式维甲酸 (ATRA)诱导人胚胎神经干细胞分化为神经元过程中的表达及其发挥的作用。方法 :用不同浓度 (0 .5、1、5和 10 μmol/L)的ATRA在体外诱导人胚胎神经干细胞 ,7d后 ,做NSE免疫荧光染色 ,计数分化为神经... 目的 :探讨Notch1基因在全反式维甲酸 (ATRA)诱导人胚胎神经干细胞分化为神经元过程中的表达及其发挥的作用。方法 :用不同浓度 (0 .5、1、5和 10 μmol/L)的ATRA在体外诱导人胚胎神经干细胞 ,7d后 ,做NSE免疫荧光染色 ,计数分化为神经元的比例。用 1μmol/L的ATRA诱导人胚胎神经干细胞 ,于诱导前、诱导 3d和诱导 7d,提取细胞的总RNA ,用半定量RT PCR法检测Notch1基因的表达。结果 :与对照组相比较 ,ATRA能显著提高人胚胎神经干细胞分化为神经元的比例 (P <0 .0 1)。其中 1μmol/L的ATRA诱导人胚胎神经干细胞分化为神经元的比例最高 ,为 (2 9.2 0± 1.0 9) %。Notch1基因在ATRA诱导后表达明显下调 (P <0 .0 0 1)。结论 :ATRA能显著提高人胚胎神经干细胞分化为神经元的比例 。 展开更多
关键词 神经干细胞 Notchl基因 表达 分化
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shRNA干扰NOTCH1基因对套细胞淋巴瘤Akt/mTOR信号通路的影响 被引量:3
13
作者 黄轶群 黄晓璐 马旭东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1616-1620,共5页
本研究旨在探讨RNA干扰沉默NOTCH1基因对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的增殖、凋亡及Akt/m TOR信号通路的影响。针对NOTCH1基因设计短发夹RNA并将其连入p GPU6/GFP/Neo质粒中,构建NOTCH1 shRNA真核表达载体,经脂质体转染入Jeko-1细胞;应用R... 本研究旨在探讨RNA干扰沉默NOTCH1基因对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的增殖、凋亡及Akt/m TOR信号通路的影响。针对NOTCH1基因设计短发夹RNA并将其连入p GPU6/GFP/Neo质粒中,构建NOTCH1 shRNA真核表达载体,经脂质体转染入Jeko-1细胞;应用RT-PCR及Western blot鉴定其干扰效果,M TT法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、procaspase-3、procaspase-9及Akt/m TOR信号通路相关蛋白Akt、p-Akt、p-m TOR、p-P70S6K的表达。结果表明:NOTCH1 shRNA转染Jeko-1细胞后,NOTCH1基因的mRNA和蛋白表达均明显下调,有统计学差异(P<0.05);转染组增殖率明显低于NegshRNA组和空白组(P<0.05),NOTCH1 shRNA转染48 h后,凋亡率为(34.58±3.46)%,而Neg-shRNA组和空白组分别为(2.44±1.35)%、(1.72±0.64)%,有统计学差异(P<0.05);凋亡相关蛋白BCL-2、procaspase-3、procaspase-9的表达下调,而BAX表达上调;干扰NOTCH1基因后Akt总蛋白未见明显变化,而p-Akt、p-m TOR、pP70S6K的表达下降。结论:干扰沉默NOTCH1基因可抑制套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞增殖,诱导细胞凋亡,通过去磷酸化抑制Akt/m TOR信号通路可能是其机制之一。 展开更多
关键词 套细胞淋巴瘤 notch1基因 RNA干扰 Akt/mTOR信号途径
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Notch1基因在T-ALL患者中的表达及其对NF-κB通路的影响 被引量:2
14
作者 武坤 郭翀 +5 位作者 马晓波 李云涛 张学美 李林燕 罗珊 史明霞(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期982-986,共5页
目的:探讨Notch1基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其对NF-κB通路的作用。方法:选取T-ALL患者67例作为试验组,以67例健康体检者作为对照。采用qRT-PCR分析PBMC中Notch1和NF-κB通路(IκBα、IKKβ... 目的:探讨Notch1基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其对NF-κB通路的作用。方法:选取T-ALL患者67例作为试验组,以67例健康体检者作为对照。采用qRT-PCR分析PBMC中Notch1和NF-κB通路(IκBα、IKKβ)mRNA表达量,分析Notch1的表达水平与T-ALL患者临床指标和预后之间的关联,以及Notch1与NF-κB通路mRNA表达水平的关联。沉默Jurkat细胞中的Notch1基因,qRT-PCR分析Notch1、IκBα和IKKβ mRNA表达,Western blot分析Notch1、磷酸化IκBα(p-IκBα)和磷酸化IKKβ(p-IKKβ)蛋白表达。结果:T-ALL组PBMC中Notch1 mRNA表达水平高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。Notch1表达水平与LDH水平、白细胞水平和危险度分级之间呈显著正相关(r=0.102,P=0.025;r=0.247,P=0.019;r=0.429,P=0.006),而与年龄和性别无显著相关性。Notch1与IκBα mRNA水平呈显著负相关(r=-0.754,P=0.039),与IKKβ mRNA水平呈显著正相关(r=0.738,P=0.002)。Notch1低表达组中位总生存时间为(18.5±2.2)个月,显著长于高表达组的(12.7±3.4)个月(χ;=1.677,P=0.038)。沉默Notch1可显著上调IκBα mRNA和p-IκBα蛋白水平(P<0.05),显著下调IKKβ mRNA和p-IKKβ蛋白水平(P<0.05)。结论:Notch1基因在T-ALL患者血浆PBMC中高表达,与患者LDH水平、白细胞水平和危险度分级等临床指标和生存率相关,Notch1可能通过NF-κB通路发挥作用。 展开更多
关键词 急性T淋巴细胞白血病 notch1基因 NF-ΚB通路 临床特征
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Notch1 siRNA对小鼠恶性黑色素瘤细胞体内外增殖的抑制作用研究 被引量:3
15
作者 齐艳霞 康世均 +1 位作者 刘新会 罗荣城 《山东医药》 CAS 2014年第10期14-16,20,共4页
目的探讨靶向Notch1基因小干扰RNA(Notch1 siRNA,以下简称siNotch)对小鼠恶性黑色素瘤细胞体内外增殖的抑制作用。方法将siNotch转染小鼠恶性黑色素瘤细胞株B16F1,诱导RNA干扰,采用RT-PCR、Western blot、MTT法及细胞克隆试验体外检测细... 目的探讨靶向Notch1基因小干扰RNA(Notch1 siRNA,以下简称siNotch)对小鼠恶性黑色素瘤细胞体内外增殖的抑制作用。方法将siNotch转染小鼠恶性黑色素瘤细胞株B16F1,诱导RNA干扰,采用RT-PCR、Western blot、MTT法及细胞克隆试验体外检测细胞Notch1基因和蛋白表达及细胞增殖、克隆形成变化。随后分别将转染及对照细胞皮下接种于同基因C57BL/6小鼠(分别为转染组及对照组),在成瘤过程中瘤内注射相应siNotch1,记录肿瘤生长情况并绘制生长曲线,处死动物后取肿瘤比较各组肿瘤体积,并行HE及免疫组化染色观察肿瘤组织病理学变化和Notch1蛋白表达情况。结果 siNotch1转染B16F1细胞后,细胞增殖能力、克隆形成率及小鼠体内成瘤等均受到抑制(P<0.01),免疫组化显示转染组Notch1蛋白表达阳性细胞百分比明显低于对照组(P均<0.01)。结论 siNotch1可降低细胞Notch1的表达,从而抑制小鼠MM细胞的增殖与生长,可作为治疗恶性黑色素瘤的新方法。 展开更多
关键词 恶性黑色素瘤 小鼠 细胞增殖 靶向notch1基因小干扰RNA
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原发性肺癌患者Notch1基因rs3124599位点单核苷酸多态性与肺癌易感性的相关性分析 被引量:2
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作者 于红 胡强 +2 位作者 王利玲 苏晓勇 周建平 《山东医药》 CAS 2018年第43期22-26,共5页
目的分析原发性肺癌患者Notch1基因rs3124599位点的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNP)与肺癌易感性的相关性。方法 78例原发性肺癌患者(观察组),我院非呼吸科患者及患者同一社区健康人群156例为对照组,抽取两组晨起... 目的分析原发性肺癌患者Notch1基因rs3124599位点的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNP)与肺癌易感性的相关性。方法 78例原发性肺癌患者(观察组),我院非呼吸科患者及患者同一社区健康人群156例为对照组,抽取两组晨起肘部静脉血2 m L,采用酚-氯仿抽提法提取DNA,采用PCR-PFLPS技术分析Notch1基因rs3124599位点分型。收集两组临床资料,采用条件Logistic回归分析法评价各因素与肺癌易感性的相关性,采用交互作用系数(γ)评估环境因素与基因多态性的交互作用。结果观察组Notch1基因rs3124599位点基因型AA、AG、GG的分布频率分别为25. 6%(20/78)、39. 7%(31/78)、34. 6%(27/78),等位基因A、G的分布频率分别为45. 5%(71/156)、54. 5%(85/156);对照组分别为37. 2%(58/156)、44. 9%(70/156)、17. 9%(28/156),等位基因A、G的分布频率分别为59. 6%(186/312)、40. 4%(126/312);两组基因型分布及等位基因A、G的分布频率差异存在统计学意义(χ2=6. 518,3. 987; P均<0. 05)。观察组吸烟例数、吸烟程度、存在肿瘤家族史者均高于对照组(χ2=23. 890,5. 647; P均<0. 05)。条件Logistic回归分析显示,与rs3124599位点AA型基因人群比较,rs3124599位点GG基因型的个体患肺癌的风险性增加(校正OR=1. 596,95%CI:1. 058~2. 429);且携带G等位基因的个体患肺癌的危险度是A基因的1. 193倍(95%CI:1. 132~2. 501,P <0. 05)。rs3124599位点AG或GG基因型与吸烟(γ=2. 296)、饮酒(γ=1. 130)具有正向交互作用。rs3124599位点AG/GG基因型与肿瘤家族史同时存在时,患者发生肺癌的风险增加(OR=3. 751,95%CI=1. 665~18. 034)。相对于rs3124599位点基因型AA不吸烟的个体,单独吸烟及吸烟且携带AG/GG的暴露者患肺癌的危险性分别升高4. 495倍、12. 134倍。结论肺癌患者Notch1基因rs3124599位点G等位基因突变频率较高。Notch1基因rs3124599(A/G)的G等位基因可能是肺癌患病风险的一个危险因素,其与患者肿瘤家族史、吸烟史间存在交互作用。 展开更多
关键词 notch1基因 rs3124599位点 单核苷酸多态性 肺肿瘤 肺癌
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吴茱萸次碱通过抑制Notch1/eIF3a信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化 被引量:26
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作者 高云星 蒋莉莉 +2 位作者 张倩 左东泽 李先伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第17期3530-3538,共9页
研究吴茱萸次碱(Rut)是否通过抑制Notch1/真核翻译起始因子3a(e IF3a)信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,以及作用是否与促进降钙素基因相关肽(CGRP)合成与释放,进而抑制肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)有关。雄性SD大鼠随... 研究吴茱萸次碱(Rut)是否通过抑制Notch1/真核翻译起始因子3a(e IF3a)信号通路保护博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,以及作用是否与促进降钙素基因相关肽(CGRP)合成与释放,进而抑制肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)有关。雄性SD大鼠随机分为5组:对照组,博莱霉素组,Rut不同(100,300 mg·kg-1)剂量组及辣椒素(Cap)+Rut(300 mg·kg-1)剂量组,每组12只。采用博莱霉素(5 mg·kg-1)气管滴注诱导肺纤维化大鼠模型。Cap+Rut组于造模前1天和造模后第7,14,21天分别皮下注射Cap(50 mg·kg-1)耗竭内源性CGRP。造模后第29天处死动物,颈动脉采血ELISA法测定血浆CGRP含量。HE染色和Masson染色观察肺组织病理学及胶原沉积的变化。免疫组化、q PCR和(或)Western blot法检测肺组织CGRP,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),E钙粘蛋白(E-cadherin),紧密连接蛋白-1(ZO-1),波形蛋白(vimentin),I型胶原(collagen I),Notch1,e IF3a mRNA及蛋白表达。结果显示,与对照组相比,博莱霉素组大鼠肺组织结构破坏,肺泡间隔增宽,大量炎性细胞浸润以及成纤维细胞明显增殖,胶原沉积明显增多,同时collagen I,α-SMA,vimentin,Notch1,e IF3a的表达明显升高,而E-cadherin,ZO-1,CGRP的表达及血浆CGRP的水平明显降低(P〈0.05或P〈0.01)。与博莱霉素组相比,不同剂量Rut连续给药4周后能明显改善肺组织损伤,显著降低肺组织胶原的沉积,明显提高E-cadherin,ZO-1,CGRP的表达及血浆CGRP的水平,同时降低collagen I,α-SMA,vimentin,Notch1,e IF3a的表达(P〈0.05或P〈0.01)。而用辣椒素耗竭内源性CGRR后能够取消吴茱萸次碱的这些作用。由此推测,吴茱萸次碱可能通过抑制Notch1/e IF3a信号通路,减缓肺泡上皮细胞EMT的进程,从而缓解博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,此作用与促进CGRP的合成与释放有关。 展开更多
关键词 上皮细胞间质转分化 notch1 eIF3a 降钙素基因相关肽 吴茱萸次碱 大鼠
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靶向沉默Notch1基因对膀胱癌细胞系T24增殖的影响 被引量:2
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作者 艾星 张秀萍 +7 位作者 吴准 刘双林 臧桐 张国晖 孙凤岭 张水文 张勇 张旭 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第9期53-57,共5页
目的探讨Notch1基因沉默对人膀胱癌细胞增殖的影响。方法用pGenesil质粒构建靶向Notch1的siRNA真核表达载体psiRNA1,并将其转染到膀胱癌细胞系T24中,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)、流式细胞术(FCM)检测Notch1沉默后膀胱癌细胞... 目的探讨Notch1基因沉默对人膀胱癌细胞增殖的影响。方法用pGenesil质粒构建靶向Notch1的siRNA真核表达载体psiRNA1,并将其转染到膀胱癌细胞系T24中,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)、流式细胞术(FCM)检测Notch1沉默后膀胱癌细胞生长变化、细胞周期和凋亡情况。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印记法(Western Blot)检测Notch1基因的mRNA和蛋白在转染前后表达变化。结果转染psiRNA1质粒后T24细胞的生长受到显著抑制,呈一定的时间依赖性(60 h内),凋亡率增加,G0/G1期细胞明显增多(未转染组、空载体组、阴性对照组),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),且Notch1基因在mRNA和蛋白水平表达相对于对照组明显下调(P<0.05)。结论沉默Notch1基因能够抑制膀胱癌细胞的增殖,Notch1在膀胱癌中可能具有癌基因的作用。 展开更多
关键词 基因 notch1 T24细胞 膀胱肿瘤 增殖
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磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1在Notch1诱导的小鼠急性T淋巴细胞白血病发展中的作用 被引量:1
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作者 王乐 胡甜园 +7 位作者 陈幸 李聪 郭惠东 初雅婧 汪晓敏 王伟丽 程涛 袁卫平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期637-642,共6页
目的:应用Mx1-cre;Lox P系统,建立可诱导敲除PDK1的Notch1诱导的急性T淋巴细胞白血病小鼠模型,观察PDK1在急性T淋巴细胞白血病发展过程中的作用。方法:用流式细胞术检测小鼠骨髓白血病细胞的周期和凋亡率,应用实时荧光定量PCR检测小鼠... 目的:应用Mx1-cre;Lox P系统,建立可诱导敲除PDK1的Notch1诱导的急性T淋巴细胞白血病小鼠模型,观察PDK1在急性T淋巴细胞白血病发展过程中的作用。方法:用流式细胞术检测小鼠骨髓白血病细胞的周期和凋亡率,应用实时荧光定量PCR检测小鼠白血病细胞中肿瘤相关基因和转录因子的表达水平。结果:成功建立诱导敲除PDK1的T-ALL小鼠模型;体内诱导PDK1敲除后,与对照组相比,敲除组白血病小鼠的生存期明显延长(P<0.01);PDK1敲除对白血病细胞的周期无影响;敲除组小鼠骨髓白血病细胞的凋亡率显著高于对照组(P<0.001);PDK1的敲除引起肿瘤相关基因和转录因子c-Myc和NF-κB表达水平降低(P<0.01)以及P53表达水平升高(P<0.01)。结论:PDK1的敲除可抑制T-ALL的发展,推测其机制可能是通过调控白血病细胞的凋亡和多种转录因子的表达来影响白血病的进程。 展开更多
关键词 PDK1 notch1 条件基因敲除 急性T淋巴细胞白血病 白血病小鼠模型
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寻常型银屑病患者皮损中miRNA-34a及其靶基因Notch1的表达及意义 被引量:4
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作者 陈春丽 赵宗峰 +3 位作者 刘新梅 王慧琴 康晓静 吴卫东 《皮肤性病诊疗学杂志》 2015年第6期423-427,共5页
目的:探讨miRNA-34a及其靶基因Notch1在寻常型银屑病患者皮损中的表达水平及意义。方法:实时荧光定量PCR法检测22例寻常型银屑病患者皮损组织及10例正常人皮肤组织中miRNA-34a的表达水平。采用免疫组化EnVision法检测51例寻常型银屑... 目的:探讨miRNA-34a及其靶基因Notch1在寻常型银屑病患者皮损中的表达水平及意义。方法:实时荧光定量PCR法检测22例寻常型银屑病患者皮损组织及10例正常人皮肤组织中miRNA-34a的表达水平。采用免疫组化EnVision法检测51例寻常型银屑病患者(包括上述22例患者)和29例正常人(包括上述10例正常人)皮损组织中miRNA-34a可能的靶基因Notch1的表达情况。结果:miRNA-34a在寻常型银屑病患者皮损组织中的表达水平为0.162±0.186,高于正常皮肤组织中的表达水平(0.028±0.029),银屑病组为正常对照组的5.786倍,两组比较,差异有统计学意义(t=2.22,P〈0.05);Notch1在寻常型银屑病组织中主要为表皮全层细胞质表达,阳性表达率为76.47%(39/51),而在正常皮肤组织中阳性表达率为13.79%(4/29),两者差异有统计学意义(χ^2=29.22,P〈0.05)。结论:miRNA-34a在寻常型银屑病皮损组织中的表达高于正常人皮肤组织,其可能通过调控靶基因Notch1参与寻常型银屑病的发病机制。 展开更多
关键词 银屑病 寻常型 miRNA-34a 靶基因 notch1
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