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穿膜肽非共价结合递送核酸蛋白药物研究进展
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作者 陈云霞 郭琼 +3 位作者 王雅鹃 李蝉 倪蓓蓓 崔京霞 《沈阳药科大学学报》 2025年第2期101-107,141,共8页
细胞穿透肽可以与蛋白、核酸片段等多种生物活性分子非共价结合后将其递送到细胞中,其递送效率高,不会造成细胞损伤,进入细胞后可降解为无毒的氨基酸成分,在基因治疗、药物递送方面取得了显著的进展。穿膜肽的发现为多肽非共价结合递送... 细胞穿透肽可以与蛋白、核酸片段等多种生物活性分子非共价结合后将其递送到细胞中,其递送效率高,不会造成细胞损伤,进入细胞后可降解为无毒的氨基酸成分,在基因治疗、药物递送方面取得了显著的进展。穿膜肽的发现为多肽非共价结合递送系统的研究提供了新的研究方向。本文作者就近年来国内外关于穿膜肽以非共价结合方式递送核酸、蛋白药物的应用、研究方法以及影响因素等进行了综述。 展开更多
关键词 穿膜肽 蛋白药物 核酸药物 非共价结合 纳米递送系统
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基于CRISPR的生物传感器在非核酸靶标检测中的应用综述
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作者 侯莹茜 张浩 《医疗卫生装备》 2025年第11期91-102,共12页
介绍了基于成簇规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的生物传感器的检测策略和优势,综述了基于CRISPR的生物传感器在蛋白质、外泌体、小分子、酶、激素、抗体等非核酸靶标检测... 介绍了基于成簇规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的生物传感器的检测策略和优势,综述了基于CRISPR的生物传感器在蛋白质、外泌体、小分子、酶、激素、抗体等非核酸靶标检测中的应用现状,分析了基于CRISPR的生物传感器应用于非核酸靶标检测存在的不足并展望了未来的发展方向。 展开更多
关键词 成簇规律间隔短回文重复序列 生物传感器 非核酸靶标 非核酸靶标检测 CRISPR/Cas系统
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CRISPR技术在临床诊断中的应用
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作者 张珊珊 王金 《生命科学》 2025年第8期921-935,共15页
CRISPR Cas12和Cas13蛋白反式切割活性的发现无疑是开启了“下一代分子诊断技术”的新时代。基于反式切割活性的CRISPR诊断方法不仅在靶标核酸的检测中具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优势,还可应用于非核酸靶标的高灵敏检测。本文... CRISPR Cas12和Cas13蛋白反式切割活性的发现无疑是开启了“下一代分子诊断技术”的新时代。基于反式切割活性的CRISPR诊断方法不仅在靶标核酸的检测中具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优势,还可应用于非核酸靶标的高灵敏检测。本文总结了CRISPR技术在临床诊断中的研究进展,内容涵盖核酸检测和非核酸检测两个应用方向。本文最后还讨论了CRISPR技术在临床诊断应用中所面临的挑战与机遇。 展开更多
关键词 CRISPR诊断 反式切割活性 核酸检测 非核酸检测
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抗酸染色联合结核分枝杆菌核酸检测在非结核分枝杆菌肺病诊断中的应用价值分析 被引量:1
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作者 林正龙 张蓓英 林玉玲 《医学理论与实践》 2025年第7期1090-1093,共4页
目的:评价抗酸染色联合结核分枝杆菌核酸(TB-DNA)检测诊断非结核分枝杆菌(NTM)肺病的临床价值。方法:回顾性分析2021年2月1日—2024年3月31日我院接收的120例NTM肺病确诊患者及100例肺结核确诊患者的抗酸染色及TB-DNA实验室检测结果,探... 目的:评价抗酸染色联合结核分枝杆菌核酸(TB-DNA)检测诊断非结核分枝杆菌(NTM)肺病的临床价值。方法:回顾性分析2021年2月1日—2024年3月31日我院接收的120例NTM肺病确诊患者及100例肺结核确诊患者的抗酸染色及TB-DNA实验室检测结果,探究抗酸染色联合TB-DNA检测结果对NTM肺病的诊断效能。结果:抗酸染色阳性结合TB-DNA阴性检测结果对NTM肺病诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为65.83%、97.00%、96.34%和70.29%。当抗酸染色送检次数≥3次时,该联合诊断方法的灵敏度提高到79.31%。结论:抗酸染色阳性联合TB-DNA阴性检测结果对NTM肺病具有较高的诊断效能。 展开更多
关键词 非结核分枝杆菌肺病 抗酸染色 核酸扩增技术
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循环肿瘤DNA与EGFR、KRAS、NRAS突变型可切除非小细胞肺癌的病理关系 被引量:1
5
作者 王磊 刘先 +1 位作者 吴清辉 高珂 《局解手术学杂志》 2025年第2期154-158,共5页
目的 探讨循环肿瘤DNA(ctDNA)与表皮生长因子受体基因(EGFR)、Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)、神经母细胞瘤RAS病毒致癌基因(NRAS)突变型可切除非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理特征的关系。方法 纳入在我院接受手术切除并且在生物... 目的 探讨循环肿瘤DNA(ctDNA)与表皮生长因子受体基因(EGFR)、Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)、神经母细胞瘤RAS病毒致癌基因(NRAS)突变型可切除非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理特征的关系。方法 纳入在我院接受手术切除并且在生物库中有匹配血浆样本的36例NSCLC患者进行突变分析。使用肽核酸钳制PCR法分析血浆ctDNA和活检组织EGFR、KRAS、NRAS突变,探讨血浆ctDNA脱落与患者临床病理特征的关系。结果 36例患者活检组织和血浆样本中EGFR、KRAS、NRAS的一致性分别为63.89%(23/36)、88.89%(32/36)、86.11%(31/36)。在突变型肿瘤中,血浆ctDNA中EGFR、KRAS、NRAS突变检测的敏感度分别为23.53%(4/17)、33.33%(2/6)、40.00%(2/5)。在腺癌患者中,血浆ctDNA脱落与较高的肿瘤分期、N分期、TNM分期、肿瘤坏死率、10HPFs核分裂象及较大的肿瘤最大直径、肿瘤体积有关(P<0.05)。在肺腺癌患者亚组分析中,ctDNA脱落与较高的N分期、血管浸润率、肿瘤坏死率、10HPFs核分裂象及更大的肿瘤最大直径、肿瘤体积显著相关(P<0.05)。结论 肺腺癌ctDNA脱落与原发性肿瘤的直径、体积以及侵袭性组织学特征(如坏死和高核分裂象)有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 循环肿瘤DNA 基因突变 肽核酸钳制PCR法
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血液制品中人类细小病毒B19核酸检测分析
6
作者 王月 郑宵蓓 +8 位作者 龚钦 赵颖 罗远修 杨丹丹 张林林 江峥 彭干 张金 柯兵兵 《中国输血杂志》 2025年第7期950-957,共8页
目的分析我国市售主要血液制品人血白蛋白、静注人免疫球蛋白、狂犬病人免疫球蛋白及不同品种凝血因子类制品中人类细小病毒B19核酸载量,为血液制品生产工艺改进和原料血浆质量控制提供依据。方法采用实时荧光定量PCR对98批凝血因子类制... 目的分析我国市售主要血液制品人血白蛋白、静注人免疫球蛋白、狂犬病人免疫球蛋白及不同品种凝血因子类制品中人类细小病毒B19核酸载量,为血液制品生产工艺改进和原料血浆质量控制提供依据。方法采用实时荧光定量PCR对98批凝血因子类制品,其中人凝血酶原复合物42批、人凝血因子Ⅷ35批、人纤维蛋白原21批,人血白蛋白6批,静注人免疫球蛋白6批以及狂犬病人免疫球蛋白38批进行人类细小病毒B19核酸检测。结果人血白蛋白、静注人免疫球蛋白、狂犬病人免疫球蛋白中人类细小病毒B19核酸检测的结果均为阴性。对98批因子类制品进行人类细小病毒B19核酸检测,人凝血酶原复合物42批,B19病毒核酸反应性比率69.0%(29/42),检测结果远低于10^(4) IU/mL;人凝血因子Ⅷ35批,B19病毒核酸反应性比率48.6%(17/35),检测结果均低于10^(4) IU/mL;人纤维蛋白原21批,B19病毒核酸反应性比率61.9%(13/21),检测结果均低于10^(4) IU/mL。结论人血白蛋白、静注人免疫球蛋白、狂犬病人免疫球蛋白中未检出人类细小病毒B19,市售凝血因子类制品中可能存在人类细小病毒B19短片段核酸反应性,应重点关注凝血因子类制品中人类细小病毒B19的核酸筛查,建议原料血浆(特别是用于凝血因子类产品)中开展B19病毒核酸检测。 展开更多
关键词 人类细小病毒B19 凝血因子类制品 实时荧光定量PCR 核酸检测 非脂包膜病毒
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登革热的实验室早期诊断 被引量:11
7
作者 李玉枝 平岖 +5 位作者 赵令斋 雷杨 洪文昕 胡凤玉 张复春 唐漾波 《热带医学杂志》 CAS 2016年第1期10-13,共4页
目的建立登革热实验室早期诊断方法。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测登革病毒(DENV)NS1抗原,实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测DENV RNA并分型,对2014年广东省暴发流行期间疑似登革热的病例进行实验室早期诊断,并对两种检测方... 目的建立登革热实验室早期诊断方法。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测登革病毒(DENV)NS1抗原,实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测DENV RNA并分型,对2014年广东省暴发流行期间疑似登革热的病例进行实验室早期诊断,并对两种检测方法进行比较分析。结果272例研究对象中267例临床诊断为登革热,DENV NS1抗原阳性245例,阳性率为90.1%(245/272);DENV RNA阳性256例,阳性率为94.1%(256/272)。256例核酸阳性病例中DENV-1型224例,占87.5%(224/256);DENV-2型15例,占5.9%(15/256);DENV-1型和DENV-2型同时阳性17例,占6.6%(17/256)。两种方法检出的符合率为93.0%(253/272)。结论2014年广东省登革热暴发流行主要以DENV-1为主,同时存在DENV-2型散在流行及少数DENV-1型和DENV-2型合并感染;ELISA方法检测DENV NS1抗原及Real-time PCR检测DENV RNA的两种检测方法,有助于登革热的早期检出。 展开更多
关键词 登革热 病毒核酸 非结构区-1抗原
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聚乙烯亚胺为载体的体内核酸转染研究进展 被引量:2
8
作者 丰干钧 刘立岷 +3 位作者 龚全 李涛 刘浩 宋跃明 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1544-1550,共7页
目的总结聚乙烯亚胺[poly(ethylenimine),PEI]及其衍生物在体内核酸转染中的应用。方法广泛查阅国内外有关PEI介导的核酸转染在肿瘤治疗以及组织工程中应用的相关文献,并进行总结分析。结果目前PEI及其衍生物介导的核酸转染的动物模型... 目的总结聚乙烯亚胺[poly(ethylenimine),PEI]及其衍生物在体内核酸转染中的应用。方法广泛查阅国内外有关PEI介导的核酸转染在肿瘤治疗以及组织工程中应用的相关文献,并进行总结分析。结果目前PEI及其衍生物介导的核酸转染的动物模型体内研究较多,主要应用于肿瘤治疗以及组织工程修复(如颅骨或角膜缺损),并取得了一定效果。给药方式包括尾静脉注射、肺部给药及局部给药。但其转染效率较低,在体内表达时间有限,用于临床仍有一定距离。结论 PEI及其衍生物介导的核酸转染为肿瘤治疗及组织工程研究提供了一种良好方法,但还需要建立标准化的实验方法以及进行更多的动物体内实验。 展开更多
关键词 聚乙烯亚胺 非病毒载体 核酸转染
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乙型病毒性肝炎疫苗免疫无应答者进行再免疫的临床研究 被引量:6
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作者 赵红娜 曹明 +1 位作者 赵振峰 杨鸿儒 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第11期991-992,共2页
目的探讨乙型病毒性肝炎疫苗(乙肝疫苗)全程接种后免疫无应答者获得免疫保护的方法。方法从接种过全程乙肝疫苗的成人中,筛选血清乙肝病毒标志物均阴性者为研究对象,并将其随机分为对照组、观察组1和观察组2。对照组单独应用乙肝疫苗10... 目的探讨乙型病毒性肝炎疫苗(乙肝疫苗)全程接种后免疫无应答者获得免疫保护的方法。方法从接种过全程乙肝疫苗的成人中,筛选血清乙肝病毒标志物均阴性者为研究对象,并将其随机分为对照组、观察组1和观察组2。对照组单独应用乙肝疫苗10μg肌肉注射;观察组1加量应用乙肝疫苗20μg肌肉注射;观察组2联合使用卡介菌多糖核酸和乙肝疫苗。疗程结束30d检测保护性抗体(抗-HBs)。结果对照组、观察组1和观察组2的抗-HBs阳转率分别为10%、50%和90%。观察组2抗-HBs阳转率与对照组、观察组1比较,差别有统计学意义(P<0.01)。结论对乙肝疫苗全程免疫后无应答者联合使用卡介菌多糖核酸和乙肝疫苗可诱导或激发机体抗-HBs阳转,疗效满意。 展开更多
关键词 肝炎疫苗 乙型 免疫无应答 卡介菌多糖核酸
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松材线虫杂交探针制备与检测技术 被引量:3
10
作者 陈凤毛 叶建仁 +1 位作者 吴小芹 郝德君 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期126-128,共3页
选用松材线虫特异引物对M05F2/R1(F1:5-′CGGGT CATGG CTGGA GGTAT CGT-3,′R1:5′-TG-GCT CAATG GCAAA TCCTT CGTA-3′),以D ig-11-dUTP代替部分dTTP,采用PCR技术,直接扩增松材线虫特异片段作为松材线虫地高辛探针。结果表明,地高辛探... 选用松材线虫特异引物对M05F2/R1(F1:5-′CGGGT CATGG CTGGA GGTAT CGT-3,′R1:5′-TG-GCT CAATG GCAAA TCCTT CGTA-3′),以D ig-11-dUTP代替部分dTTP,采用PCR技术,直接扩增松材线虫特异片段作为松材线虫地高辛探针。结果表明,地高辛探针长度一致,为600 bp。产量较高,探针质量浓度达280mg/L。采用探针D IG-F2/R1对线虫基因组DNA进行点杂交,19个松材线虫株系均表现有较强的杂交信号,而8个拟松材线虫、1个霍夫曼尼伞滑刃线虫、1个大核滑刃线虫、1个长尾属线虫均无杂交信号。且用该探针可以稳定地检测出单条松材线虫。因此,该探针特异性强,灵敏度高。该探针及其配套的杂交检测技术可以用于检测线虫样本中是否含有松材线虫。 展开更多
关键词 松材线虫 非放射性探针 核酸斑点杂交 地高辛探针
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非肺孢子菌肺炎患者支气管肺泡灌洗液肺孢子菌检出情况 被引量:3
11
作者 任珊珊 田小军 +4 位作者 齐志群 安亦军 范东瀛 王爱东 任翊 《中国热带医学》 CAS 2015年第10期1172-1176,共5页
目的利用常规PCR、巢式PCR(Nest PCR,n PCR)和定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)方法,调查非肺孢子菌肺炎(Non-Pneumocystis pneumonia,non-PCP)患者支气管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中耶氏肺孢子菌(Pneumocystis ... 目的利用常规PCR、巢式PCR(Nest PCR,n PCR)和定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)方法,调查非肺孢子菌肺炎(Non-Pneumocystis pneumonia,non-PCP)患者支气管肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)的检出情况。方法入选non-PCP患者50例留取BALF,分别以线粒体大亚基r RNA(Mi-tochondrial large subunit r RNA,mt LSUr RNA)为靶基因进行常规PCR(Mt-PCR)和巢氏PCR(Mt-nPCR),以主要表面糖蛋白(Major surface glycoprotein,Msg)为靶基因进行常规PCR(Msg-PCR),检测Mt-PCR,Mt-nPCR和Msg-PCR三种方法的Pj特异性核酸片段检出率,并对PCR检出为阳性的样本分别用以mt LSU r RNA和Msg为靶基因的qPCR来检测相应Pj核酸片段拷贝数。结果 50例BALF中,Mt-n PCR、Mt-PCR及Msg-PCR的检出率分别为56%(28/50)、36%(18/50)和26%(13/50),其中三种检测方法同时阳性5例(10%),任意两种方法阳性13例(26%),任意一种方法阳性18例(36%),三种方法均为阴性14例(28%)。36例PCR检测结果阳性的标本分别进行mtLSUrRNA定量PCR(Mt-qPCR)和Msg定量PCR(Msg-qPCR)检测,其中Mt-qPCR检测结果为:1 000拷贝/μL^9 999拷贝/μL有36例(100%);Msg-qPCR检测结果为:100拷贝/μL^999拷贝/μL有3例(8.3%),1 000拷贝/μL^9 999拷贝/μL有16例(44.4%),10 000拷贝/μL^99 999拷贝/μL有9例(25%),105拷贝/μL以上8例(22.2%)。36例配对检测qPCR样本中,Msg-qPCR拷贝数大于Mt-qPCR拷贝数样本28例(77.8%)。结论在non-PCP患者BALF中,Pj核酸扩增方法的检出率为72%,Mt-qPCR拷贝数主要位于103拷贝/μL数量级,Msg-qPCR拷贝数主要分布于103至105拷贝/μL。用核酸扩增方法在BALF中检测出Pj时,临床意义解读需要谨慎。 展开更多
关键词 耶氏肺孢子菌 非肺孢子菌肺炎 核酸扩增试验 支气管肺泡灌洗液
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孕妇外周血中胎儿游离DNA在产前诊断中的应用 被引量:13
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作者 王文博 张毅 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期442-446,共5页
孕妇外周血中胎儿游离DNA的发现,为无创性产前诊断开辟了一条新途径。检测孕妇血浆中特异的胎儿DNA序列已被用于胎儿性连锁疾病鉴定、RhD血型检查和多种单基因遗传病的产前诊断;游离DNA水平的变化还可被用作某些妊娠相关疾病如先兆子、... 孕妇外周血中胎儿游离DNA的发现,为无创性产前诊断开辟了一条新途径。检测孕妇血浆中特异的胎儿DNA序列已被用于胎儿性连锁疾病鉴定、RhD血型检查和多种单基因遗传病的产前诊断;游离DNA水平的变化还可被用作某些妊娠相关疾病如先兆子、早产和胎儿染色体疾病的临床诊断新指标。本文对母体外周血中胎儿游离DNA的生化特征及其临床应用研究,进行了总结和分析。 展开更多
关键词 胎儿游离DNA 游离核酸 无创性产前诊断 基因诊断 孕妇血浆
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核酸序列非编码区关联长度的计算 被引量:2
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作者 蔡禄 罗辽复 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1995年第2期152-157,共6页
首次计算DNA非编码区的关联长度;发现70%左右的序列关联长度≤2。约15%的序列具有中程关联(3≤s≤6),约15%的序列为长程关联(s≥7).并作了初步的理论解释。
关键词 核酸 非编码区 关联长度 序列分析 DNA
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血液核酸筛查非特异扩增曲线的原因分析 被引量:4
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作者 陈少彬 何子毅 +2 位作者 陈庆恺 黄志森 车嘉琳 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期812-815,共4页
目的 分析血液筛查Roche Cobas s201核酸检测系统非特异扩增曲线产生的原因。方法 统计本室2014年10月-2015年12月用Cobas Taq Screen MPX v2.0核酸试剂检测产生非特异扩增曲线的次数,探讨其发生与时间、检测系统(A、B和C系统)和试剂... 目的 分析血液筛查Roche Cobas s201核酸检测系统非特异扩增曲线产生的原因。方法 统计本室2014年10月-2015年12月用Cobas Taq Screen MPX v2.0核酸试剂检测产生非特异扩增曲线的次数,探讨其发生与时间、检测系统(A、B和C系统)和试剂批号(批号1、批号2、批号3、批号4、批号5和批号6)之间的关系。结果 本室核酸检测非特异扩增曲线总发生率为0.386%(86/2 228);不同月份(χ2=27.325,P〈0.05)、不同检测系统(χ2=66.305,P〈0.05)和不同批号试剂(χ2=129.550,P〈0.05)之间的非特异扩增曲线发生率均有差异,其中2015年2月份、C检测系统和试剂批号2的发生率在各分项中均最大,分别为0.893%(10/1 120)、3.17%(10/315)和5.26%(10/190);非特异扩增曲线类型中以HCV曲线出现47次最多,占54.65%(47/86)。结论 核酸检测非特异扩增曲线的发生与检测系统和试剂批号有明显相关性,加强对检测系统的管理和试剂确认管理能够提高核酸检测性能。 展开更多
关键词 核酸检测 非特异扩增曲线 原因 COBAS s201
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陕西省急性弛缓性麻痹病例中脊髓灰质炎病毒监测分析 被引量:1
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作者 李鹂 杜燕华 +4 位作者 董媛媛 周天天 司源 张少白 胡伟军 《医学动物防制》 2024年第9期842-846,共5页
目的分析陕西省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例及接触者病毒分离和鉴定情况,为继续维持无脊髓灰质炎状态提供理论依据。方法采用描述性流行病学方法进行指标描述,将2014—2021年陕西省报告的AFP病例及接触者粪便标本... 目的分析陕西省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例及接触者病毒分离和鉴定情况,为继续维持无脊髓灰质炎状态提供理论依据。方法采用描述性流行病学方法进行指标描述,将2014—2021年陕西省报告的AFP病例及接触者粪便标本,采用转人类脊髓灰质炎病毒受体小鼠肺细胞(mouse cell line expressing the gene for human cellular receptor for Poliovirus,L20B)系和人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞,根据WHO《脊髓灰质炎实验室手册》开展脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,PV)检测,对L20B阳性分离物采取逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法扩增VP1区片段,同时开展核苷酸序列测定分析。结果从1104份AFP病例及接触者粪便标本检出7份PV阳性,14株PV,分离率为0.63%,分离非脊髓灰质炎肠道病毒(non-polio Enteroviruses,NPEV)36株,分离率为3.26%。相比昆明株和Sabin株,脊髓灰质炎病毒VP1区核苷酸<6个变异的为13株,1株发生9个变异;NPEV阳性分离例数7月和8月较多,占总数的30.56%。结论陕西省AFP监测系统运行良好,2014—2021年未发现野生型脊髓灰质炎病毒(wild Poliovirus,WPV)及疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(vaccine-derived Poliovirus,VDPV),继续保持无脊髓灰质炎状态。 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 非脊髓灰质炎肠道病毒 核苷酸序列 监测 分析
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核酸检测非重复反应性的HBsAg阴性血液HBV感染的确认 被引量:33
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作者 邓雪莲 李婷婷 +4 位作者 郭笑寒 周磊 臧亮 梁晓华 Daniel Candotti 《中国输血杂志》 CAS 2018年第9期962-967,共6页
目的对单个标本核酸检测呈初始反应性(Initial reactive,IR)但鉴别试验为无反应性,即所谓的核酸检测非重复反应性(NAT non-reproducible reactivity,NAT NRR),且HBsAg阴性的献血者进行HBV感染的确认。方法采用Ultrio plus(盖立复... 目的对单个标本核酸检测呈初始反应性(Initial reactive,IR)但鉴别试验为无反应性,即所谓的核酸检测非重复反应性(NAT non-reproducible reactivity,NAT NRR),且HBsAg阴性的献血者进行HBV感染的确认。方法采用Ultrio plus(盖立复)进行单个标本核酸检测(Individual donation nucleic acid testing,ID-NAT)。应用超高速离心技术(25 0000 g×3 h)与靶向HBV基因BCP/PC、PreCore/Core、pre-S/S和S区段的高灵敏度巢式PCR检测相结合的超离体系对12mL NAT NRR血浆标本进行HBV DNA确认,以获得HBV基因序列作为HBV DNA确认的标准;同时与采用2次联检和1次鉴别试验的推荐流程的确认结果进行比较。NAT NRR标本补充电化学发光法(ECL,罗氏)的HBsAg,抗-HBc和抗-HBc检测。结果 2016年1月至2018年2月间共筛查标本77 556份,检出HBsAg-/NAT NRR标本85份(0. 11%),其中有79份标本进行了确认试验。超离体系确认出HBV感染标本43份,推荐流程确认出32份。配对比较显示超离体系明显优于推荐流程(McNemar test,P〈0. 05):有48份(60. 7%)标本至少被1种流程确认,其中27份(34. 2%)标本同时被2种流程确认,16份(20. 2%)标本单独被超离体系确认,超离体系未能确认的5份(6. 3%)标本被推荐流程确认。HBV感染确认组和未确认组间抗-HBc+(92%和80%)和抗-HBs+(42%和55%)的占比无统计学差异,但确认组抗-HBs定量值的分布(中位数22 IU/mL,范围10-1 000 IU/mL)明显低于未确认组(P〈0. 05)。在HBV感染确认组中鉴别出血清学阳性型隐匿性乙型肝炎病毒感染(Occult Hepatitis B virus infection,OBI)献血者45位(94%)、血清学阴性OBI献血者1位,2位献血者因未能跟踪而疑似HBV窗口期感染。结论加大核酸提取的血浆体积并结合以高灵敏度巢式PCR的方法能够确认60%的HBsAg-/NAT NRR标本存在HBV DNA。NAT NRR现象与病毒载量极低的OBI有关,抗-HBc检测可有助于此类HBV感染献血者的排除; HBV DNA低水平感染构成了血液安全的潜在风险,对NAT NRR献血者进行屏蔽是防范此类风险的合理措施。 展开更多
关键词 血液筛查 核酸检测 非重复反应性 隐匿性HBV感染 血液安全 确认试验
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水环境中微小细菌的分布及生态作用研究进展 被引量:3
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作者 刘杰 李蕾 王莹莹 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2100-2111,共12页
由于微生物本身的生理特性及现有检测方法的限制,自然界中大部分细菌不能被传统微生物工具所观察,这类微小细菌被称之为"看不见的主体(Unseen majority,USM)",在大多数天然水环境中营养物浓度较低,微小细菌(USM)占有主导优势... 由于微生物本身的生理特性及现有检测方法的限制,自然界中大部分细菌不能被传统微生物工具所观察,这类微小细菌被称之为"看不见的主体(Unseen majority,USM)",在大多数天然水环境中营养物浓度较低,微小细菌(USM)占有主导优势,具有重要的生态作用。但是,微小细菌对传统富营养培养基比较敏感,且生物体积微小(小于0.1μm3),难以被传统培养基所检测分离,人们对其认识仍然很局限。总结关于微小细菌的一些特性概念,概括微小细菌的检测和培养方法及在水环境中的分布情况,进一步讨论其生态作用及应用,最后对微小细菌的生理及其在水质评价中的应用等方面进行展望。 展开更多
关键词 水环境 纳米细菌 寡营养细菌 超微细菌 不可培养活细菌 低核酸细菌 检测及培养
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毛细管电泳法测定小鼠组织中的反义核酸药物KS0604 被引量:1
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作者 王诗鸿 王秀中 +3 位作者 王彤 向慎思 王清清 宋海峰 《中国药师》 CAS 2012年第5期629-632,共4页
目的:建立小鼠组织中KS0604的定量分析方法。方法:采用组织消化结合基于离子交换和反相分配原理的两步固相萃取法,并采用无胶筛分毛细管电泳技术测定小鼠组织中的KS0604。结果:小鼠肾组织中KS0604在2.0~2000μg·g^(-1)范围内呈良... 目的:建立小鼠组织中KS0604的定量分析方法。方法:采用组织消化结合基于离子交换和反相分配原理的两步固相萃取法,并采用无胶筛分毛细管电泳技术测定小鼠组织中的KS0604。结果:小鼠肾组织中KS0604在2.0~2000μg·g^(-1)范围内呈良好线性,最低定量限LOQ为2.0μg·g^(-1);其他组织中KS0604在1.3~128μg·g^(-1)范围内呈良好线性,最低定量限LOQ为1.3μg·g^(-1);r>0.999。加样回收率试验RSD<10.82%,精密度试验RSD<2.3%,稳定性试验结果表明KS0604在小鼠组织中的稳定性良好。结论:该方法可用于定量检测小鼠组织中的KS0604。 展开更多
关键词 非胶筛分毛细管电泳 反义核酸 组织 小鼠
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DNA非编码区的进化 被引量:2
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作者 蔡禄 《内蒙古科技大学学报》 CAS 1994年第1期26-29,共4页
对核酸序列非编码区及子序列进行信息论研究,发现:大多数非编码区信息指标<D1>、<D2>高于编码区值,而相应<X>指标低于编码区值,非编码区信息指标与进化无明显关联;非编码区子序列指标相近。并对理论意义作了解释。
关键词 核酸 非编码区 进化
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Dynamic DNA nanomachines for amplification imaging of diseased cells based on stimuli-responsive mechanism 被引量:1
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作者 Jingting Wu Wenqing Lin Zai-Sheng Wu 《Advanced Agrochem》 2023年第3期202-212,共11页
As a basic functional unit,living cell with sophisticated structures play an indispensable role in life activities.Since the abnormality of important molecules inside cells is closely related to diseases,the dynamic a... As a basic functional unit,living cell with sophisticated structures play an indispensable role in life activities.Since the abnormality of important molecules inside cells is closely related to diseases,the dynamic analysis and spatio-temporal monitoring of specific molecules in living cells can provide precious information for the diagnosis and treatment of diseases.More recently,DNA has not only been recognized as the carrier of genetic information,but has also used as a robust building block for the assembly of multitudinous nanoscale structures due to the intrinsic advantages of high programmability of classic Watson–Crick base-pairing rule.Intensive study promotes the rapid progress of nanotechnology in various fields,such as bioimaging,diagnosis,and therapeutics.Among numerous well-defined DNA nanomaterials,DNA nanomachines have been widely exploited in cell imaging owing to their desirable ability to achieve high-resolution temporal and spatial images in response to endogenous or exogenous stimuli.In brief,elaborate DNA nanomachines can undergo structural changes upon the stimuli of target analytes or environmental factors,resulting in rapid increase or reduction of output signals and thereby indirectly reflecting the expression level of targets.DNA nanomachines with high sensitivity and specificity contribute to the recognition of diseased tissues.In this review,we introduce the basic assembly modules of DNA nanomachines and summarize the recent advances in dynamic DNA nanomachines for diseased-cell imaging.Finally,the current challenges and future directions of DNA nanomachines for bioimaging are discussed. 展开更多
关键词 Dynamic DNA nanomachines Stimuli-responsive mechanism Cell imaging Functional nucleic acids non-nucleic acid auxiliary materials
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