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神经营养因子neuritin在人体组织中的表达及验证 被引量：1
1
作者 孟平平 朱井玲 +2 位作者 曹建 魏瑜 罗星 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第6期505-509,共5页
目的基于生物信息学探讨神经营养因子neuritin(NRN1)在人体组织中的表达并验证。方法利用人类蛋白图谱(HPA)数据库对NRN1基因进行组织表达谱分析;分别利用实时定量PCR和免疫组织化学检测NRN1 mRNA及蛋白表达。利用已构建的pEGFP-C1-neur... 目的基于生物信息学探讨神经营养因子neuritin(NRN1)在人体组织中的表达并验证。方法利用人类蛋白图谱(HPA)数据库对NRN1基因进行组织表达谱分析;分别利用实时定量PCR和免疫组织化学检测NRN1 mRNA及蛋白表达。利用已构建的pEGFP-C1-neuritin绿荧光蛋白融合表达载体转染人肾上皮细胞系293细胞,免疫荧光检测293细胞中NRN1蛋白定位情况;同时检测小鼠海马神经元细胞系HT22细胞中内源性NRN1蛋白定位情况。结果HPA数据库分析结果显示,NRN1主要在大脑皮层、甲状旁腺、脂肪组织、胎盘等组织中表达。验证结果显示,NRN1在上述组织中均有表达,其中,脑及脾脏组织中表达量最高。免疫荧光结果显示NRN1在HT22细胞主要定位在细胞膜上;在293细胞主要定位在细胞质中。结论NRN1在人体脑、心脏、肝脏、肺、小肠以及卵巢等多种组织中表达,在脑组织中呈高表达。NRN1主要定位在细胞膜及细胞质中。 展开更多
关键词 neuritin 组织分布 表达谱 免疫组织化学 亚细胞定位
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Neuritin通过与Syap1相互作用促进神经突起的生长
2
作者 孟平平 魏瑜 +5 位作者 宋思玲 郝慧鑫 钟志伟 罗星 赵丹 朱井玲 《中国生物工程杂志》 北大核心 2025年第10期14-21,共8页
目的:筛选与Neuritin相互作用的蛋白并鉴定,探讨Neuritin促进神经突起生长的可能分子机制。方法:利用酵母双杂交技术筛选与Neuritin相互作用的蛋白;构建重组质粒pcDNA3.1-His-Neuritin和pcDNA3.1-Myc-Syap1,转染至HEK 293细胞,利用免疫... 目的:筛选与Neuritin相互作用的蛋白并鉴定,探讨Neuritin促进神经突起生长的可能分子机制。方法:利用酵母双杂交技术筛选与Neuritin相互作用的蛋白;构建重组质粒pcDNA3.1-His-Neuritin和pcDNA3.1-Myc-Syap1,转染至HEK 293细胞,利用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,CO-IP)明确Neuritin与Syap1(synapse-associated protein 1)的相互作用;过表达和低表达Neuritin,利用Western blot检测Neuritin对Syap1表达水平的影响;利用间接免疫荧光观察Neuritin过表达对Syap1转运以及对SH-SY5Y细胞轴突形态的影响。结果:对酵母双杂交阳性克隆进行测序和序列比对分析,共获得57条与Neuritin互作的蛋白,与Neuritin功能高度一致的Syap1列为候选蛋白;正向与反向CO-IP结果表明Neuritin和Syap1具有特异性相互作用;过表达和低表达Neuritin后,Western blot结果表明Neuritin是Syap1的负向调控因子;Neuritin过表达可以促进SH-SY5Y细胞中Syap1蛋白向轴突终末转运,并可促进轴突延长。结论:Neuritin与Syap1具有特异性相互作用,是Syap1的负向调控因子,并且过表达Neuritin可以促进Syap1蛋白向轴突终末转运和神经突起延长。 展开更多
关键词 neuritin Syap1 相互作用 突起延长
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Neuritin对鸡胚尿囊膜及人脐静脉内皮细胞血管生成作用的影响
3
作者 梁富华 张云华 +4 位作者 杨萱 侯艳萌 吕贵珍 唐文洁 杨丽 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第2期170-177,共8页
目的 探究神经营养因子Neuritin过表达对鸡胚尿囊膜(CAM)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成作用的影响,为治疗血管生成性疾病提供新方向。方法 选择新鲜黄皮种蛋30枚建立CAM模型,采用随机数字表法分为3组:阳性对照组(bFGF)、阴性对照... 目的 探究神经营养因子Neuritin过表达对鸡胚尿囊膜(CAM)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成作用的影响,为治疗血管生成性疾病提供新方向。方法 选择新鲜黄皮种蛋30枚建立CAM模型,采用随机数字表法分为3组:阳性对照组(bFGF)、阴性对照组(NS)和实验组(Neuritin),每组10枚。阳性对照组载入2 500 U/mL的bFGF,实验组载入10μg/mL的Neuritin蛋白,阴性对照组载入NS,各组载入量均为10μL且所有CAM的培养温度、相对湿度及孵育时间相同,记录孵育72 h后各组CAM的血管分支、数目及大小。选择健康孕妇的新鲜脐带制作原代HUVECs,将其分为3组:转染重组质粒组(HUVEC-neu组)、转染空载体组(HUVEC-3.1组)和未转染组(HUVEC组)。HUVEC-neu组的原代HUVECs经重组质粒Neuritin转染,HUVEC-3.1组经空载体质粒转染,HUVEC组不给予特殊处理,3组均接受相同的传代培养方案。Western blot检测Neuritin在HUVEC-3.1组与HUVEC-neu组的蛋白表达水平。CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验和管型形成实验检测HUVEC-3.1组和HUVEC-neu组的细胞增殖、迁移和管型形成能力。结果 (1)实验组的CAM血管分支点数及微小血管数较阴性对照组明显增加(P <0.01),但两组的大、中血管数差异无统计学意义(P> 0.05);(2)HUVEC-neu组中Neuritin在HUVECs成功过表达。(3)与HUVEC-3.1组相比,HUVEC-neu组的细胞增殖活力下降(P <0.05),但其迁移、管型形成能力明显增强(P <0.01)。结论 Neuritin过表达可促进血管生成,通过影响细胞增殖、迁移和管型形成能力参与新生血管的调控。 展开更多
关键词 血管生成 neuritin 鸡胚尿囊膜 人脐静脉血管内皮细胞
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化浊解毒疏肝方对CUMS抑郁小鼠行为学及神经元活性和Neuritin表达的影响 被引量：1
4
作者 王呈炜 杨佳丽 +3 位作者 信碗红 徐文丹 芦晔 裴林 《中成药》 北大核心 2025年第5期1660-1665,共6页
目的 探讨化浊解毒疏肝方对CUMS抑郁小鼠行为学及神经元活性和Neuritin表达的影响。方法 将雄性C57BL/6J小鼠10只设为对照组,30只随机分为CUMS模型组、氟西汀组、化浊解毒疏肝方组,每组10只。对照组、CUMS模型组灌胃生理盐水,氟西汀组... 目的 探讨化浊解毒疏肝方对CUMS抑郁小鼠行为学及神经元活性和Neuritin表达的影响。方法 将雄性C57BL/6J小鼠10只设为对照组,30只随机分为CUMS模型组、氟西汀组、化浊解毒疏肝方组,每组10只。对照组、CUMS模型组灌胃生理盐水,氟西汀组、化浊解毒疏肝方组分别灌胃氟西汀(0.01 g/kg)和化浊解毒疏肝方(3.4 g/kg),连续灌胃4周。糖水偏爱、悬尾、强迫游泳和旷场实验评价抑郁模型小鼠行为学改变,HE染色观察小鼠海马组织CA3区病理变化,ELISA法检测小鼠血清中5-HT、NE、CORT水平,Tunel染色法检测海马组织CA3区神经元细胞凋亡情况,Western blot检测小鼠海马组织Neuritin、Neurl 1、Jagged 1、Caspase-3和cleaved Caspase-3蛋白表达。结果 与对照组比较,CUMS模型组小鼠糖水偏爱率降低(P<0.05),中央区停留时间、中央区总距离、直立次数减少(P<0.05),悬尾、强迫游泳静止时间增加(P<0.05),海马组织CA3区神经元细胞凋亡率升高(P<0.05),血清中5-HT、NE水平降低(P<0.05)、CORT水平升高(P<0.05),Neuritin蛋白表达降低(P<0.05)、Jagged 1、Neurl 1、cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05);与CUMS模型组比较,化浊解毒疏肝组和氟西汀组糖水偏爱率升高(P<0.05),中央区停留时间、中央区总距离、直立次数增加(P<0.05),悬尾、强迫游泳静止时间减少,海马组织CA3区神经元细胞凋亡率降低(P<0.05),血清中5-HT、NE水平升高(P<0.05)、CORT水平降低(P<0.05),Neuritin蛋白表达升高(P<0.05)、Jagged 1、Neurl 1、cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。结论 化浊解毒疏肝方促进了Neuritin表达,抑制了神经元凋亡,改善了小鼠的抑郁样行为。 展开更多
关键词 化浊解毒疏肝方 抑郁症 neuritin 凋亡 海马神经元
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广西巴马小型猪Neuritin基因克隆与生物信息学分析及真核表达载体的构建 被引量：1
5
作者 李龙 司景磊 +6 位作者 夏攀洁 何剑雄 吴延军 程晓芳 吴敏 徐文文 兰干球 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期557-563,共7页
本研究旨在通过克隆广西巴马小型猪的Neuritin基因并进行生物信息学分析,为后续对Neuritin的研究奠定基础。实验成功获得Neuritin基因的编码区序列,并对Neuritin基因编码区序列和预测蛋白序列进行分析。结果表明,广西巴马小型猪的Neuri... 本研究旨在通过克隆广西巴马小型猪的Neuritin基因并进行生物信息学分析,为后续对Neuritin的研究奠定基础。实验成功获得Neuritin基因的编码区序列,并对Neuritin基因编码区序列和预测蛋白序列进行分析。结果表明,广西巴马小型猪的Neuritin基因编码142个氨基酸,其中含有2个磷酸化位点和2个跨膜信号结构以及1个结构保守域。通过双酶切技术成功获得重组质粒pEGFP-N1-Neuritin并转染到N2a细胞中,在24 h拍照发现N2a细胞发出荧光,证明Neuritin真核表达载体构建成功。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 neuritin基因 信息学分析 pEGFP-N1-neuritin
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PCDH10、Neuritin和E-钙黏附素在胃癌患者组织中的表达及其与临床病理特征的关系 被引量：1
6
作者 蒲萌萌 黄立言 +1 位作者 和庆强 王子众 《临床和实验医学杂志》 2025年第2期128-132,共5页
目的探究胃癌患者组织中原钙黏蛋白10(PCDH10)、神经突蛋白(Neuritin)和E-钙黏附素(E-cadherin)的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法采用回顾性研究方法,选取2023年1月至2024年7月邢台市人民医院收治的90例胃癌患者为研究对象。... 目的探究胃癌患者组织中原钙黏蛋白10(PCDH10)、神经突蛋白(Neuritin)和E-钙黏附素(E-cadherin)的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法采用回顾性研究方法,选取2023年1月至2024年7月邢台市人民医院收治的90例胃癌患者为研究对象。均接受手术治疗并经术后病理学诊断确诊,提取患者的胃癌组织及癌旁组织(距离癌组织2 cm以上的健康组织)进行PCDH10、Neuritin、E-cadherin检测,比较并分析癌组织与癌旁组织、不同临床病理特征胃癌患者的PCDH10、Neuritin、E-cadherin表达情况。结果胃癌组织PCDH10表达为(0.67±0.22)ng/mL,明显低于癌旁组织[(0.84±0.30)ng/mL],Neuritin、E-cadherin表达分别为(1.62±0.38)、(1.72±0.54)ng/mL,均明显高于癌旁组织[(1.03±0.43)、(1.38±0.46)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。90例患者中PCDH10阳性表达58例,占比64.44%。肿瘤≥5 cm、Ⅲ~Ⅳ期、中高分化、淋巴结转移N_(2)~N_(3)、浸润程度T_(3)~T_(4)胃癌患者的PCDH10阳性表达率分别为70.69%、72.41%、56.90%、75.86%、67.24%,均明显高于肿瘤<5 cm、Ⅰ~Ⅱ期、低分化、淋巴结转移N_(0)~N_(1)、浸润程度T_(1)~T_(2)的胃癌患者(43.75%、21.88%、34.38%、25.00%、37.50%),差异均有统计学意义(P<0.05)。90例患者中Neuritin阳性表达75例,占比83.33%。不同肿瘤大小、分化程度、浸润程度胃癌患者的Neuritin阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移N_(2)~N_(3)胃癌患者的Neuritin阳性表达率分别为61.33%、64.00%,均明显高于Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结转移N_(0)~N_(1)的胃癌患者(20.00%、26.67%),差异均有统计学意义(P<0.05)。90例患者中E-cadherin阳性表达69例,占比76.67%。肿瘤≥5 cm、Ⅲ~Ⅳ期、中高分化、淋巴结转移N_(2)~N_(3)、浸润程度T_(3)~T_(4)胃癌患者的E-cadherin阳性表达率分别为71.01%、60.87%、57.97%、68.12%、66.67%,均明显高于肿瘤<5 cm、Ⅰ~Ⅱ期、低分化、淋巴结转移N_(0)~N_(1)、浸润程度T_(1)~T_(2)的胃癌患者(28.57%、33.33%、19.05%、23.81%、23.81%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者的PCDH10呈现出低表达状态,Neuritin、E-cadherin呈现出高表达状态,且其表达水平与临床病理特征有关。通过检测PCDH10、Neuritin、E-cadherin表达有助于早期胃癌的诊断,提高胃癌早期确诊率。 展开更多
关键词 胃癌 原钙黏蛋白10 神经突蛋白 E-钙黏附素
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胡芦巴碱对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及海马neuritin表达的影响 被引量：8
7
作者 江明金 莫志贤 +2 位作者 周吉银 曾圣雅 贺燕 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期113-117,共5页
目的观察胡芦巴碱对2型糖尿病大鼠糖脂代谢和海马区neuritin表达的影响。方法采用链脲佐菌素(40 mg·kg-1,ip)加高糖、高脂饲料喂养建立2型糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠分为糖尿病模型组,罗格列酮组(4 mg·kg-1)和胡芦巴碱低、... 目的观察胡芦巴碱对2型糖尿病大鼠糖脂代谢和海马区neuritin表达的影响。方法采用链脲佐菌素(40 mg·kg-1,ip)加高糖、高脂饲料喂养建立2型糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠分为糖尿病模型组,罗格列酮组(4 mg·kg-1)和胡芦巴碱低、中、高剂量组(5、15、45 mg·kg-1),每组6只大鼠,连续给药8周。另取6只正常SD大鼠作为正常对照组。检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、肝糖原和肌糖原水平,real-time PCR结合Western blot分析海马区neuritin表达水平。结果给药8周后,糖尿病模型组大鼠FBG、HbA1c、FINS、TC、TG明显升高,胰岛素敏感指数(ISI)、肝糖原和肌糖原水平、海马neuritin mRNA及蛋白表达水平均下降,与正常对照组比较差异均有非常显著意义(P<0.01)。与糖尿病模型组相比,胡芦巴碱中、高剂量组和罗格列酮组大鼠FBG、HbA1c、FINS水平下降,ISI、肝糖原和肌糖原水平、海马neuritinmRNA及蛋白表达水平均上升,差异均有非常显著意义(P<0.01);胡芦巴碱中、高剂量组TC、TG明显下降(P<0.01),而罗格列酮组TC、TG无显著变化(P>0.05)。结论胡芦巴碱能改善糖尿病大鼠糖脂代谢和海马区neuritin表达。 展开更多
关键词 胡芦巴碱 糖尿病 海马 糖脂代谢 neuritin
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Neuritin在大鼠脑外伤合并骨折过程中的作用研究 被引量：7
8
作者 彭方亮 董金波 +3 位作者 吴迎波 刘垚炜 张志峰 赵磊 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第15期2854-2857,共4页
目的:研究脑外伤合并股骨骨折的骨痂中Neuritin的表达及血清中变化,探讨中枢神经系统损伤加速对骨折愈合的作用,为临床难治性骨创伤提供新的理论依据。方法:取96只雄性SD大鼠随机分成:A组正常组8只、B组单纯骨折组40只、C组单纯脑外伤组... 目的:研究脑外伤合并股骨骨折的骨痂中Neuritin的表达及血清中变化,探讨中枢神经系统损伤加速对骨折愈合的作用,为临床难治性骨创伤提供新的理论依据。方法:取96只雄性SD大鼠随机分成:A组正常组8只、B组单纯骨折组40只、C组单纯脑外伤组8只及D组骨折合并脑外伤组40只,做股骨骨折和采用脑损伤液压装置建脑损伤模型,术后3、7、14、21、28天取血离心,ELISA法测血清中的Neuritin值。分时间处死B组和D组,取骨痂做切片,行免疫组织化学染色,观测各时间点骨痂中Neuritin的变化和骨折愈合情况。结果:①免疫组织化学染色:骨折愈合过程中血管内皮细胞、软骨细胞及成骨细胞的胞浆中有阳性表达,并显色强。D组1w至3w时的Neuritin阳性细胞百分数均高于B组有显著性统计意义(P<0.05),但4周时(P>0.05)。②血清浓度值:A组值(81.37±1.37),B组、C组、D组3天(94.94±3.77 107.28±3.46 118.35±1.43)逐渐升高,2周达到高峰(110.18±1.48131.89±3.26 161.48±1.46),然后下降,3d至3w时各组有显著性统计意义(P<0.05),4周下降为略高于正常(P>0.05)结论:血清和骨痂中Neuritin的表达显著升高。 展开更多
关键词 脑外伤 骨折愈合 neuritin
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Neuritin毕赤酵母表达系统的构建及其对PC12细胞的影响 被引量：6
9
作者 张树军 赵臣 +4 位作者 狄建军 穆莎茉莉 仙玲玲 于娜 黄瑾 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期148-152,共5页
旨在构建Neuritin的毕赤酵母表达系统获得大量有活性的Neuritin蛋白,研究其神经生物学功能。PCR扩增编码neuritin基因cDNA序列,并纯化回收,通过酶切和连接插入穿梭载体pPIC9K中,转化大肠杆菌DH5α,neuritin-pPIC9k重组质粒经PCR与测序... 旨在构建Neuritin的毕赤酵母表达系统获得大量有活性的Neuritin蛋白,研究其神经生物学功能。PCR扩增编码neuritin基因cDNA序列,并纯化回收,通过酶切和连接插入穿梭载体pPIC9K中,转化大肠杆菌DH5α,neuritin-pPIC9k重组质粒经PCR与测序鉴定后,使用SalⅠ酶切使其线性化,电击转化酵母菌GS115,经筛选与鉴定,成功构建了Neuritin的毕赤酵母表达系统。结果表明,使用甲醇诱导其表达,SDS-PAGE和Western blot分析得到11 kD的Neuritin蛋白,纯化的Neuritin蛋白加入PC12细胞培养液中,能促进其突起的生长。 展开更多
关键词 neuritin PPIC9K 毕赤酵母表达系统 PC12细胞
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NGF与Neuritin在脑外伤伴四肢骨折病人血清中的表达及意义 被引量：9
10
作者 魏勇 董金波 +1 位作者 李长俊 张振东 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第19期3683-3686,共4页
目的:通过检测脑外伤患者、脑外伤合并骨折患者、骨折患者及正常人外周血中NGF,neuritin不同时间段的表达,根据其含量的变化,判断与骨折愈合速度的相关性,寻找骨折愈合的关键因子。方法:收集单纯脑外伤、单纯骨折患者各80例、脑外伤合... 目的:通过检测脑外伤患者、脑外伤合并骨折患者、骨折患者及正常人外周血中NGF,neuritin不同时间段的表达,根据其含量的变化,判断与骨折愈合速度的相关性,寻找骨折愈合的关键因子。方法:收集单纯脑外伤、单纯骨折患者各80例、脑外伤合并骨折患者60例、健康体检人群20例。选取外伤后3天、10天、2周抽取所有实验对象的静脉血,应用ELISA技术测定标本中NGF与Neuritin的含量。结果:损伤后每个时间段里,患者血清中NGF、neuritin含量有不同程度升高,均高于正常对照组,其中又以脑外伤合并骨折组最高。血清NGF在骨折合并脑外伤组伤后第3天含量明显升高,为(0.86±0.21),伤后10天为(1.47±0.29),14天为(2.0 7±0.21),脑外伤合并四肢骨折组neuritin血清含量在伤后第3天略有升高为(83.47±18.85),10天(108.50±31.65),2周(91.86±21.12).脑外伤合并骨折病人血清NGF、neuritin表达明显高于其他对照组,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论:脑外伤合并骨折病人血清NGF、neuritin表达明显高于其他对照组,说明与骨折愈合有着密切的相关性,两种因子可能在骨折愈合修复过程中共同起作用,从而,推测可能是脑外伤后骨折愈合加速的重要因素。 展开更多
关键词 神经生长因子 neuritin 脑外伤 骨折愈合
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乳腺癌组织中神经营养因子Neuritin的表达及其临床意义 被引量：5
11
作者 曹健 王瑞 侯进 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期799-803,F0003,共6页
目的:观察神经营养因子Neuritin蛋白和mRNA在人乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法:收集74例乳腺癌组织标本和12例正常乳腺组织标本,采用免疫组织化学和Western blotting法检测标本中Neu... 目的:观察神经营养因子Neuritin蛋白和mRNA在人乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法:收集74例乳腺癌组织标本和12例正常乳腺组织标本,采用免疫组织化学和Western blotting法检测标本中Neuritin蛋白的阳性表达率和表达水平,利用RT-PCR法检测标本中Neuritin mRNA的表达水平。结果:Neuritin蛋白在正常乳腺组织中阳性表达率为25%,在乳腺癌组织中阳性表达率为70.62%,乳腺癌组织中Neuritin蛋白阳性表达率高于正常乳腺组织(P<0.05),且其在乳腺癌肿瘤细胞中定位于细胞核和细胞质。Neuritin蛋白的阳性表达率与乳腺癌淋巴结转移、TNM分期和ER/PR/HER2高阳性率有关联(P<0.05)。与正常乳腺组织比较,Ⅰ-Ⅱ期及Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌组织中Neuritin蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01);与Ⅰ-Ⅱ期乳腺癌组织比较,Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌组织中Neuritin蛋白和mRNA表达水平亦升高(P<0.05)。结论:Neuritin可能是促进乳腺癌发生发展的一个重要基因,也可能是治疗乳腺癌的关键靶向分子。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 神经生长因子 neuritin 实时荧光定量PCR法
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Neuritin对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤影响的研究 被引量：3
12
作者 李晓天 赵冬 +6 位作者 代林志 朱立仓 田卫东 唐仕军 朱文学 杨鹏 王业忠 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期2908-2914,共7页
目的探究Neuritin对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤过程中内质网应激因子GRP78及血-脑脊液屏障通透性的影响。方法 2014年4月—2015年9月选取成年健康雄性SD大鼠144只,按照随机数字表法分为对照组、假手术组(Sham组)、SAH组、Neur... 目的探究Neuritin对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤过程中内质网应激因子GRP78及血-脑脊液屏障通透性的影响。方法 2014年4月—2015年9月选取成年健康雄性SD大鼠144只,按照随机数字表法分为对照组、假手术组(Sham组)、SAH组、Neuritin组,各36只。再依据简单随机抽样法分别于3、6、12、24、48、72 h抽取每组6只大鼠处死,Neuritin组于处死前1 h采用立体定向技术向侧脑室注射Neuritin。建模后6、12、24、48、72 h处死大鼠前,记录各组大鼠Garcia神经功能评分;建模后3、6、12、24、48、72 h处死大鼠后,采用HE染色观察SAH建立情况,侧脑室微量注射亚甲蓝鉴定Neuritin注射情况;采用Western blotting法检测大鼠大脑皮质内质网应激因子GRP78表达水平;采用甲酰胺浸泡法检测大鼠脑内伊文蓝(EB)含量以评价血-脑脊液屏障通透性。结果 SAH组、Neuritin组建模后6、12、24、48、72 h大鼠Garcia神经功能评分均低于对照组和Sham组(P<0.05);Neuritin组建模后6、12、24、48、72 h大鼠Garcia神经功能评分均高于SAH组(P<0.05)。SAH组大鼠大脑表面弥散分布积血,其中在willis环、小脑延髓池及脑干腹侧有大量积血存在。Neuritin组大脑腹面有亚甲蓝循环存在,大脑背面无亚甲蓝,Neuritin侧脑室注射成功。SAH组建模后3、6、12、24、48、72 h GRP78表达水平高于对照组、Sham组(P<0.05);Neuritin组建模后6、12、24、48、72 h GRP78表达水平低于SAH组(P<0.05)。SAH组大鼠建模后3、6、12、24、48、72 h脑组织EB含量均高于对照组、Sham组(P<0.05);Neuritin组大鼠建模后3、12 h脑组织EB含量高于SAH组,建模后6、48、72 h脑组织EB含量低于SAH组(P<0.05)。结论 SAH后早期脑损伤过程中存在内质网应激反应,神经营养因子Neuritin可显著改变内质网应激因子GRP78表达水平,改善早期脑损伤过程中大鼠的神经行为学评分,并对血-脑脊液屏障通透性产生影响。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 脑损伤 神经生长因子类 血脑屏障 内质网应激 neuritin GRP78
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Neuritin在人非小细胞肺癌血管内皮细胞中的表达 被引量：3
13
作者 张峤 王强 +1 位作者 张健 单莉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期326-330,共5页
目的:明确Neuritin在人非小细胞肺癌血管内皮细胞(non-small lung cancer-vascular endothelial cells,NSCLCVECs)中的表达水平,探讨Neuritin与非小细胞肺癌血管发生的关系。方法:培养及鉴定人NSCLC-VECs及肺微血管内皮细胞株(human pul... 目的:明确Neuritin在人非小细胞肺癌血管内皮细胞(non-small lung cancer-vascular endothelial cells,NSCLCVECs)中的表达水平,探讨Neuritin与非小细胞肺癌血管发生的关系。方法:培养及鉴定人NSCLC-VECs及肺微血管内皮细胞株(human pulmonary microvascular endothelial cell,HPMEC),使用免疫荧光组织化学染色检测细胞膜上FactorⅧ抗体及CD34抗体表达水平,应用RT-PCR及Western blotting法检测Neuritin的表达水平。结果:经加压筛选稳定传代的NSCLCVECs及HPMEC细胞膜上可见内皮细胞特异性标记物FactorⅧ抗体及CD34抗体表达。NSCLC-VECs中Neuritin mRNA的表达水平显著高于HPMEC[(0.95±0.09)vs(0.64±0.05),P<0.05],Neuritin蛋白在NSCLC-VECs中的表达的水平明显高于HPMEC[(1.15±0.11)vs(0.27±0.14),P<0.05]。结论:Neuritin在人NSCLC-VECs中过表达,提示Neuritin可能与肿瘤血管发生相关,是一个潜在的肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 neuritin 人非小细胞肺癌 血管内皮细胞 肿瘤血管发生
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Neuritin蛋白在脑损伤组织中的时相性表达及意义 被引量：6
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作者 蔡云鹏 赵冬 +6 位作者 许晖 刘祺 戴晶 朱立仓 何学君 杨传豪 王业忠 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第15期2384-2386,共3页
目的:检测神经突蛋白(neuritin)在大鼠创伤性脑损伤组织中的时相性表达,探讨其在脑损伤后的意义。方法:42只SD大鼠分为正常组、对照组和实验组,改良Feeney法建立大鼠脑损伤模型,术后分6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d共6个亚组。免疫... 目的:检测神经突蛋白(neuritin)在大鼠创伤性脑损伤组织中的时相性表达,探讨其在脑损伤后的意义。方法:42只SD大鼠分为正常组、对照组和实验组,改良Feeney法建立大鼠脑损伤模型,术后分6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d共6个亚组。免疫组化、Western-blot检测脑损伤组织中neuritin蛋白表达。结果:免疫组化:实验组neuritin蛋白6 h呈阳性表达,12 h^7 d呈强阳性,明显高于对照组与正常组,14 d呈弱阳性表达。Western-blot:实验组neuritin蛋白6 h稍增高,24 h达高峰,持续到7 d,与对照组、正常组比较差异均有统计学差异(P<0.01),14 d明显降低,较正常组差异仍有统计学意义(P<0.05)。结论:Neuritin蛋白在脑损伤组织中表达明显增高,可能在脑损伤后起着重要作用。 展开更多
关键词 脑损伤 neuritin
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Neuritin对非小细胞肺癌血管内皮细胞的生物学作用及其机制研究 被引量：4
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作者 张建庆 章恒 +1 位作者 王珍 赵辉 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期7-15,共9页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Neuritin的异常表达对肺血管内皮细胞的生物学作用及其作用机制。方法选择2017年9月至12月新疆维吾尔自治区人民医院NSCLC患者手术切除的癌组织5～10例,提取原代人NSCLC血管内皮细胞(NSCLC-VECs),原代培... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Neuritin的异常表达对肺血管内皮细胞的生物学作用及其作用机制。方法选择2017年9月至12月新疆维吾尔自治区人民医院NSCLC患者手术切除的癌组织5～10例,提取原代人NSCLC血管内皮细胞(NSCLC-VECs),原代培养经病理确诊的NSCLC患者NSCLC-VECs细胞,选择CD34及FactorⅧ经免疫组化鉴定。利用荧光定量PCR(QPCR)及Western-blotting检测NSCLC-VECs及人肺微血管内皮细胞株(HPMECs)中Neuritin的表达水平。构建过表达/敲低Neuritin的NSCLC-VECs、HPMEC细胞系及阴性对照组,MTT、细胞划痕、Transwell小室、流式细胞术分别检测转染干扰/过表达Neuritin对细胞增殖及转移能力、细胞周期、细胞凋亡的影响;扫描电镜观察转染后细胞形态的改变。结果 NSCLC-VECs细胞中的Neuritin表达显著高于HPMEC细胞(P <0. 01)。过表达Neuritin后HPMEC和NSCLC-VECs细胞内Notch1、VEGFR蛋白和mRNA表达均显著升高(P <0. 01);细胞体外增殖、划痕愈合及体外迁移能力较阴性对照组显著增强(P <0. 05);电镜下观察细胞表面伪足明显,细胞间粘连增加;同时,过表达Neuritin促进了HPMEC和NSCLC-VECs细胞周期进程,并抑制细胞凋亡(P <0. 001)。反之,干扰HPMEC和NSCLC-VECs细胞内Neuritin表达后,胞内Notch1、VEGFR蛋白和mRNA表达均受到显著抑制(P <0. 01);电镜下观察细胞表面光滑,细胞体外增殖活性、划痕愈合能力及迁移能力均较阴性对照组显著降低(P <0. 01); HPMEC和NSCLC-VECs细胞周期阻滞于G_0/G_1期,细胞凋亡率显著升高(P <0. 001)。结论Neuritin可能作为NSCLC潜在的生物标记物,在NSCLC的发生发展中发挥一定的生物学功能。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌(NSCLC) neuritin NOTCH1 血管内皮生长因子(VEGF)
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大鼠雪旺细胞Neuritin的表达 被引量：4
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作者 石敏 李剑波 +6 位作者 张红曼 徐宽枫 许馨予 程恒 沈捷 杨涛 陈家伟 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期497-499,共3页
目的探讨体外培养大鼠雪旺细胞Neuritin的表达。方法体外培养和纯化大鼠雪旺细胞,用RT-PCR和Western blot方法分别鉴定Neuritin在雪旺细胞转录和翻译水平的表达。结果 Neuritin在雪旺细胞的转录和翻译水平均有表达,分为细胞内和分泌性... 目的探讨体外培养大鼠雪旺细胞Neuritin的表达。方法体外培养和纯化大鼠雪旺细胞,用RT-PCR和Western blot方法分别鉴定Neuritin在雪旺细胞转录和翻译水平的表达。结果 Neuritin在雪旺细胞的转录和翻译水平均有表达,分为细胞内和分泌性两种。结论 Neuritin在大鼠雪旺细胞有表达。 展开更多
关键词 雪旺细胞 neuritin
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局部注射Neuritin促进骨折愈合的实验研究 被引量：3
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作者 刘京敏 史晨辉 +4 位作者 王维山 孙益明 彭方亮 张杰 董金波 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第6期720-724,共5页
为了观察Neuritin在SD大鼠骨折模型中促进骨折愈合的作用。将96只健康雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组72只,对照组24只。各组动物取右侧股骨,切断中段股骨后行克氏针髓内固定术制作骨折模型。对照组不予特殊处理。实验组根据... 为了观察Neuritin在SD大鼠骨折模型中促进骨折愈合的作用。将96只健康雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组72只,对照组24只。各组动物取右侧股骨,切断中段股骨后行克氏针髓内固定术制作骨折模型。对照组不予特殊处理。实验组根据用药剂量实验组分为A、B、C 3组,各组分别每日给予Neuritin 0.1、0.05、0.025μm/L局部注射治疗,并分别于用药后1、2、4周处死,通过拍摄X线片、测量骨痂体积、做病理切片进行相关分析。结果显示:(1)大体标本观察及X线拍片显示:实验组各组与同期对照组比较,骨折愈合骨化速度明显增快,与对照组之间差异明显(P<0.05);而A组显著快于C组大鼠(P<0.05)。(2)骨痂体积测量结果显示:同期实验组与对照组比较骨痂体积明显增大,均明显大于对照组(P<0.05);实验各组之间,A组明显大于C组大鼠(P<0.05)。(3)病理切片HE染色显示:实验各组在相同时间点内其软骨细胞、成骨细胞明显多于对照组(P<0.05)。由此可知,局部注射Neuritin后可使动物骨折模型的骨痂含量增加,骨痂骨化速度增快。 展开更多
关键词 neuritin 骨折动物模型 骨折愈合 局部注射
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人Neuritin在原核表达系统的构建及表达纯化 被引量：6
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作者 唐娟 于娜 +5 位作者 吴亮生 杨磊 仙玲玲 黄延红 张树军 黄瑾 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期46-50,共5页
Neuritin是一种新发现能促进神经突起和轴突分支的蛋白,为了更清楚的研究它的生物学功能,在已克隆Neuritin cDNA的基础上,PCR扩增出Neuritin ORF,与原核表达载体pET32a重组后,成功的构建了Neuritin原核表达质粒pET32a-Neuritin。重组质... Neuritin是一种新发现能促进神经突起和轴突分支的蛋白,为了更清楚的研究它的生物学功能,在已克隆Neuritin cDNA的基础上,PCR扩增出Neuritin ORF,与原核表达载体pET32a重组后,成功的构建了Neuritin原核表达质粒pET32a-Neuritin。重组质粒转化B121大肠杆菌,IPTG 诱导后,表达产物用SDS-PAGE和Western blot证实系Neuritin,用镍离子亲和层析的方法获得了纯化的Neuritin蛋白。 展开更多
关键词 重组neuritin原核表达纯化
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Neuritin在乳腺腺病和乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义 被引量：3
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作者 杨丽 王旭晖 +2 位作者 刘春燕 张金莉 黄瑾 《中国妇幼保健》 CAS 2016年第12期2541-2543,共3页
目的 观察Neuritin蛋白在乳腺腺病及乳腺浸润性导管癌中的表达情况,探讨Neuritin与乳腺腺病及乳腺浸润性导管癌的相关性。方法 收集乳腺腺病组织20例、乳腺浸润性导管癌组织30例,采用免疫组织化学法检测各组织中Neuritin蛋白的表达情况... 目的 观察Neuritin蛋白在乳腺腺病及乳腺浸润性导管癌中的表达情况,探讨Neuritin与乳腺腺病及乳腺浸润性导管癌的相关性。方法 收集乳腺腺病组织20例、乳腺浸润性导管癌组织30例,采用免疫组织化学法检测各组织中Neuritin蛋白的表达情况,并用蛋白质免疫印记法进行验证。结果 Neuritin蛋白在乳腺腺病组织高表达,阳性表达率为65.0%;在乳腺浸润性导管癌组织中低表达,阳性表达率为16.7%,差异具有统计学意义（χ^2=12.17,P〈0.05）;蛋白质免疫印记结果与之相符。Neuritin蛋白的表达与乳腺浸润性导管癌患者的年龄,肿瘤高、中、低分化程度及淋巴结转移情况无明显相关性。结论Neuritin在乳腺腺病及乳腺浸润性导管癌组织中表达阳性,提示Neuritin可能与乳腺腺病及乳腺浸润性导管癌的发生、发展相关,Neuritin在乳腺腺病组织中表达显著升高,这将为临床乳腺腺病的鉴别诊断提供理论依据。 展开更多
关键词 neuritin 乳腺腺病 乳腺浸润性导管癌 免疫组织化学
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毕赤酵母表达Neuritin蛋白的纯化及鉴定 被引量：2
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作者 张云华 朱井玲 +5 位作者 熊安英 单莉娅 朱美意 郑艳 郝慧星 黄瑾 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第1期47-50,共4页
为研究重组Neuritin的毕赤酵母表达蛋白的纯化方法及鉴定。应用甲醇诱导GSll5/pPIC9K-Neuritin毕赤酵母工程菌株表达Neuritin蛋白,采用硫酸铵盐析、His-Trap Crud亲和层析等方法,对该表达产物进行纯化。纯化后的蛋白进行SDS-PAGE、weste... 为研究重组Neuritin的毕赤酵母表达蛋白的纯化方法及鉴定。应用甲醇诱导GSll5/pPIC9K-Neuritin毕赤酵母工程菌株表达Neuritin蛋白,采用硫酸铵盐析、His-Trap Crud亲和层析等方法,对该表达产物进行纯化。纯化后的蛋白进行SDS-PAGE、western-blot和生物质谱鉴定。结果显示,SDS-PAGE分析显示经甲醇诱导后表达的蛋白获得了与Neuritin分子量理论值相符的条带,western-blot分析它能够与抗表位抗体特异反应,进一步生物质谱分析证实该纯化重组蛋白为Neuritin重组蛋白。由此可知,本研究建立了一种有效的纯化方法,获得高纯度的Neuritin重组蛋白,为大量制备Neuritin纯化蛋白,开展其功能和机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 neuritin 蛋白纯化 鉴定
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