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题名酿酒酵母Nar1p参与寿命调控机制的初步研究
被引量：2
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作者
赵炜
刘依娜
牛宇杰
袁源
刘新光
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机构
广东医学院衰老研究所
广东省医学分子诊断重点实验室
广东医学院生物化学与分子生物学研究所
广东医学院第二临床医学院
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出处
《海南医学院学报》
CAS
2014年第3期293-296,301,共5页
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基金
国家自然科学基金(No.30871440
No.31101051
+3 种基金
No.81170327)
广东省自然科学基金(No.9252402301000002)
广东医学院建博科技创新团队项目(No.STIF201102)
博士启动项目(No.B2012061)~~
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文摘
目的:酵母Nar1p是人类早老症关键蛋白prelamin A相互作用蛋白NARF在酵母中的同源蛋白,目前未见其在寿命和衰老中的功能报道。本研究以酿酒酵母为模式物种,研究Nar1p在酵母复制寿命和氧化应激中的作用。方法:首先通过基因重组的原理构建Nar1p过表达酵母菌株,然后检测其复制寿命、对强氧化剂百草枯的抵抗能力、细胞内总SOD活性。结果:相对于野生型酵母菌株,Nar1p过表达酵母菌株的复制寿命缩短,抗氧化性损伤的能力减弱,但是细胞内总SOD活性升高。结论:Nar1p很可能参与了酵母复制寿命和氧化应激能力的调节,为全面研究Nar1p的功能奠定基础。
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关键词
酿酒酵母
nar1p
寿命
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Keywords
Saccharomyces cerevisiae
nar1p
Lifespan
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分类号
Q25
[生物学—细胞生物学]
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题名Nar1基因酵母表达载体的构建及表达鉴定
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作者
赵炜
方炳雄
刘依娜
牛宇杰
袁源
刘新光
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机构
广东医学院衰老研究所
广东省医学分子诊断重点实验室
普宁市人民医院检验科
广东医学院第二临床医学院
广东医学院生物化学与分子生物学研究所
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出处
《湖北医药学院学报》
CAS
2014年第2期110-113,共4页
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基金
国家自然科学基金(31101051)
广东省大学生创新创业训练计划项目(1057112031)
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文摘
目的:构建Nar1基因的酵母表达载体,并纯化His-Nar1融合蛋白,为进一步研究Nar1的相互作用蛋白及其功能奠定基础。方法:通过PCR扩增Nar1全长基因;通过定向克隆的方法将Nar1片段与载体pYES2/NTC连接;通过乙酸锂转化法把重组质粒转化入野生型酵母菌株INVSc1;再通过免疫沉淀的方法纯化His-Nar1融合蛋白;通过Western blot检测靶蛋白。结果:DNA测序验证穿梭表达质粒pYES2/NTC-Nar1构建成功,Western blot检测到融合蛋白His-Nar1的表达。结论:成功构建Nar1酵母过表达载体,并且可以有效表达融合蛋白His-Nar1。
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关键词
nar1
酵母
表达
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Keywords
nar1
Saccharomyces cerevisiae
Expression
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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