贝类水产品甲型肝炎病毒NanoPCR检测方法的建立及初步应用

1

作者 林鹏 薛悦 +3 位作者 宋姗姗 张德福 吴清平 励建荣 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第1期1-12,共12页

HAV是导致人类急性肝炎的重要病原体之一.贝类通过富集水环境中的病毒,成为多数食源性病毒重要的传播载体.为了解HAV在贝类中的污染情况,有效防止HAV的传播和保障消费者食品安全,因此需要研发一种操作简便、敏感性高和特异性强的HAV检... HAV是导致人类急性肝炎的重要病原体之一.贝类通过富集水环境中的病毒,成为多数食源性病毒重要的传播载体.为了解HAV在贝类中的污染情况,有效防止HAV的传播和保障消费者食品安全,因此需要研发一种操作简便、敏感性高和特异性强的HAV检测方法.通过将纳米材料和PCR技术相结合,通过优化反应体系和反应条件,建立一种新型HAV NanoPCR检测方法.结果发现,与传统PCR相比,建立的NanoPCR方法具有更高的灵敏度,最低检测到9.0 copies/μL,其灵敏度是传统PCR的10000倍;对其他贝类常见病毒无交叉反应,具有良好的特异性;对264份贝类水产品实际样品进行HAV检测分析,NanoPCR方法检出率为9.47%,而PCR方法检出率为7.58%,表明HAV NanoPCR检测方法的准确率高于传统PCR方法.因此,HAV NanoPCR检测方法适用于快速检测病毒含量较低的食品样品,对保障人类食品安全提供技术保障. 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 nanopcr 贝类水产品 检测方法

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贝类水产品星状病毒高效NanoPCR检测方法的建立及初步应用 被引量：1

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作者 林鹏 李倩楠 +3 位作者 宋姗姗 李学鹏 吴清平 励建荣 《渤海大学学报（自然科学版）》 CAS 2024年第1期1-11,共11页

人星状病毒(Human astrovirus,HAstV)是导致全球腹泻的主要病原体之一,主要存在于贝类水产品中.消费者通过加工、烹饪贝类水产品等过程感染HAstV,并伴有腹泻、呕吐等临床症状.因此,为及时发现贝类水产品中的HAstV和保障消费者食品安全,... 人星状病毒(Human astrovirus,HAstV)是导致全球腹泻的主要病原体之一,主要存在于贝类水产品中.消费者通过加工、烹饪贝类水产品等过程感染HAstV,并伴有腹泻、呕吐等临床症状.因此,为及时发现贝类水产品中的HAstV和保障消费者食品安全,本研究将纳米材料融入到PCR检测方法中,建立一种操作简便、灵敏度高和特异性强的HAstV检测方法.针对具有保守HAstVORF2基因序列设计特异性引物,通过优化纳米金颗粒含量、引物浓度及退火温度,建立HAstV纳米PCR(Nanomaterial-assisted PCR,NanoPCR)检测方法.研究发现HAstVNanoPCR检测方法具有较高的敏感性和特异性,其最低病毒检测限为2.0×10^(0)copies/μL,灵敏度是传统PCR的1000倍,与贝类水产品中其他常见的病毒无交叉反应;HAstV NanoPCR方法检测贝类水产品HAstV检出率为7.5%,而传统PCR检出率为5.35%.研究表明建立的HAstV NanoPCR检测方法适用于筛选贝类水产品中的HAstV,后续可应用于检测水产品中HAstV流行情况,为保障消费者食品安全提供技术保障. 展开更多

关键词 nanopcr HAstV 贝类水产品 食品安全

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非洲猪瘟病毒NanoPCR检测方法的建立 被引量：3

3

作者 李智杰 孙飞雁 +1 位作者 刘占悝 郭利 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1348-1352,共5页

为建立一种快速、灵敏、适用于大批量样品检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的方法,本研究使用金纳米颗粒与传统PCR技术相结合,针对ASFV中P72保守序列,建立了一种新的ASFV的NanoPCR分子检测方法,并对其特异性和敏感性进行了研究。结果表明,对于相... 为建立一种快速、灵敏、适用于大批量样品检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的方法,本研究使用金纳米颗粒与传统PCR技术相结合,针对ASFV中P72保守序列,建立了一种新的ASFV的NanoPCR分子检测方法,并对其特异性和敏感性进行了研究。结果表明,对于相关病毒,包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪瘟病毒(CSFV),NanoPCR分析均未发现交叉反应。与常规PCR相比,NanoPCR灵敏度更高,每个反应的检出限为2.86×10~3copies/μL,而常规PCR检出限为2.86×10~4copies/μL。用建立的方法对23份临床样品进行检测,结果 ASFV的阳性检出率为60.86%。综上所述,本研究开发的灵敏、特异性的NanoPCR方法可广泛应用于ASFV感染的临床诊断和现场监测。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 金纳米颗粒 纳米粒子辅助PCR

原文传递

基于经验模型探究CsPbX_(3)(X=Cl,Br,I)的迁移率

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作者 史力斌 吕舒涵 陈媛媛 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期207-213,共7页

正交相卤化物钙钛矿CsPbX_(3)(X=Cl,Br,I)因其优异的光电性能而受到广泛关注.为探究其电输运性质,利用纵向声学声子(longitudinal acoustic phonon,LAP)和极化光学声子(polar optical phonon,POP)模型预测其载流子迁移率.POP模型所得结... 正交相卤化物钙钛矿CsPbX_(3)(X=Cl,Br,I)因其优异的光电性能而受到广泛关注.为探究其电输运性质,利用纵向声学声子(longitudinal acoustic phonon,LAP)和极化光学声子(polar optical phonon,POP)模型预测其载流子迁移率.POP模型所得结果低于LAP模型,且与实验值相符,这说明极化光学声子是主要散射源.通过计算发现,正交相CsPbX_(3)的载流子迁移率表现出显著的各向异性行为,其中CsPbI_(3)在z方向上的迁移率最高,达到了125 cm^(2)·V^(-1)·s^(-1).通过进一步分析电子分波态密度,发现价带顶和导带底分别由卤素原子和Pb原子的p轨道贡献.此外,还利用第一性原理计算了CsPbX_(3)的声子色散曲线,验证了其动力学稳定性. 展开更多

关键词 密度泛函理论 经验模型 正交相钙钛矿 迁移率nanopcr HAstV 贝类水产品

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基于Franck-Condon因子的液相分子光谱模拟方法

5

作者 苏杭 李麦宁 刘宇辉 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期180-187,共8页

作为最常见的光化学反应之一,激发态质子转移(ESPT)反应在许多光化学以及光生物过程中起着关键作用,并且在荧光探针、有机发光二极管(OLED)等领域具有良好的应用价值,受到了越来越多的关注.双荧光是ESPT反应在发射光谱中的典型现象,其... 作为最常见的光化学反应之一,激发态质子转移(ESPT)反应在许多光化学以及光生物过程中起着关键作用,并且在荧光探针、有机发光二极管(OLED)等领域具有良好的应用价值,受到了越来越多的关注.双荧光是ESPT反应在发射光谱中的典型现象,其中包含“正常”和“异常”发射,它们分别对应于溶液中未发生质子转移的激发态溶质分子和发生了质子转移反应的激发态产物.迄今为止,学者们已经通过各种实验和理论方法对激发态质子转移反应进行了广泛研究,然而,量子化学程序中通常简单地通过垂直激发能来模拟实验光谱的手段,越来越无法满足人们对复杂光化学反应机理研究的需求.目前,基于Franck-Condon因子的振动分辨电子光谱模拟方法已被广泛应用于复杂光化学反应机理以及新型发光材料发光机制的研究中.但由于溶液相Franck-Condon模拟存在困难,关于模拟振动分辨电子光谱的报道很少.最近,引入了在质量加权笛卡儿坐标系中的阻尼Franck-Condon因子来模拟溶质-溶剂相互作用,解释溶剂增强吸收和荧光现象,并通过溶液相的Franck-Condon模拟深入了解激发态质子转移反应,从电子光谱模拟的独特视角出发,对几种激发态质子转移反应机制提出了新的观点. 展开更多

关键词 激发态质子转移 Franck-Condon模拟 电子光谱nanopcr HAstV 贝类水产品

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基于复合伪谱法的最优控制问题的研究

6

作者 叶世进 李太芳 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期200-206,共7页

本研究构建了一种复合伪谱法来求解一类具有按段光滑的常微分方程及不等式约束的最优控制问题.将待优化的系统运行区间依据函数的非光滑时刻点划分成多个间距不等的子区间;在每个子区间内,通过Legendre-Gauss-Radau节点,利用Lagrange插... 本研究构建了一种复合伪谱法来求解一类具有按段光滑的常微分方程及不等式约束的最优控制问题.将待优化的系统运行区间依据函数的非光滑时刻点划分成多个间距不等的子区间;在每个子区间内,通过Legendre-Gauss-Radau节点,利用Lagrange插值法构建分段插值多项式,利用弱微分表示法,推导出与之对应的导数运算矩阵,并运用Legendre-Gauss求积公式以及获得的导数运算矩阵,将该最优控制问题转化为一类离散的非线性规划问题,其中状态函数与控制函数的非光滑点为未知参量.获得的离散化非线性规划问题可使用Matlab非线性求解器进行求解.由于导数运算矩阵中元素结构建立了相邻子区间系统状态之间的联系,去除了状态连续性条件,因此,该方法可用于处理具有按段光滑的常微分方程约束的最优控制问题.最后通过数值例子验证了所提出方法的有效性. 展开更多

关键词 最优控制 伪谱法 按段光滑函数 弱微分法nanopcr HAstV 贝类水产品

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快速实现两比特控制相位门并制备四粒子团簇态

7

作者 李微 赵若冰 刘雨 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期214-221,共8页

多粒子团簇态因其最大连通性、持续纠缠性和对退相干的鲁棒性,近年来受到广泛关注.如何制备多粒子团簇态成为当前量子信息领域研究的热点问题之一.提出快速实现量子相位门的超绝热捷径方案并利用其制备四粒子团簇态.传统的绝热通道方案... 多粒子团簇态因其最大连通性、持续纠缠性和对退相干的鲁棒性,近年来受到广泛关注.如何制备多粒子团簇态成为当前量子信息领域研究的热点问题之一.提出快速实现量子相位门的超绝热捷径方案并利用其制备四粒子团簇态.传统的绝热通道方案需要分两步,并且由于演化时间过长可能会导致方案无效.本方案只需一步,这大大减少了实验实现的难度和实验过程中的各种损耗.数值模拟结果表明:超绝热捷径方案对腔系统中原子自发辐射和腔衰减引起的退相干效应具有鲁棒性,并且比传统的绝热通道方案花费的时间更短. 展开更多

关键词 量子纠缠 团簇态 量子相位门 超绝热捷径nanopcr HAstV 贝类水产品

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基于正弦分布输入环形回声状态网络的时间序列预测

8

作者 张澳 伦淑娴 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期231-240,共10页

回声状态网络(ESN)是一种相对较新的递归神经网络,在混沌时间序列的数据预测中显示出良好的前景.然而,回声状态网络的连接和权值结构是随机生成的,这可能会使得储备池在执行任务的过程中不是最优的,同时,输入权重矩阵可能在随机初始化... 回声状态网络(ESN)是一种相对较新的递归神经网络,在混沌时间序列的数据预测中显示出良好的前景.然而,回声状态网络的连接和权值结构是随机生成的,这可能会使得储备池在执行任务的过程中不是最优的,同时,输入权重矩阵可能在随机初始化过程中存在较大波动.为此,设计了一种具有确定性储备池结构、输入权重矩阵具有自相关性的回声状态网络,称为正弦-环形回声状态网络(SCESN).为了保证储备池的稀疏连通性,回声状态网络对输入权重矩阵采用正弦分布,使得输入权重具有自相关性,同时,在储备池的结构上,采用NW(Newmon-Watts)小世界网络结构.通过对多个数据集的预测,并与传统的回声状态网络的预测结果进行比较,结果表明,SCESN的预测结果优于传统的回声状态网络,网络复杂度低于回声状态网络. 展开更多

关键词 回声状态网络 储备池 混沌时间序列预测 网络拓扑结构设计nanopcr HAstV 贝类水产品

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明胶、聚乙二醇对大豆蛋白/多糖高内相乳液稳定性的影响

9

作者 王胜男 刘秀琳 +2 位作者 李阳阳 刘贺 何余堂 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期161-169,共9页

为探讨明胶(GE)和聚乙二醇(PEG)对大豆可溶性多糖-大豆分离蛋白杂化粒子(SSHPs)制备的高内相乳液(HIPEs)特性的影响,通过粒径分析、显微镜观察、流变学测试及荧光光谱等技术进行表征.结果表明GE和PEG的添加HIPEs的性质影响显著.平均粒... 为探讨明胶(GE)和聚乙二醇(PEG)对大豆可溶性多糖-大豆分离蛋白杂化粒子(SSHPs)制备的高内相乳液(HIPEs)特性的影响,通过粒径分析、显微镜观察、流变学测试及荧光光谱等技术进行表征.结果表明GE和PEG的添加HIPEs的性质影响显著.平均粒径与显微结果显示加入GE后的HIPEs的乳滴更小且分布更均匀紧密,扫描电镜图像也进一步证实了这一结果.此外,流变学测量结果表现出剪切稀化行为以及良好的黏弹性,并且样品的弹性模量(>500 Pa)始终大于黏性模量(<500 Pa).另外,内源性荧光光谱显示GE-SSHPs较PEG-SSHPs吸收强度降低并发生蓝移,说明GE与SSHPs产生较强结合.上述结果表明,相较于PEG,GE的加入使SSHPs稳定的HIPEs更加均一稳定,更利于加强稳固多糖蛋白稳定的HIPEs.这为制备更加稳固的生源性HIPEs提供了一定的理论依据. 展开更多

关键词 明胶 聚乙二醇 大豆可溶性多糖 高内相乳液 稳定性nanopcr HAstV 贝类水产品

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一类带Neumann边界条件的弱退化抛物方程的数值解法

10

作者 杜润梅 潘迪 那杨 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期188-199,共12页

研究一类带Neumann边界条件的弱退化抛物方程的数值解法.针对退化边界导致的奇异性问题,构造适配退化特性的自定义基函数{x^(1-α),1,x,x ^(2),…,x^(n)}的Galerkin方法.该方法通过基函数首项x^(1-α)的引入,大幅提升了数值解在退化边... 研究一类带Neumann边界条件的弱退化抛物方程的数值解法.针对退化边界导致的奇异性问题,构造适配退化特性的自定义基函数{x^(1-α),1,x,x ^(2),…,x^(n)}的Galerkin方法.该方法通过基函数首项x^(1-α)的引入,大幅提升了数值解在退化边界处的计算精度.数值实验表明:相比基于守恒原理的有限差分法(最大误差1.9988)和传统多项式Galerkin方法(最大误差0.20501),该方法仅用4个基函数即将最大绝对误差降至10^(-14)量级,计算耗时也大幅度降低,在精度与效率上均显著优于对比方法,为复杂退化方程的求解提供了高效高精度工具. 展开更多

关键词 退化抛物方程 NEUMANN边界条件 Galerkin方法nanopcr HAstV 贝类水产品

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基于改进YOLOv11n算法的草莓成熟度检测模型构建

11

作者 郑再飞 吕长鑫 徐秀义 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期170-179,共10页

准确且高效的草莓成熟度评估对于提高现代农业中的果实品质和收割标准化至关重要.然而,传统的手工检查方法存在主观性强和效率低下的问题.本研究旨在针对复杂环境下的草莓成熟度实时分类任务,提出了一种基于YOLOv11n的增强型轻量级目标... 准确且高效的草莓成熟度评估对于提高现代农业中的果实品质和收割标准化至关重要.然而,传统的手工检查方法存在主观性强和效率低下的问题.本研究旨在针对复杂环境下的草莓成熟度实时分类任务,提出了一种基于YOLOv11n的增强型轻量级目标检测模型.该模型整合了LightGhostConv模块、LightCA注意力机制和优化的C2f模块,以改善小物体特征提取、降低计算复杂度并增强对遮挡和光照变化的鲁棒性.在我国锦州收集了一个包含“红颜”草莓不同成熟度等级的定制数据集,数据集在各种光照和遮挡条件下进行采集.实验结果表明,改进后的模型实现了92.6%的平均精度,推理速度为49 fps,参数数量仅为2.24 M,优于原始的YOLOv11n以及其他主流模型,如YOLOv5n、YOLOv8n和YOLOv10n.基于此模型,进一步开发了一个基于网络的检测系统,该系统支持图像上传、分类和可视化操作,从而为智能收获应用提供了实用的支持.这项工作为移动终端的轻量级部署提供了一种可行的解决方案,并在智能农业和精准水果收获领域具有广阔的应用前景. 展开更多

关键词 草莓成熟度 小目标检测 轻量化模型 YOLOv11n 坐标注意力 设施农业nanopcr HAstV 贝类水产品

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基于LDA与社会网络分析的新能源汽车微博市场趋势及用户态度研究

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作者 孙旭飞 方爱丽 孙晓 《渤海大学学报(自然科学版)》 2025年第3期222-230,共9页

随着全球绿色低碳转型的加速,新能源汽车产业正以空前的速度迅猛发展,电动汽车和燃油汽车的发展与替代性问题成为了人们关注的焦点.基于微博数据挖掘,对热门话题“电动车能否替代燃油车”下相关微博及评论进行爬取分析,旨在详尽探讨电... 随着全球绿色低碳转型的加速,新能源汽车产业正以空前的速度迅猛发展,电动汽车和燃油汽车的发展与替代性问题成为了人们关注的焦点.基于微博数据挖掘,对热门话题“电动车能否替代燃油车”下相关微博及评论进行爬取分析,旨在详尽探讨电动车能否替代燃油车的未来发展趋势.通过运用LDA情感主题分析确定了3个主题因素为最佳,即环境影响、经济因素和技术因素.进行社会网络分析,找出了最有影响力的微博用户,即汽车之家、懂车弟-小洋哥等,这些用户通常在网络中扮演着核心角色,对于信息的传播、资源的流动或群体行为的影响具有显著作用.研究结果不仅为政府制定新能源汽车政策提供了科学依据,也有助于企业把握市场脉搏,调整产品策略和营销策略,进一步推动电动车市场的繁荣发展. 展开更多

关键词 微博数据挖掘 情感分析 LDA情感主题分析 社会网络分析 新能源汽车nanopcr HAstV 贝类水产品

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禽腺病毒血清4型纳米PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：20

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作者 王利丽 郑丽 +6 位作者 李富强 李秀丽 任卫科 路超 张莉 董志民 鄢明华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期701-704,共4页

为建立一种快速有效检测禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的方法,本研究根据FAdV-4五邻体(Penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,经过条件优化,建立了检测FAdV-4的纳米PCR方法(Nano PCR)。特异性试验结果显示,该方法对鸡新城疫病毒等12种家禽... 为建立一种快速有效检测禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的方法,本研究根据FAdV-4五邻体(Penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,经过条件优化,建立了检测FAdV-4的纳米PCR方法(Nano PCR)。特异性试验结果显示,该方法对鸡新城疫病毒等12种家禽常见病原及国内报导的FAdV-1、FAdV-2、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11等5个主要血清型病毒的扩增结果均为阴性,仅FAdV-4检测结果为阳性,特异性较强。敏感性试验结果显示,该方法对FAdV-4的最低核酸检出量为54.0拷贝/μL,较常规PCR方法高10倍,敏感性较高。应用该方法和病毒分离培养法同时对87份临床样品进行检测,二者均检出14份阳性样品,总体符合率为100%。以上结果表明本研究建立的Nano PCR方法特异性好、敏感性高,可以用于FAdV-4的临床检测和分子流行病学调查。 展开更多

关键词 禽腺病毒血清4型 五邻体基因 nanopcr检测

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新型冠状病毒纳米PCR快速检测方法的建立 被引量：3

14

作者 李智杰 孙飞雁 +2 位作者 刘占悝 魏宇 郭利 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期19-24,共6页

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染可导致致命性肺炎,且极具传染性。自2019年年末在我国出现以来,已在全球蔓延。为了建立一种灵敏、快速检测SARS-CoV-2的分子检测方法,本研究使用金纳米颗粒配合普通PCR检测方法,针对SARS-CoV-2核衣壳蛋白... 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染可导致致命性肺炎,且极具传染性。自2019年年末在我国出现以来,已在全球蔓延。为了建立一种灵敏、快速检测SARS-CoV-2的分子检测方法,本研究使用金纳米颗粒配合普通PCR检测方法,针对SARS-CoV-2核衣壳蛋白建立了SARS-CoV-2 NanoPCR新型分子检测方法。特异性结果显示,该方法对猪流行性腹泻病毒、牛冠状病毒、犬冠状病毒、水貂冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒均无交叉反应,表明该方法的特异性良好。敏感性结果显示,该方法的最低检测量为3.69×10^(4)拷贝/μL,高于普通PCR最低检测量10倍,表明该方法的敏感性良好。使用建立的方法对3份临床样品进行检测,该方法与普通PCR方法结果一致,10倍稀释样品后,NanoPCR相比较普通PCR条带仍然具有较高辨识度。综上,本研究建立的灵敏、特异的NanoPCR方法可以对临床样品进行快速诊断和鉴定。 展开更多

关键词 新型冠状病毒(SARS-CoV-2) nanopcr 金纳米粒子

原文传递

猪细小病毒高效纳米PCR检测方法的建立 被引量：11

15

作者 崔宇超 彭永刚 +1 位作者 马兴杰 崔尚金 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期286-288,共3页

为建立快速、灵敏的猪细小病毒(PPV)的检测方法,本研究针对PPV VP2基因的保守区域设计一对扩增472 bp片段的特异性引物,建立了PPV纳米PCR检测方法。敏感性试验表明纳米PCR方法是普通PCR的1 000倍,最低核酸检出量为4拷贝/μL。利用该纳米... 为建立快速、灵敏的猪细小病毒(PPV)的检测方法,本研究针对PPV VP2基因的保守区域设计一对扩增472 bp片段的特异性引物,建立了PPV纳米PCR检测方法。敏感性试验表明纳米PCR方法是普通PCR的1 000倍,最低核酸检出量为4拷贝/μL。利用该纳米PCR方法检测猪的其他相关病毒核酸,结果均呈阴性。分别采用纳米PCR和普通PCR对3个省份送检的43份临床样品进行检测,PPV阳性率分别为95%(41/43)和72%(31/41),表明该纳米PCR检测方法具有更高的敏感性,适用于PPV低含量临床样品的检测。 展开更多

关键词 猪细小病毒 VP2基因 纳米PCR

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鉴别猪伪狂犬病病毒强弱毒的高效纳米PCR检测试剂盒及初步应用 被引量：2

16

作者 马兴杰 仇铮 +6 位作者 崔宇超 王晓玲 张晶 朱宝 孔苗苗 罗亚坤 崔尚金 《养猪》 2014年第5期100-104,共5页

试验建立了鉴别猪伪狂犬病病毒（PRV）强弱毒高效纳米PCR检测方法，并对相关条件进行优化，组装了试剂盒。根据PRV保守序列设计3对引物分别扩增PRV基因组的gB（431 bp）、gE（316 bp）和gG（202 bp）3个基因，用于区分PRV强毒与基因缺... 试验建立了鉴别猪伪狂犬病病毒（PRV）强弱毒高效纳米PCR检测方法，并对相关条件进行优化，组装了试剂盒。根据PRV保守序列设计3对引物分别扩增PRV基因组的gB（431 bp）、gE（316 bp）和gG（202 bp）3个基因，用于区分PRV强毒与基因缺失毒株，优化反应条件后建立了纳米PCR检测PRV强弱毒的方法并组装试剂盒，对试剂盒进行了特异性、敏感性、批内批间可重复性及保存期评估试验，并对临床样品进行检测。特异性试验表明，此试剂盒对于PRV能够扩增出431（gB）、316（gE）和202 bp（gG）的目的片段，对于PRV-Bartha-K61能够扩增出431和202 bp的目的片段，对于猪捷申病毒、非洲猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及大肠杆菌等DNA或cDNA均未扩增出条带。敏感性试验表明，此试剂盒的方法比常规PCR方法敏感100-1000倍，最低核酸拷贝数检出量可以达到101 copy/μL数量级。试剂盒的批内、批间检测结果无明显差异，稳定性良好。-20℃至少可保存12个月。在对中国黑龙江、吉林等7个省市的临床送检的117份样品进行检测，结果显示，PRV强毒阳性率为51%，阴性率为49%，未发现有弱毒感染。鉴别PRV强弱毒纳米PCR试剂盒的研制，对PRV感染的早期检测、野毒株和疫苗株的鉴别、疾病控制等都有重要意义，而且也可以用于其他动物PRV感染的检测和早期诊断。 展开更多

关键词 检测 猪伪狂犬病病毒

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猪伪狂犬病毒纳米PCR检测方法的建立 被引量：6

17

作者 张悦勇 南文龙 +4 位作者 秦立得 巩明霞 吴发兴 单虎 陈义平 《中国动物检疫》 CAS 2017年第3期102-105,共4页

[目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、猪... [目的 ]快速灵敏检测猪伪狂犬病毒(PRV)[方法 ]根据PRV g B基因设计特异性引物,建立了PRV纳米PCR检测方法。[结果 ]PRV纳米PCR方法的最低检出限为10拷贝/μL,其敏感性比未添加纳米金的对照PCR提高100倍;建立的纳米PCR与猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒等常见猪病毒性病原均无交叉反应。应用纳米PCR和PRV国家标准中的PCR方法,对2014—2016年期间采集自17个省市发病猪场的148份临床样品进行平行检测,PRV纳米PCR的阳性检出率为49.3%(73/148),PRV国标PCR方法的阳性检出率为23.6%(35/148),并且PRV纳米PCR检测为阳性,而PRV国标PCR方法检测为阴性的38份样品,测序结果均确认为PRV阳性。[结论 ]本研究建立的纳米PCR检测方法敏感特异,可用于猪伪狂犬病的病原学检测。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 纳米PCR g B基因

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纳米基因扩增技术及其应用 被引量：6

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作者 桑付明 李鑫 刘佳 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1745-1753,共9页

聚合酶链式反应(PCR)是20世纪80年代中期发展起来的一种应用广泛的体外DNA扩增技术,但目前该技术仍然存在着一些问题,如特异性差、灵敏度低和假阳性等。近年来,随着纳米科技的发展,一些纳米粒子如金属纳米粒子、碳纳米材料、量子点和纳... 聚合酶链式反应(PCR)是20世纪80年代中期发展起来的一种应用广泛的体外DNA扩增技术,但目前该技术仍然存在着一些问题,如特异性差、灵敏度低和假阳性等。近年来,随着纳米科技的发展,一些纳米粒子如金属纳米粒子、碳纳米材料、量子点和纳米金属氧化物等被引入到PCR反应体系中,即纳米基因扩增技术(Nano PCR)。该技术大幅度提高了PCR的扩增效率、选择性、灵敏度和特异性,推动了生物学技术的发展,具有非常重要的理论意义和应用价值。本文综述了近年来纳米基因扩增技术的主要研究进展、反应机理,并探讨了其应用研究。 展开更多

关键词 纳米基因扩增技术 纳米材料 特异性 扩增效率 热启动 评述

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