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利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Nup155基因敲除的PK-15细胞系
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作者 孙瑜嘉 殷娟斌 +6 位作者 刘瀛 李可卿 曹轶梅 朵红 卢曾军 赵志荀 张强 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第5期569-576,共8页
本研究使用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构成Nup155基因缺失的PK-15细胞株,并检测敲除Nup155基因后对PK-15细胞的影响。首先设计精确靶向Nup155基因的4条sg RNA,与载体LentiCRISPR v2连接后进行慢病毒包装;再使用2μg/m L嘌呤霉素筛选细胞... 本研究使用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构成Nup155基因缺失的PK-15细胞株,并检测敲除Nup155基因后对PK-15细胞的影响。首先设计精确靶向Nup155基因的4条sg RNA,与载体LentiCRISPR v2连接后进行慢病毒包装;再使用2μg/m L嘌呤霉素筛选细胞株;通过RT-qPCR和Western-blot来确认细胞中Nup155基因是否被敲除;最终通过CCK8试验检测Nup155基因敲除对PK-15细胞活性的影响。RT-qPCR及Westernblot结果显示,细胞株Nup155基因的m RNA和蛋白表达水平显著降低;CCK8试验结果显示,部分敲除Nup155基因的PK-15细胞活力下降。本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了1株Nup155基因部分敲除的PK-15细胞系,并发现部分敲除Nup155基因会显著影响PK-15细胞活力,为深入研究Nup155基因的功能机制提供了理想的细胞模型。 展开更多
关键词 PK-15细胞 基因敲除 nup155 慢病毒包装
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NUP155与房颤及原发性心律失常性猝死关系的研究进展 被引量：2
2
作者 任涵 成建定 黄二文 《中国法医学杂志》 CSCD 2017年第6期599-602,共4页
NUP155是组成核孔复合体的一种重要的核孔蛋白,在核孔复合体介导大分子物质出入细胞核过程中发挥重要作用。原发性心律失常是导致猝死的重要原因之一,其主要由于编码心肌细胞膜上离子通道的基因突变所致,因此又被称为"心脏离子通道... NUP155是组成核孔复合体的一种重要的核孔蛋白,在核孔复合体介导大分子物质出入细胞核过程中发挥重要作用。原发性心律失常是导致猝死的重要原因之一,其主要由于编码心肌细胞膜上离子通道的基因突变所致,因此又被称为"心脏离子通道病"。NUP155是第一个被发现突变后能导致原发性心律失常及心源性猝死的非离子通道基因。本文将对NUP155的结构和生物学功能及其与原发性心律失常性猝死的关系进行阐述。 展开更多
关键词 法医病理学 nup155 心房颤动 原发性心律失常性猝死
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