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猪源NUB1的基因克隆、表达与细胞定位研究
1
作者
卢洪婷
朱雪蛟
+5 位作者
周金柱
张雪寒
陶然
郭容利
牛家强
李彬
《畜牧与兽医》
北大核心
2025年第8期43-48,共6页
旨在对猪源泛素样蛋白负调控因子1(NUB1)进行鉴定、表达和细胞定位分析,并探究NUB1对猪轮状病毒(PoRV)的复制、先天性免疫、神经前体细胞表达发育调控下调蛋白8(NEDD8)通路调节的影响。设计带有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物并在C端带入Hi...
旨在对猪源泛素样蛋白负调控因子1(NUB1)进行鉴定、表达和细胞定位分析,并探究NUB1对猪轮状病毒(PoRV)的复制、先天性免疫、神经前体细胞表达发育调控下调蛋白8(NEDD8)通路调节的影响。设计带有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物并在C端带入His标签,以猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)的cDNA为模板,扩增NUB1基因,并克隆到pcDNA3.1(+)载体;利用LipofectamineTM 3000脂质体转染重组质粒到MARC145细胞,Western blot和间接免疫荧光试验检测NUB1在MARC145细胞中的表达情况,共聚焦显微分析技术确定NUB1定位情况。结果:成功扩增出猪源NUB1基因,并构建NUB1真核表达质粒pcDNA3.1(+)-NUB1-His;重组质粒能在MARC145细胞中表达,NUB1蛋白定位于细胞核和细胞浆。综上,本试验成功构建了可外源表达NUB1的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-NUB1-His,为后续研究NUB1的生物学功能及其对PoRV复制的影响奠定了基础。
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关键词
nub1
NEDD8
基因克隆
细胞定位
基因表达
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职称材料
鲫Nub1基因的克隆及特征分析
被引量：
4
2
作者
甘力
张义兵
+1 位作者
孙钒
桂建芳
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期702-708,共7页
Nub1(NEDD8 Ultimate Buster-1)是近年来发现的一种干扰素诱导表达基因,过量表达该基因能抑制细胞生长。研究通过RACE-PCR方法从产生干扰素的鲫囊胚培养细胞(Carassius auratus blastulae embryonic cells,CAB)中克隆出鲫Nub1基因。鲫N...
Nub1(NEDD8 Ultimate Buster-1)是近年来发现的一种干扰素诱导表达基因,过量表达该基因能抑制细胞生长。研究通过RACE-PCR方法从产生干扰素的鲫囊胚培养细胞(Carassius auratus blastulae embryonic cells,CAB)中克隆出鲫Nub1基因。鲫Nub1全长cDNA为2298bp,编码一个由589个氨基酸残基组成的蛋白。推导的鲫NUB1蛋白具有哺乳类同源蛋白保守的结构域,包括N端的UBL结构域和C端两个UBA结构域,与已知的哺乳类包括人和小鼠、鸟类和两栖类的同源蛋白具有41%—45%的相似性。诱导表达分析显示PolyI:C和LPS均能诱导CAB细胞Nub1mRNA的上调,表明Nub1基因在鱼类的抗病免疫反应中发挥某种重要作用。
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关键词
nub1
干扰素诱导基因
诱导表达
抗病免疫反应
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职称材料
题名
猪源NUB1的基因克隆、表达与细胞定位研究
1
作者
卢洪婷
朱雪蛟
周金柱
张雪寒
陶然
郭容利
牛家强
李彬
机构
西藏农牧大学动物科学学院/农业农村部西藏包虫病防治重点实验室/西藏高原动物疫病研究自治区高校重点实验室
江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室
出处
《畜牧与兽医》
北大核心
2025年第8期43-48,共6页
基金
国家重点研发计划项目(2023YFD1801303)
国家自然科学基金项目(32302892)
江苏省自然科学基金项目(BK20221432)。
文摘
旨在对猪源泛素样蛋白负调控因子1(NUB1)进行鉴定、表达和细胞定位分析,并探究NUB1对猪轮状病毒(PoRV)的复制、先天性免疫、神经前体细胞表达发育调控下调蛋白8(NEDD8)通路调节的影响。设计带有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物并在C端带入His标签,以猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)的cDNA为模板,扩增NUB1基因,并克隆到pcDNA3.1(+)载体;利用LipofectamineTM 3000脂质体转染重组质粒到MARC145细胞,Western blot和间接免疫荧光试验检测NUB1在MARC145细胞中的表达情况,共聚焦显微分析技术确定NUB1定位情况。结果:成功扩增出猪源NUB1基因,并构建NUB1真核表达质粒pcDNA3.1(+)-NUB1-His;重组质粒能在MARC145细胞中表达,NUB1蛋白定位于细胞核和细胞浆。综上,本试验成功构建了可外源表达NUB1的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-NUB1-His,为后续研究NUB1的生物学功能及其对PoRV复制的影响奠定了基础。
关键词
nub1
NEDD8
基因克隆
细胞定位
基因表达
Keywords
nub1
NEDD8
gene cloning
subcellular localization
gene expression
分类号
S852 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鲫Nub1基因的克隆及特征分析
被引量：
4
2
作者
甘力
张义兵
孙钒
桂建芳
机构
中国科学院水生生物研究所
出处
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期702-708,共7页
基金
国家自然科学基金(306716l7
30871922)
863项目(2007AA09Z423)资助
文摘
Nub1(NEDD8 Ultimate Buster-1)是近年来发现的一种干扰素诱导表达基因,过量表达该基因能抑制细胞生长。研究通过RACE-PCR方法从产生干扰素的鲫囊胚培养细胞(Carassius auratus blastulae embryonic cells,CAB)中克隆出鲫Nub1基因。鲫Nub1全长cDNA为2298bp,编码一个由589个氨基酸残基组成的蛋白。推导的鲫NUB1蛋白具有哺乳类同源蛋白保守的结构域,包括N端的UBL结构域和C端两个UBA结构域,与已知的哺乳类包括人和小鼠、鸟类和两栖类的同源蛋白具有41%—45%的相似性。诱导表达分析显示PolyI:C和LPS均能诱导CAB细胞Nub1mRNA的上调,表明Nub1基因在鱼类的抗病免疫反应中发挥某种重要作用。
关键词
nub1
干扰素诱导基因
诱导表达
抗病免疫反应
Keywords
nub1
Interferon stimulated gene
Inducible expression
Antiviral immune response
分类号
S941 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪源NUB1的基因克隆、表达与细胞定位研究
卢洪婷
朱雪蛟
周金柱
张雪寒
陶然
郭容利
牛家强
李彬
《畜牧与兽医》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鲫Nub1基因的克隆及特征分析
甘力
张义兵
孙钒
桂建芳
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
4
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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