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犬NT-proCNP单链抗体库的构建及1株单链抗体的筛选与免疫活性检测
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作者 江少佳 南沙 +8 位作者 王慧康 毛玲 尹瑞玲 雷蔷会 王浩龙 李好 萧锦瑜 丁明星 丁一 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第3期535-541,共7页
首先采用原核表达制备氨基末端C型钠尿肽原(NT-proCNP)并对新西兰大白兔进行免疫。当兔血清效价达到预期后,提取其脾细胞总RNA,并反转录为cDNA。以cDNA为模板,利用简并引物分别对兔源抗体轻链可变区(VL)以及重链可变区(VH)基因进行扩增... 首先采用原核表达制备氨基末端C型钠尿肽原(NT-proCNP)并对新西兰大白兔进行免疫。当兔血清效价达到预期后,提取其脾细胞总RNA,并反转录为cDNA。以cDNA为模板,利用简并引物分别对兔源抗体轻链可变区(VL)以及重链可变区(VH)基因进行扩增。通过重叠延伸PCR法将VL和VH拼接成完整的噬菌体单链抗体(scFv)片段,再将scFv与嗜菌粒pComb3XSS连接并电转化至感受态E.coli TG1中以构建抗NT-proCNP兔源单链抗体免疫文库。对该抗体库进行4轮富集淘筛,并从中筛选出特异性单链抗体。最后通过原核表达系统对单链抗体进行可溶性表达并检测其免疫反应活性。结果表明,本研究基于噬菌体展示技术成功筛选到1株具有良好抗原结合活性且符合scFv基因特征的单链抗体scFv-1-CNP,为进一步探究单链抗体在NT-proCNP检测中的应用提供了研究思路。 展开更多
关键词 氨基末端C型钠尿肽原 单链抗体 噬菌体展示
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NT-proANP、NT-proBNP和NT-proCNP对心力衰竭患者心源性事件预后预测价值的比较 被引量：20
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作者 吴超 赵雪燕 +1 位作者 袁晋青 杨跃进 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2021年第3期3949-3952,共4页
目的比较氨基末端A型利钠肽(amino-terminal A-type natriuretic peptide,NT-proANP)、氨基末端B型利钠肽(amino-terminal B-type natriuretic peptide,NT-proBNP)和氨基末端C型利钠肽(amino-terminal C-type natriuretic peptide,NT-pr... 目的比较氨基末端A型利钠肽(amino-terminal A-type natriuretic peptide,NT-proANP)、氨基末端B型利钠肽(amino-terminal B-type natriuretic peptide,NT-proBNP)和氨基末端C型利钠肽(amino-terminal C-type natriuretic peptide,NT-proCNP)对心力衰竭患者预后的预测价值。方法入选112例心力衰竭患者,入院测定NT-proANP、NT-proBNP和NT-proCNP的血浆浓度。心源性事件定义为心源性死亡、心力衰竭再住院及心脏移植。通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)比较NT-proANP、NT-proBNP和NT-proCNP对心源性事件的预后预测价值。采用多因素Cox回归模型评估心源性事件的相关影响因素。结果112例患者平均随访(16.75±6.32)个月,共发生心源性事件30例。心源性事件组(n=30)的NT-proANP、NT-proBNP均较无心源性事件组(n=82)显著升高(P均<0.01),NT-proCNP虽有升高的趋势,但无统计学差异(P>0.05)。NTproANP、NT-proBNP和NT-proCNP区分心源性事件的AUC分别为0.742(95%CI:0.634~0.850,P<0.001),0.772(95%CI:0.673~0.871,P<0.001)和0.569(95%CI:0.444~0.693,P=0.265)。多因素Cox分析,log(NT-proBNP)[B(SE):1.103(0.539),P=0.041]和左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)[B(SE):-0.042(0.021),P=0.046]是心源性事件的独立影响因素,而NT-proANP和NTproCNP与心源性事件无独立相关性。结论NT-proANP和NT-proBNP对心源性事件具有预测价值。而NT-proBNP和LVEF是心源性事件的独立影响因素。NT-proCNP对心力衰竭患者的预测价值不佳。 展开更多
关键词 心力衰竭 氨基末端A型利钠肽 氨基末端B型利钠肽 氨基末端C型利钠肽 预后
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心力衰竭患者NT-proANP、NT-proBNP和NT-proCNP与肾功能指标的相关性分析 被引量：17
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作者 吴超 赵雪燕 +1 位作者 袁晋青 杨跃进 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2021年第2期34-38,67,共6页
目的探讨血肌酐轻度升高或正常心力衰竭(心衰)患者氨基末端A型利钠肽(NT-proANP)、氨基末端B型利钠肽(NT-proBNP)和氨基末端C型利钠肽(NT-proCNP)与肾功能指标(肌酐、尿素氮、肾小球滤过率(eGFR))的相关性。方法测定112例血肌酐<2 mg... 目的探讨血肌酐轻度升高或正常心力衰竭(心衰)患者氨基末端A型利钠肽(NT-proANP)、氨基末端B型利钠肽(NT-proBNP)和氨基末端C型利钠肽(NT-proCNP)与肾功能指标(肌酐、尿素氮、肾小球滤过率(eGFR))的相关性。方法测定112例血肌酐<2 mg·dL-1(176.8μmol·L-1)的心衰患者(心衰组)和44例行冠状动脉造影除外冠心病的正常对照者(对照组)的肾功能指标、血肌酐和尿素氮。心衰组按肾功能指标再分为3个亚组,分析NT-proANP、NT-proBNP、NT-proCNP与肾功能指标的相关性及其影响因素。结果与对照组相比,心衰组的肌酐、尿素氮、NT-proANP、NT-proBNP、NT-proCNP值均明显升高,而eGFR明显降低(均P<0.05)。相关性分析:心衰患者Log NT-proANP、Log NT-proBNP和Log NT-proCNP分别与肌酐、尿素氮呈正相关(r=0.221~0.528,均P<0.05);分别与eGFR呈负相关(r=-0.303~-0.369,均P<0.01)。多元回归分析:是否使用利尿剂、尿素氮和NYHA分级为NT-proANP和NT-proBNP的独立影响因素,而肌酐为NT-proCNP的独立影响因素(均P<0.05)。结论肾功能正常或伴有轻度肾功能不全的心衰患者,利钠肽水平与肾功能指标密切相关,对该类患者应关注肾功能指标对利钠肽的影响。 展开更多
关键词 心力衰竭 肾功能不全 氨基末端A型利钠肽 氨基末端B型利钠肽 氨基末端C型利钠肽
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