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水稻氮高效基因NRT1.1B的KASP标记开发与利用
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作者 牛付安 周继华 +6 位作者 程灿 孙滨 张安鹏 张建明 曹黎明 高益 储黄伟 《分子植物育种》 北大核心 2025年第2期489-494,共6页
水稻中的硝酸盐转运蛋白基因NRT1.1B可以调节水稻氮肥利用效率,影响水稻产量。为了提升NRT1.1B基因型鉴定和育种应用效率,本研究开发了一个可以高通量鉴定NRT1.1B基因型的分子标记NRT1.1B-KASP。利用NRT1.1B-KASP对籼稻‘9311’和粳稻‘... 水稻中的硝酸盐转运蛋白基因NRT1.1B可以调节水稻氮肥利用效率,影响水稻产量。为了提升NRT1.1B基因型鉴定和育种应用效率,本研究开发了一个可以高通量鉴定NRT1.1B基因型的分子标记NRT1.1B-KASP。利用NRT1.1B-KASP对籼稻‘9311’和粳稻‘繁14’的回交BC4F2群体进行NRT1.1B基因的分型,发现在BC4F2群体的65个单株的DNA样品中,有14份样品与供体亲本‘9311’同为NRT1.1B-indica基因型,17份样品与‘繁14’同为NRT1.1B-japonica基因型,34份样品显示杂合基因型。对这65份DNA样品的NRT1.1B基因进行测序,测序结果显示与KASP标记分型的结果完全一致。以上结果说明NRT1.1B-KASP标记可以高效、准确地对NRT1.1B进行基因分型,可以应用于水稻分子标记辅助选择育种。 展开更多
关键词 水稻(Oryza sativa) 氮高效 nrt1.1B KASP
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甘薯IbNRT2基因家族全基因组鉴定和表达分析
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作者 王芳 乔帅 +4 位作者 宋伟 崔鹏娟 廖安忠 谭文芳 杨松涛 《生物技术通报》 北大核心 2025年第7期193-204,共12页
【目的】鉴定甘薯高亲和硝酸盐转运体NRT2家族成员,分析其理化性质、基因结构和不同胁迫下表达分析,为甘薯NRT2家族成员功能鉴定提供理论支持。【方法】利用NCBI和甘薯基因组数据库,采用生物信息学、转录组分析和低氮表型筛选等方法,系... 【目的】鉴定甘薯高亲和硝酸盐转运体NRT2家族成员,分析其理化性质、基因结构和不同胁迫下表达分析,为甘薯NRT2家族成员功能鉴定提供理论支持。【方法】利用NCBI和甘薯基因组数据库,采用生物信息学、转录组分析和低氮表型筛选等方法,系统鉴定IbNRT2基因成员,并对其基因结构、保守基序和表达特性等进行分析。【结果】在甘薯全基因组中鉴定到7个IbNRT2高亲和硝酸盐转运体基因。理化性质分析结果显示,IbNRT2家族成员编码氨基酸残基数为462-536,理论等电点均大于7,且所有编码蛋白为疏水蛋白。7个甘薯IbNRT2和9个近缘野生二倍体甘薯(Ipomoea trifida)ItfNRT2基因均分布在5条染色体上。系统进化树分析显示,7个IbNRT2家族成员分成3个亚组,甘薯与野生二倍体的亲缘关系最近。顺式作用元件分析表明,IbNRT2基因启动子区域存在大量环境及激素类响应元件,其中光信号响应元件最多。甘薯种内共线性关系显示,7个IbNRT2基因存在2对共线性关系;种间共线性关系结果显示,甘薯与野生二倍体ItfNRT2基因之间形成7对共线性关系,与拟南芥AtNRT2形成4对共线性关系。不同部位组织和盐胁迫表达分析结果揭示IbNRT2.7具有较为广泛的表达,在种子和叶片中表达最高且受盐胁迫诱导表达上调;IbNRT2.1、IbNRT2.2主要在根部表达且受盐胁迫诱导表达下调。在不同氮处理甘薯品种中进行RT-qPCR分析,结果揭示IbNRT2.1和IbNRT2.2受低硝酸盐诱导最明显,且在氮高效甘薯品种中(川薯221、川薯228、西成薯007)的诱导表达倍数高于氮低效甘薯品种(普薯32、绵紫薯9)。【结论】甘薯中鉴定出7个IbNRT2基因,在不同部位、盐胁迫和低氮胁迫下的表达模式存在差异,为进一步研究IbNRT2在不同部位的功能奠定基础。 展开更多
关键词 甘薯 nrt2基因 组织表达模式 盐胁迫表达模式 低氮表型
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植物硝酸盐转运蛋白NRT2.1的功能与调控机制研究进展
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作者 吴秀菊 蒋文亚 李强 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第5期174-182,共9页
氮素是植物生长发育必需的元素,硝酸盐作为陆生植物氮素摄取的主要形式,其吸收和转运过程对植物生长发育及产量形成至关重要。硝酸盐转运蛋白NRT2.1(Nitrate transporter 2.1)属于植物体内的高亲和性硝酸盐转运蛋白,参与调控植物生长发... 氮素是植物生长发育必需的元素,硝酸盐作为陆生植物氮素摄取的主要形式,其吸收和转运过程对植物生长发育及产量形成至关重要。硝酸盐转运蛋白NRT2.1(Nitrate transporter 2.1)属于植物体内的高亲和性硝酸盐转运蛋白,参与调控植物生长发育进程。文章综述了硝酸盐转运蛋白NRT2.1在植物中的主要功能及其调控机制,以期为深入解析植物硝酸盐转运蛋白功能和调控机制奠定基础,为提升作物氮素利用效率、挖掘作物高产种质资源提供科学依据。 展开更多
关键词 nrt2.1 硝酸盐转运蛋白 氮素 调控机制
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小麦NRT1基因家族鉴定、表达与DNA变异分析
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作者 郭志强 范佳利 +1 位作者 朱立勋 张春来 《分子植物育种》 北大核心 2025年第1期1-18,共18页
硝态氮是植物吸收氮素的主要形式之一,其吸收与硝酸盐转运蛋白1(NRT1)的功能相关。而氮损失是农业污染之一,提高普通六倍体栽培小麦的氮素利用率在绿色作物生产中占重要地位。本研究旨在鉴定普通小麦全基因组NRT1家族成员,分析其基因结... 硝态氮是植物吸收氮素的主要形式之一,其吸收与硝酸盐转运蛋白1(NRT1)的功能相关。而氮损失是农业污染之一,提高普通六倍体栽培小麦的氮素利用率在绿色作物生产中占重要地位。本研究旨在鉴定普通小麦全基因组NRT1家族成员,分析其基因结构、染色体定位、理化性质、二级结构、亚细胞定位与跨膜结构域、保守基序、启动子顺式作用元件、系统进化、基因表达及选择进化。从中国春小麦参考基因组鉴定出77个小麦NRT1基因,不均匀分布在21条染色体上,分为十个亚家族,同一亚家族中的NRT1基因结构高度相似。除TraesCS3B02G215200编码蛋白外小麦NRT1蛋白均为疏水性蛋白,二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主,且亚细胞定位几乎全部在质膜上;基因保守性分析结果显示,motif 1~motif 10是小麦NRT1基因家族中保守的基序;基因启动子顺式作用元件分析发现,TraesCS1A02G031300、TraesCS1B02G267900、TraesCS7A02G196100等基因的启动子区域中含有ABRE、MBS、LAMP-element等逆境胁迫响应元件,可能调控对环境反应;系统进化树分析表明,小麦NRT1家族与高粱、水稻亲缘关系更近;通过小麦基因组NRT1DNA重测序数据的Ka、Ks,表明小麦NRT1蛋白编码基因进化具有纯化效应;基因表达热图分析表明,TraesCS4B02G029600、TraesCS4A02G283900、TraesCS4D02G026800这三个基因可能在分蘖期、抽穗期小麦根部表达活性高,参与对氮素的吸收。本研究初步分析了小麦全基因组NRT1的基因结构、表达与进化,为小麦氮高效种质的创制提供了基础。 展开更多
关键词 小麦基因组 nrt1家族 基因表达 DNA变异
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盐地碱蓬NRT1基因家族鉴定及盐胁迫响应研究
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作者 王潇雨 李昊鹏 祝建波 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第19期26-37,共12页
为鉴定盐地碱蓬硝酸盐转运蛋白(Nitrate transporter1,NRT1)基因家族成员,分析其基本性质、进化关系以及在不同组织的表达特征,筛选出具有抵抗盐胁迫功能的基因,利用生物信息学方法鉴定盐地碱蓬NRT1基因家族并分析其理化性质、基因结构... 为鉴定盐地碱蓬硝酸盐转运蛋白(Nitrate transporter1,NRT1)基因家族成员,分析其基本性质、进化关系以及在不同组织的表达特征,筛选出具有抵抗盐胁迫功能的基因,利用生物信息学方法鉴定盐地碱蓬NRT1基因家族并分析其理化性质、基因结构,利用转录组数据分析NRT在其表达特征,并将SsNRT1.4和AtNRT1.4基因通过基因工程方法转化番茄,使用6.7 g/L的NaCl溶液进行盐胁迫处理,观察结果。结果表明,盐地碱蓬共有32个NRT1基因,并将其分为8个亚科。SsNRT1基因家族编码的蛋白多为碱性蛋白,其稳定性在18.69~47.07之间,SsNRT1亚家族成员主要在根、叶中表达量较高,通过热图选取基因编号为GOSA-00007947-RA作为研究目标并命名为SsNRT1.4。以AtNRT1.4为对照,通过转基因技术使其在番茄中表达。在NaCl水溶液处理下,过表达SsNRT1.4基因的番茄植株比野生型和AtNRT1.4转基因番茄植株生长情况更好,说明过表达SsNRT1.4可以提高番茄植株抗盐性。因此,可以推断SsNRT1.4是在盐胁迫中具有重要作用的关键基因。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 nrt1基因家族 盐胁迫 转基因番茄
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NRT1.1B作为植物ABA受体整合复杂环境信号
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作者 马晓军 王威 +2 位作者 陈达 胡斌 储成才 《遗传》 北大核心 2025年第11期1182-1185,共4页
适应复杂多变的自然环境既是植物生存的永恒主题,也是农作物高产稳产、实现粮食安全的重要前提。其中,季节性降水变化引发的干旱,以及矿质元素分布不均导致的养分缺乏,是植物面临的两类高频逆境胁迫,且在多数情况下二者会同时发生。植... 适应复杂多变的自然环境既是植物生存的永恒主题,也是农作物高产稳产、实现粮食安全的重要前提。其中,季节性降水变化引发的干旱,以及矿质元素分布不均导致的养分缺乏,是植物面临的两类高频逆境胁迫,且在多数情况下二者会同时发生。植物如何整合复杂环境信号是深入理解植物生存智慧的关键,也是创制兼具养分高效与逆境抗性的未来作物新品种的理论基础。然而,目前的研究主要针对单一信号的感知与应答,对复杂环境信号的整合机制尚缺乏系统认知。 展开更多
关键词 nrt1.1B 复杂环境信号 植物 ABA受体
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水稻硝酸盐转运蛋白基因OsTNrt2.1的编码蛋白特征和表达 被引量:12
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作者 徐海荣 谷俊涛 +3 位作者 路文静 邓若磊 曹云飞 肖凯 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期723-730,共8页
根据Nipponbare的OsNrt2.1cDNA序列,从氮效率较高的水稻品种TP309中克隆了与OsNrt2.1高度同源的硝酸盐转运蛋白(NRT)基因OsTNrt2.1。其开放阅读框为1 602 bp,编码533个氨基酸残基。OsTNrt2.1具有NRT共有的结构特征,与拟南芥、玉米、小... 根据Nipponbare的OsNrt2.1cDNA序列,从氮效率较高的水稻品种TP309中克隆了与OsNrt2.1高度同源的硝酸盐转运蛋白(NRT)基因OsTNrt2.1。其开放阅读框为1 602 bp,编码533个氨基酸残基。OsTNrt2.1具有NRT共有的结构特征,与拟南芥、玉米、小麦、大麦和烟草的NRT基因高度同源。OsTNrt2.1的表达表现器官特异性,在根中高于在叶中。此外,OsTNrt2.1的表达受NH+4的抑制和NO-3的诱导,并具典型的昼夜节律特征。在不同NO-3浓度下,OsTNrt2.1的表达水平相近,表明OsTNrt2.1可能是具有双亲和特征的NRT基因。在不同氮源及不同介质氮浓度条件下,OsTNrt2.1在根中的表达均高于在叶中,表明OsTNrt2.1对于根系吸收NO-3可能具有重要作用。 展开更多
关键词 水稻(Oryza sativa) nrt基因 OsTnrt2.1 基因特征 基因表达
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花生高亲和硝酸盐转运蛋白基因AhNRT2.7a响应低氮胁迫的功能研究 被引量:5
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作者 王娟 陈皓宁 +9 位作者 石大川 于天一 闫彩霞 孙全喜 苑翠玲 赵小波 牟艺菲 王奇 李春娟 单世华 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第22期4356-4372,共17页
【目的】氮素在作物生产中对生物量和产量起关键作用。高亲和硝酸盐转运蛋白基因NRT2在植物响应低氮胁迫时被激活并具有维持氮吸收和转运的作用。通过筛选花生低氮耐受相关的NRT2基因并解析其生物学功能,为培育高氮素利用率的花生新品... 【目的】氮素在作物生产中对生物量和产量起关键作用。高亲和硝酸盐转运蛋白基因NRT2在植物响应低氮胁迫时被激活并具有维持氮吸收和转运的作用。通过筛选花生低氮耐受相关的NRT2基因并解析其生物学功能,为培育高氮素利用率的花生新品种提供理论参考,最终有助于实现节氮、高效的绿色生产目标。【方法】检测正常氮浓度及1/20正常氮浓度(15 mmol·L^(-1))条件下5个具有典型跨膜结构的花生NRT2基因(AhNRT2.4、AhNRT2.5b、AhNRT2.5c、AhNRT2.7a和AhNRT2.7b)的时空表达情况。以花育6309的cDNA为模板,对AhNRT2.7a进行克隆和生物信息学分析,并通过亚细胞定位确定AhNRT2.7a的表达部位。进一步构建异源过表达AhNRT2.7a的拟南芥株系,分别在正常以及低氮胁迫条件下测定其叶绿素含量、氮积累量以及谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合成酶(GOGAT)、硝酸还原酶(NR)、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酸脱氢酶(GDH)5个氮代谢关键酶的活性。【结果】5个NRT2基因中有4个NRT2基因在花生响应低氮胁迫条件下大量表达。其中,AhNRT2.7a能够响应低氮胁迫,并在花生茎和叶中高表达。获得AhNRT2.7a的cDNA序列,全长为1380 bp,编码459个氨基酸。蛋白结构分析显示其为具有12个典型跨膜结构域的膜蛋白。该氨基酸序列与栽培种花生(Arachis hypogaea L.)相似性高达99.56%,其次是野生亲本AA和BB基因组花生。亚细胞定位显示其主要定位于细胞质膜上。构建异源过表达AhNRT2.7a的转基因拟南芥植株,在不同供氮条件下,成熟叶和幼叶叶片的叶绿素相对含量均显著高于野生型拟南芥。同时,对上述5个氮代谢相关酶活性以及氮、磷、钾积累量测定显示,转基因植株中2个氮代谢相关酶(GS和NR)的酶活性以及氮积累量均比野生型拟南芥有显著升高。【结论】花生中4个NRT2基因响应低氮胁迫,其中AhNRT2.7a能够提高植物氮代谢过程的氮素利用率。AhNRT2.7a的表达在促进氮代谢过程的同时,促使碳代谢作用的进一步加强。因此,AhNRT2.7a适合作为花生氮素高效利用为目的的候选基因。 展开更多
关键词 花生 nrt2 Ahnrt2.7a 氮素效率 氮代谢相关酶
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节旋藻硝酸盐转运蛋白基因Amnrt P序列分析
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作者 凌娜 茅云翔 +2 位作者 隋正红 邵林 张学成 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期97-103,共7页
应用生物信息学软件对获得的节旋藻硝酸盐转运蛋白基因(AmnrtP)全长序列进行了结构特征、同源性比较、多序列比对、系统发育学分析等。结果表明:该基因全长为1515个核苷酸,编码504个氨基酸,平均 GC 含量为43.8%,疏水氨基酸的比例为47.6... 应用生物信息学软件对获得的节旋藻硝酸盐转运蛋白基因(AmnrtP)全长序列进行了结构特征、同源性比较、多序列比对、系统发育学分析等。结果表明:该基因全长为1515个核苷酸,编码504个氨基酸,平均 GC 含量为43.8%,疏水氨基酸的比例为47.6%。该硝酸盐转运蛋白含有12个跨膜结构域(Transmembrane domains,Tm),膜拓扑结构与NRT2家族的类似,并发现了多个 NRT2家族的保守序列。同源性搜索显示与属于 NRT2基因家族的海洋蓝藻的氨基酸序列相似性为75%~89%。采用邻接法(NJ)、最大简约法(MP)和最大似然法(ML)构建了分子系统树,结果表明3种树的拓扑结构基本相似,并且在蓝藻中基于硝酸盐转运蛋白基因的系统发育关系与形态学分类结果相一致。所获 Am-nrtP 基因属于 NRT2基因家族,可成为蓝藻系统进化研究的分子标记,并为了解节旋藻中硝酸盐吸收与转运的基因结构和分子机制奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 节旋藻 硝酸盐转运蛋白(nrt) 硝酸盐转运蛋白基因(AmnrtP) 序列分析 系统发育
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甘蓝型油菜NRT1.5和NRT1.8家族基因的生物信息学分析及其对氮-镉胁迫的响应 被引量:11
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作者 梁桂红 华营鹏 +3 位作者 周婷 廖琼 宋海星 张振华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期365-380,共16页
植物对硝酸盐的吸收和转运需要硝酸盐转运体(nitratetransporters,NRTs)的协助。在拟南芥中,硝酸盐的长途转运及其在根部和地上部的分配,主要受NRT1家族的两个成员NRT1.5和NRT1.8的协同调控,且两者的表达均受到硝酸盐的强烈诱导。本文以... 植物对硝酸盐的吸收和转运需要硝酸盐转运体(nitratetransporters,NRTs)的协助。在拟南芥中,硝酸盐的长途转运及其在根部和地上部的分配,主要受NRT1家族的两个成员NRT1.5和NRT1.8的协同调控,且两者的表达均受到硝酸盐的强烈诱导。本文以AtNRT1.5和AtNRT1.8基因序列为基础序列,采用生物信息学方法鉴定了白菜、甘蓝和甘蓝型油菜中NRT1.5和NRT1.8同源基因,并对基因结构和分子特性、基因拷贝数变异、基因染色体分布、系统进化树、蛋白保守序列比对和跨膜结构域、基因响应低氮和镉胁迫的转录组测序以及基因共表达网络进行了分析。结果表明,白菜、甘蓝及甘蓝型油菜中NRT1.5和NRT1.8蛋白均含有保守的跨膜结构域和保守基序(F-Y-L-A-L-N-LG-S-L),属于MFS (major facilitator superfamily)超家族的小肽转运体PTR (peptide transporter)家族。转录组测序结果表明,甘蓝型油菜低氮处理72 h,根部NRT1.5基因的表达丰度上调而抑制NRT1.8的表达;镉处理条件下,乙烯/茉莉酸-硝酸盐转运体介导的信号途径能够促进NRT1.8表达上调而抑制NRT1.5的表达,从而使更多的硝酸盐从地上部运输到根部,提高植物抗镉胁迫的能力。本研究为进一步了解甘蓝型油菜NRT1.5和NRT1.8家族基因的生物学功能及其对氮-镉胁迫的响应奠定基础,同时为NRT1.5和NRT1.8家族基因在其他物种中的生物信息学研究提供参考。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 生物信息学 nrt1.5 nrt1.8 硝酸盐
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大豆盐胁迫响应NRT基因的鉴定及GmNRT1.5A的克隆和表达分析 被引量:1
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作者 王玉斌 张志贤 +4 位作者 张辰淼 刘薇 张彦威 张礼凤 徐冉 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期674-682,共9页
硝酸盐转运蛋白(Nitrate Transporters, NRTs)在植物根系NO-3吸收或转运中发挥重要作用,为探究大豆NRTs基因在盐胁迫响应中的功能,本研究从前期盐胁迫处理的转录组数据中鉴定出8个持续响应盐胁迫的差异表达GmNRTs基因。这些GmNRTs基因... 硝酸盐转运蛋白(Nitrate Transporters, NRTs)在植物根系NO-3吸收或转运中发挥重要作用,为探究大豆NRTs基因在盐胁迫响应中的功能,本研究从前期盐胁迫处理的转录组数据中鉴定出8个持续响应盐胁迫的差异表达GmNRTs基因。这些GmNRTs基因的启动子上均含有多个与逆境胁迫或植物激素应答相关的元件,推测它们可能与大豆非生物胁迫应答或植物激素调控盐胁迫响应相关。同时,从齐黄34根系中克隆了盐胁迫处理上调倍数最大的基因GmNRT1.5A,并对其进行了生物信息学和表达分析。结果显示:GmNRT1.5A的蛋白质编码区全长为1 794 bp,编码597个氨基酸,蛋白分子质量为66.78 kD,理论等电点为5.85。进化树分析结果表明,GmNRT1.5A与AtNRT1.5同源性最高,含有12个跨膜结构域,含有典型的NRT1s保守结构域,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。实时荧光定量PCR分析表明,GmNRT1.5A主要在籽粒和根系中表达,盐胁迫和干旱胁迫显著诱导根系中GmNRT1.5A的表达。此外,GmNRT1.5A的表达受植物激素的调控,ABA和ACC显著诱导其表达,但GA3处理显著抑制GmNRT1.5A表达。本研究表明,GmNRT1.5在响应盐胁迫逆境中发挥重要作用,为探索GmNRTs基因在响应逆境胁迫中的功能提供了新思路,也为深入研究GmNRT1.5基因的功能提供了基础。 展开更多
关键词 大豆 盐胁迫 nrts Gmnrt1.5A 表达分析
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白菜NRT2基因的克隆及表达模式分析 被引量:12
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作者 孔敏 杨学东 +2 位作者 侯喜林 刘同坤 任君 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2309-2316,共8页
以白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)品种‘苏州青’为试材,采用RT-PCR技术,获得1个高亲和硝酸盐转运蛋白基因(NRT2)的cDNA序列,全长1 593 bp,推断其编码530个氨基酸,命名为BcNRT2。序列分析表明:BcNRT2基因与甘蓝型油菜B... 以白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)品种‘苏州青’为试材,采用RT-PCR技术,获得1个高亲和硝酸盐转运蛋白基因(NRT2)的cDNA序列,全长1 593 bp,推断其编码530个氨基酸,命名为BcNRT2。序列分析表明:BcNRT2基因与甘蓝型油菜BnNRT2基因和拟南芥AtNRT2.1基因核苷酸序列的相似性分别为98%和90%,氨基酸序列的相似性分别为99%和95%,表明植物中NRT2基因保守度较高。实时定量PCR表达分析表明,BcNRT2在白菜根部的表达量最高,为诱导型表达。低浓度NO3-(0.2 mmol.L-1 KNO3)处理0.5 h后其表达量迅速上升,BcNRT2可能为NO3-感受器。高浓度NO3-(20 mmol.L-1 KNO3)处理后其表达量更高,持续时间较长,可能是受到低亲和硝酸盐转运蛋白NRT1.1的调控而产生的高水平响应。原生质体的瞬时表达显示,BcNRT2蛋白位于细胞膜上。 展开更多
关键词 白菜 硝酸盐 nrt2 实时定量PCR 亚细胞定位
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茶树硝态氮转运蛋白NRT1.1基因的克隆及表达分析 被引量:9
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作者 杨亦扬 胡雲飞 +3 位作者 万青 李荣林 王枫 阮建云 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期505-512,共8页
以茶树(Camellia sinensis(L.))品种龙井43为试材,采用PCR结合RACE技术,克隆得到硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的c DNA全长序列,基因序列全长1 880 bp,其中开放阅读框(ORF)1 788 bp,编码595个氨基酸,预测蛋白质分子量为65.9 k D,理论等电... 以茶树(Camellia sinensis(L.))品种龙井43为试材,采用PCR结合RACE技术,克隆得到硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的c DNA全长序列,基因序列全长1 880 bp,其中开放阅读框(ORF)1 788 bp,编码595个氨基酸,预测蛋白质分子量为65.9 k D,理论等电点为8.99,命名为Cs NRT1.1。序列分析表明,Cs NRT1.1与葡萄NRT1.1氨基酸序列的相似性最高。通过生物信息学分析,对Cs NRT1.1的氨基酸理化性质、亲/疏水性、跨膜区域及亚细胞定位进行了预测。实时定量PCR表达分析表明,茶树根和叶片中Cs NRT1.1在1 mol·L^(-1) NO3-处理5 min内均受到抑制,叶部Cs NRT1.1表达量0.5 h后即达到最大值,24 h内各个时间点均高于根部,根中表达量Cs NRT1.1始终低于对照。本研究结果为研究茶树对NO3-的吸收、转运和调控机理提供了分子生物学基础。 展开更多
关键词 茶树 硝态氮 nrt1.1基因 实时定量PCR
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草地早熟禾硝酸盐转运蛋白NRT2.4基因序列的克隆及表达分析 被引量:3
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作者 陈阳 金一锋 +4 位作者 金忠民 王玉书 蔡荣建 邵竹林 王杰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期1-8,共8页
植物硝酸盐转运蛋白(Nitrate transporter,NRT)可有效调节与转运NO-3,提升氮素利用效率。分析草地早熟禾硝酸盐转运蛋白NRT2.4基因在不同氮素浓度下的表达规律,旨在揭示硝酸盐转运蛋白NRT2.4基因在氮素调控中扮演的角色。以草地早熟禾... 植物硝酸盐转运蛋白(Nitrate transporter,NRT)可有效调节与转运NO-3,提升氮素利用效率。分析草地早熟禾硝酸盐转运蛋白NRT2.4基因在不同氮素浓度下的表达规律,旨在揭示硝酸盐转运蛋白NRT2.4基因在氮素调控中扮演的角色。以草地早熟禾为材料,首先设计特异引物,利用RT-PCR技术克隆得到草地早熟禾NRT2.4基因cDNA序列,其长度为1694 bp,包含一个1257 bp的CDS区,编码418个氨基酸序列,属于Nitrate/nitrite transporter NarK超级家族1,与二穗短柄草、节节麦NRT2.4基因高度同源。第6,7个跨膜区之间有一段MFS家族所特有的序列特征:G-X3-D-X2-G-X-R,第4个跨膜区有典型的NO-3/NO-2转运载体特征序列:A-G-W-G/A-N-M-G,第8个跨膜区之后含有保守的蛋白激酶C识别基序(S/T-X-R/K):SKR。利用qRT-PCR方法,测定草地早熟禾NRT2.4基因表达水平存在组织特异性,叶部表达量最多,硝态氮利于NRT2.4基因的表达,氮饥饿和高浓度NaNO3水培液处理均利于NRT2.4基因的表达。上述结果为草地早熟禾硝酸盐转运蛋白NRT2.4在草坪草抗逆基因工程中的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 草坪草 草地早熟禾 nrt2.4 氮素营养胁迫 克隆 表达
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谷子硝酸盐转运蛋白NRT1家族的鉴定及表达分析 被引量:6
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作者 张瑞娟 屈聪玲 +2 位作者 贺榆婷 杨致荣 王兴春 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第4期37-43,76,共8页
[目的]为了揭示谷子硝酸盐高效吸收和利用的分子机制,本文鉴定并分析了谷子硝酸盐转运蛋白NRT1基因家族。[方法]以拟南芥中已知的11个参与硝酸盐吸收和转运的NRT1蛋白为基础,利用Blast的方法在全基因组范围内鉴定谷子参与硝酸盐吸收和... [目的]为了揭示谷子硝酸盐高效吸收和利用的分子机制,本文鉴定并分析了谷子硝酸盐转运蛋白NRT1基因家族。[方法]以拟南芥中已知的11个参与硝酸盐吸收和转运的NRT1蛋白为基础,利用Blast的方法在全基因组范围内鉴定谷子参与硝酸盐吸收和转运的NRT1基因,利用MEGA7.0和MEME构建系统进化树和鉴定保守的基序,并进一步利用PlantCARE预测顺式作用元件,最后通过RT-PCR的方法研究了谷子硝酸盐转运蛋白NRT1家族基因的组织表达情况。[结果]从谷子中鉴定了8个硝酸盐转运蛋白NRT1基因,系统进化分析表明所得8个NRT1基因分别属于NPF1、NPF2、NPF4、NPF6和NPF7亚家族。谷子NRT1蛋白中都含有一个保守的QX4GX8GX3FX5P基序,可能与硝酸盐的吸收和转运相关。谷子NRT1基因的启动子中富含光响应元件,尤其是SP1元件。RT-PCR分析表明谷子8个NRT1基因表达具有组织特异性,暗示了其可能在不同组织和器官的硝酸盐吸收转运中起作用。[结论]本研究鉴定了8个谷子硝酸盐吸收和转运相关的NRT1基因,为后续谷子NRT1基因功能研究及谷子耐低氮分子机制的揭示奠定了基础。 展开更多
关键词 谷子 氮素 硝酸盐转运蛋白 nrt1基因家族 NPF基因家族
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草地早熟禾NRT1/PTR FAMILY 8.3基因的克隆及表达分析 被引量:4
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作者 金一锋 陈阳 +4 位作者 齐欣 高岩松 金忠民 赵清峰 王琦 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1397-1405,共9页
植物硝酸盐转运蛋白(Nitrate transporter,NRT)可有效转运NO-3,提升氮素利用效率。为了解析草地早熟禾(Poa pratensis)适应不同浓度及不同形态氮素、干旱胁迫机理,本研究以草地早熟禾为试材,对NRT1/PTR FAMILY 8.3基因进行克隆、生物信... 植物硝酸盐转运蛋白(Nitrate transporter,NRT)可有效转运NO-3,提升氮素利用效率。为了解析草地早熟禾(Poa pratensis)适应不同浓度及不同形态氮素、干旱胁迫机理,本研究以草地早熟禾为试材,对NRT1/PTR FAMILY 8.3基因进行克隆、生物信息学分析,并分析了不同浓度及不同形态氮素以及干旱下该基因表达情况。研究结果:草地早熟禾NRT1/PTR FAMILY 8.3基因包含典型的主要协同转运蛋白超家族(Major facilitator superfamily,MFS)结构域,与二穗短柄草(Brachypodium distachyon)高度同源;荧光定量PCR分析表明,该基因根部、叶部的表达量显著高于茎部;氮浓度为7.5 mM时,不同形态氮素诱导下,NaNO3处理组有利于该基因表达;无氮、高氮组(0,15 mM NaNO3)基因的表达量显著高于适氮组(7.5 mM NaNO3);干旱胁迫可促进其表达。研究结果为探究NRT1/PTR FAMILY 8.3在不同氮素环境中的调节机制,培育氮素利用率高的优质草种提供理论基础。 展开更多
关键词 草地早熟禾 nrt1/PTR FAMILY 8.3 基因克隆 表达分析
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水稻氮高效利用基因NRT1.1B InDel分子标记的开发与应用 被引量:8
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作者 李军 李白 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3405-3413,共9页
水稻NRT1.1B基因是已经克隆并进行功能验证的氮高效利用基因,具有很高的应用价值。根据籼粳稻NRT1.1B基因的基因组序列比对发现,籼型NRT1.1B基因及粳型NRT1.1B基因内含子序列中存在插入/缺失位点。对30个常规籼粳稻的NRT1.1B基因内含子... 水稻NRT1.1B基因是已经克隆并进行功能验证的氮高效利用基因,具有很高的应用价值。根据籼粳稻NRT1.1B基因的基因组序列比对发现,籼型NRT1.1B基因及粳型NRT1.1B基因内含子序列中存在插入/缺失位点。对30个常规籼粳稻的NRT1.1B基因内含子序列进行PCR扩增、测序及序列比对,发现NRT1.1B基因内含子存在6个In Del位点,籼型NRT1.1B基因比粳型NRT1.1B基因缺失55 bp。根据插入/缺失位点设计出In Del分子标记,对15个籼稻常规稻品种、15个粳稻常规稻品种、3个籼粳杂交稻品种及20个F2代育种材料进行NRT1.1B籼粳基因型鉴定。检测实验表明与通过NRT1.1B基因的SNP位点开发的功能标记的检测完全一致。通过该标记可以准确鉴定NRT1.1B基因的纯合籼型、纯合粳型及杂合基因型,该方法成本低、简单、可靠,可用于NRT1.1B基因的鉴定和分子标记辅助育种。 展开更多
关键词 水稻 氮高效利用 nrt1.1B基因 INDEL标记
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木薯MeNRT2.1基因的克隆及表达分析 被引量:4
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作者 胡春吉 邹良平 彭明 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期117-124,共8页
木薯具有产量高、抗贫瘠等特点,为了了解其耐贫瘠的作用机理,提高木薯在贫瘠土壤中对氮素的利用率,以培养20 d的"华南5号"木薯组培苗为实验材料,采用同源克隆和RT-PCR技术,获得一个高亲和硝态氮转运蛋白(NRT2)基因,命名为Me N... 木薯具有产量高、抗贫瘠等特点,为了了解其耐贫瘠的作用机理,提高木薯在贫瘠土壤中对氮素的利用率,以培养20 d的"华南5号"木薯组培苗为实验材料,采用同源克隆和RT-PCR技术,获得一个高亲和硝态氮转运蛋白(NRT2)基因,命名为Me NRT2.1,该基因含有1 593 bp的开放阅读框架,编码530个氨基酸。生物信息学分析结果表明,木薯Me NRT2.1与苜蓿、拟南芥、可可、杨树等物种的NRT2.1同源性高,其中与可可树Tc NRT2.1的亲缘关系最近,氨基酸相似性达到90%。实时荧光定量PCR检测结果表明,Me NRT2.1在木薯组培苗的根中表达,并且在NO_3^-浓度为0.2 mmol/L时,其相对表达量较高,NO_3^-浓度为10 mmol/L时其相对表达量较低,NO_3^-浓度为0时几乎不表达;Me NRT2.1在茎、叶中也几乎不表达,即该基因具有诱导型组织特异性表达模式。原生质体瞬时表达发现Me NRT2.1定位在细胞膜上。此研究为进一步通过NRT2基因提高木薯的抗逆性奠定了基础。 展开更多
关键词 木薯 硝态氮 nrt2 实时荧光定量PCR 亚细胞定位
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NRT基因与氮素利用效率的研究进展 被引量:3
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作者 王波 马行 +1 位作者 刘莹莹 过昱辰 《北方园艺》 CAS 北大核心 2014年第20期198-202,共5页
低氮素利用效率对农田生态系统所造成的污染日益加重,如何提高作物的氮素利用效率已成为目前的一个研究热点。文章分析了植物体内硝酸盐转运体(Nitrate transporters,NRT)的分类、存在部位、生物学功能及调控机制,旨在阐明植物吸收、转... 低氮素利用效率对农田生态系统所造成的污染日益加重,如何提高作物的氮素利用效率已成为目前的一个研究热点。文章分析了植物体内硝酸盐转运体(Nitrate transporters,NRT)的分类、存在部位、生物学功能及调控机制,旨在阐明植物吸收、转运NO3-的生理机制,指出了利用分子生物学的手段是提高作物氮素利用效率的一个重要方向,这为今后通过基因工程的手段来提高氮素利用效率,减少环境污染提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 氮素利用效率 nrt 硝酸盐
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高羊茅硝态氮转运蛋白基因NRT1.1的克隆及表达模式分析 被引量:1
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作者 赵丽丽 王小利 +1 位作者 陈超 董瑞 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期240-246,共7页
为探究高羊茅(Festuca arundinacea)硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的表达模式,本研究以黔草1号高羊茅为试验材料,采用RACE和RT-qPCR技术对高羊茅NRT1.1基因的cDNA全长序列进行扩增,并对其不同胁迫处理下的表达情况进行分析。生物信息学分... 为探究高羊茅(Festuca arundinacea)硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的表达模式,本研究以黔草1号高羊茅为试验材料,采用RACE和RT-qPCR技术对高羊茅NRT1.1基因的cDNA全长序列进行扩增,并对其不同胁迫处理下的表达情况进行分析。生物信息学分析发现,高羊茅NRT1.1的理论等电点为4.81,平均亲小性为0.919,含有约32.63%α-螺旋、7.63%β-转角和53.73%不规则卷曲。结果表明,NRT1.1基因的cDNA序列全长为2328 bp,编码606个氨基酸,预测蛋白质分子量为193.9 kDa,且高羊茅NRT1.1与黑麦草NRT1.1氨基酸序列的相似性最高。RT-qPCR表达分析发现,高羊茅叶片NRT1.1受低氮处理0.5~1 h时表达量达到峰值,显著(P<0.05)高于对照组;在干旱和热处理下,NRT1.1表达量分别在6 h和12 h时达到峰值,且显著(P<0.05)高于对照组;在盐处理下,仅在6 h时NRT1.1表达量高于对照组,其余时间均受显著(P<0.05)抑制。本研究结果为解析高羊茅NRT1.1基因的表达模式提供了分子生物学基础。 展开更多
关键词 高羊茅 nrt1.1基因 RACE 实时定量PCR 胁迫
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