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长链非编码RNA NRSN2-AS1通过miR-129-5p/Wnt5a轴靶向调控Wnt/β-catenin信号通路对食管鳞状细胞癌发生、发展的影响 被引量：4
1
作者 徐同欣 颜朝阳 +3 位作者 路军涛 李晓旭 董稚明 郭炜 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1281-1286,共6页
目的探讨NRSN2-AS1对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其相关分子机制。方法应用qRT-PCR法检测96例ESCC和癌旁组织及ESCC细胞系中NRSN2-AS1的表达水平。通过体外细胞功能实验分析N... 目的探讨NRSN2-AS1对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其相关分子机制。方法应用qRT-PCR法检测96例ESCC和癌旁组织及ESCC细胞系中NRSN2-AS1的表达水平。通过体外细胞功能实验分析NRSN2-AS1过表达对ESCC细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;应用生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验,验证NRSN2-AS1和miR-129-5p的靶向关系及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。应用qRT-PCR法分别检测NRSN2-AS1/miR-129-5p/Wnt5a分子轴的表达。结果NRSN2-AS1在ESCC组织中(2.48±0.90)的表达显著高于癌旁组织(1.02±0.73,t=4.480,P<0.01)。NRSN2-AS1在食管癌细胞系Eca109(1.99±0.04)、TE1(2.43±0.09)、TE13(3.68±0.21)和KYSE150(4.44±0.26)中的表达显著高于对照组(1.00±0.08,P均<0.01)。NRSN2-AS1过表达可促进Eca109细胞的增殖能力(P<0.01);上调NRSN2-AS1可促进Eca109细胞的迁移及侵袭能力(P均<0.01)。NRSN2-AS1可通过竞争性结合miR-129-5p,上调Wnt5a的表达,进而激活Wnt/β-catenin信号通路。结论NRSN2-AS1可通过miR-129-5p/Wnt5a轴激活Wnt/β-catenin信号通路,促进ESCC细胞的增殖、迁移及侵袭,其有望成为ESCC治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞癌 长链非编码RNA nrsn2-AS1 miR-129-5p WNT/Β-CATENIN信号通路
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NRSN2介导的Wnt/β-catenin信号通路在骨肉瘤细胞增殖、分化中的作用及其分子机制 被引量：4
2
作者 阿力木·克热木 麦麦提艾力·阿不力克木 +2 位作者 梁志林 帕孜拉·艾拉 阿不都赛米·艾买提 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第9期1537-1542,共6页
目的:探讨神经膜蛋白2(neurensin 2,NRSN2)与骨肉瘤发生之间的相关性和NRSN2在骨肉瘤细胞增殖、分化中的相关分子机制。方法:采用免疫组织化学染色法和实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)实验,检测我院2... 目的:探讨神经膜蛋白2(neurensin 2,NRSN2)与骨肉瘤发生之间的相关性和NRSN2在骨肉瘤细胞增殖、分化中的相关分子机制。方法:采用免疫组织化学染色法和实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)实验,检测我院2016年01月至2020年01月收集的30例经病理学明确诊断的经典型骨肉瘤患者骨肉瘤组织标本和对应的正常组织标本中NRSN2的mRNA和蛋白表达水平。采用RT-qPCR和Western blot实验,分别检测MG63、Saos2、U2OS三种骨肉瘤细胞系中NRSN2的mRNA和蛋白水平。三种骨肉瘤细胞系中选择NRSN2相对高表达和低表达的骨肉瘤细胞系,利用RNA干扰技术构建沉默和过表达NRSN2的质粒,利用慢病毒转染法转染到骨肉瘤细胞系,构建沉默和过表达NRSN2的骨肉瘤细胞系。采用Western blot实验检测沉默NRSN2的U2OS骨肉瘤细胞系和过表达NRSN2的MG63骨肉瘤细胞系中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白(p-GSK3β、GSK3β、nu-β-catenin)的表达水平。采用CCK8法检测过表达NRSN2的MG63骨肉瘤细胞系中分别加入0μmol/L、5μmol/L的Wnt/β-catenin抑制剂IWR-1-endo后24 h、48 h、72 h、96 h时骨肉瘤细胞的增殖能力。结果:在骨肉瘤组织标本中NRSN2的阳性表达率明显高于正常组织标本;NRSN2的mRNA表达水平明显高于正常组织标本(P<0.01)。三种骨肉瘤细胞系中NRSN2的mRNA和蛋白表达水平均显著高于成骨细胞hFOB1.19(P<0.01);U2OS和Saos2骨肉瘤细胞系中NRSN2的mRNA和蛋白表达水平高于MG63骨肉瘤细胞系(P<0.05)。沉默NRSN2的U2OS骨肉瘤细胞系中p-GSK3β、nu-β-catenin的蛋白表达水平明显低于未转染组和重新上调NRSN2组的蛋白表达水平;过表达NRSN2的MG63骨肉瘤细胞系中p-GSK3β、nu-β-catenin的蛋白表达水平明显高于空质粒组;未加入IWR-1-endo的过表达NRSN2组细胞增殖能力在48 h、72 h和96 h均高于加入IWR-1-endo组(均P<0.01);未加入IWR-1-endo的空质粒NRSN2组骨肉瘤细胞增殖能力在48 h、72 h和96 h均高于加入IWR-1-endo抑制剂组(均P<0.05)。结论:本研究探讨了NRSN2与骨肉瘤发生之间的相关性,且NRSN2通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨肉瘤细胞增殖、分化。 展开更多
关键词 骨肉瘤 nrsn2 WNT/Β-CATENIN信号通路
暂未订购
RNA干扰神经膜蛋白2基因表达对骨肉瘤细胞生物学特性的影响 被引量：3
3
作者 张凌飞 邵林 李丽 《临床和实验医学杂志》 2018年第12期1275-1278,共4页
目的探究神经膜蛋白2(NRSN2)对骨肉瘤U2-OS细胞增殖、侵袭、迁移的影响以及作用机制。方法实验分为对照组、siRNA阴性组、siRNA-NRSN2组。对照组为常规培养的细胞,siRNA阴性组和siRNA-NRSN2组通过siRNA技术干扰骨肉瘤细胞中NRSN2基因的... 目的探究神经膜蛋白2(NRSN2)对骨肉瘤U2-OS细胞增殖、侵袭、迁移的影响以及作用机制。方法实验分为对照组、siRNA阴性组、siRNA-NRSN2组。对照组为常规培养的细胞,siRNA阴性组和siRNA-NRSN2组通过siRNA技术干扰骨肉瘤细胞中NRSN2基因的表达,分别将siRNA-NC和siRNA-NRSN2转染入U2-OS细胞。CCK-8实验检测干扰NRSN2基因表达对细胞增殖的影响。Transwell小室法检测干扰NRSN2对骨肉瘤U2-OS细胞侵袭、迁移的影响。采用免疫印迹试验(Western Blot)检测NRSN2、钙黏蛋白E(E-cadherin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)水平。结果与对照组相比,siRNA-NRSN2组U2-OS细胞中NRSN2蛋白的表达量显著降低(P<0.05)。干扰NRSN2表达显著抑制U2-OS细胞增殖(P<0.05),降低其侵袭、迁移能力(P<0.05),显著增加Ecadherin蛋白水平,明显降低N-cadherin、Vimentin蛋白水平(P<0.05)。结论干扰NRSN2通过抑制上皮-间质转化(EMT)的发生,阻碍骨肉瘤U2-OS细胞的增殖、侵袭、迁移。 展开更多
关键词 骨肉瘤 神经膜蛋白2 上皮-间质转化 U2-OS细胞
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