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3种介导猪NR2F2基因转染PK15细胞方法的比较研究 被引量:5
1
作者 张万锋 黑伟 +8 位作者 何志强 刘敏 孟珊 高鹏飞 蔡春波 杨阳 郭晓红 曹果清 李步高 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第5期1352-1359,共8页
试验旨在研究3种转染方法对猪肾上皮细胞(PK15)的转染效率,为以PK15细胞为模型研究外源基因的功能提供参考。本研究以PK15细胞为研究对象,用脂质体、电穿孔、慢病毒3种转染方法转染后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,采用实时荧... 试验旨在研究3种转染方法对猪肾上皮细胞(PK15)的转染效率,为以PK15细胞为模型研究外源基因的功能提供参考。本研究以PK15细胞为研究对象,用脂质体、电穿孔、慢病毒3种转染方法转染后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,采用实时荧光定量PCR检测EGFP和NR2F2基因的表达情况,采用CCK-8检测细胞存活率,进而比较3种方法的转染效果。结果显示,转染PK15细胞后,电穿孔和慢病毒方法转染效率极显著高于脂质体(P<0.01),但电穿孔方法和慢病毒方法之间差异不显著(P>0.05);EGFP和NR2F2基因的实时荧光定量PCR结果显示慢病毒方法效果最好,脂质体方法较差,与细胞转染效率基本一致;CCK-8结果显示,电穿孔转染后细胞存活率最低,极显著低于对照组(P<0.01),脂质体方法显著低于对照组(P<0.05),慢病毒方法与对照组间差异不显著(P>0.05)。综合考虑转染效率及细胞活性,本研究认为慢病毒转染方法最适合转染PK15细胞,为今后高效转染PK15细胞提供了理想的方法。 展开更多
关键词 PK15细胞 nr2f2基因 脂质体转染 电穿孔转染 慢病毒转染
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NR2F2过表达对三阴性乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响及机制研究 被引量:1
2
作者 张艳丽 常文慧 +3 位作者 赵梓妍 王文明 李菁 丁怡 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期683-688,共6页
目的阐明NR2F2对三阴性乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响及其可能的机制。方法采用慢病毒感染构建稳定高表达NR2F2的小鼠乳腺癌4T1细胞株。划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real... 目的阐明NR2F2对三阴性乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响及其可能的机制。方法采用慢病毒感染构建稳定高表达NR2F2的小鼠乳腺癌4T1细胞株。划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中NR2F2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的mRNA和蛋白的表达情况。结果三阴性乳腺癌4T1细胞过表达NR2F2后,细胞的迁移和侵袭能力增强,间质表型标志物N-cadherin、Vimentin表达升高,上皮表型标志物E-cadherin表达降低。结论NR2F2通过诱导三阴性乳腺癌细胞上皮间质转化,促进了细胞的迁移和侵袭。针对NR2F2的靶向干预可望为治疗三阴性乳腺癌提供新的策略。 展开更多
关键词 乳腺癌 转录因子nr2f2 迁移 侵袭 上皮间质转化
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咪达唑仑通过调控LncRNA NR2F2-AS1对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响 被引量:1
3
作者 周宇 曹钦钰 刘蕾 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期1257-1260,共4页
目的 探讨咪达唑仑对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,随机分组:咪达唑仑0、20、40、60μmol/L组、si-NC组、si-核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2F2-AS)1组、咪达唑仑+pcDNA组、咪... 目的 探讨咪达唑仑对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,随机分组:咪达唑仑0、20、40、60μmol/L组、si-NC组、si-核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2F2-AS)1组、咪达唑仑+pcDNA组、咪达唑仑+pcDNA-NR2F2-AS1组;CCK-8法、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡及迁移;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA NR2F2-AS1表达量;Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关蛋白(Bax)表达量。结果 与咪达唑仑0μmol/L组比较,咪达唑仑20、40、60μmol/L组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bax蛋白水平明显升高,迁移细胞数和Bcl-2蛋白水平明显降低,长链非编码(Lnc)RNA NR2F2-AS1表达量明显降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);转染si-NR2F2-AS1可明显抑制细胞增殖及迁移,并可明显提高细胞凋亡率(P<0.05);与咪达唑仑+pcDNA组比较,咪达唑仑+pcDNA-NR2F2-AS1组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bax蛋白水平明显降低,迁移细胞数和Bcl-2蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论 咪达唑仑可通过抑制LncRNA NR2F2-AS1表达而减弱肾癌细胞增殖及迁移能力,并可诱导肾癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 肾癌 咪达唑仑 LncRNA核受体亚家族2组F成员反义RNA(nr2f2-AS)1 细胞增殖 凋亡 迁移
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LncRNA NR2F2-AS1靶向抑制miR-129-5p调控胶质瘤细胞增殖和凋亡的机制研究 被引量:3
4
作者 张大鹏 杨艳辉 《中国医药生物技术》 2020年第3期277-283,共7页
目的研究lncRNA NR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法qRT-PCR检测lncRNANR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤组织和细胞中表达水平,MTT法和流式细胞术检测U251细胞增殖和凋亡,Westernblot检测... 目的研究lncRNA NR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法qRT-PCR检测lncRNANR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤组织和细胞中表达水平,MTT法和流式细胞术检测U251细胞增殖和凋亡,Westernblot检测细胞中CyclinD1、p21、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平,双荧光素酶报告系统验证NR2F2-AS1和miR-129-5p的调控关系。结果与正常脑组织相比,在胶质瘤组织中lncRNA NR2F2-AS1的含量显著升高(P<0.05),miR-129-5p的含量则显著下降(P<0.05);干扰NR2F2-AS1表达和过表达miR-129-5p均可抑制胶质瘤U251细胞增殖并促进细胞凋亡,使细胞中CyclinD1和Bcl-2含量降低(P<0.05),p21和Bax含量升高(P<0.05);lncRNA NR2F2-AS1靶向负调控miR-129-5p的表达;抑制miR-129-5p表达逆转了干扰NR2F2-AS1表达对U251细胞增殖、凋亡的作用。结论干扰lnc RNANR2F2-AS1通过靶向促进miR-129-5p表达抑制胶质瘤U251细胞增殖,诱导细胞凋亡。LncRNA NR2F2-AS1可能是胶质瘤的分子靶点。 展开更多
关键词 胶质瘤 U251细胞 nr2f2-AS1 miR-129-5p 增殖 凋亡
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NR2F2基因调控猪PK15细胞增殖和凋亡的研究
5
作者 张万锋 赵天枝 +7 位作者 李娇 尤紫薇 杨阳 蔡春波 高鹏飞 曹果清 郭晓红 李步高 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3242-3251,共10页
旨在探究NR2F2基因对猪PK15细胞增殖和凋亡的影响。本研究在猪PK15细胞中过表达NR2F2基因,通过qRT-PCR、Western blot、CCK-8、EdU、流式细胞术、划痕试验等方法检测了过表达NR2F2基因对细胞增殖的影响;采用CO-IP技术验证NR2F2与Smad4... 旨在探究NR2F2基因对猪PK15细胞增殖和凋亡的影响。本研究在猪PK15细胞中过表达NR2F2基因,通过qRT-PCR、Western blot、CCK-8、EdU、流式细胞术、划痕试验等方法检测了过表达NR2F2基因对细胞增殖的影响;采用CO-IP技术验证NR2F2与Smad4蛋白结合能力;用qRT-PCR方法检测了NR2F2基因对Smad 4基因表达以及下游基因Cyclin B、CDK1、CDK4、Cyclin D 1表达的影响;挽救试验过表达NR2F2基因且干扰Smad 4基因检测下游基因及增殖基因Ki67、PCNA的表达。结果发现,过表达NR2F2基因极显著上调了Ki 67基因的表达(P<0.01),显著上调了PCNA的表达(P<0.05),促进了细胞周期的进程,抑制了细胞凋亡,促进了细胞的增殖。CO-IP结果证明了NR2F2与Smad4蛋白物理性结合,且发现过表达NR2F2基因后,Smad 4基因表达显著上升(P<0.01),Smad 4基因调控的下游基因Cyclin B、CDK1、CDK4、Cyclin D 1表达显著升高(P<0.01);干扰NR2F2基因后,Smad 4基因表达显著下降(P<0.01),Smad 4基因调控的下游基因表达显著降低(P<0.01)。挽救试验发现,过表达NR2F2基因后,干扰Smad 4基因的表达,能显著降低Cyclin D1、Cyclin B、CDK 1以及Ki67、PCNA的表达(P<0.01,P<0.05)。本研究结果表明,过表达NR2F2基因后促进了细胞的增殖,抑制凋亡,且NR2F2蛋白能与Smad4蛋白结合并影响Smad 4基因的表达,进而影响下游基因的表达。 展开更多
关键词 nr2f2基因 Smad 4基因 细胞增殖 PK15细胞
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NR2F2对肿瘤上皮细胞-间充质表型转化的调控 被引量:2
6
作者 常文慧 刘易 +3 位作者 张艳丽 夏百里 王丽华 丁怡 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期237-241,共5页
肿瘤是一种威胁人类健康的恶性疾病,也是世界性的医学难题。一直以来,恶性肿瘤的发病率和死亡率没有得到有效遏制,仍呈逐年上升趋势。肿瘤发生浸润转移,以及肿瘤治疗过程中产生的药物抵抗是肿瘤复发和患者死亡的重要原因。近年,上皮细胞... 肿瘤是一种威胁人类健康的恶性疾病,也是世界性的医学难题。一直以来,恶性肿瘤的发病率和死亡率没有得到有效遏制,仍呈逐年上升趋势。肿瘤发生浸润转移,以及肿瘤治疗过程中产生的药物抵抗是肿瘤复发和患者死亡的重要原因。近年,上皮细胞-间充质表型转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)被认为是肿瘤发生浸润转移的起始步骤和肿瘤细胞耐药的主要原因之一。 展开更多
关键词 nr2f2 上皮细胞-间充质表型转化 肿瘤 转移
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人NR2F2基因的克隆及其生物信息学分析 被引量:3
7
作者 海那尔·乌拉孜巴依 叶尔那扎尔·努尔吐热 +2 位作者 陈小玲 张富春 张茂祥 《生物技术》 CAS 2020年第4期318-327,共10页
[目的]克隆人NR2F2(Nuclear Receptor subfamily 2,group F,member 2)基因并分析其生物学特性。[方法]根据NCBI数据库提供的人NR2F2基因序列设计其特异性引物,通过PCR扩增目的基因,并将其连接到p ET-28a载体上,然后进行酶切鉴定与DNA测... [目的]克隆人NR2F2(Nuclear Receptor subfamily 2,group F,member 2)基因并分析其生物学特性。[方法]根据NCBI数据库提供的人NR2F2基因序列设计其特异性引物,通过PCR扩增目的基因,并将其连接到p ET-28a载体上,然后进行酶切鉴定与DNA测序来确定人NR2F2基因克隆的正确性,再利用生物信息学在线工具分析人NR2F2蛋白的生物学特性。[结果]酶切鉴定与DNA测序结果表明人NR2F2基因开放阅读框为786 bp,编码261个氨基酸残基,分子量为29162.79 Da,p I为5.96。NR2F2蛋白是主要位于细胞质和细胞核中的亲水性蛋白,不含跨膜结构域,无信号肽,其二级结构由α螺旋、无规则卷曲和延伸链构成,并且三级结构与二级结构预测结果一致。[结论]克隆获得人NR2F2基因,其编码的蛋白质属于类固醇/甲状腺激素受体超家族,α螺旋和无规则卷曲为二级结构中最主要的结构元件。GO注释分析表明,人NR2F2属于转录因子,参与序列特异性DNA结合、基因转录、RNA的生物合成、RNA代谢等过程。 展开更多
关键词 nr2f2基因 基因克隆 生物信息学 预测和分析
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NR2F2促进小鼠MC3T3-E1前成骨细胞增殖 被引量:1
8
作者 王崧 熊霞辉 +1 位作者 朱宁 陈梅红 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第6期647-651,共5页
目的探讨NR2F2基因对小鼠前成骨细胞增殖的影响。方法用实时定量PCR检测mRNA表达量,MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,ELISA-Brdu法检测细胞DNA合成速度。结果在小鼠MC3T3-E1前成骨细胞增殖速度加快时,NR2F2基因的表达增高至... 目的探讨NR2F2基因对小鼠前成骨细胞增殖的影响。方法用实时定量PCR检测mRNA表达量,MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,ELISA-Brdu法检测细胞DNA合成速度。结果在小鼠MC3T3-E1前成骨细胞增殖速度加快时,NR2F2基因的表达增高至对照的4.57±0.30倍(P<0.01)。过表达NR2F2基因促使MC3T3-E1细胞增殖速度加快,细胞数量增加(P<0.01),细胞周期中S期细胞比例明显升高,为对照组的2倍,G2/M期比例也有增加(P<0.05)。过表达NR2F2基因使MC3T3-E1细胞的Brdu掺入率增高,DNA的合成加速(P<0.01)。结论 NR2F2使S期细胞比例增加,促进小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的增殖速度。 展开更多
关键词 nr2f2 MC3T3-E1细胞 细胞增殖
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先天性心脏缺损相关NR2F2基因新突变研究 被引量:4
9
作者 董斌斌 刘兴元 杨奕清 《国际心血管病杂志》 2019年第4期235-238,共4页
目的:探索先天性心脏缺损(CHD)相关NR2F2基因新突变。 方法:入选104例中国汉族CHD患者和208名匹配的非CHD对照者。对全部入选对象的NR2F2基因的编码区、剪接位点及部分非翻译区进行聚合酶链反应-测序分析。将所测序列与核苷酸数据库中... 目的:探索先天性心脏缺损(CHD)相关NR2F2基因新突变。 方法:入选104例中国汉族CHD患者和208名匹配的非CHD对照者。对全部入选对象的NR2F2基因的编码区、剪接位点及部分非翻译区进行聚合酶链反应-测序分析。将所测序列与核苷酸数据库中公布的NR2F2序列进行对比分析以发现NR2F2基因突变。运用计算机软件ClustalW2分析突变氨基酸进化上的保守性,应用PROVEAN、MutationTaster和PolyPhen-2软件预测突变的致病性。 结果:在1例散发性动脉导管未闭合并室间隔缺损患者中发现了1个NR2F2基因新突变,即c.1189C>T(p.Arg397Trp)突变。该错义突变不存在于208名非CHD对照者。多物种NR2F2蛋白的氨基酸序列比对分析显示被改变氨基酸在进化上完全保守,致病性预测表明所识别的NR2F2基因突变是致病性突变。 结论:c.1189C>T是CHD相关NR2F2基因新突变,对CHD的早期防治具有潜在的意义。 展开更多
关键词 先天性心脏缺损 分子遗传学 转录因子 nr2f2 突变
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长链非编码RNA NR2F2-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡的影响机制 被引量:1
10
作者 左文伟 李春莲 潘凤 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第5期739-743,共5页
目的:研究lncRNA NR2F2-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法:运用qRT-PCR法检测细胞中NR2F2-AS1、miR-425-5p的mRNA表达情况;将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-NR2F2-AS1组(转染pcDNA-NR2F2-AS1)、sh-NR2F2-AS1组(转染sh-NR2... 目的:研究lncRNA NR2F2-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法:运用qRT-PCR法检测细胞中NR2F2-AS1、miR-425-5p的mRNA表达情况;将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-NR2F2-AS1组(转染pcDNA-NR2F2-AS1)、sh-NR2F2-AS1组(转染sh-NR2F2-AS1)、sh-NC组(转染sh-NC)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-425-5p组(转染anti-miR-425-5p)、pcDNA-NR2F2-AS1+miR-NC组(共转染pcDNA-NR2F2-AS1和miR-NC)、pcDNA-NR2F2-AS1+miR-425-5p组(共转染pcDNA-NR2F2-AS1和miR-425-5p mimics)转染至MGC-803、MKN-45细胞;MTT法检测细胞的增殖;流式细胞术检测细胞的凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果:与正常胃黏膜上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞MGC-803、MKN-45中NR2F2-AS1的表达显著降低,miR-425-5p的表达显著升高;过表达NR2F2-AS1、抑制miR-425-5p均可抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡;miR-425-5p可抑制野生型NR2F2-AS1的MGC-803、MKN-45细胞的荧光活性;过表达miR-425-5p可逆转过表达NR2F2-AS1对MGC-803、MKN-45细胞增殖和凋亡的作用。结论:lncRNA NR2F2-AS1可抑制胃癌细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与靶向miR-425-5p有关,将可为胃癌的治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 nr2f2-AS1 胃癌 miR-425-5p 增殖 凋亡
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NR2F2在鼻咽癌中的表达及其临床意义 被引量:1
11
作者 王亮 金哲 姚富远 《医学信息(医学与计算机应用)》 2014年第22期79-80,共2页
目的:观察NR2F2基因的表达与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的关系。方法采用实时定量rtPCR技术检测NR2F2基因在NPC细胞株(CNE1、CNE2、58F)和鼻咽上皮细胞株(NP69)中的表达;采用组织芯片技术通过免疫组化检测NR2F2在124例恶性... 目的:观察NR2F2基因的表达与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的关系。方法采用实时定量rtPCR技术检测NR2F2基因在NPC细胞株(CNE1、CNE2、58F)和鼻咽上皮细胞株(NP69)中的表达;采用组织芯片技术通过免疫组化检测NR2F2在124例恶性鼻咽癌肿瘤、31例对应的癌旁正常组织和12例正常鼻炎粘膜组织的表达。结果 NR2F2 mRNA在NP69中表达水平较高,而在NPC细胞株中表达水平显著下降。正常鼻咽粘膜及癌旁组织中NR2F2蛋白染色阳性表达率约为72%(31/43);而在鼻咽癌组织中阳性表达率约为31%(39/124);NR2F2蛋白表达水平与肿瘤的侵犯范围(T)呈负相关(<0.01),与颈淋巴结转移(N)无关(>0.05)。结论 NR2F2基因表达的抑制可能参与鼻咽癌的发生。 展开更多
关键词 nr2f2 鼻咽癌 基因表达
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LncRNA NR2F2-AS1靶向抑制miR-129-5p调控子宫内膜癌细胞增殖和凋亡研究 被引量:2
12
作者 华金仁 程慧明 +2 位作者 严菁 曾丹 潘玫 《临床医药实践》 2022年第10期726-730,共5页
目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)核受体亚家族2组F成员2反义RNA1(NR2F2-AS1)靶向抑制微小RNA-129-5p(miR-129-5p)调控子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的情况。方法:选取2020年4月—2020年12月经病理检查确诊为子宫内膜癌的50例患者。采用荧光... 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)核受体亚家族2组F成员2反义RNA1(NR2F2-AS1)靶向抑制微小RNA-129-5p(miR-129-5p)调控子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的情况。方法:选取2020年4月—2020年12月经病理检查确诊为子宫内膜癌的50例患者。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)对子宫内膜癌组织与细胞中miR-129-5p和LncRNA NR2F2-AS1的表达水平进行检测;用流式细胞术与MTT比色法(MTT法)对子宫内膜癌细胞(Ishikawa)凋亡与增殖水平进行检测;用蛋白质印迹法(Western blot)对细胞中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、兔抗人单克隆抗体(Bax)、p21基因(p21)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的蛋白表达水平进行检测;采用双荧光素酶报告系统对miR-129-5p与LncNR2F2-AS1的调控关系进行验证。结果:子宫内膜癌组织中LncRNA NR2F2-AS1的含量明显高于正常子宫内膜组织(P<0.05)。干扰LncNR2F2-AS1表达、过表达miR-129-5p可抑制子宫内膜癌细胞增殖,加速细胞凋亡,细胞中的Bcl-2和CyclinD1含量大幅降低(P<0.05),而p21含量明显升高(P<0.05)。结论:干扰LncRNA NR2F2-AS1可以靶向促进miR-129-5p的表达,从而抑制子宫内膜癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA 长链非编码RNA核受体亚家族2组F成员2反义RNA1 子宫内膜癌 增殖 凋亡
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miR-27b inhibits gastric cancer metastasis by targeting NR2F2 被引量:18
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作者 Qingzhao Feng Xionglin Wu +5 位作者 Fuchao Li Beibei Ning Xiaofeng Lu Yin Zhang Ying Pan Wenxian Guan 《Protein & Cell》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期114-122,共9页
Increasing attention is focused on the down-regulation of miRNAs in cancer process. Nuclear receptor subfamily 2 (NR2F2, also known as COUP-TFU) is involved in the development of many types of cancers, but its role ... Increasing attention is focused on the down-regulation of miRNAs in cancer process. Nuclear receptor subfamily 2 (NR2F2, also known as COUP-TFU) is involved in the development of many types of cancers, but its role in gastric cancer remains elusive. In this experiment, oncomine and Kaplan-meier database revealed that NR2F2 was up-regulated in gastric cancer and that the high NR2F2 expression contributed to poor survival. MicroRNA-2Tb was targeted and down-regulated by NR2F2 in human gastric cancer tissues and cells. The ectopic expression of miR-27b inhibited gastric cancer cell proliferation and tumor growth in vitro and in vivo. Assays suggested that the overexpression of miR-27b could promote MGC-803 cells' migration and invasion and retard their metastasis to the liver. In addition, down-regulation of miR-27b enhanced GES-1 cells' proliferation and metastasis in vitro. These findings reveal that miR-27b is a tumor suppressor in gastric cancer and a biomarker for improving patients' survival. 展开更多
关键词 miR-27b nr2f2 gastric cancer tumor metastasis
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长链非编码RNA核受体亚家族2 F组成员2反义RNA 1靶向微小RNA-588调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移侵袭的分子机制
14
作者 秦俊美 肖鹏 +3 位作者 崔妙然 宁永明 袁聪 李林依 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期2120-2123,共4页
目的探讨长链非编码RNA核受体亚家族2 F组成员2反义RNA 1(lncRNA NR2F2-AS1)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)增殖、迁移侵袭的影响及分子机制。方法选取郑州大学第一附属医院35例RA患者滑膜组织及正常滑膜组织,实时荧光定量聚合酶... 目的探讨长链非编码RNA核受体亚家族2 F组成员2反义RNA 1(lncRNA NR2F2-AS1)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)增殖、迁移侵袭的影响及分子机制。方法选取郑州大学第一附属医院35例RA患者滑膜组织及正常滑膜组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NR2F2-AS1和微小RNA(miR)-588的表达水平;将RASF分为si-NR2F2-AS1组、si-NC组、miR-588组、miR-NC组、si-NR2F2-AS1+anti-miR-588组、si-NR2F2-AS1+anti-miR-NC组;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;划痕实验检测细胞划痕愈合率;Transwell检测细胞侵袭数;蛋白质印迹法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测NR2F2-AS1和miR-588的靶向关系。用SPSS 20.0软件进行统计学分析。结果 RA患者滑膜组织中NR2F2-AS1表达水平高于正常滑膜组织(3.50±0.23比1.00±0.06,t=62.223,P<0.05),而miR-588表达水平低于正常滑膜组织(0.29±0.04比1.00±0.09,t=42.649,P<0.05)。si-NR2F2-AS1组细胞活性低于si-NC组(0.55±0.04比1.03±0.08,t=16.100,P<0.05),细胞克隆形成数低于si-NC组[(47.58±5.03)个比(103.93±10.24)个,t=14.818,P<0.05]、侵袭细胞数[(55.31±5.28)个比(123.37±10.09)个,t=17.929,P<0.05]低于si-NC组,划痕愈合率低于si-NC组[(23.21±2.47)%比(64.19±5.55)%,t=20.238,P<0.05],E钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平高于si-NC组,N钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平低于si-NC组(P<0.05)。过表达miR-588与其作用相同。NR2F2-AS1靶向调控miR-588;下调miR-588表达逆转抑制NR2F2-AS1表达对RASF增殖、迁移侵袭的作用。结论抑制lncRNA NR2F2-AS1表达可通过靶向调控miR-588抑制RA滑膜成纤维细胞的增殖、迁移侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码RNA nr2f2-AS1 微小RNA-588 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 增殖 迁移 侵袭
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