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GUS基因和NPTII基因表达的相关性及其在转基因棉花检测研究中的应用 被引量：10
1
作者 上官小霞 李燕娥 +3 位作者 梁运生 吴霞 杜春芳 张林水 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期163-167,共5页
利用农杆菌介导转化法,将含有35S启动子驱动NPTII基因和GUS基因以及棉纤维特异表达启动子E6驱动目的基因FB的植物表达载体转入到常规棉花R15中。重点分析了GUS基因和NPTII基因在愈伤诱导阶段、T0代及T1代转基因棉花中的表达情况。综合... 利用农杆菌介导转化法,将含有35S启动子驱动NPTII基因和GUS基因以及棉纤维特异表达启动子E6驱动目的基因FB的植物表达载体转入到常规棉花R15中。重点分析了GUS基因和NPTII基因在愈伤诱导阶段、T0代及T1代转基因棉花中的表达情况。综合两个基因的表达来进行转基因棉花的阳性鉴定,可以为转基因棉花后代的纯合选育提供双重保障。7个转基因株系选育到T3代共获得株行51个,卡那霉素检测多数株行阳性率在90%以上,其中21个株行阳性率达100%。 展开更多
关键词 GUS基因 nptii基因 相关性 转基因棉花 基因表达
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GUS基因和NPTII基因在转基因花生后代的遗传研究 被引量：6
2
作者 方小平 许泽永 +6 位作者 张宗义 晏立英 陈坤荣 罗莉霞 陈金香 R.G.Birch R.G.Dietzgen 《花生学报》 北大核心 1999年第S1期241-245,共5页
对β－ 葡糖苷酸酶（ＧＵＳ）基因在转基因花生Ｔ１－ Ｔ３ 代植株中的活性测定和ＮＰＴ ＩＩ基因在Ｔ３ 代植株中的活性和ＰＣＲ检测表明：Ｔ１ 代的ＧＵＳ基因为１ ∶１、３∶１ 等分离， Ｔ２ 和Ｔ３ 代ＧＵＳ基因符合３ ： １ 单基... 对β－ 葡糖苷酸酶（ＧＵＳ）基因在转基因花生Ｔ１－ Ｔ３ 代植株中的活性测定和ＮＰＴ ＩＩ基因在Ｔ３ 代植株中的活性和ＰＣＲ检测表明：Ｔ１ 代的ＧＵＳ基因为１ ∶１、３∶１ 等分离， Ｔ２ 和Ｔ３ 代ＧＵＳ基因符合３ ： １ 单基因显性遗传规律的植株数增加，１ ： １ 分离单株比例逐渐减少。从Ｔ３ 代中就可选择到ＧＵＳ基因纯合的单株，得到了４ 株遗传性稳定的单株，说明ＧＵＳ基因在转基因花生植株后代的遗传应属于单基因显性遗传规律。实验证明，位于同一质粒上的ＧＵＳ和新霉素磷酸转移酶（ＮＰＴ ＩＩ）基因，在转基因花生植株中表现为连锁遗传。 展开更多
关键词 转基因花生 GUS基因 nptii基因 外源基因遗传
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转基因抗虫棉根际卡那霉素抗性细菌种群动态及nptⅡ基因漂移检测 被引量：8
3
作者 王振 邓欣 +1 位作者 赵廷昌 刘学敏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期4401-4408,共8页
【目的】研究转基因抗虫棉根际卡那霉素抗性细菌的种群动态,检测转基因棉卡那霉素抗性细菌nptII基因漂移。【方法】采用常规培养方法分析了转基因抗虫棉GK12、GK19、33B、SGK321,常规棉泗棉3号、33、石远321等7个棉花品种根际卡那霉素... 【目的】研究转基因抗虫棉根际卡那霉素抗性细菌的种群动态,检测转基因棉卡那霉素抗性细菌nptII基因漂移。【方法】采用常规培养方法分析了转基因抗虫棉GK12、GK19、33B、SGK321,常规棉泗棉3号、33、石远321等7个棉花品种根际卡那霉素抗性细菌种群在棉花整个生育期的种群动态变化。以质粒pBI121为对照,设计nptII基因特异性引物,采用PCR方法对分离的根际卡那霉素抗性细菌菌株进行nptII基因漂移检测。【结果】7个棉花品种根际卡那霉素抗性细菌数量随时间延长而减少,同一棉花品种不同采样时间卡那霉素抗性细菌数量差异显著,而同一采样时间抗虫棉和对应的受体棉间差异不显著。Simpson、Shannon-Wiener多样性指数以及Pielou均匀度指数计算结果表明,受体棉根际卡那霉素抗性细菌群落的多样性高于转基因棉。PCR检测结果表明,21株卡那霉素抗性细菌菌株中18株发现有阳性片段,但其测序结果与卡那霉素抗性基因序列比对的同源性未能达到100%,不能判断nptII是否发生了转移。【结论】根际卡那霉素抗性细菌的数量在转基因棉与对应受体棉之间差异不显著,受体棉根际卡那霉素抗性细菌群落多样性指数高于转基因棉,更均匀稳定。未发现转基因棉卡那霉素抗性标记基因nptII向根际细菌的基因漂移。 展开更多
关键词 转基因抗虫棉 根际卡那霉素抗性细菌 种群 nptii 基因漂移
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NPTⅡ基因在满江红鱼腥藻染色体DNAglnA位点的定点整合及对泌氨和细胞形态结构的影响
4
作者 吴晓强 施定基 +5 位作者 刘祥林 汪洪杰 邱泽生 张承谦 印莉萍 赵微平 《首都师范大学学报（自然科学版）》 1993年第4期27-33,共7页
本研究构建了含glnA基因片段和TPTⅡ基因的单交换整合型重组质粒pGN1-4,并通过电激法,三亲接合转移和二亲接合转移法号入到满江红鱼腥藻细胞中。用蓝细菌原位杂交法筛选出转化细胞菌落。再经Southern杂交方法进一步证实了转化结果。化... 本研究构建了含glnA基因片段和TPTⅡ基因的单交换整合型重组质粒pGN1-4,并通过电激法,三亲接合转移和二亲接合转移法号入到满江红鱼腥藻细胞中。用蓝细菌原位杂交法筛选出转化细胞菌落。再经Southern杂交方法进一步证实了转化结果。化学测氨法表明,培养后7～14d泌氨达到高峰,转化细胞泌氨比对照高40％。光镜观察表明,转化细胞藻丝变短,易断成单个细胞,异形胞频率降低;扫描电镜观察指出,转化细胞外壁有鳞片状鞘层,而对照较光滑。 展开更多
关键词 满江红鱼腥藻 nptii基因 glnA 定点整合 泌氨 细胞形态结构
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转多基因杨树中抗生素标记基因NPTⅡ表达量分析研究 被引量：5
5
作者 侯英杰 苏晓华 +1 位作者 张冰玉 褚延广 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2009年第5期630-634,共5页
对转基因库安托杨及银腺杂种杨（含1-5个外源基因）中选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因（NPTII）进行PCR扩增,证实该基因稳定存在于转基因杨树的基因组中。应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）对2种转基因杨树中NPTII蛋白的表达量进行定... 对转基因库安托杨及银腺杂种杨（含1-5个外源基因）中选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因（NPTII）进行PCR扩增,证实该基因稳定存在于转基因杨树的基因组中。应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）对2种转基因杨树中NPTII蛋白的表达量进行定量检测,结果显示：NPTII蛋白的表达量并没有随着目的基因数量的增加而升高,说明与转单个基因杨树相比,转多个基因杨树可能由标记基因引起的生物安全问题并不会加剧。 展开更多
关键词 转基因杨树 新霉素磷酸转移酶基因 酶联免疫吸附测定
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高效马铃薯遗传转化体系的建立及甜蛋白基因的导入 被引量：30
6
作者 杨美珠 潘乃穟 陈章良 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第1期31-36,共6页
本研究选用了三个马铃薯(Solanum Iuberosum L.)栽培品种“85T-14-3”、“86-2”及“Favorita”的块茎、微型薯和试管薯为起始材料,应用根癌农杆菌 Ti 质粒系统成功地建立了一种方法简单、速度快和频率高的遗传转化体系。其中试管薯薄... 本研究选用了三个马铃薯(Solanum Iuberosum L.)栽培品种“85T-14-3”、“86-2”及“Favorita”的块茎、微型薯和试管薯为起始材料,应用根癌农杆菌 Ti 质粒系统成功地建立了一种方法简单、速度快和频率高的遗传转化体系。其中试管薯薄片的转化速度最快,经根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)共培养后,薄片在100mg/L 卡那霉素的分化培养上,2—3周就可产生出抗性小芽,这些小芽进一步仲长后可在50—100mg/L 卡那霉素的无激素MS 培养基上生根。从共培养到转化植株的获得只需6—7周。微型薯和试管薯的转化频率较高,最高可达67.5%。大多数抗性植株均能检测到胭脂碱合成酶或 GUS 基因的表达。把带有甜蛋白基因和胭脂碱合成酶标记基因的Ti质粒导入马铃薯,获得大量转化植株。叶片抗性检测和 nopaline 检测可推断外源甜蛋白基因已进入马铃薯基因组。 展开更多
关键词 马铃薯 遗传转化 甜蛋白基因
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