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重组质粒pEGFP-N1-NPRL2对人胃癌细胞生物学特性的影响 被引量:5
1
作者 胡在敏 王川 +3 位作者 季文 刘波 蔡璨 姜政 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1020-1024,共5页
目的:探讨pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体对SGC-7901胃癌细胞体外增殖﹑细胞周期、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法:构建pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体,并进行酶切及测序鉴定。脂质体介导转染入SGC-7901胃癌细胞,应用荧光显微镜、RT-PCR、Weste... 目的:探讨pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体对SGC-7901胃癌细胞体外增殖﹑细胞周期、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法:构建pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体,并进行酶切及测序鉴定。脂质体介导转染入SGC-7901胃癌细胞,应用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot法检测NPRL2的基因及蛋白水平情况,CCK8法检测细胞增殖的变化,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化,Transwell实验检测NPRL2对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:成功构建了pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体。重组质粒转染SGC-7901细胞后,通过荧光显微镜观察到绿色荧光的表达,RT-PCR和Westernblot法检测到NPRL2 mRNA及蛋白的表达,CCK8法检测发现NPRL2能够明显抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05),细胞周期分析显示NPRL2使细胞停在G0~G1期(P<0.05),细胞凋亡结果显示NPRL2能抑制细胞凋亡(P<0.05),Transwell侵袭和迁移实验显示NPRL2使细胞侵袭迁移能力均降低(P<0.05)。结论:NPRL2可抑制肿瘤细胞的增殖、周期、侵袭及迁移,并促进凋亡。 展开更多
关键词 nprl2 SGC7901 转染 增殖 侵袭
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抑癌基因NPRL2的研究进展 被引量:6
2
作者 姚磊 吴德全 唐志强 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期160-163,共4页
抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator-like 2)也称肿瘤抑制候选基因4(tumor suppressor candidate4,TUSC4),定位于人染色体3p21.3区域,广泛存在于人体各种组织中,在生物物种之间具有高度保守性;研究发现,在人类多种肿瘤组织(如... 抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator-like 2)也称肿瘤抑制候选基因4(tumor suppressor candidate4,TUSC4),定位于人染色体3p21.3区域,广泛存在于人体各种组织中,在生物物种之间具有高度保守性;研究发现,在人类多种肿瘤组织(如肺癌、乳腺癌和肾癌等)中的表达明显降低。NPRL2基因具有参与DNA错配修饰、调控细胞周期信号转导以及诱导细胞凋亡的生物学功能。NPRL2基因失活与多种肿瘤的发生和发展有关。但其具体的抑瘤机制尚不清楚,有待于进一步研究。 展开更多
关键词 肿瘤 基因 肿瘤抑制 nprl2
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RKIP及NPRL2在涎腺黏液表皮样癌中的表达及其临床意义 被引量:2
3
作者 胡那日苏 张斌 +3 位作者 叶菲 俞春江 关呈超 牟海滨 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1101-1104,共4页
目的:研究口腔黏液表皮样癌组织中RKIP和抑癌基因NPRL2的表达,探讨其表达与口腔黏液表皮样癌各临床病理因素之间的关系。方法:应用免疫组织化学染色方法检测48例口腔黏液表皮样癌组织和13例正常组织中RKIP和NPRL2的表达,并对其与临床病... 目的:研究口腔黏液表皮样癌组织中RKIP和抑癌基因NPRL2的表达,探讨其表达与口腔黏液表皮样癌各临床病理因素之间的关系。方法:应用免疫组织化学染色方法检测48例口腔黏液表皮样癌组织和13例正常组织中RKIP和NPRL2的表达,并对其与临床病理特征的关系进行统计学分析。结果:RKIP和NPRL2均表达于黏液表皮样癌细胞的胞浆和部分胞膜。黏液表皮样癌组织与正常组织中RKIP和NPRL2高表达的阳性率分别为52.08%,92.31%和47.92%,100.00%,黏液表皮样癌组织与两者比较有显著性差异(P<0.05)。结论:RKIP和NPRL2可能参与了黏液表皮样癌的发生、发展过程。 展开更多
关键词 黏液表皮样癌 RKIP nprl2 转移
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CTP-NPRL2融合蛋白对肾癌原代细胞迁移侵袭能力的抑制及机制研究 被引量:1
4
作者 史晓博 叶茂 +5 位作者 曾洋 陈明龙 陈志雄 熊晶 吕不凡 唐伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期2592-2599,共8页
目的将原核表达的氮酶调节因子2(nitrogen permease regulator 2-like,NPRL2)融合蛋白通过胞浆转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)转入肾癌原代细胞内,观察其对肾癌原代细胞迁移侵袭的影响,并分析与肾癌上皮间质转化(epithel... 目的将原核表达的氮酶调节因子2(nitrogen permease regulator 2-like,NPRL2)融合蛋白通过胞浆转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)转入肾癌原代细胞内,观察其对肾癌原代细胞迁移侵袭的影响,并分析与肾癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法胶原酶消化法培养肾癌原代细胞;构建原核表达质粒pET15b-CTP-NPRL2和pET15b-NPRL2,表达融合蛋白CTP-NPRL2和NPRL2,并通过Western blot鉴定目的蛋白的表达。将培养成功的原代细胞分为BLANK组、NPRL2组和CTP-NPRL2组。免疫荧光检测目的蛋白的细胞定位;Transwell迁移侵袭实验检测导入NPRL2蛋白后,对肾癌细胞迁移侵袭能力的影响;Real-time PCR检测Raptor、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤粘蛋白(Fibronectin)m RNA表达水平;Western blot检测Raptor、E-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白表达水平。结果成功培养出肾癌原代细胞并通过鉴定;测序结果及Western blot检测结果显示质粒构建成功并表达出目的蛋白;免疫荧光检测结果显示CTP-NPRL2融合蛋白可以穿过胞膜并定位于胞浆;迁移和侵袭实验显示CTP-NPRL2组肾癌细胞迁移侵袭能力明显下降(P<0.05);Real-time PCR和Western blot检测结果显示CTP-NPRL2组Raptor、Vimentin与Fibronectin的m RNA、蛋白表达水平与NPRL2组和BLANK组相比明显降低(P<0.05),而E-cadherin的mRNA、蛋白表达水平与NPRL2组与BLANK组相比明显升高(P<0.05)。结论 NPRL2可能通过与Raptor相互作用影响mTORC1的活性,进而调节EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、Fibronectin的表达量,影响肾癌细胞的迁移侵袭能力。 展开更多
关键词 nprl2 mTORC1 迁移 侵袭 上皮间质转化
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口腔涎腺腺样囊性癌组织中RKIP和NPRL2的表达及其意义 被引量:1
5
作者 胡那日苏 张斌 +3 位作者 关呈超 俞春江 叶菲 牟海滨 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2012年第2期148-151,共4页
目的:探讨抑癌基因RKIP和NPRL2在口腔涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测RKIP蛋白和NPRL2蛋白在52例口腔涎腺腺样囊性癌组织、26例癌旁腺样囊性癌组织及15例正常涎腺组织中的表达,并分析RKIP和NPRL... 目的:探讨抑癌基因RKIP和NPRL2在口腔涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测RKIP蛋白和NPRL2蛋白在52例口腔涎腺腺样囊性癌组织、26例癌旁腺样囊性癌组织及15例正常涎腺组织中的表达,并分析RKIP和NPRL2的表达与腺样囊性癌临床病理学特征的关系。结果:免疫组化结果显示腺样囊性癌组织、癌旁及正常涎腺组织中RKIP和NPRL2的阳性率分别为48.08%、76.92%、93.33%和46.15%、80.77%、93.33%;腺样囊性癌组织中RKIP和NPRL2的表达显著低于癌旁及正常涎腺组织,差异有统计学意义(P<0.05),而腺样囊性癌组织和癌旁组织中两者蛋白的表达均呈显著正相关(P=0.000,P=0.005)。结论:RKIP和NPRL2表达的减少或缺失与腺样囊性癌的发生发展、侵袭转移密切相关。 展开更多
关键词 腺样囊性癌 RKIP nprl2 转移
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胃癌组织中NPRL2蛋白的表达变化 被引量:1
6
作者 程智勇 韩猛 +1 位作者 门晓彦 易喜贤 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第14期42-43,共2页
目的观察胃癌组织中NPRL2蛋白的表达变化。方法采用免疫组化SP法检测60例胃腺癌组织及其癌旁正常组织中的NPRL2蛋白。结果 NPRL2蛋白在癌旁正常组织中的阳性率为86.7%,明显高于癌正常组织中的26.7%,P<0.05。NPRL2蛋白表达与胃癌分化... 目的观察胃癌组织中NPRL2蛋白的表达变化。方法采用免疫组化SP法检测60例胃腺癌组织及其癌旁正常组织中的NPRL2蛋白。结果 NPRL2蛋白在癌旁正常组织中的阳性率为86.7%,明显高于癌正常组织中的26.7%,P<0.05。NPRL2蛋白表达与胃癌分化程度、有无淋巴结转移、肿瘤浸润深度、临床分期及患者的年龄、性别均无关(P均>0.05)。结论胃癌组织中NPRL2蛋白表达降低。 展开更多
关键词 胃肿瘤 胃癌 nprl2基因 抑癌基因
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抑癌基因NPRL2对肾癌786-O细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
7
作者 蒋立 唐伟 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期47-52,共6页
抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator-like 2)在人类许多正常组织中均有明显的表达,而在人类多种肿瘤组织中的表达明显降低。该实验通过构建重组质粒pEGFP-N1-NPRL2并转染肾癌786-O细胞株,应用倒置荧光显微镜、RT-PCR和Western b... 抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator-like 2)在人类许多正常组织中均有明显的表达,而在人类多种肿瘤组织中的表达明显降低。该实验通过构建重组质粒pEGFP-N1-NPRL2并转染肾癌786-O细胞株,应用倒置荧光显微镜、RT-PCR和Western blot检测NPRL2基因的表达情况;MTT法检测786-O细胞增殖的情况;流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡情况。结果显示:肾癌786-O细胞株转染重组质粒pEGFP-N1-NPRL2后,通过荧光显微镜可以观察到绿色荧光;RT-PCR和Western blot检测到NPRL2基因的转录和蛋白质表达水平明显增加(P<0.05);MTT法检测发现72 h时pEGFP-N1-NPRL2组、pEGFP-N1组和空白对照组的细胞D490值分别为0.654±0.030、1.528±0.022和1.572±0.036,pEGFP-N1-NPRL2组细胞的增殖较其他两组受到明显的抑制(P<0.05);流式细胞仪检测显示pEGFP-N1-NPRL2组、pEGFP-N1组和空白对照组的凋亡率分别为18.82%±0.40%、5.65%±0.12%和5.85%±0.07%,而处于G0/G1期的细胞比例分别为69.80%±1.40%、46.24%±1.30%和47.03%±0.45%,与其他两组相比,pEGFP-N1-NPRL2组的凋亡率显著增高而且G0/G1期细胞明显增多,表现出G0/G1期阻滞。提示抑癌基因NPRL2的转染可以抑制786-O细胞的增殖,并诱导其凋亡将细胞周期阻滞于G0/G1期。 展开更多
关键词 nprl2 786-O细胞 肾癌 增殖 凋亡
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基因NPRL2在急性白血病中的表达 被引量:3
8
作者 于广晴 张家军 石亚男 《黑龙江医药科学》 2011年第1期50-51,共2页
白血病是造血干细胞的克隆性疾病。我国白血病发病率为2.76/10万。在恶性肿瘤死亡率中,白血病居第6位(男性)和第8位(女性),在儿童及35岁以下成人中则居第l位。其中急性髓细胞白血病最多(1.62/10万),其次为急性淋巴细胞白血病(0.6... 白血病是造血干细胞的克隆性疾病。我国白血病发病率为2.76/10万。在恶性肿瘤死亡率中,白血病居第6位(男性)和第8位(女性),在儿童及35岁以下成人中则居第l位。其中急性髓细胞白血病最多(1.62/10万),其次为急性淋巴细胞白血病(0.69/10万)。白血病的发生与原癌基因、抑癌基因和调控基因密切相关, 展开更多
关键词 基因nprl2 急性白血病 RT-PCR
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胃癌组织中NPRL2 mRNA的表达变化及意义
9
作者 程智勇 门晓彦 +1 位作者 韩猛 易喜贤 《山东医药》 CAS 2012年第6期59-60,共2页
目的观察胃癌组织中NPRL2 mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测60例胃腺癌组织及其癌旁正常组织中NPRL2 mRNA的表达。结果 NPRL2 mRNA在胃癌及癌旁正常组织中均有表达,但胃癌组织中NPRL2 mRNA... 目的观察胃癌组织中NPRL2 mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测60例胃腺癌组织及其癌旁正常组织中NPRL2 mRNA的表达。结果 NPRL2 mRNA在胃癌及癌旁正常组织中均有表达,但胃癌组织中NPRL2 mRNA的表达显著降低(IOD比值为1.099±0.285),与癌旁正常组织(IOD比值为1.582±0.305)相比P<0.05。NPRL2 mRNA的表达与肿瘤分化程度、有无淋巴结转移、肿瘤浸润深度、临床分期及患者的年龄、性别无显著相关(P均>0.05)。NPRL2 mRNA在不同分化程度、不同临床分期、有无淋巴结转移及不同年龄、性别患者的胃癌组织中的表达无显著差异(P均>0.05)。结论胃癌组织中NPRL2mRNA表达降低,其在胃癌的发生、发展过程中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 胃癌 nprl2基因 抑癌基因 逆转录聚合酶链反应
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pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体的构建及其对人鼻咽癌细胞增殖的影响
10
作者 乔宇 白荣平 盛玉彪 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第15期2363-2365,共3页
目的:构建pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体并观察其对鼻咽癌细胞株CNE1体外增殖的影响。方法:提取CNE1细胞中总RNA,RT-PCR扩增NPRL2并克隆至pEGFP-N1载体,鉴定出阳性克隆送测序,以重组质粒转染CNE1细胞。通过Western blot检测转染细胞中NPRL... 目的:构建pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体并观察其对鼻咽癌细胞株CNE1体外增殖的影响。方法:提取CNE1细胞中总RNA,RT-PCR扩增NPRL2并克隆至pEGFP-N1载体,鉴定出阳性克隆送测序,以重组质粒转染CNE1细胞。通过Western blot检测转染细胞中NPRL2蛋白的表达,CCK-8法检测细胞增殖的变化。结果:成功构建了pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体,Western blot法检测到NPRL2蛋白的表达,CCK-8法检测发现NPRL2能够明显抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05)。结论:成功构建pEGFP-N1-NPRL2真核表达载体并转染至CNE1细胞,NPRL2可抑制肿瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 nprl2 鼻咽癌 CNE1 增殖
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NPRL2、Survivin在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义 被引量:6
11
作者 谷旭 王夏青 +2 位作者 任万华 秦成勇 韩国庆 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第6期68-72,共5页
目的探究NPRL2、Survivin在肝细胞肝癌中的作用,两者间的关系及其与各临床指标间的联系。方法收集45例肝细胞肝癌患者的癌组织、癌旁组织及15例正常肝脏组织,采用免疫组织化学方法、实时荧光定量RT-PCR法检测NPRL2、Survivin在各组织中... 目的探究NPRL2、Survivin在肝细胞肝癌中的作用,两者间的关系及其与各临床指标间的联系。方法收集45例肝细胞肝癌患者的癌组织、癌旁组织及15例正常肝脏组织,采用免疫组织化学方法、实时荧光定量RT-PCR法检测NPRL2、Survivin在各组织中的表达。结果 NPRL2在肝癌组织中的表达低于其癌旁组织、正常肝脏组织(P<0.01),与肿瘤TNM分期有关(P<0.05)。Survivin在肝癌组织中的表达高于癌旁组织、正常肝脏组织(P<0.01),且与血清AFP浓度、TNM分期有关(P<0.05)。在正常肝脏组织和癌旁组织中,NPRL2、Survivin的表达差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman等级相关分析结果表明,NPRL2、Survivin m RNA在肝癌组织中的表达呈负相关(r=-0.45,P<0.01)。结论在肝细胞肝癌中,NPRL2是肿瘤抑制基因,Survivin是癌基因,且两者表达呈负相关,共同参与了肿瘤的发生发展。 展开更多
关键词 nprl2 SURVIVIN 肝细胞肝癌 免疫组织化学 RT-PCR
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NPRL2与膀胱癌患者临床病理特征的相关性及对膀胱癌细胞凋亡的影响 被引量:5
12
作者 朱西 罗生军 +1 位作者 蒋立 唐伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期432-437,共6页
目的研究NPRL2与膀胱癌患者临床病理特征的相关性及沉默NPRL2对膀胱癌细胞系Biu87/RT-4凋亡的影响。方法收集本院泌尿外科2014年1月至2019年1月的131例膀胱癌患者癌组织标本,免疫组化检测膀胱癌组织中NPRL2表达情况,分析其与膀胱癌临床... 目的研究NPRL2与膀胱癌患者临床病理特征的相关性及沉默NPRL2对膀胱癌细胞系Biu87/RT-4凋亡的影响。方法收集本院泌尿外科2014年1月至2019年1月的131例膀胱癌患者癌组织标本,免疫组化检测膀胱癌组织中NPRL2表达情况,分析其与膀胱癌临床病理特征的相关性;检测CP-H068、Biu87和RT-4细胞系中NPRL2的表达,CCK-8法检测沉默NPRL2后细胞的增殖情况,流式细胞术检测凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果NPRL2在膀胱癌组织中高表达,为53.44%,与膀胱癌临床分期、分级存在显著相关性(P<0.05);NPRL2在膀胱癌细胞系Biu87/RT-4中的表达显著高于正常膀胱上皮细胞CP-H068(P<0.05);沉默NPRL2后Biu87/RT-4细胞增殖能力下降,凋亡率上升,凋亡相关蛋白JNK、Bax、caspase-9表达量增高,Bcl-2表达受抑制,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论膀胱癌中NPRL2表达与膀胱癌临床分期和分级相关,通过沉默膀胱癌细胞Biu87/RT-4中NPRL2的表达,可以有效抑制膀胱癌细胞增殖、促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 nprl2 膀胱癌 Biu87细胞 RT-4细胞 凋亡
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胃癌中NPRL2和CHK1的表达及意义 被引量:1
13
作者 赵艳 周建斌 +3 位作者 李芳 张娜 周亚东 杨晶 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1273-1276,共4页
目的观察胃良、恶性病变组织中NPRL2和细胞周期检测点激酶1(CHK1)的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化SP法检测胃良、恶性病变组织中NPRL2和CHK1的表达,分析两者的表达水平与临床病理特征的关系以及两者表达的相互性。其中慢性浅... 目的观察胃良、恶性病变组织中NPRL2和细胞周期检测点激酶1(CHK1)的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化SP法检测胃良、恶性病变组织中NPRL2和CHK1的表达,分析两者的表达水平与临床病理特征的关系以及两者表达的相互性。其中慢性浅表性胃炎20例,慢性萎缩性胃炎伴肠化32例,异型增生30例,胃癌50例。结果在慢性浅表性胃炎→慢性萎缩性胃炎伴肠化→异型增生→胃癌的过程中,CHK1的表达呈逐渐递增趋势,而NPRL2则逐步递减;NPRL2、CHK1表达均与浸润深度、分化程度、淋巴结转移明显相关,差异均有显著性(P<0.05);两者的表达与年龄、性别无关;胃癌组织中NPRL2和CHK1表达存在相关性(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,CHK1阴性组2年生存率为72.2%,稍高于阳性组的56.2%(P>0.05);NPRL2阳性组2年生存率为83.3%,明显高于阴性组50%(P<0.01)。Cox回归多因素分析显示NPRL2表达是一独立预后因素。结论 NPRL2和CHK1表达水平可能是反映胃癌发生、进展、生物学行为及指导临床辅助治疗的重要生物学指标。NPRL2表达可作为评价胃癌预后的指标。 展开更多
关键词 胃肿瘤 nprl2 CHK1
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非小细胞肺癌组织中NPRL2蛋白的表达及意义 被引量:3
14
作者 梁大英 谢宗涛 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2011年第2期149-152,共4页
目的探讨NPRL2在非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)组织中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化sP法检测NSCLC组织和正常肺组织中NPRL2蛋白的表达水平。结果NSCLC组织中NPRL2的表达水平明显低于正常肺组织(P〈0.0... 目的探讨NPRL2在非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)组织中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化sP法检测NSCLC组织和正常肺组织中NPRL2蛋白的表达水平。结果NSCLC组织中NPRL2的表达水平明显低于正常肺组织(P〈0.01);NPRL2蛋白的表达水平分别与病理类型、分化程度、临床分期、淋巴结转移与否有关(P〈0.05)。结论NPRL2蛋白的低表达可能与非小细胞肺癌的发生发展密切相关。 展开更多
关键词 nprl2 肺肿瘤 免疫组化
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NPRL2基因与奥沙利铂治疗结直肠癌的研究进展 被引量:2
15
作者 付伟然 刘艾芸 杜雅菊 《胃肠病学》 2017年第12期760-763,共4页
结直肠癌(CRC)是全球三大恶性肿瘤之一,具有高发病率和高死亡率。研究发现,NPRL2基因与CRC发生、发展关系密切,CRC患者NPRL2基因表达显著降低。奥沙利铂是第三代铂类抗肿瘤药物,已广泛应用于胃肠道肿瘤化疗,可提高CRC患者生存率,但部分... 结直肠癌(CRC)是全球三大恶性肿瘤之一,具有高发病率和高死亡率。研究发现,NPRL2基因与CRC发生、发展关系密切,CRC患者NPRL2基因表达显著降低。奥沙利铂是第三代铂类抗肿瘤药物,已广泛应用于胃肠道肿瘤化疗,可提高CRC患者生存率,但部分患者存在耐药。NPRL2基因可增加奥沙利铂治疗CRC的敏感性,是CRC潜在的治疗靶点。本文就NPRL2基因与奥沙利铂治疗CRC的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 nprl2基因 奥沙利铂 治疗
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上调NPRL2表达对神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的抑制作用
16
作者 田琪 黄宁 程远 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1304-1313,共10页
目的:探讨抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator like-2)过表达对人神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法:将NPRL2过表达的重组慢病毒LV-NPRL2感染SHG44和U251细胞后,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法... 目的:探讨抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator like-2)过表达对人神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法:将NPRL2过表达的重组慢病毒LV-NPRL2感染SHG44和U251细胞后,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中NPRL2m RNA和蛋白的表达水平,CCK-8和FCM法检测细胞增殖和细胞周期,蛋白质印迹法检测磷酸化3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(phospho-3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1,p-PDK1)、磷酸化蛋白激酶B1(phospho-protein kinase B1,p-PKB1,又称p-Akt1)、p27和p21蛋白的表达水平,应用酶联免疫检测仪检测细胞中PDK1、Akt1、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)和CDK4的活性。裸鼠皮下成瘤实验观察NPRL2过表达对SHG44和U251细胞致瘤性的影响,免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和Ki-67增殖指数的变化。结果:LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞中NPRL2 m RNA和蛋白的表达水平均显著高于阴性对照组[SHG44和U251细胞感染阴性对照慢病毒(lentivirus-negative control,LV-NC)]和空白对照组(SHG44和U251细胞未感染任何慢病毒)(P值均<0.01)。LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞的增殖受到抑制(P值均<0.05),G0/G1期细胞所占百分比显著上升(P值均<0.01),S期细胞所占百分比显著下降(P值均<0.01),p-PDK1和p-Akt1蛋白的表达水平下调(P值均<0.01),p21和p27蛋白的表达水平上调(P值均<0.01),PDK1、Akt1、CDK2和CDK4的活性水平显著下降(P值均<0.01)。LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞在裸鼠皮下的成瘤能力(P<0.05)以及移植瘤组织中PCNA和Ki-67的增殖指数显著低于阴性对照组(P值均<0.01)。结论:NPRL2过表达可以抑制人神经胶质瘤SHG44和U251细胞的增殖,其机制可能与抑制PDK1/Akt1信号转导通路有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 细胞增殖 细胞周期 小鼠 nprl2基因
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NPRL2对结肠癌HT29细胞系自噬和凋亡的影响 被引量:7
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作者 刘艾芸 乔久涛 +2 位作者 陈晶 裴凤华 杜雅菊 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2019年第2期249-255,共7页
目的:探讨NPRL2对人结肠癌细胞自噬的影响,并进一步探讨自噬和凋亡的关系。方法:构建过表达NPRL2慢病毒载体,转染至HT29细胞。检测转染48h后NPRL2、LC3B和p62蛋白表达量,吖啶橙染色检测细胞自噬。用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理转... 目的:探讨NPRL2对人结肠癌细胞自噬的影响,并进一步探讨自噬和凋亡的关系。方法:构建过表达NPRL2慢病毒载体,转染至HT29细胞。检测转染48h后NPRL2、LC3B和p62蛋白表达量,吖啶橙染色检测细胞自噬。用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理转染后细胞,测定细胞增殖,细胞死亡,细胞caspase-3活性,细胞凋亡和caspase-3、Bax、Bcl-2、LC3B及p62的蛋白表达量,吖啶橙染色检测细胞自噬。结果:免疫印迹法检测结果表明NPRL2能够激活HT29细胞的自噬。前期研究结果表明,NPRL2能够促进HT29细胞凋亡。进一步研究NPRL2激活的自噬与凋亡之间的关系,结果表明3-MA抑制由NPRL2诱导的自噬,降低细胞活力,抑制其增殖,促进其凋亡,并促进活化caspase-3和Bax的表达,抑制Bcl-2的蛋白表达和细胞自噬。结论:NPRL2能够促进HT29细胞的自噬,但这种自噬抑制了NPRL2引起的细胞凋亡,通过抑制3-MA抑制NPRL2引起的自噬能够有效地促进结肠癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 nprl2 结肠肿瘤 自噬 凋亡
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RagA和Nprl2在果蝇肠道发育中的调节作用关系 被引量:1
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作者 牛春梅 管建文 +2 位作者 孟国强 周颖 韦有恒 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1747-1758,共12页
动物胃肠道是食物消化和营养吸收器官,对机体健康至关重要。果蝇与哺乳动物的肠道在细胞组成、遗传调控等方面高度相似,是研究肠道发育的良好模型。体外培养细胞中的研究发现,Nprl2通过作用于Rag GTPase,抑制雷帕霉素靶点复合物1(target... 动物胃肠道是食物消化和营养吸收器官,对机体健康至关重要。果蝇与哺乳动物的肠道在细胞组成、遗传调控等方面高度相似,是研究肠道发育的良好模型。体外培养细胞中的研究发现,Nprl2通过作用于Rag GTPase,抑制雷帕霉素靶点复合物1(target of rapamycin complex 1,TORC1)的活性,参与细胞代谢的调节。前期报道nprl2突变果蝇具有前胃增大、消化能力降低等肠道衰老相关表型。但对于Nprl2是否通过Rag GTPase调控肠道发育等方面尚不清楚。为了探究Rag GTPase在Nprl2调控果蝇肠道发育中的作用,本研究利用遗传杂交结合免疫荧光等方法对RagA敲减和nprl2突变果蝇的肠道形态、肠道细胞组成等方面进行研究。发现单独敲减RagA可以引起肠变粗、前胃增大等表型,敲减RagA能挽救nprl2突变体中肠道变细、分泌型细胞减少的表型,但并不能挽救nprl2突变体中前胃增大的表型。以上结果表明,RagA在肠道发育中发挥重要作用,Nprl2通过作用于Rag GTPase调节肠道细胞分化和肠道形态,但Nprl2对前胃发育和肠道的消化功能的调节可能通过不依赖于Rag GTPase的机制实现。 展开更多
关键词 果蝇 肠道 RagA nprl2突变体 发育
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NPRL2在结直肠癌中的抗肿瘤作用
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作者 何丽媛 陈晶 刘艾芸 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第4期361-364,共4页
结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是全球最常见的癌症类型之一,其预后不佳提示明确CRC发病机制的重要性。既往研究表明,CRC的形成发展是多基因的,涉及多阶段变化,其中癌基因突变和肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene,TSG)失活是促成CR... 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是全球最常见的癌症类型之一,其预后不佳提示明确CRC发病机制的重要性。既往研究表明,CRC的形成发展是多基因的,涉及多阶段变化,其中癌基因突变和肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene,TSG)失活是促成CRC的重要因素。目前已经发现,氮通透酶调节因子-2(nitrogen permease regulator-like-2,NPRL2)作为抑癌基因在CRC中表达下调。NPRL2通过调节细胞周期进而抑制CRC的发生、发展,并且可以促进CRC细胞的凋亡和自噬,增强CRC细胞对多种化疗药物的敏感性。体内实验进一步验证了NPRL2在CRC中抗肿瘤和增强对化疗药物敏感性的作用。通过研究NPRL2在CRC中的抗肿瘤作用,有助于我们发现新的治疗手段。 展开更多
关键词 nprl2 结直肠肿瘤 抗肿瘤
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NPRL3基因突变相关可变灶家族性局灶性癫痫3例患儿家系遗传学分析 被引量:1
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作者 杨柳 刘艳萍 +5 位作者 任纯明 郭松伟 曹睿明 李婷婷 梅道启 高丽 《中华实用诊断与治疗杂志》 2023年第2期189-194,共6页
目的分析3例可变灶家族性局灶性癫痫患儿临床资料及NPRL3基因突变情况。方法收集3例可变灶家族性局灶性癫痫患儿临床资料,采集3例患儿外周血行全外显子组测序;采集3例患儿及其父母、哥哥、姐姐外周血,采用Sanger测序或荧光定量PCR法验证... 目的分析3例可变灶家族性局灶性癫痫患儿临床资料及NPRL3基因突变情况。方法收集3例可变灶家族性局灶性癫痫患儿临床资料,采集3例患儿外周血行全外显子组测序;采集3例患儿及其父母、哥哥、姐姐外周血,采用Sanger测序或荧光定量PCR法验证NPRL3基因突变位点可能来源。结果病例1表现为过度运动性发作,病例2表现为痉挛性发作,病例3表现为全面强直-阵挛性发作。病例3头颅MRI提示左侧额上回皮质发育不良,余2例未见结构性病变。病例1、病例3患儿24 h视频脑电图显示发作间期双侧额极、额及前颞区棘波、棘慢波发放,病例2显示多灶性慢波及慢波夹杂棘波阵发。病例3头颅MRI显示左侧额上回皮质发育不良,PET-CT显示左侧额叶葡萄糖代谢减低,余2例头颅MRI未见明显结构性病变。3例患儿NPRL3基因均存在来自父亲或母亲一方的杂合突变,病例1为loss1(exon3-14)(all)外显子缺失,病例2为c.1270(exon12)C>T(p.Arg424Stop,145)无义突变,病例3为c.321(exon5)c.322(exon5)insC(p.Ser108Leufs*18)移码突变。病例1早期口服奥卡西平、拉莫三嗪,控制2年未发作,后期复发加用氯硝西泮、拉考沙胺,效果欠佳,后加用西罗莫司,发作次数减少40%;病例2给予促肾上腺皮质激素静脉滴注及丙戊酸、托吡酯、氨己烯酸口服治疗,仍有少量孤立性痉挛发作,发作次数减少70%;病例3口服抗癫痫药物控制差,行左侧额叶皮层切除术,之后口服丙戊酸、左乙拉西坦,癫痫发作控制。结论NPRL3基因突变相关可变灶家族性局灶性癫痫起病较早,发作频繁,发作形式多样,可伴局灶性皮质发育不良,常规抗癫痫治疗效果欠佳,mTORC1抑制剂及手术治疗可降低发作频率。 展开更多
关键词 可变灶家族性局灶性癫痫 儿童 nprl3基因 局灶性皮质发育不良
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