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NPM1突变在急性髓系白血病中的临床意义及治疗进展
1
作者 侯恩静(综述) 刘丽萍(校对) 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第14期743-747,共5页
核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin 1,NPM1)突变是成人急性髓系白血病(adult acute myeloid leukemia,AML)的核心分子标志,是监测白血病亚临床水平即微小残留病(minimal residual disease,MRD)的理想靶点,对疾病分型、治疗选择及预后评估具... 核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin 1,NPM1)突变是成人急性髓系白血病(adult acute myeloid leukemia,AML)的核心分子标志,是监测白血病亚临床水平即微小残留病(minimal residual disease,MRD)的理想靶点,对疾病分型、治疗选择及预后评估具有重要临床价值。本文整合近期研究进展,讨论靶向治疗、化疗联合CD33单抗及异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)的临床适用范围,强调MRD动态监测在优化长期管理中的价值。特别关注NPM1突变AML的耐药机制,如B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma 2,BCL-2)/髓系细胞白血病1(myeloid cell leukemia 1,MCL-1)失衡、代谢适应及中国人群(突变频率、共突变谱、治疗反应)的特点。本文旨在为临床医生提供NPM1突变的分层诊疗框架,同时为未来研究方向提供理论依据。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 npm1突变 危险分层 靶向治疗 微小残留病
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Menin抑制剂治疗NPM1突变急性髓系白血病的研究进展
2
作者 于晓达 李佳璟 +2 位作者 王安安 郭建刚 刘蓓 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第4期533-540,共8页
核仁磷酸蛋白1(NPM1)突变是急性髓系白血病(AML)最常见的突变之一,在合并FLT3内部串联重复(FLT3-ITD)和/或DNMT3A共突变或伴不良细胞遗传学等条件下会使原本较好的预后变差。近年来,研究发现靶向Menin-KMT2A复合物的多发性内分泌腺瘤蛋... 核仁磷酸蛋白1(NPM1)突变是急性髓系白血病(AML)最常见的突变之一,在合并FLT3内部串联重复(FLT3-ITD)和/或DNMT3A共突变或伴不良细胞遗传学等条件下会使原本较好的预后变差。近年来,研究发现靶向Menin-KMT2A复合物的多发性内分泌腺瘤蛋白(Menin)抑制剂在NPM1突变的AML(NPM1m-AML)中可以抑制致白血病基因HOX(homeotic gene)和MEIS1(myeloid ecotropic viral integration site 1)基因的过表达,体现出显著的抗白血病活性。本文将对新型小分子靶向药物Menin抑制剂在NPM1m-AML的作用机制、临床研究以及Menin抑制剂的耐药机制进行综述,希望为NPM1m-AML患者提供更有前景的治疗方案。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 Menin抑制剂 npm1突变 Menin-KMT2A复合物
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杯状核细胞AML-M1伴NPM1、GATA2突变1例
3
作者 徐道晶 朱海燕 于洁 《国际医药卫生导报》 2025年第6期1047-1049,共3页
急性白血病(acute leukemia,AL)按照系列归属分为急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)和急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)两大类。未分化型AML(AML-M1)是AML的一种亚型。AML-M1患者骨髓中没有分化的原始... 急性白血病(acute leukemia,AL)按照系列归属分为急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)和急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)两大类。未分化型AML(AML-M1)是AML的一种亚型。AML-M1患者骨髓中没有分化的原始粒细胞>90%,化疗缓解率低。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 npm1突变 GATA2突变 杯状细胞
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HLAⅠ类分子与急性髓细胞白血病伴NPM1突变和预后的关系
4
作者 李文君 刘爱喜 +2 位作者 陈瑶瑶 韩青汝 韩冰 《临床肿瘤学杂志》 2025年第3期244-250,共7页
目的探讨人白细胞抗原(HLA)Ⅰ类分子与急性髓细胞白血病(AML)伴核磷素(NPM1)突变和预后的关系。方法收集2018年1月至2021年12月间在解放军联勤保障部队第九六O医院诊治的106例NPM1突变AML患者以及90例NPM1突变阴性AML患者。另外,选取同... 目的探讨人白细胞抗原(HLA)Ⅰ类分子与急性髓细胞白血病(AML)伴核磷素(NPM1)突变和预后的关系。方法收集2018年1月至2021年12月间在解放军联勤保障部队第九六O医院诊治的106例NPM1突变AML患者以及90例NPM1突变阴性AML患者。另外,选取同时期60例与AML患者没有血缘关系且无血液病的健康志愿者作为健康对照组。通过聚合酶链反应-序列特异性引物法检测所有受试者的HLAⅠ类基因分型。随访记录患者总生存期(OS)。使用预测软件工具寻找NPM1衍生免疫肽。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存差异进行Log-rank检验。结果NPM1突变AML组患者HLAⅠ类等位基因A02、B07、B40和C07的频率显著低于健康对照组,且B07和C07频率显著低于NPM1突变阴性组(P<0.05)。与不表达HLAⅠ类特定等位基因(A02、B07、B40、C07)的AML患者比较,表达至少1种HLAⅠ类特定等位基因的患者死亡率更低(43.28%vs.79.49%,P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示NPM1突变AML中HLAⅠ类分子阳性患者的中位OS更长(P<0.001)。Cox风险比例回归模型分析显示FMS样酪氨酸激酶3基因内部串联重复(FLT3-ITD)阴性、HLA-B07表达是影响NPM1突变AML患者OS的独立因素(P<0.05)。仅在FLT3-ITD突变阴性患者中,HLA-B7和HLA-C7阳性组患者的生存预后明显优于阴性组(P<0.05)。预测软件工具发现B40和B07的候选NPM1衍生免疫肽。结论NPM1突变AML患者特定HLAⅠ类等位基因明显降低,且HLA-B07或C07抗原的存在与FLT3-ITD阴性的NPM1突变AML患者的更好生存相关。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 npm1突变 HLAⅠ类分子 预后
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Aurora-B介导NPM1蛋白磷酸化促进骨肉瘤细胞恶性表型的体外研究 被引量:1
5
作者 皮闻森 刘家明 +1 位作者 黄山虎 刘志礼 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第1期5-9,113,共6页
目的探讨Aurora-B介导NPM1(nucleophosmin1)蛋白磷酸化水平改变对骨肉瘤细胞恶性表型的影响。方法运用生物信息学数据库预测NPM1在肉瘤中的表达情况以及Aurora-B与NPM1的相互关系。构建重组慢病毒载体,获得沉默Aurora-B慢病毒(LV/ShAuro... 目的探讨Aurora-B介导NPM1(nucleophosmin1)蛋白磷酸化水平改变对骨肉瘤细胞恶性表型的影响。方法运用生物信息学数据库预测NPM1在肉瘤中的表达情况以及Aurora-B与NPM1的相互关系。构建重组慢病毒载体,获得沉默Aurora-B慢病毒(LV/ShAurora-B)、过表达NPM1慢病毒(LV/NPM1)和阴性对照慢病毒(LV/negative)。转染人源骨肉瘤细胞系143B及U2-OS细胞,分为Lv/ShAurora-B组、NC(LV/negative)组和LV/ShAurora-B+LV/NPM1共转染组。Western blot分别检测LV/ShAurora-B组和NC组中Aurora-B、磷酸化NPM1^(ser125)蛋白表达。采用CCK-8法检测3组细胞增殖情况,Wound healing法检测细胞迁移能力,Transwell invasion法检测细胞侵袭能力。结果生物信息学结果显示,NPM1在肉瘤中高表达以及NPM1高表达患者的预后较差,且NPM1存在丝氨酸和苏氨酸磷酸化位点,Aurora-B与NPM1之间可能存在磷酸化作用。Western blot结果显示,与NC组相比,LV/ShAurora-B组中Aurora-B和磷酸化NPM1^(ser125)蛋白的表达均降低(P<0.05),而NPM1蛋白差异无统计学意义(P>0.05)。体外表型实验显示,LV/ShAurora-B组细胞的增殖、迁徙和侵袭能力均低于NC组(P<0.05),且LV/ShAurora-B+LV/NPM1共转染组能部分恢复下调Aurora-B对骨肉瘤细胞恶性表型的抑制(P<0.05)。结论 Aurora-B通过介导NPM1蛋白磷酸化促进骨肉瘤细胞恶性表型。 展开更多
关键词 骨肉瘤 计算生物学 AURORA-B npm1 磷酸化npm1^ser125 恶性表型
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双重PCR检测急性髓系白血病FLT3-ITD和NPM1基因突变 被引量:10
6
作者 张泽川 鹿全意 +2 位作者 赵江宁 陈亚玫 李志鹏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期717-720,共4页
本研究旨在建立一种同时筛查FLT3-ITD突变和NPM1突变的检测方法。设计2对引物,分别扩增NPM1基因的外显子12和FLT3基因的外显子14、内含子14、外显子15,以覆盖几乎所有已知突变位点。对双重PCR体系的反应程序和引物浓度比例进行优化,将双... 本研究旨在建立一种同时筛查FLT3-ITD突变和NPM1突变的检测方法。设计2对引物,分别扩增NPM1基因的外显子12和FLT3基因的外显子14、内含子14、外显子15,以覆盖几乎所有已知突变位点。对双重PCR体系的反应程序和引物浓度比例进行优化,将双重PCR产物通过毛细管电泳分离,根据野生型产物和突变型产物的大小差异来判断突变存在与否并利用产物的峰面积对突变比例进行定量,并对突变阳性标本进行测序验证。结果表明,在93例标本中NPM1突变者17例(18.5%),FLT3-ITD突变者15例(16.3%),NPM1突变和FLT3-ITD突变双阳性6例。17例NPM1突变中7例M2、4例M4、5例M5、1例M6,其中10例男性、7例女性;有15例为A型,1例为B型,1例为Nm型;有1例CML急变为AML的标本中带有NPM1基因A型突变。15例FLT3-ITD阳性中1例M1、8例M2、2例M3、1例M4、3例M5,其中5例男性、10例女性。扩增产物测序结果进一步证明了该检测体系的准确性和可靠性。结论 :建立了同时筛查FLT3-ITD突变和NPM1突变的检测体系,该体系以基因组DNA为模板,具有方便、快捷、准确、可定量的优点。 展开更多
关键词 白血病 npm1基因 FLT3基因 内部串联重复 毛细管电泳
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正常核型急性髓系白血病NPM1、FLT3-ITD突变与外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比相关性研究 被引量:5
7
作者 苏龙 李薇 +7 位作者 崔久巍 谭业辉 杨岩 刘晓亮 喻萍 胡瑞萍 王丽莉 高素君 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期571-575,共5页
本研究旨在分析NPM1和FLT3-ITD突变与急性髓系白血病患者外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比的相关性。回顾分析我中心2009年1月至2011年12月份初治正常核型急性髓系白血病患者51例,其中男性22例,女性29例,中位年龄47岁(14-83岁)。采... 本研究旨在分析NPM1和FLT3-ITD突变与急性髓系白血病患者外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比的相关性。回顾分析我中心2009年1月至2011年12月份初治正常核型急性髓系白血病患者51例,其中男性22例,女性29例,中位年龄47岁(14-83岁)。采用聚合酶链式反应检测NPM1及FLT3-ITD突变状态。结果表明,与无NPM1突变患者相比,突变者初诊时外周血白细胞数较多(30.7×109/L vs 8.6×109/L,P=0.002);FLT3-ITD突变患者较无突变患者具有更多的外周血白细胞数(42.38×109/L vs 11.45×109/L,P=0.033)及更高的骨髓原始细胞百分比(74.0%vs 60.25%,P=0.036)。外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比在NPM1、FLT3-ITD无突变组、单独NPM1突变组、单独FLT3-ITD突变组到NPM1、FLT3-ITD双突变组逐步升高(均P<0.05)。白细胞数大于12.55×109/L的患者NPM1突变率明显升高(P=0.002),大于37.85×109/L者FLT3-ITD突变率明显升高(P=0.033);原始细胞比例大于72.25%的FLT3-ITD突变率明显升高(P=0.008)。NPM1突变患者首疗程完全缓解率(CR)明显高于无突变者(78.13%vs 40.0%,χ2=4.651,P=0.031)。结论:NPM1及FLT3-ITD突变患者白细胞计数及原始细胞比例大,提示NPM1与FLT3-ITD突变均可能促进白血病细胞增殖,且二者可能具有协同效应。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 正常核型 白细胞 原始细胞 npm1 FLT3-ITD突变
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急性髓细胞白血病NPM1和FLT3-ITD突变检测临床意义分析 被引量:6
8
作者 应逸 陈建兰 +4 位作者 王汉平 谢健晋 周薇 陈小卫 陈小燕 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第2期121-124,共4页
目的:研究核仁磷酸蛋白1(NPM1)FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复(ITD)突变在急性髓细胞白血病(AML)中发生的情况,并了解其临床特征及预后意义。方法:分别应用高分辨熔解曲线(HRM)和变性高效液相色谱技术(DHPLC)检测103例初诊AML... 目的:研究核仁磷酸蛋白1(NPM1)FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复(ITD)突变在急性髓细胞白血病(AML)中发生的情况,并了解其临床特征及预后意义。方法:分别应用高分辨熔解曲线(HRM)和变性高效液相色谱技术(DHPLC)检测103例初诊AML患者NPM1和FLT3-ITD突变情况,并结合临床资料进行分析。结果:103例初诊AML患者中,31例发现NPM1基因突变,20例发现FLT3-ITD突变,阳性率分别为30.1%和19.4%,而在核型正常组中所占的比例分别为47.6%(20/42)和26.2%(11/42)。FLT3-ITD突变型外周血白细胞计数高,t=2.21,P=0.037;骨髓原始细胞比例高,t=2.44,P=0.023;NPM1突变型亦表现为高外周血白细胞计数,t=2.24,P=0.034。在非M3患者中,NPM1突变型的CR与野生型差异无统计学意义,但第1次化疗的CR(76.9%)明显高于野生型患者(35.0%),χ2=12.78,P=0.000 35;FLT3-ITD突变型患者的CR为58.8%,野生型患者为82.6%,两者比较,χ2=4.48,P=0.034;FLT3-ITD突变型患者第1次化疗的CR为17.6%,而野生型患者为55.1%,两者比较,χ2=6.23,P=0.012。31例NPM1基因突变中有6例合并FLT3-ITD突变,NPM1+/FLT3-ITD-组的CR最高(85.0%),1年内RR率最低(17.6%);NPM1-/FLT3-ITD+组的CR最低(54.5%),1年内RR率最高(50.0%)。结论:NPM1和FLT3-ITD突变是AML患者常见的分子遗传学异常,与预后密切相关,可成为目前细胞遗传学预后分组的重要补充,对于指导AML患者的个体化治疗具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 基因 突变 npm1 FLT3 内部串联重复 白血病 髓样 急性
原文传递
急性髓系白血病NPM1基因突变的研究 被引量:6
9
作者 戴丹 张苏江 +5 位作者 乔纯 孙雪梅 钱思轩 徐卫 徐燕丽 李建勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期294-297,共4页
本研究旨在探讨急性髓系白血病(AML)患者NPM1基因突变情况及临床特征。采用PCR扩增产物直接测序法检测33例AML患者NPM1基因第12外显子的突变情况,了解NPM1基因突变阳性患者的临床特征。结果显示:33例AML患者中共检出8例(24.2%)具有NPM1... 本研究旨在探讨急性髓系白血病(AML)患者NPM1基因突变情况及临床特征。采用PCR扩增产物直接测序法检测33例AML患者NPM1基因第12外显子的突变情况,了解NPM1基因突变阳性患者的临床特征。结果显示:33例AML患者中共检出8例(24.2%)具有NPM1基因突变,其中M11例、M23例、M41例、M53例。19例正常核型AML患者中7例(36.8%)发生NPM1基因突变,明显高于异常核型组(14例中1例,7.1%)(p<0.05)。NPM1基因突变型患者骨髓原始细胞比例及外周血白细胞计数均高于野生型组(p值均<0.05)。结论:NPM1基因第12外显子的突变多见于正常核型AML患者,突变患者骨髓原始细胞比例及外周血白细胞数量增多。 展开更多
关键词 npm1基因突变 急性髓系白血病 DNA突变
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急性髓系白血病NPM1基因突变检测方法的研究 被引量:4
10
作者 李志鹏 张绚 +3 位作者 赵晓明 李庆阁 陈亚玫 鹿全意 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期999-1004,共6页
本研究旨在建立检测急性髓系细胞白血病(AML)患者NPM1基因突变的方法。针对NPM1基因突变集中区域设计引物/探针,建立高分辨熔解曲线方法(HRM)和等位基因特异PCR方法(AS-PCR),通过89份AML标本进行了临床评估,并采用毛细管电泳法(CE)和测... 本研究旨在建立检测急性髓系细胞白血病(AML)患者NPM1基因突变的方法。针对NPM1基因突变集中区域设计引物/探针,建立高分辨熔解曲线方法(HRM)和等位基因特异PCR方法(AS-PCR),通过89份AML标本进行了临床评估,并采用毛细管电泳法(CE)和测序法作为对照进行了验证。结果表明,通过上述4种方法共检出阳性标本17例(19.1%),其中A型突变15例,B型和Nm型突变各1例。上述方法中HRM法检测全面,灵敏度为5%,而AS-PCR法有一定的漏检,但灵敏度高达0.01%。结论:考虑到操作的难易程度,同时也结合临床样品的检测情况,HRM在临床上可法用于NPM1突变筛查,而AS-PCR法可用于后续的微小残留病定量检测。 展开更多
关键词 急性髓性细胞白血病 npm1基因 毛细管电泳 高分辨熔解曲线法 等位基因特异PCR
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正常核型急性髓系白血病NPM1基因突变的临床研究 被引量:6
11
作者 孙超 夏珺 +2 位作者 张苏江 李建勇 沈云峰 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第12期17-20,共4页
目的探讨正常核型急性髓系白血病(AML)患者核仁磷酸蛋白1(NPM1)基因突变发生情况,并了解其临床特征及预后。方法采用基因组DNA-PCR方法检测123例初发AML患者NPM1基因及正常核型AML患者FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因,直接测序法检测AML患者... 目的探讨正常核型急性髓系白血病(AML)患者核仁磷酸蛋白1(NPM1)基因突变发生情况,并了解其临床特征及预后。方法采用基因组DNA-PCR方法检测123例初发AML患者NPM1基因及正常核型AML患者FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因,直接测序法检测AML患者NPM1基因第12外显子的突变情况,琼脂糖电泳分析正常核型AML患者FLT3基因内部串联重复(ITD)突变。结果 123例AML患者中检出NPM1突变24例(19.5%),其中A型突变22例、B型突变1例、D型突变1例。57例正常核型中FLT3-ITD阳性10例,其中5例同时发生NPM1和FLT3-ITD两种突变。NPM1突变在正常核型中的发生率为40.3%(23/57),显著高于异常核型的2.1%(1/47)(P<0.01)。正常核型中NPM1基因突变者发病年龄高、缓解率高,但合并FLT3-ITD突变者缓解率低。结论 NPM1基因突变是AML尤其是正常核型AML患者常见的分子学异常,NPM1基因突变检测对指导AML患者治疗及评估预后有重要意义。 展开更多
关键词 npm1 白血病 髓系 急性 突变
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FLT3,NPM1,WT1,c-KIT基因突变在儿童急性髓细胞白血病的分布及临床意义 被引量:5
12
作者 周翾 李伟京 +5 位作者 骆燕辉 林巍 漆佩静 李斯丹 郑胡镛 吴敏媛 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2016年第3期147-152,161,共7页
目的探讨儿童急性髓细胞白血病(AML)中FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)、核仁磷酸蛋白(NPM1)、Wilms瘤基因(WT1)及c-KIT基因突变发生的频次,并分析其临床意义。方法利用PCR方法检测2005年1月-2011年11月首都医科大学附属北京儿童医院收治的儿童A... 目的探讨儿童急性髓细胞白血病(AML)中FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)、核仁磷酸蛋白(NPM1)、Wilms瘤基因(WT1)及c-KIT基因突变发生的频次,并分析其临床意义。方法利用PCR方法检测2005年1月-2011年11月首都医科大学附属北京儿童医院收治的儿童A ML患者的FLT3、NPM1、WT1及c-KIT基因突变情况,分析这些突变与临床特征、细胞遗传学改变之间的关系及对预后的影响。结果 256例患儿中FLT3、NPM1、WT1及c-KIT基因突变检出率分别为12.5%、30.1%、4.7%及12.1%。FLT3及WT1阳性的非M3型AML患儿第一疗程完全缓解率(CR)降低(P=0.027,P=0.014)。单纯FLT3-ITD阳性的非M3型AML患儿无复发生存时间(RFS)及无事件生存时间(EFS)最低,单纯NPM1阳性或无基因突变的患儿RFS及EFS最高(P<0.001)。结论 FLT3、NPM1、WT1及c-KIT基因突变在儿童AML患者中的分布及临床意义有其独特性,加强对这四种基因突变的研究与认识利于儿童AML准确分层治疗,从而提高长期生存率。 展开更多
关键词 FLT3 npm1 WT1 C-KIT 儿童 急性髓细胞白血病
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猪新基因NPM1的克隆、序列分析与染色体定位 被引量:2
13
作者 唐中林 李勇 +4 位作者 赵书红 刘榜 樊斌 朱猛进 李奎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期105-109,共5页
克隆了猪NPM1基因的cDNA和第4内含子序列,并利用生物信息学方法进行验证。所得cDNA序列全长1 195 bp且包含一个完整的开放阅读框,编码294个氨基酸。内含子序列长300 bp,遵循GT/AG剪接法则。序列分析表明,该基因与已报道的人、大鼠和小... 克隆了猪NPM1基因的cDNA和第4内含子序列,并利用生物信息学方法进行验证。所得cDNA序列全长1 195 bp且包含一个完整的开放阅读框,编码294个氨基酸。内含子序列长300 bp,遵循GT/AG剪接法则。序列分析表明,该基因与已报道的人、大鼠和小鼠等物种的NPM1基因高度同源,氨基酸序列同源性分别为95%、91%和91%。该基因编码的蛋白具有Nucleoplasmin保守功能域。用体细胞杂种板将该基因定位在猪16号染色体q21区段,辐射杂种板定位结果表明该基因与猪16号染色体上SW977标记紧密连锁。 展开更多
关键词 npm1基因 克隆 序列分析 染色体定位
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一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立 被引量:3
14
作者 简正伟 徐芬 +2 位作者 石淙 万腊根 张长林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期1058-1062,共5页
本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3... 本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3'末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM1不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法。通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性。结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D 5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致。ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103copies/ml-109copies/ml,其灵敏度为0.01%,而当突变体含量低于10%时采用直接测序则检测不出突变。结论:本研究建立了一种可以检测NPM1 4种高频突变的ARMS-PCR方法。该方法灵敏度高,可以检出95%以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法。 展开更多
关键词 npm1突变体 ARMS-PCR方法 急性髓系白血病
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肺腺癌c-Src及核仁磷蛋白/B23(NPM1)蛋白的高表达与化疗疗效负相关 被引量:6
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作者 贺兼斌 向志 +2 位作者 肖集文 肖海波 刘理静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1378-1381,共4页
目的观察c-Src蛋白及核仁磷蛋白/B23(NPM1)在肺腺癌组织中的表达并探讨与化疗疗效的关系。方法选择2012-10-10/2015-06-30期间怀化市第一人民医院确诊的肺腺癌患者的肿瘤标本共107例,采用免疫组织化学染色方法检测c-Src蛋白和NPM1蛋白... 目的观察c-Src蛋白及核仁磷蛋白/B23(NPM1)在肺腺癌组织中的表达并探讨与化疗疗效的关系。方法选择2012-10-10/2015-06-30期间怀化市第一人民医院确诊的肺腺癌患者的肿瘤标本共107例,采用免疫组织化学染色方法检测c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达情况,分析c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达与肺腺癌发生、发展的关系,其中Ⅲ-Ⅳ期患者55例予以吉西他滨联合顺铂方案规则化疗4疗程,探讨c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达与化疗疗效的关系。结果 c-Src蛋白和NPM1蛋白在肺腺癌组织中皆为阳性表达,临床分期越高,c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达越高,同时c-Src蛋白和NPM1蛋白在肿瘤细胞的表达随分化程度的升高而降低,化疗疗效随c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达升高而降低。结论高表达c-Src、NPM1的肺腺癌化疗敏感性较差,高表达c-Src和NPM1可能与肺腺癌低分化有关。 展开更多
关键词 C-SRC 核仁磷蛋白/B23(nucleophosmin/B23 npm1) 肺腺癌 化学(药物)疗法
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核型正常的NPM1突变阳性的急性髓系白血病的免疫表型与临床特征分析 被引量:3
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作者 刘艳荣 赖悦云 +10 位作者 常艳 阮国瑞 秦亚溱 王亚哲 主鸿鹄 石红霞 江滨 江浩 江倩 郝乐 李金兰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1385-1389,共5页
本研究在形态学亚型构成比例相似情况下比较具有正常核型的NPM1基因突变阳性的AML(NPM1m+AML)与突变阴性的AML(NPM1m-AML)非特指型(NOS)间的免疫表型、临床、细胞遗传学和基因表达特征。利用多参数流式细胞术进行免疫分型检测;定量PCR... 本研究在形态学亚型构成比例相似情况下比较具有正常核型的NPM1基因突变阳性的AML(NPM1m+AML)与突变阴性的AML(NPM1m-AML)非特指型(NOS)间的免疫表型、临床、细胞遗传学和基因表达特征。利用多参数流式细胞术进行免疫分型检测;定量PCR方法检测NPM1基因A、B、D型突变及多种基因;正常核型的NPM1m+AML并进行免疫分型患者共77例,AML NOS患者55例。结果表明:NPM1m+AML患者以女性为主,WBC和血小板计数、WT1表达水平、FLT3-ITD突变阳性率和第一疗程诱导缓解率明显高于NPM1m-AML(P<0.05)。在免疫表型方面共有10个抗原显著不同,主要为早期分化标志CD34、HLA-DR、CD117、CD38和淋系标志CD4、CD7、CD19、CD2的低表达及CD123、CD33的高表达。进一步分析NPM1m+AML中M1/2和M4/5患者的结果显示,M1/2患者保留了女性为主及WBC数和WT1表达较高的特点(P<0.05),免疫表型共有9个抗原的阳性细胞数明显不同(P<0.05),主要为包括HLA-DR内的单核细胞标志及CD7在M4/5中高表达及CD117的低表达。结论:在形态学亚型构成比例相似及正常核型情况下,NPM1m+AML高表达WT1,且具有较高的CR率,免疫表型主要表现为早期祖细胞标志、淋系标志的低表达和CD33、CD123的高表达。在NPM1m+AML中只有M4/5患者高表达单核细胞相关标志。 展开更多
关键词 基因突变 npm1 急性髓细胞白血病 免疫表型
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伴NPM1突变急性髓系白血病二代测序突变基因谱与MICM分型特征关联性分析 被引量:2
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作者 王彪 凌云 +4 位作者 戴莉 顾伟英 张修文 邢珊珊 李海乾 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期56-64,共9页
目的:分析伴NPM1突变(NPM1^(mut))急性髓系白血病(AML)患者二代测序(NGS)法检测的突变基因谱与MICM特征间的关系,解释NPM1^(mut)AML的临床生物学异质性。方法:收集苏州大学附属第三医院、南京医科大学附属常州第二人民医院和浙江医院收... 目的:分析伴NPM1突变(NPM1^(mut))急性髓系白血病(AML)患者二代测序(NGS)法检测的突变基因谱与MICM特征间的关系,解释NPM1^(mut)AML的临床生物学异质性。方法:收集苏州大学附属第三医院、南京医科大学附属常州第二人民医院和浙江医院收治的成人初诊AML患者,选取NGS资料完整的NPM1^(mut)患者238例,采用χ^(2)检验和非参数检验分析NGS突变基因谱与常规MICM参数间的分布关联性。结果:全部患者共检出240个NPM1突变事件,其中10个(10/240,4.2%)为错义突变,均不累及W288或W290位点。这10例错义突变事件仅见于NPM1^(mut)/FLT3-ITD^(-)者,其中9例(90%)同时合并AML亚型定义的细胞遗传学或分子学异常,且全部为低危(7例)或高危(2例)组。NPM1^(mut)/FLT3-ITD^(+)者NPM1^(mut)仅为插入/缺失(indel)突变。NPM1^(mut)/FLT3-ITD^(-)者高危+低危组异常核型发生率显著高于NPM1^(mut)/FLT3-ITD^(+)者(6.4%vs.0,P=0.031)。NPM1^(mut)/FLT3-ITD^(+)者CD34和CD7阳性率均显著高于NPM1^(mut)/FLT3-ITD^(-)者(CD34:47.9%vs.20.6%,P<0.001;CD7:61.5%vs.29.9%,P<0.001)。Logistic多因素分析显示,FLT3-ITD独立预测CD34^(+)(OR=5.29,95%CI:2.64-10.60,P<0.001)和CD7^(+)(OR=3.47,95%CI:1.79-6.73,P<0.001)。Ras通路突变独立预测HLA-DR^(+)(OR=4.05,95%CI:1.70-9.63,P=0.002),KRAS突变独立预测MPO^(-)(OR=0.18,95%CI:0.05-0.62,P=0.007)。TET2/IDH1突变独立预测CD34^(-)(OR=0.26,95%CI:0.11-0.62,P=0.002)、CD7^(-)(OR=0.30,95%CI:0.14-0.62,P=0.001)和MPO^(+)(OR=3.52,95%CI:1.48-8.38,P=0.004)。DNMT3A-R882独立预测HLA-DR^(+)(OR=13.41,95%CI:4.56-39.45,P<0.001)和CD7^(+)(OR=3.59,95%CI:1.80-7.16,P<0.001),DNMT3A突变独立预测MPO^(-)(OR=0.35,95%CI:1.48-8.38,P=0.004)。结论:NPM1^(mut)AML共存FLT3-ITD预测CD34^(+)和CD7^(+),共存Ras通路突变预测HLA-DR^(+)和MPO^(-),共存TET2/IDH1突变预测CD34^(-)、CD7^(-)和MPO^(+),共存DNMT3A突变预测HLA-DR^(+)、CD7^(+)和MPO^(-),这为患者免疫表型异质性提供了部分机制解释。 展开更多
关键词 npm1 FLT3-ITD 急性髓系白血病 免疫表型 二代测序
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NPM1突变急性髓系白血病二代测序突变基因谱及共存互斥相关性分析 被引量:2
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作者 戴莉 王志林 +4 位作者 邱国强 吴义存 张修文 邢珊珊 王彪 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1733-1740,共8页
目的:分析NPM1突变(NPM1^(mut))急性髓系白血病(AML)患者二代测序(NGS)检测的突变基因谱及其共存互斥关系,以解释NPM1^(mut)AML的临床生物学异质性。方法:收集238例成人初诊NPM1^(mut)患者基于112种血液病相关基因的NGS资料,采用χ^(2)... 目的:分析NPM1突变(NPM1^(mut))急性髓系白血病(AML)患者二代测序(NGS)检测的突变基因谱及其共存互斥关系,以解释NPM1^(mut)AML的临床生物学异质性。方法:收集238例成人初诊NPM1^(mut)患者基于112种血液病相关基因的NGS资料,采用χ^(2)检验和非参数检验分析突变谱基因间分布相关性。结果:全部NPM1^(mut)患者均检出至少1个共存突变。包括NPM1^(mut),中位数突变基因个数/每例为4.5 (2-14)个。其中NPM1^(mut)/FLT3-ITD;者突变基因个数为5.0 (2-10)个,多于NPM1^(mut)/FLT3-ITD;者[4.0(2-14)个],但两者间无统计学差异(P=0.378)。全部238例NPM1^(mut)患者共检出240例NPM1突变事件,其中10个(10/240,4.2%)为错义突变,且均见于NPM1^(mut)/FLT3-ITD;者。这些错义突变绝大多数(9/10,90%)同时合并AML亚型定义的细胞遗传学或分子学异常,且均为低危(7例)或高危组(2例)。分析相对常见(突变率>5%)的NPM1^(mut)共存突变基因谱,最常见的为DNMT3A(104例,43.7%),其次为FLT3-ITD(95例,39.9%)和FAT1(57例,23.9%)。FLT3-ITD与DNMT3A间呈显著性突变共存(P=0.005)。FLT3-ITD与FLT3-nonITD(P<0.001)、NRAS(P<0.001)、PTPN11(P=0.017)以及IDH1(P=0.005)间呈显著性突变排斥,与KRAS间呈临界意义突变排斥倾向(P=0.073)。FLT3-nonITD与KRAS间(P=0.035)、NRAS与KRAS(P=0.008)和PTPN11(P=0.039)间显著性突变共存。结论:阐述NPM1^(mut)患者的临床预后时,应区别对待相对少见的错义突变类型。检测NPM1^(mut)AML突变基因谱全貌和了解突变间共存关系,为患者生物学多样性和临床异质性提供了机制解释。 展开更多
关键词 npm1 FLT3-ITD 急性髓系白血病 二代测序 突变
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过表达突变的NPM1基因对THP-1白血病细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 覃凤娴 邵会媛 +4 位作者 陈先春 谭诗 张慧娟 肖玲 张伶 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第3期251-256,共6页
目的探讨核仁磷酸蛋白基因(NPM1)突变对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法将携带NPM1 A型突变(NPM1 mA)的重组质粒载体pEGFPC1-NPM1 mA转染白血病THP-1细胞系,构建稳定表达NPM1 mA蛋白的细胞株(THP-1 mA),同时设立空载体转染组(THP-1 C1... 目的探讨核仁磷酸蛋白基因(NPM1)突变对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法将携带NPM1 A型突变(NPM1 mA)的重组质粒载体pEGFPC1-NPM1 mA转染白血病THP-1细胞系,构建稳定表达NPM1 mA蛋白的细胞株(THP-1 mA),同时设立空载体转染组(THP-1 C1)和未处理组(THP-1)为对照。MTT实验观察细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期和凋亡;RT-PCR和Western blot分别检测细胞凋亡相关蛋白(BAX和BCL-2)mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组相比较,实验组THP-1 mA细胞体外增殖能力明显增强(P<0.05),S期细胞比例明显增高(P<0.05),G1期细胞比例显著减低(P<0.05);而3组细胞凋亡率无显著差异,BAX,BCL-2的mRNA和蛋白表达以及BAX/BCL-2比值亦未见明显改变。结论 NPM1突变基因能够促进白血病细胞的体外增殖能力,而对白血病细胞凋亡无显著影响。 展开更多
关键词 npm1突变 白血病 THP-1细胞系 增殖 凋亡
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急性髓系白血病NPM1基因突变研究 被引量:7
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作者 陈华英 鹿全意 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期258-262,共5页
核仁磷酸蛋白(NPM1)又称B23、N038,是位于核仁颗粒区的一种在各种类型的细胞中广泛表达的多功能蛋白质。目前的多项研究发现,NPM1突变在急性髓系白血病(AML)中,尤其是在正常核型AML(nk-AML)中检出率最高的一种分子遗传学异常。NPM1突变... 核仁磷酸蛋白(NPM1)又称B23、N038,是位于核仁颗粒区的一种在各种类型的细胞中广泛表达的多功能蛋白质。目前的多项研究发现,NPM1突变在急性髓系白血病(AML)中,尤其是在正常核型AML(nk-AML)中检出率最高的一种分子遗传学异常。NPM1突变是AML一类特殊的亚群,具有相对独特的临床特点,且是AML独立的预后良好的指标。NPM1突变的研究对AML患者诊断、治疗及预后判断具有重要的临床意义。本文综述近年来AML中NPM1基因突变的发现,包括NPM1基因结构与生理功能,AML中NPM1基因突变及NPM1基因突变检测方法等问题。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 npm1 基因突变
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