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Streptomyces sp.NO1W98中杀黑星菌素的分离和生物合成基因簇的鉴定
1
作者
张少飞
张园
+1 位作者
申传璞
陈奇
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第11期2461-2474,共14页
【目的】分离Streptomyces sp.NO1W98中的杀黑星菌素并鉴定其生物合成基因簇。【方法】利用有机溶剂萃取法对Streptomyces sp.NO1W98放大规模发酵产物进行提取;以正向、反向色谱柱层析进行化合物的分离纯化;借助波谱学手段进行单体化合...
【目的】分离Streptomyces sp.NO1W98中的杀黑星菌素并鉴定其生物合成基因簇。【方法】利用有机溶剂萃取法对Streptomyces sp.NO1W98放大规模发酵产物进行提取;以正向、反向色谱柱层析进行化合物的分离纯化;借助波谱学手段进行单体化合物的结构鉴定;采用Illumina Hiseq技术进行基因组序列测定,对得到的序列进行生物信息学分析、注释并定位杀黑星菌素的生物合成基因簇vtd,利用基于PCR-targeting的遗传操作系统构建vtd内相关基因的阻断突变株,同时利用pSET152AKE进行基因回补,并分析与野生菌株的发酵产物差异。【结果】从NO1W98发酵产物提取物中初步分离鉴定了2个大环内酯类化合物杀黑星菌素A(1)和B(2);NO1W98的基因组大小约为11.6 Mb,蕴涵49个次级代谢产物生物合成基因簇,其中scaffold 3上的Region 3.3可能负责杀黑星菌素的生物合成;基因阻断和回补实验初步鉴定了杀黑星菌素的生物合成基因簇,包含6个骨架基因、5个转运基因、2个调控基因以及9个后修饰基因。【结论】杀黑星菌素的分离、结构鉴定和基因簇的鉴定以及生物合成途径的推导为其遗传改造和工程菌株的构建奠定了分子基础。
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关键词
STREPTOMYCES
sp.
no1w98
杀黑星菌素
基因簇
PCR-targeting
生物合成途径
原文传递
题名
Streptomyces sp.NO1W98中杀黑星菌素的分离和生物合成基因簇的鉴定
1
作者
张少飞
张园
申传璞
陈奇
机构
淮北师范大学生命科学学院
安徽医科大学生命科学学院
安徽医科大学药学院
中国科学院南海海洋研究所
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第11期2461-2474,共14页
基金
国家自然科学基金(41806158)
广东省海洋药物重点实验室开放课题基金
中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室开放课题基金(2018011007)
文摘
【目的】分离Streptomyces sp.NO1W98中的杀黑星菌素并鉴定其生物合成基因簇。【方法】利用有机溶剂萃取法对Streptomyces sp.NO1W98放大规模发酵产物进行提取;以正向、反向色谱柱层析进行化合物的分离纯化;借助波谱学手段进行单体化合物的结构鉴定;采用Illumina Hiseq技术进行基因组序列测定,对得到的序列进行生物信息学分析、注释并定位杀黑星菌素的生物合成基因簇vtd,利用基于PCR-targeting的遗传操作系统构建vtd内相关基因的阻断突变株,同时利用pSET152AKE进行基因回补,并分析与野生菌株的发酵产物差异。【结果】从NO1W98发酵产物提取物中初步分离鉴定了2个大环内酯类化合物杀黑星菌素A(1)和B(2);NO1W98的基因组大小约为11.6 Mb,蕴涵49个次级代谢产物生物合成基因簇,其中scaffold 3上的Region 3.3可能负责杀黑星菌素的生物合成;基因阻断和回补实验初步鉴定了杀黑星菌素的生物合成基因簇,包含6个骨架基因、5个转运基因、2个调控基因以及9个后修饰基因。【结论】杀黑星菌素的分离、结构鉴定和基因簇的鉴定以及生物合成途径的推导为其遗传改造和工程菌株的构建奠定了分子基础。
关键词
STREPTOMYCES
sp.
no1w98
杀黑星菌素
基因簇
PCR-targeting
生物合成途径
Keywords
Streptomyces sp.
no1w98
venturicidins
gene cluster
PCR-targeting
biosynthetic pathway
分类号
R914 [医药卫生—药物化学]
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Streptomyces sp.NO1W98中杀黑星菌素的分离和生物合成基因簇的鉴定
张少飞
张园
申传璞
陈奇
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
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