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miR-199a-3p/Nme2在TGF-β1信号通路中的作用分析 被引量：3
1
作者 刘晓雯 吴道兵 +3 位作者 刘智勇 周世华 段红艳 李丹 《激光生物学报》 CAS 2016年第1期46-51,共6页
通过microRNA芯片技术在小鼠GC-1 spg细胞中筛选发现microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)受转化生长因子TGF-β1调节。为了进一步探讨二者的关系,通过基因克隆与载体构建技术、双荧光素酶报告基因检测及定量PCR实验,发现miR-199a-3p靶向识别... 通过microRNA芯片技术在小鼠GC-1 spg细胞中筛选发现microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)受转化生长因子TGF-β1调节。为了进一步探讨二者的关系,通过基因克隆与载体构建技术、双荧光素酶报告基因检测及定量PCR实验,发现miR-199a-3p靶向识别肿瘤转移抑制基因2(Nme2)的3'非编码区(UTR)序列,且正向调控Nme2的表达。利用TGF-β1处理GC-1 spg细胞后,结果显示Nme2和miR-199a-3p在mRNA水平的表达均显著上调;进一步将miR-199a-3p和TGF-β1双重作用于GC-1 spg细胞后,结果表明Nme2的表达会明显增强,而且在TGF-β1通路中,miR-199a-3p被抑制的部分功能可能会被Nme2补偿。综上,miR-199a-3p对Nme2基因具有直接靶向识别和调控作用,且在参与TGF-β1信号通路的生物学效应中,二者在功能上相互关联。 展开更多
关键词 miR-199a-3p nme2 TGF-β1信号通路
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Nme2基因在畸形精子症中的作用分析
2
作者 刘晓雯 吴道兵 +2 位作者 荣卓献 刘智勇 李丹 《生命科学研究》 CAS CSCD 2016年第1期21-24,35,共5页
为了探讨Nme2(metastasis suppressor non-metastatic 2)基因在男性生殖中的作用,利用GEO(gene expression omnibus,GEO)基因芯片数据库对Nme2在精子发生中的表达情况进行数据挖掘和分析,通过MTT(5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)和P... 为了探讨Nme2(metastasis suppressor non-metastatic 2)基因在男性生殖中的作用,利用GEO(gene expression omnibus,GEO)基因芯片数据库对Nme2在精子发生中的表达情况进行数据挖掘和分析,通过MTT(5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)和PI-Hoechst实验构建过氧化氢诱导的GC-1 spg细胞氧化损伤模型,荧光定量PCR技术检测氧化损伤分子OGG1(8-oxoguanine DNA glycosylase),ALDH2(aldehyde dehydrogenase 2family)以及Nme2的表达。发现Nme2在不同类型生精细胞中差异性表达,在畸形精子中的表达显著降低;进一步研究发现Nme2在细胞氧化损伤过程中表达上调。结果表明Nme2与畸形精子症相关,其作用机制可能通过应答氧化损伤信号来实现。 展开更多
关键词 nme2 精子发生 畸形精子 氧化损伤
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Nme2基因参与小鼠基质细胞蜕膜化过程
3
作者 张雪 张爽 +5 位作者 陈雪梅 刘学庆 何俊琳 王应雄 丁裕斌 付利娟 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期965-969,共5页
目的:检测Nme2(nucleoside diphosphate kinase 2)基因在小鼠早期妊娠和人工诱导蜕膜化的子宫内膜组织中的表达规律;探究Nme2基因与子宫基质细胞蜕膜化的相关性。方法:利用免疫组织化学、Western blot和实时荧光定量PCR(q RTPCR)分别检... 目的:检测Nme2(nucleoside diphosphate kinase 2)基因在小鼠早期妊娠和人工诱导蜕膜化的子宫内膜组织中的表达规律;探究Nme2基因与子宫基质细胞蜕膜化的相关性。方法:利用免疫组织化学、Western blot和实时荧光定量PCR(q RTPCR)分别检测小鼠妊娠第5天着床点(D5IS)、着床旁(D5IIS),D6IS、D6IIS、D8IS、D8IIS及人工诱导蜕膜化模型小鼠子宫内膜中Nme2的表达定位,m RNA和蛋白质水平的表达水平。结果:小鼠D5、D6、D8子宫内膜中着床点Nme2基因的m RNA和蛋白水平的表达明显高于着床旁;免疫组织化学结果显示Nme2表达定位表达于D5着床点的初级蜕膜区(primary decidua region,PDZ)、D6和D8着床点的次级蜕膜区(secondary decidua region,SDZ);人工诱导蜕膜化模型中,Nme2基因的m RNA和蛋白质水平在诱导组的表达明显高于对照组。结论:Nme2基因的表达上调与小鼠基质细胞的蜕膜化过程相关。 展开更多
关键词 子宫内膜 蜕膜化 nme2
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禽源NME/NM23核苷二磷酸激酶2(NME2)基因的克隆及表达鉴定 被引量：1
4
作者 谢丽基 谢芝勋 +8 位作者 王盛 黄娇玲 邓显文 谢志勤 罗思思 曾婷婷 张艳芳 张民秀 范晴 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第4期113-116,共4页
参照GenBank中禽源核苷二磷酸激酶2(NME2)基因序列,设计了NME2基因的特异性引物。采用RT-PCR扩增NME2基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-NME2。将构建好的重组质粒pEF1α-Myc-NME2转染DF1细胞后,采... 参照GenBank中禽源核苷二磷酸激酶2(NME2)基因序列,设计了NME2基因的特异性引物。采用RT-PCR扩增NME2基因,经双酶切后克隆到真核表达载体pEF1α-Myc,得到重组质粒pEF1α-Myc-NME2。将构建好的重组质粒pEF1α-Myc-NME2转染DF1细胞后,采用间接免疫荧光和Western blot技术对目的蛋白进行验证。结果表明,Myc-NME2融合蛋白在DF1细胞内得到了正确表达。本研究为后续研究禽源NME2基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 NME/NM23核苷二磷酸激酶2 克隆 表达
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茂基烷氧基稀土化合物[(MeC_5H_4)_2Ln(μ-OCH_2CH_2NMe_2)]_2的合成、晶体结构及催化ε-己内酯开环聚合 被引量：1
5
作者 邓明宇 周玉芳 +2 位作者 姚英明 沈琪 翁林红 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期626-630,共5页
将N,N 二甲基乙醇胺按1∶1的摩尔比与三(甲基环戊二烯)稀土化合物在四氢呋喃(THF)中反应,合成了含N官能基的茂基烷氧基稀土化合物[(MeC5H4)2Ln(μ OCH2CH2NMe2)]2(Ln=Sm,Y,Nd)。产物经元素分析和红外表征,并测定了钐化合物的晶体结构。... 将N,N 二甲基乙醇胺按1∶1的摩尔比与三(甲基环戊二烯)稀土化合物在四氢呋喃(THF)中反应,合成了含N官能基的茂基烷氧基稀土化合物[(MeC5H4)2Ln(μ OCH2CH2NMe2)]2(Ln=Sm,Y,Nd)。产物经元素分析和红外表征,并测定了钐化合物的晶体结构。结果表明,该化合物具有二个不对称氧桥的双分子结构并存在着由氮原子向中心金属钐经分子内配位而形成的三环骨架,中心金属钐的配位数是九,整个分子呈中心对称。这类配合物对ε 己内酯开环聚合显示良好的催化活性。 展开更多
关键词 茂基烷氧基稀土化合物 [MeC5H4)2Ln(μ-OCH2CH2nme2)]2 合成 氮官能化烷氧化合物 晶体结构 Ε-己内酯 开环聚合反应 催化活性
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Hf(NMe_2)_4催化下芳香胺与丙烯酸叔丁酯的氮杂迈克加成反应
6
作者 王凯 李玉峰 +4 位作者 潘毅 陈强 庄韦 冯美丽 朱红军 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期517-520,共4页
研究了以Hf(NMe2)4为催化剂的芳香胺与丙烯酸叔丁酯的氮杂迈克加成反应,讨论了催化反应过程中催化剂用量,反应温度,以及芳胺取代基对反应收率的影响。利用该方法合成了6种取代的氮杂加成产物,并对反应条件进行优化,使收率在18～63%之间... 研究了以Hf(NMe2)4为催化剂的芳香胺与丙烯酸叔丁酯的氮杂迈克加成反应,讨论了催化反应过程中催化剂用量,反应温度,以及芳胺取代基对反应收率的影响。利用该方法合成了6种取代的氮杂加成产物,并对反应条件进行优化,使收率在18～63%之间。研究发现,芳香胺上取代基的给电子能力越强,反应收率越高,产物结构经1H NMR,13C NMR表征,证明为目标产物。 展开更多
关键词 氮杂迈克加成反应 Hf(nme2)4 催化 合成
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鼠源肿瘤转移抑制基因2的基因特征及亚细胞定位
7
作者 卢炳州 刘永杰 +2 位作者 张克山 杨孝朴 郑海学 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期644-648,共5页
运用蛋白质组学技术发现口蹄疫病毒(FMDV)感染BHK21细胞致其肿瘤转移抑制基因2(NME2)蛋白上调表达,NME2基因在细胞增殖、生长、黏附和分化、细胞凋亡活动中发挥重要功能,蛋白质功能的发挥与其在亚细胞的定位密切相关。目前,为了解鼠源N... 运用蛋白质组学技术发现口蹄疫病毒(FMDV)感染BHK21细胞致其肿瘤转移抑制基因2(NME2)蛋白上调表达,NME2基因在细胞增殖、生长、黏附和分化、细胞凋亡活动中发挥重要功能,蛋白质功能的发挥与其在亚细胞的定位密切相关。目前,为了解鼠源NME2的基因特征及其在BHK21中的亚细胞定位,笔者从BHK21细胞中克隆了鼠源NME2基因并进行了序列测定,比较分析了11种不同物种间NME2基因特征,建立了相应的系统进化树,构建了NME2真核表达质粒,转染BHK21激光共聚焦显微观察其亚细胞定位。结果发现,每个物种的NME2基因特征都有差异,且有一定的遗传进化距离,鼠源NME2基因在BHK21细胞中主要定位于细胞核。研究结果为了解不同物种间NME2基因的差异及其在FMDV感染BHK21细胞中的作用提供了依据。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 肿瘤转移仰制基因2 基因特征 亚细胞定位
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