外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化 被引量：7

1

作者 张金平 张雷 +4 位作者 王惠娟 王多 赵昱 尹青 赵春芳 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期725-729,共5页

目的:构建人Nkx2-5基因融合绿色荧光蛋白真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,探讨外源性Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化的作用。方法:以真核表达质粒pEFSA-HA-Nkx2-5为模板,PCR扩增得到人Nkx2-5基因,将目的片段亚克隆到pEGFP-N1载体,鉴定正... 目的:构建人Nkx2-5基因融合绿色荧光蛋白真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,探讨外源性Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化的作用。方法:以真核表达质粒pEFSA-HA-Nkx2-5为模板,PCR扩增得到人Nkx2-5基因,将目的片段亚克隆到pEGFP-N1载体,鉴定正确。将重组质粒pEGFP-N1-Nkx2-5以脂质体法转染P19细胞,G418筛选2周,聚集4d,贴壁培养16d。以免疫细胞化学检测desmin、α-sarcomeric actin和cardiac Troponin T(cTnT)的表达。结果:将Nkx2-5基因正确插入pEGFP-N1载体,外源表达Nkx2-5基因可使P19细胞在无诱导剂、聚集条件下表达desmin、α-sarcomeric actin和cTnT蛋白。结论:成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化。 展开更多

关键词 nkx2-5 质粒构建 P19细胞 基因转染 心肌分化

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Nkx2-5基因诱导P19细胞分化中心肌标志物的表达 被引量：5

2

作者 张金平 王慧娟 +5 位作者 史玉兰 王立轩 赵昱 郭艳红 赵春芳 张雷 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2658-2662,共5页

目的研究同源框基因Nkx2-5在心肌发生中的作用。方法实验分转染组和未转染组,转染组细胞为稳定表达Nkx2-5的P19细胞,未转染组细胞为P19细胞。两组细胞悬浮培养4d,形成聚集体后贴壁培养,于贴壁培养的4、8、12、16d,免疫细胞化学检测α横... 目的研究同源框基因Nkx2-5在心肌发生中的作用。方法实验分转染组和未转染组,转染组细胞为稳定表达Nkx2-5的P19细胞,未转染组细胞为P19细胞。两组细胞悬浮培养4d,形成聚集体后贴壁培养,于贴壁培养的4、8、12、16d,免疫细胞化学检测α横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin,α-SA)和心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)的表达;RT-PCR检测GATA-4、α-肌球蛋白重链(α-myosin heavy chain,α-MHC)、心房利钠因子(atrial natriuretic factor,ANF)基因的表达。结果转染组α-SA和cTnT两种蛋白在聚集体贴壁的8、12、16d出现表达,表达量有增高趋势;16d与8d比有显著差异(P<0.01);RT-PCR结果显示:转染组GATA-4在贴壁培养的4d有表达,8、12d表达逐渐增多,16d时表达有所下降。α-MHC和ANF在贴壁培养的8d有表达,12d和16d时表达逐渐增多。统计结果表明GATA-4在8、12、16d的表达量与4d比有显著差异(P<0.05或P<0.01),α-MHC在12、16d的表达量与8d比有显著差异(P<0.05,P<0.01),ANF在16d的表达量与8d比有显著差异(P<0.01),16d表达量与12d比也有显著差异(P<0.01);未转染组结果均为阴性。结论外源表达Nkx2-5基因可诱导P19细胞逐渐表达心肌标志物。 展开更多

关键词 同源框基因 nkx2-5 P19细胞 心肌标志物

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3个贵州地方鸡种NKX2-5基因多态性及生物信息学分析 被引量：3

3

作者 杨红 孙鹃 +5 位作者 裘贵华 宋汝谋 杨开明 朱明贵 李俊 张勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第12期209-214,共6页

以高脚鸡、威宁鸡、乌蒙乌骨鸡(含白壳蛋鸡和绿壳蛋鸡)3个贵州地方鸡种为研究对象,构建品种DNA池,扩增NKX2-5基因第1外显子全部序列及第2内含子部分序列,采用直接测序法对3个品种(4个群体)的NKX2-5基因进行单核苷酸多态性检测,利用生物... 以高脚鸡、威宁鸡、乌蒙乌骨鸡(含白壳蛋鸡和绿壳蛋鸡)3个贵州地方鸡种为研究对象,构建品种DNA池,扩增NKX2-5基因第1外显子全部序列及第2内含子部分序列,采用直接测序法对3个品种(4个群体)的NKX2-5基因进行单核苷酸多态性检测,利用生物信息学软件预测不同多态性位点对NKX2-5基因mRNA二级结构、蛋白质二级结构的影响。结果表明,在3个品种(4个群体)中共检测到G108A、T288C、C400T、T420G和G429A5个SNPs位点,其中,G108A位于非编码区;T288C、C400T位于第1外显子区;T420G和G429A位于内含子区。T288C和C400T均为错义突变,T288C突变导致丝氨酸(Ser)变为脯氨酸(Pro)、C400T突变导致丙氨酸(Ala)变为缬氨酸(Val),SNPs位点对于NKX2-5基因mRNA二级结构、蛋白质二级结构有一定影响。 展开更多

关键词 贵州地方鸡种 nkx2-5基因 SNPS 生物信息学

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NKX2-5、TBX5、GATA4基因与先天性心脏病关系研究进展 被引量：10

4

作者 杜佳 易岂建 《儿科药学杂志》 CAS 2018年第5期58-61,共4页

先天性心脏病（congenital heart disease,CHD）是指胚胎发育异常所致的心脏、大血管结构及功能异常,在新生儿中的发病率为0.4%～1.0%,是最常见的出生缺陷类型。心脏是胚胎最先形成的器官,心脏发育过程由基因调控,其任一基因的表达异常... 先天性心脏病（congenital heart disease,CHD）是指胚胎发育异常所致的心脏、大血管结构及功能异常,在新生儿中的发病率为0.4%～1.0%,是最常见的出生缺陷类型。心脏是胚胎最先形成的器官,心脏发育过程由基因调控,其任一基因的表达异常,均能引起心脏发育畸形。 展开更多

关键词 GATA4 基因突变 心脏发育 nkx2-5 CHD 先天性心脏病

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急性心肌缺血对骨髓Nkx2-5^+心脏祖细胞的动员作用(英文) 被引量：1

5

作者 董红燕 徐志伟 +2 位作者 张中明 于红丽 徐夏红 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期185-193,共9页

骨髓源性Nkx2-5+心脏祖细胞(bone marrow-derived Nkx2-5+ cardiac progenitor cells)具有高度特异性分化为心肌细胞的潜能,在病理状态下可能参与内源性心肌修复。但在器官缺血、特别在急性心肌缺血病理状态下,该细胞如何被动员的机制... 骨髓源性Nkx2-5+心脏祖细胞(bone marrow-derived Nkx2-5+ cardiac progenitor cells)具有高度特异性分化为心肌细胞的潜能,在病理状态下可能参与内源性心肌修复。但在器官缺血、特别在急性心肌缺血病理状态下,该细胞如何被动员的机制尚不清楚。本研究在观察Nkx2-5+心脏祖细胞在骨髓中分布特征的基础上,分析急性心肌缺血对骨髓源性Nkx2-5+心脏祖细胞的动员作用,探讨其细胞动员的可能机制。分别建立小鼠急性心肌缺血及脑、后肢急性缺血动物模型。采用纳米金-银免疫标记透射电镜、免疫荧光标记及分子生物学等检测方法,观察骨髓Nkx2-5+心肌祖细胞的定位及其形态学特征;检测急性心肌缺血后外周血Nkx2-5+细胞比例变化、缺血不同时段骨髓及外周血中Nkx2-5蛋白表达的变化;比较不同器官缺血对Nkx2-5+心脏祖细胞的动员作用;应用SDF-1/CXCR4通路特异性阻断剂AMD3100,分析SDF-1在急性心肌缺血后对Nkx2-5+心脏祖细胞动员作用的影响。结果显示:Nkx2-5+心脏祖细胞呈散在分布于骨髓血窦旁。与对照组相比,急性心肌缺血后,外周血Nkx2-5+心脏祖细胞比例显著增加(P<0.01)。心肌缺血早期(1d),外周血Nkx2-5蛋白表达显著增加(P<0.01),并可持续7d;而此间,骨髓中Nkx2-5蛋白表达立即升高,随后则降低。应用AMD3100阻断剂后,心肌缺血组外周血Nkx2-5蛋白表达受到明显抑制(P<0.05)。脑、后肢缺血后,外周血Nkx2-5蛋白表达显著少于急性心肌缺血组(P<0.01),而与对照组相比无显著差异。上述结果提示,生理状态下,骨髓中存在Nkx2-5+心脏祖细胞亚群;急性心肌缺血对骨髓Nkx2-5+心脏祖细胞具有显著的动员作用,且该动员作用具有显著的器官特异性,SDF-1/CXCR4通路在该动员作用中发挥了重要的趋化作用。 展开更多

关键词 心脏祖细胞 骨髓 nkx2-5 动员 心肌缺血

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转录因子NKx2-5表达在大鼠右心室心肌重塑模型的变化 被引量：1

6

作者 钱小青 王大为 +1 位作者 张爱华 李军 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期367-370,共4页

目的:观察增加大鼠右心室压力负荷后,右心室心肌重塑与同源盒转录因子NKx2-5表达的变化。方法:注射野百合碱(MCT)制作大鼠肺动脉高压模型,测量大鼠不同时间点肺动脉压和右心室肥厚指数;采用RT-PCR法和Westernblot分析,分别测定右心室心... 目的:观察增加大鼠右心室压力负荷后,右心室心肌重塑与同源盒转录因子NKx2-5表达的变化。方法:注射野百合碱(MCT)制作大鼠肺动脉高压模型,测量大鼠不同时间点肺动脉压和右心室肥厚指数;采用RT-PCR法和Westernblot分析,分别测定右心室心肌NKx2-5及其下游基因心房利钠因子(ANF)的mRNA及蛋白表达。结果:注射MCT后第14天,右室心肌明显肥厚,NKx2-5与ANF的mRNA及蛋白表达亦明显增加,与其呈明显正相关。结论:右心室壁压力负荷增加可作为原发性刺激,使在心脏胚胎发育早期表达的心脏同源盒基因NKx2-5表达增加,NKx2-5在成熟心肌重塑中可能起作用。 展开更多

关键词 转录因子nkx2-5 心肌重塑 右室压力负荷

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NKX2-5 63A/G多态性与中国人群先天性心脏病易感性的Meta分析 被引量：3

7

作者 洪媛 王维鹏 +2 位作者 魏中南 石祖亮 聂波 《中国优生与遗传杂志》 2014年第10期21-23,共3页

目的探讨NKX2-5 63A>G多态性与先天性心脏病易感性之间的关系。方法全面检索相关文献,收集2014年1月前有关NKX2-5 63A>G多态性与先心病易感性的病例对照研究,使用Stata 10.0进行Meta分析。结果最终纳入病例对照研究7项,累计病例1... 目的探讨NKX2-5 63A>G多态性与先天性心脏病易感性之间的关系。方法全面检索相关文献,收集2014年1月前有关NKX2-5 63A>G多态性与先心病易感性的病例对照研究,使用Stata 10.0进行Meta分析。结果最终纳入病例对照研究7项,累计病例1243例,对照1139例。Meta分析的OR值及95%CI为1.26(1.02-1.56),异质性显著(I2=65.1%)。经分层分析和敏感性分析初步锁定异质性来源。结论 NKX2-5 63A>G多态性与先心病易感性显著关联。 展开更多

关键词 先天性心脏病 nkx2-5 多态性 META分析

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Nkx2-5在单纯性先天性心脏病中的突变及表达研究 被引量：5

8

作者 施展 刘明颖 李辉 《中国优生与遗传杂志》 2011年第3期15-17,共3页

目的分析Nkx2-5基因在单纯性先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)心肌组织中的突变及表达情况,探讨Nkx2-5基因突变、表达与单纯性CHD发生机制的关系。方法采用PCR-SSCP(单链构象多态性)方法对30例因CHD引产胎儿心脏组织进行Nkx... 目的分析Nkx2-5基因在单纯性先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)心肌组织中的突变及表达情况,探讨Nkx2-5基因突变、表达与单纯性CHD发生机制的关系。方法采用PCR-SSCP(单链构象多态性)方法对30例因CHD引产胎儿心脏组织进行Nkx2-5基因编码序列突变筛查;以β-actin为内对照,用RT-PCR方法检测Nkx2-5基因在单纯性CHD引产胎儿心肌组织中mRNA的表达情况。结果 30例单纯性CHD引产胎儿Nkx2-5基因2个外显子PCR产物经SSCP检测未发现突变;与正常对照心肌组织相比,单纯性CHD胎儿该基因mRNA表达呈下降趋势(P<0.05)。结论单纯性CHD中Nkx2-5基因编码区的体细胞突变可能不是单纯性CHD的致病机制;Nkx2-5基因转录水平异常可能是该基因参与CHD形成的一种潜在机制。 展开更多

关键词 nkx2-5基因 单纯性先天性心脏病 突变 表达

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妊高症患者胎盘MiR-26b和Nkx2-5的表达水平及临床意义 被引量：7

9

作者 魏娜 李江丽 宋亚南 《医学研究杂志》 2019年第1期99-102,173,共5页

目的探究妊娠高血压疾病患者胎盘micro RNA-26b(MiR-26b)和Nkx2-5的表达水平及临床意义。方法选择2016年3月～2017年10月于笔者医院接受治疗的60例妊高症患者(包括20例妊娠期高血压、20例轻度子痫前期和20例重度子痫前期)为实验组,另选... 目的探究妊娠高血压疾病患者胎盘micro RNA-26b(MiR-26b)和Nkx2-5的表达水平及临床意义。方法选择2016年3月～2017年10月于笔者医院接受治疗的60例妊高症患者(包括20例妊娠期高血压、20例轻度子痫前期和20例重度子痫前期)为实验组,另选择同期住院的20例健康孕妇作为对照组。实时定量PCR(q RT-PCR)技术检测胎盘组织MiR-26b水平;蛋白质印迹(Western blot)技术检测胎盘组织Nkx2-5水平。结果轻度子痫前期组和重度子痫前期组的新生儿体重及胎盘重量较健康对照组均显著降低(P<0.05)。q RT-PCR结果显示,妊娠期高血压组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组胎盘组织MiR-26b水平较健康对照组均显著升高(P<0.05),且随着病情的加重,MiR-26b水平逐渐上升(P<0.05)。Western blot法检测结果显示,妊娠期高血压组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组胎盘组织Nkx2-5水平较健康对照组均显著降低(P<0.05),且随着病情的加重,MiR-26b水平逐渐降低(P<0.05)。妊高症患者胎盘组织MiR-26b水平与Nkx2-5水平显著呈负相关(P<0.05)。妊高症患者胎盘组织MiR-26b水平与新生儿体重、胎盘重量呈负相关(P<0.05),Nkx2-5水平与新生儿体重、胎盘重量显著呈正相关(P<0.05)。结论妊高症患者胎盘组织中MiR-26b表达上调、Nkx2-5表达下调,且与病情严重程度相关,暗示MiR-26b、Nkx2-5可作为妊高症的独立诊断因子。 展开更多

关键词 妊高症 MiR-26b nkx2-5 胎盘

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纳米金-银加强法对骨髓微环境中Nkx2-5^+细胞定位的实验研究 被引量：1

10

作者 于红丽 徐志伟 +1 位作者 张中明 董红燕 《徐州医学院学报》 CAS 2006年第4期296-298,共3页

目的应用包埋前纳米金-银加强法,电镜观察骨髓微环境中Nkx2-5+细胞并进行形态学分析。方法取BALB/c小鼠双后肢胫骨,脱钙后行冰冻切片,利用1.4 nm超微纳金颗粒标记骨髓纵切面Nkx2-5+的细胞,通过银加强使金颗粒增大,Epon 812树脂包埋,常... 目的应用包埋前纳米金-银加强法,电镜观察骨髓微环境中Nkx2-5+细胞并进行形态学分析。方法取BALB/c小鼠双后肢胫骨,脱钙后行冰冻切片,利用1.4 nm超微纳金颗粒标记骨髓纵切面Nkx2-5+的细胞,通过银加强使金颗粒增大,Epon 812树脂包埋,常规超薄切片,电镜下观察。结果免疫金颗粒主要标记Nkx2-5+细胞的胞质,极少数胞核也可见到免疫金颗粒。免疫金颗粒标记细胞均为体积较大的骨髓单核细胞,偶见双核细胞。结论包埋前纳米金-银加强法除可应用于神经系统的研究外,也可应用于骨髓微环境中抗原的精确定位。 展开更多

关键词 纳米金-银加强法 nkx2-5 骨髓微环境

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心脏转录因子Nkx2-5、GATA-4真核表达质粒的构建 被引量：1

11

作者 赖平 罗耀玲 +2 位作者 张敏鸿 杨建琼 邱悦群 《赣南医学院学报》 2017年第1期42-45,共4页

目的:构建人类心脏特异性转录因子Nkx2-5、GATA-4的真核表达质粒,探讨Nkx2-5、GATA-4在心脏发育及先天性心脏病发病过程中的作用奠定基础。方法:以质粒人脑c DNA为模板,并设计上下游引物扩增Nkx2-5、GATA-4编码区序列。将真核表达载体pC... 目的:构建人类心脏特异性转录因子Nkx2-5、GATA-4的真核表达质粒,探讨Nkx2-5、GATA-4在心脏发育及先天性心脏病发病过程中的作用奠定基础。方法:以质粒人脑c DNA为模板,并设计上下游引物扩增Nkx2-5、GATA-4编码区序列。将真核表达载体pCDNA 3.1-HA、pCDNA 3.1-flag分别和Nkx2-5、GATA-4的PCR产物分别在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pCDNA 3.1-HA-Nkx2-5、pCDNA 3.1-flag-GATA-4,转化至大肠杆菌,质粒抽提后经PCR、双酶切及测序鉴定。结果:成功设计引物扩增出Nkx2-5、GATA-4基因编码区约1 kbp及1.3 kbp的目的片段,PCR和酶切鉴定结果显示,构建的重组真核表达质粒中含有正确的Nkx2-5、GATA-4基因序列。结论:成功构建了含有Nkx2.5、GATA4的真核表达重组质粒,为后续研究奠定基础。 展开更多

关键词 转录因子 nkx2-5 GATA-4 重组质粒 真核表达载体

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同源盒基因Nkx2-5促进5-氮胞苷诱导的单层P19细胞表达心肌标志物

12

作者 张金平 王慧娟 +4 位作者 邵素霞 尹青 史玉兰 赵春芳 张雷 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1372-1375,共4页

目的:探讨同源盒基因Nkx2-5基因在5-氮胞苷(5-aza)诱导单层生长的P19细胞向心肌细胞分化中的作用。方法:以稳定表达Nkx2-5的P19细胞为实验组,P19细胞为对照组。两组细胞均单层培养并以5-aza(1μmol/L)诱导,倒置显微镜下观察细胞的生长状... 目的:探讨同源盒基因Nkx2-5基因在5-氮胞苷(5-aza)诱导单层生长的P19细胞向心肌细胞分化中的作用。方法:以稳定表达Nkx2-5的P19细胞为实验组,P19细胞为对照组。两组细胞均单层培养并以5-aza(1μmol/L)诱导,倒置显微镜下观察细胞的生长状态;在诱导后4、8、12、16 d,以RT-PCR检测转录因子GATA-4、α-肌球蛋白重链(α-MHC)和心房利钠多肽(ANP)基因的表达。结果:对照组经5-aza诱导后ANP没有表达;GATA-4在8、12、16 d有表达;α-MHC在12、16 d有表达。实验组5-aza诱导后,GATA-4在诱导4、8、12、16 d有表达;α-MHC和ANP都是在5-aza诱导后的8、12和16 d表达。两组结果比较显示实验组GATA-4和α-MHC基因的表达时间提前;两组除α-MHC在12 d的表达无差异外,其他取材时间点实验组两个基因的表达量与对照组相比均增高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:Nkx2-5促进5-aza诱导的单层生长的P19细胞向心肌分化。 展开更多

关键词 nkx2-5 5-氮胞苷 P19细胞 心肌分化

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NKX2-5诱导P19细胞向心肌分化的研究

13

作者 张金平 郝军 +5 位作者 王慧娟 邵素霞 王多 郭燕红 赵春芳 张雷 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期197-200,共4页

目的探索NKX2-5在心肌分化中的作用和机制。方法实验分转染组和未转染组,转染组为稳定表达NKX2-5的P19细胞,未转染组为P19细胞。两组细胞悬浮培养4d,形成聚集体后贴壁培养,于贴壁培养的4d、8d、12d、16d,免疫荧光双标和Western blot检... 目的探索NKX2-5在心肌分化中的作用和机制。方法实验分转染组和未转染组,转染组为稳定表达NKX2-5的P19细胞,未转染组为P19细胞。两组细胞悬浮培养4d,形成聚集体后贴壁培养,于贴壁培养的4d、8d、12d、16d,免疫荧光双标和Western blot检测横纹肌α肌动蛋白(α-SA)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达;取贴壁培养16d的细胞透射电镜观察细胞超微结构变化。结果转染组α-SA和cTnT两种蛋白在聚集体贴壁4d时没有表达,8d、12d、16d出现表达和共表达。转染组部分细胞出现幼稚的细胞连接和肌丝样结构;未转染组没有发现两种蛋白的表达,电镜观察未发现分化的细胞。结论稳定表达NKX2-5基因的P19细胞可向心肌分化,但不适于作为心脏发育的体外模型。 展开更多

关键词 同源盒基因 nkx2-5基因 P19细胞 心肌分化

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Nkx2-5转录因子在心脏发育中的作用

14

作者 杨哲 张勇 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期360-362,共3页

关键词 nkx2-5转录因子 心脏发育 相互作用

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人类单纯性先天性心脏病患者Nkx2-5基因突变及表达的研究 被引量：15

15

作者 孙淼 邱广蓉 +2 位作者 孙桂凤 袁翼华 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期321-324,共4页

目的 :研究Nkx 2 5基因在人类单纯性先天性心脏病患者中的突变及表达情况。方法 :应用PCR SSCP方法和DNA测序技术在 5 8个单纯性先天性心脏病核心家系 183名成员中检测Nkx 2 5基因的突变情况 ;以 β actin作为内对照对 11个室间隔缺... 目的 :研究Nkx 2 5基因在人类单纯性先天性心脏病患者中的突变及表达情况。方法 :应用PCR SSCP方法和DNA测序技术在 5 8个单纯性先天性心脏病核心家系 183名成员中检测Nkx 2 5基因的突变情况 ;以 β actin作为内对照对 11个室间隔缺损患者心肌标本和 2个非先天性心脏病患者 (正常对照 )心肌标本进行RT PCR扩增和定量分析 ,观察mRNA表达水平。结果 :发现Nkx 2 5基因同源结构域中 (CCA)三碱基缺失 ;与非先天性心脏病患者 (正常对照 )相比 ,室间隔缺损患者的Nkx 2 5基因mRNA表达呈下降趋势。结论 :Nkx 2 5基因与人类单纯性先天性心脏病密切相关 ,其同源结构域内的基因突变可能是人类单纯性先天性心脏病发病的重要遗传基础。Nkx 2 展开更多

关键词 先天性心脏病 nkx2-5基因 基因表达 基因突变

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对海南省210例散发性先天性单纯性心脏病患者NKX2-5、GATA4、ZIC3基因突变的筛选研究 被引量：2

16

作者 李青蔓 郭丰 +7 位作者 凌奕 李慧慧 刘芳芳 刘辉 温壮飞 孙薇薇 刘亦恒 张海英 《海南医学院学报》 CAS 2022年第19期1472-1478,共7页

目的:心脏发育异常可导致先天性心脏病(congenital heart disease,CHD),是国内外最常见的先天性畸形,已知NKX2-5、GATA4和ZIC3基因突变可引起CHD。本实验探讨了海南省NKX2-5、GATA4、ZIC3基因突变和散发性先天性单纯性心脏病之间的关系... 目的:心脏发育异常可导致先天性心脏病(congenital heart disease,CHD),是国内外最常见的先天性畸形,已知NKX2-5、GATA4和ZIC3基因突变可引起CHD。本实验探讨了海南省NKX2-5、GATA4、ZIC3基因突变和散发性先天性单纯性心脏病之间的关系。方法:收集210例散发性CHD患者,提取患者血液DNA,扩增目的基因片段,利用高分辨熔解曲线(high-resolution melting,HRM)技术和DNA测序技术,分析NKX2-5、GATA4和ZIC3基因的序列。结果:对210例CHD患者NKX2-5、GATA4、ZIC3基因测序,发现7个基因突变,包括1个NKX2-5杂合错义突变(c.178G>T),GATA4的3个杂合突变(c.677C>T,c.928A>G,c.1123G>A),ZIC3的3个杂合突变(c.19G>C,c.1255C>G,c.1348C>T)。其中NKX2-5(c.178G>T)、GATA4(c.1123G>A)、ZIC3(c.19G>C,c.1255C>G,c.1348C>T)为新突变位点。通过生物信息学软件预测这些基因突变为致病性突变。结论:在210例患者中发现了7个基因突变,首次报道海南省NKX2-5、GATA4和ZIC3的基因突变与CHD发病相关。 展开更多

关键词 先天性心脏病 基因突变 nkx2-5 GATA4 ZIC3

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大鼠BMSCs向心肌样细胞分化过程中miR-128对Nkx2-5基因的调控作用 被引量：1

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作者 朱国伟 鞠延玲 高振宇 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第34期1-3,共3页

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化过程中miR-128对Nkx2-5基因的调控作用。方法分离培养大鼠BMSCs,应用5-氮杂胞苷将其诱导为心肌样细胞,采用Real-time PCR法检测诱导6、10、14、18、22 d时miR-128、Nkx2-5基因的表... 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化过程中miR-128对Nkx2-5基因的调控作用。方法分离培养大鼠BMSCs,应用5-氮杂胞苷将其诱导为心肌样细胞,采用Real-time PCR法检测诱导6、10、14、18、22 d时miR-128、Nkx2-5基因的表达。用生物信息学方法对miR-128和Nkx2-5基因的靶向匹配关系进行预测,显示miR-128与Nkx2-5 mRNA的3'UTR结合情况良好。提取心肌细胞总RNA,扩增Nkx2-5 mRNA 3'UTR片段,构建Nkx2-5 3'UTR-pmir GLO荧光素酶报告载体,双荧光素酶检测转染Nkx2-5 3'UTR-pmir GLO以及miR-128模拟物或对照miRNA的荧光强度,鉴定miR-128与Nkx2-5的靶向关系。结果将诱导6 d的Nkx2-5和miR-128的表达量分别设为1,诱导10 d的Nkx2-5表达量为4.33±1.32、22 d为14.78±6.05,诱导10 d的miR-128表达量为0.776 2±0.054 3、22 d为0.197 6±0.083 6。miR-128与Nkx2-5的表达呈负相关(r=-0.546,P=0.021)。相对于转染对照miRNA(设定其荧光素酶活性为1),转染miR-128能使Nkx2-5 3'UTR-pmir GLO的荧光素酶表达下降为0.435 4±0.072 6。结论 miR-128通过结合Nkx2-5 mRNA 3'UTR抑制其表达,具有负性调控BMSCs向心肌样细胞分化过程中Nkx2-5表达的作用。 展开更多

关键词 微小核糖核酸 nkx2-5基因 骨髓间充质干细胞 心肌样细胞 大鼠

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Nkx2-5和Sam68在子痫前期胎盘组织中的表达及意义 被引量：2

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作者 吴栋才 陈小菊 施蕾 《广东医学》 CAS 2018年第16期2472-2474,2478,共4页

目的探讨Nkx2-5和Sam68在子痫前期胎盘组织中的表达及其与围产结局的关系。方法选取临床确诊的子痫前期孕产妇236例为疾病组,并以择期行剖宫产的正常妊娠晚期孕产妇30例为对照组。在两组新生儿娩出15 min内在母体面取胎盘组织进行Nkx2-5... 目的探讨Nkx2-5和Sam68在子痫前期胎盘组织中的表达及其与围产结局的关系。方法选取临床确诊的子痫前期孕产妇236例为疾病组,并以择期行剖宫产的正常妊娠晚期孕产妇30例为对照组。在两组新生儿娩出15 min内在母体面取胎盘组织进行Nkx2-5、Sam68和可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)表达水平的检测,统计两组围产儿死亡率,并分析疾病组胎盘组织Nkx2-5和Sam68表达与胎盘组织sFlt-1表达水平和围产结局的关系。结果疾病组患者围产儿死亡率为6.36%(15/236),高于对照组的0(0/30)(P<0.05)。疾病组胎盘组织Nkx2-5、Sam68和sFlt-1 mRNA相对表达量亦均高于对照组(P<0.05)。与疾病组围产儿存活者比较,其围产儿死亡者的胎盘组织Nkx2-5、Sam68和sFlt-1 mRNA相对表达量均较高(P<0.05)。Logistic相关分析结果显示,子痫前期胎盘组织Nkx2-5和Sam68 mRNA相对表达量与围产儿死亡均密切相关(P<0.05);Pearson线性相关分析结果显示,子痫前期胎盘组织Nkx2-5和Sam68 mRNA相对表达量与胎盘组织sFlt-1 mRNA相对表达量均呈正相关(r=0.886,0.879,P<0.05)。结论 Nkx2-5和Sam68在子痫前期胎盘组织中的表达水平较高且与其病情相关因子sFlt-1和围产结局相关,Nkx2-5和Sam68可能参与子痫前期的发生、发展。 展开更多

关键词 nkx2-5 Sam68 可溶性血管内皮生长因子受体-1 子痫前期 胎盘组织 围产结局

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转录因子Nkx2-5和GATA-4在胚胎心肌发育早期的作用 被引量：1

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作者 林钊 周春燕 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期732-734,共3页

关键词 nkx2-5 GATA-4 转录因子 心脏 胚胎学

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先天性心脏病圆锥动脉干畸形NKX2-5基因CpG岛甲基化状态分析 被引量：3

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作者 盛伟 王慧君 +5 位作者 马晓静 李文灿 陈龙 张进 黄国英 马端 《中国产前诊断杂志（电子版）》 2010年第3期12-16,共5页

目的研究心肌特异性转录因子NKX2-5基因启动子区在先天性心脏病圆锥动脉干畸形(CTD)病例中的甲基化状态,从表观遗传学角度探讨先心病的发病机制,为先心病的早期临床诊治提供理论依据。方法首先利用Tru1l限制性内切酶将基因组片段化并接... 目的研究心肌特异性转录因子NKX2-5基因启动子区在先天性心脏病圆锥动脉干畸形(CTD)病例中的甲基化状态,从表观遗传学角度探讨先心病的发病机制,为先心病的早期临床诊治提供理论依据。方法首先利用Tru1l限制性内切酶将基因组片段化并接上接头,然后利用甲基化结合蛋白(MBD)与甲基化DNA特异性结合的特点对甲基化DNA片段进行富集;针对NKX2-5基因启动子区的CpG岛设计引物,通过实时定量PCR检测CTD与正常胎心组织中NKX2-5基因甲基化状态。结果通过与正常心脏组织相比,NKX2-5基因在6例病变组织中均发生了不同程度的甲基化,其中4例呈现高甲基化,另外2例甲基化程度无明显变化。结论 NKX2-5基因甲基化可能与先心病CTD发病相关,可能成为先心病早期诊断的分子标志物之一。 展开更多

关键词 先天性心脏病 圆锥动脉干畸形 nkx2-5基因 甲基化 分子标志物

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