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题名杂合抗菌肽NK-LPd的设计、表达及抑菌活性评价
被引量：4
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作者
刘子琦
刘正宇
郭银虹
王鸿飞
姚波
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机构
重庆科技学院化学化工学院
工业发酵微生物重庆市重点实验室
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出处
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2023年第18期173-180,共8页
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基金
重庆市技术创新与应用发展专项面上项目(CSTB2022TIAD-LDX0006)
重庆科技学院研究生科技创新计划项目(YKJCX2020528,YKJCX2220514)。
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文摘
目的:了解杂合抗菌肽NK-LPd的抑菌活性,探讨进一步开发潜力。方法:用两个甘氨酸作接头连接NKlysin和Piscidin的活性片段,生物信息学技术预测杂合抗菌肽的理化性质和功能结构,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏好性优化杂合抗菌肽NK-LPd基因序列,重叠延伸聚合酶链式反应(gene splicing by overlap extension polymerase chain reaction,SOE-PCR)扩增基因并与分泌型表达载体pPIC9K连接,通过化学法将其转化至毕赤酵母KM71感受态细胞中,经0.5%甲醇诱导表达和亲和纯化后获得杂合抗菌肽NK-LPd,评价其抗菌活性。结果:成功构建了KM71/pPIC9K-NK-LPd,经诱导表达5 d后上清液中获得了相对分子质量约6 kDa的表达产物,与预期大小相符;抗菌活性实验表明,NK-LPd对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有较强的抑菌活性,与母体肽相比,杂合抗菌肽NK-LPd的抑菌活性显著增强。结论:设计并在毕赤酵母KM71中分泌表达了杂合抗菌肽NK-LPd,其抑菌活性优于母体肽。本研究可为新型杂合抗菌肽的设计和生产提供技术参考。
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关键词
杂合抗菌肽
nk-lpd
设计
表达
抑菌活性评价
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Keywords
hybrid peptide
nk-lpd
design
expression
evaluation of bacteriostatic activity
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分类号
Q789
[生物学—分子生物学]
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