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蜡样芽孢杆菌cytK和nhe毒素基因双重核酸试纸条快速检测方法的建立及其评价
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作者 杨继飞 潘蓓珍 +6 位作者 刘岩 周钰娇 杨建宇 张先宇 丁文博 李昊宇 孙丽媛 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期516-525,共10页
目的:采用聚合酶链式反应(PCR)和胶体金技术建立1种蜡样芽孢杆菌cytK和nhe2种毒素基因双重核酸试纸条快速检测方法,并对其特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行评价。方法:采用煮沸法提取蜡样芽孢杆菌DNA,以蜡样芽孢杆菌细胞毒素cytK和... 目的:采用聚合酶链式反应(PCR)和胶体金技术建立1种蜡样芽孢杆菌cytK和nhe2种毒素基因双重核酸试纸条快速检测方法,并对其特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行评价。方法:采用煮沸法提取蜡样芽孢杆菌DNA,以蜡样芽孢杆菌细胞毒素cytK和非溶血性肠毒素nhe为靶基因设计特异性引物,通过克隆转化鉴定PCR产物,确定胶体金标记链霉亲和素、质量控制线(C线)、cytK检测线(T_(1))和nhe检测线(T_(2))最佳标记量,组装核酸试纸条并对其特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行评价。结果:蜡样芽孢杆菌DNA浓度为248 mg·L^(-1),纯度为1.8~2.0;经克隆转化和测序比对,PCR产物与GenBank数据库中已登记的蜡样芽孢杆菌cytK和nhe相似性均为100%。在pH为7.0的条件下,每200μL胶体金溶液中链霉亲和素最佳标记量为6.0μL;质量控制线(C线)最佳标记量为2.00 g·L^(-1),cytK基因检测线(T1)最佳标记量为0.550 g·L^(-1),nhe基因检测线(T_(2))最佳标记量为0.2 g·L^(-1)。特异性检测,仅蜡样芽孢杆菌组显示阳性结果,试纸条与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌无交叉反应,与电泳结果一致;灵敏度检测,当双重核酸试纸条中蜡样芽孢杆菌DNA浓度降至10^(-2)mg·L^(-1)时,可观察到C线、T1线和T_(2)线3个条带,检测限为琼脂糖凝胶电泳(10^(-1)mg·L^(-1))的1/10;重复性检测,由不同实验室不同人员对试纸条进行验证,结果一致;稳定性检测,在第6、9和12个月进行试纸条稳定性验证,稳定性良好。结论:本研究建立的双重核酸试纸条法可以同时检测蜡样芽孢杆菌cytK和nhe毒素基因,灵敏度高,特异性强,可实现快速可视化检测。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 cytK nhe 双重核酸试纸条
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温氏土鸡和白洛克鸡胚小肠PepT1和NHEs mRNA表达差异及发育性变化 被引量:3
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作者 黎相广 严会超 +4 位作者 曾佩玲 束刚 张德祥 罗庆斌 王修启 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期96-100,共5页
为研究温氏土鸡和白洛克鸡胚小肠寡肽转运载体PepT1(Solute carrier family 15 member 1)以及Na+/H+交换载体NHE2(Solute carrier family 9 member 2)和NHE3(Solute carrier family 9 member 3)mRNA的表达规律,选取产蛋日龄相近的温氏... 为研究温氏土鸡和白洛克鸡胚小肠寡肽转运载体PepT1(Solute carrier family 15 member 1)以及Na+/H+交换载体NHE2(Solute carrier family 9 member 2)和NHE3(Solute carrier family 9 member 3)mRNA的表达规律,选取产蛋日龄相近的温氏土鸡和白洛克鸡所产种蛋各96枚,每个品种随机分为6组,每组16枚,在相同的条件下进行孵化。分别在9,12,14,17,19胚龄(E)和出壳当天(DOH),每个品种选取16枚鸡胚,采集小肠样品,采用Real-time RT-PCR方法检测小肠PepT1、NHE2和NHE3 mRNA的相对表达丰度。结果显示:从发育性变化来看,PepT1、NHE2和NHE3mRNA在温氏土鸡和白洛克鸡胚小肠的表达丰度都表现为随着胚龄的增加而上调,19胚龄后上调幅度较大;双因素方差分析表明,PepT1、NHE2和NHE3 mRNA的表达丰度在2个品种间无显著差异,但受发育阶段影响,PepT1 mRNA的表达丰度存在"品种×胚龄"的互作效应(P<0.000 1),NHE2和NHE3 mRNA表达丰度无"品种×胚龄"的互作效应(P>0.05)。说明PepT1、NHE2和NHE3 mRNA表达丰度在温氏土鸡和白洛克鸡胚小肠中具有相同的发育模式,其表达量受发育水平的影响,但品种间差异不显著。 展开更多
关键词 PepT1 nhe2 nhe3 表达规律 鸡胚 小肠
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肉鸡肠道NHE2 mRNA表达的组织特异性与发育性变化 被引量:5
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作者 王修启 邹仕庚 +3 位作者 左建军 苏海林 黄志毅 冯定远 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期42-47,共6页
选用遗传背景相同的1日龄父母代雄性Arbor Acre(AA)肉雏鸡120羽,随机分为4个重复,采用相对定量RT-PCR方法,以30日龄AA肉鸡肠道RNA为模板,研究肉鸡肠道钠/氢交换载体2(Sodium hydrogen exchanger 2,NHE2)mRNA表达的组织特异性;以AA... 选用遗传背景相同的1日龄父母代雄性Arbor Acre(AA)肉雏鸡120羽,随机分为4个重复,采用相对定量RT-PCR方法,以30日龄AA肉鸡肠道RNA为模板,研究肉鸡肠道钠/氢交换载体2(Sodium hydrogen exchanger 2,NHE2)mRNA表达的组织特异性;以AA肉鸡十二指肠和空肠RNA为模板,研究肉鸡肠道NHE2mRNA表达的发育性变化。结果显示:①AA肉鸡十二指肠和空肠NHE2 mRNA的表达丰度显著高于回肠和结直肠(P〈0.05),而十二指肠和空肠之间、回肠和结直肠之间无显著差异(P〉0.05);②AA肉鸡NHE2 mRNA在十二指肠及空肠中的表达具有相同的发育模式,2~16日龄升高,30~44日龄下降,55日龄略微回升;在16和30日龄时的表达丰度显著高于2、44和58日龄(P〈0.05)。以上结果说明:AA肉鸡肠道近端NHE2 mRNA的表达丰度显著高于远端(P〈0.05)。AA肉鸡十二指肠及空肠NHE2 mRNA的表达具有相同的发育模式,表明NHE2mRNA表达受到发育阶段的调控,且在十二指肠和空肠间具有稳定性。 展开更多
关键词 肉鸡 肠道 nhe2 MRNA 组织特异性 发育性表达
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人NHE-1基因反义真核表达载体的构建及初步鉴定 被引量:10
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作者 滕小春 刘海峰 +2 位作者 陈刚 杨孟华 杨仕明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期112-114,共3页
目的 构建人Na+ H+ 交换蛋白 1(Na+ H+ exchanger 1,NHE 1)基因反义真核表达载体。方法 采用分子克隆技术 ,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶从NHE 1cDNApEAP切下所需目的片段 ,然后将该片段反向插入真核表达载体pcDNA3 1( ) Zeo的多克隆位... 目的 构建人Na+ H+ 交换蛋白 1(Na+ H+ exchanger 1,NHE 1)基因反义真核表达载体。方法 采用分子克隆技术 ,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶从NHE 1cDNApEAP切下所需目的片段 ,然后将该片段反向插入真核表达载体pcDNA3 1( ) Zeo的多克隆位点 ,最后对产生重组子进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果 经琼脂糖凝胶电泳鉴定 ,将目的片段成功的连接到pcDNA3 1( ) Zeo载体上。结论 成功地将NHE 1目的片段反向插入到pcDNA3 1( ) Zeo中 ,构建了人NHE 1反义表达真核载体hNHE 1。 展开更多
关键词 nhe-1基因 胃肿瘤 反义技术 重组载体
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补中益气汤对脾虚泄泻大鼠SGLT1/NHE3通路的影响 被引量:19
5
作者 施旭光 施家希 +3 位作者 刘海涛 黄娟 罗丹 张嘉骏 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期8-12,共5页
目的探讨补中益气汤对脾虚泄泻大鼠SGLT1/NHE3通路的影响。方法采用"大黄+利血平+控制饮食"的多因素法建立脾虚泄泻大鼠模型,连续造模15 d;大鼠随机分为正常组,模型组,补中益气汤低、中、高剂量组(4.67,9.35,18.70 g·kg-... 目的探讨补中益气汤对脾虚泄泻大鼠SGLT1/NHE3通路的影响。方法采用"大黄+利血平+控制饮食"的多因素法建立脾虚泄泻大鼠模型,连续造模15 d;大鼠随机分为正常组,模型组,补中益气汤低、中、高剂量组(4.67,9.35,18.70 g·kg-1),连续给药15 d;观察并计算大鼠腹泻指数;测定大鼠肠黏膜Na+-K+ATP酶的活性;Western Blot法检测钠依赖性葡萄糖转运体(SGLT1)、葡萄糖转运体2(GLUT2)、钠-氢交换体3(NHE3)、p38MAPK、p-p38MAPK、MAPKAPK2、p-MAPKAPK2、Akt2、p-Akt2、Ezrin、p-Ezrin蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠小肠黏膜Na^+-K^+ATP酶活性显著降低(P<0.01),小肠黏膜中SGLT1、GLUT2、NHE3、p-p38MAPK、p-MAPKAPK2、p-Akt2、p-Ezrin蛋白相对表达量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,补中益气汤中、高剂量组大鼠在第25,30天的腹泻指数明显下降(P<0.05,P<0.01),补中益气汤高剂量组大鼠小肠黏膜Na^+-K^+ATP酶活性显著提高(P<0.05),补中益气汤中、高剂量组的SGLT1、GLUT2蛋白相对表达量及补中益气汤高剂量组的NHE3、p-MAPKAPK2、p-Akt2、p-Ezrin蛋白相对表达量显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论通过提高SGLT1蛋白的表达,促进p38MAPK/Ezrin通路中蛋白的磷酸化,可能是补中益气汤治疗脾虚泄泻的机理之一。 展开更多
关键词 补中益气汤 脾虚泄泻 NA^+-K^+ATP酶 SGLT1/nhe3通路
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NHE1蛋白在胃癌和胃癌前病变中的表达及临床意义 被引量:19
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作者 滕小春 刘海峰 +3 位作者 刘永生 段丽 王国安 何俊堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期402-404,共3页
目的 检测NHE1蛋白在胃癌和胃癌前病变中的表达情况 ,初步探讨NHE1蛋白在胃粘膜癌变过程中的变化规律及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测NHE1蛋白在胃癌和胃癌前病变中的表达 ,其中正常胃粘膜15例 ,慢性萎缩性胃炎 15例 ,... 目的 检测NHE1蛋白在胃癌和胃癌前病变中的表达情况 ,初步探讨NHE1蛋白在胃粘膜癌变过程中的变化规律及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测NHE1蛋白在胃癌和胃癌前病变中的表达 ,其中正常胃粘膜15例 ,慢性萎缩性胃炎 15例 ,肠上皮化生 15例 ,异型增生 8例 ,胃癌 40例。结果  15例正常胃粘膜无表达 ,15例慢性萎缩性胃炎中有 2例表达 ,阳性率为 13 3 3 % ,15例肠上皮化生中有 3例表达 ,阳性率为 2 0 0 0 % ,8例异型增生中有 2例表达 ,阳性率为 2 5 0 0 % ,40例胃癌中有 3 3例表达 ,阳性率为 82 5 0 % ,胃癌与正常胃粘膜和各型胃癌前病变相比 ,具有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 NHE1蛋白在胃癌的表达显著高于正常胃粘膜和胃癌前病变 ,可能与胃癌的发生、生长、转移有着密切的关系。 展开更多
关键词 nhe-1蛋白 胃肿瘤 癌前病变
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白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制研究 被引量:5
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作者 刘海涛 黄娟 +2 位作者 施家希 张嘉骏 施旭光 《中药材》 CAS 北大核心 2023年第5期1255-1260,共6页
目的:探讨白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制。方法:Caco-2细胞建立体外肠道吸收模型,将细胞分别设为空白对照组、抑制剂(SGLT1抑制剂根皮苷、P38MAPK抑制剂SB203580、Ezrin抑制剂NSC668394)组、白术内酯Ⅰ组、白术内酯Ⅰ+抑... 目的:探讨白术内酯Ⅰ通过SGLT1/NHE3通路治疗腹泻的机制。方法:Caco-2细胞建立体外肠道吸收模型,将细胞分别设为空白对照组、抑制剂(SGLT1抑制剂根皮苷、P38MAPK抑制剂SB203580、Ezrin抑制剂NSC668394)组、白术内酯Ⅰ组、白术内酯Ⅰ+抑制剂组,采用2-NBDG测定白术内酯Ⅰ对Caco-2细胞葡萄糖摄取的影响;Western Blot法检测SGLT1、p-P38MAPK、p-MAPKAPK2、p-AKT2、p-Ezrin、MLCK、p-MLC、NHE3等蛋白表达,荧光定量PCR检测SGLT1、MLCK、NHE3 mRNA表达。结果:白术内酯Ⅰ促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,上调SGLT1、NHE3、MLCK的表达;此外,白术内酯Ⅰ增加了MLCK和P38MAPK/Ezrin信号通路中的蛋白磷酸化。结论:白术内酯Ⅰ可激活SGLT1促进Caco-2细胞葡萄糖摄取,通过P38MAPK/Ezrin信号通路上调其下游靶点NHE3和MLCK促进水钠吸收是其治疗腹泻的机制之一。 展开更多
关键词 白术内酯Ⅰ CACO-2细胞 SGLT1/nhe3信号通路 MLCK/MLC信号通路
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猪肠道钠氢交换载体(NHE3)mRNA表达的肠段特异性和发育性变化 被引量:2
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作者 邹仕庚 冯定远 +7 位作者 黄志毅 李岩 吴同山 左建军 职爱民 董泽敏 张常明 刘清神 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期343-348,共6页
旨在探讨猪肠道钠氢交换载体(NHE3)mRNA表达的肠段特异性和发育模式,为NHE在养猪生产中的应用提供理论依据。选取遗传背景相同的1、7、26、30、60、90和150 d蓝塘和长白公猪各5头,测体质量后屠宰,取十二指肠、空肠、回肠和结肠组织样品;... 旨在探讨猪肠道钠氢交换载体(NHE3)mRNA表达的肠段特异性和发育模式,为NHE在养猪生产中的应用提供理论依据。选取遗传背景相同的1、7、26、30、60、90和150 d蓝塘和长白公猪各5头,测体质量后屠宰,取十二指肠、空肠、回肠和结肠组织样品;以18S rRNA为内标基因,用实时荧光定量PCR法检测NHE3 mRNA在60 d长白猪表达的肠段特异性及其在蓝塘和长白猪肠道表达的发育模式。结果显示:长白猪肠道NHE3 mRNA的表达丰度为结肠、十二指肠、空肠和回肠依次降低,且结肠显著高于空肠和回肠(P<0.05)。不同猪种NHE3mRNA在十二指肠和空肠的表达模式相似;蓝塘和长白猪NHE3 mRNA的表达丰度分别在7和30 d(十二指肠)、7和26 d(空肠)达最高水平(P<0.05)。不同猪种结肠NHE3 mRNA的表达模式不同,分别与其在十二指肠和空肠的发育呈现不同的模式;蓝塘猪结肠NHE3 mRNA的表达丰度在26、90和150 d时显著低于长白猪(P<0.05)。以上结果说明,猪肠道NHE3 mRNA的表达受到发育阶段、品种和肠段的调控,且在十二指肠和空肠间具有品种稳定性。 展开更多
关键词 肠道 nhe3mRNA 肠段特异性 发育模式
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NHE-1反义基因对胃癌细胞的酸化作用及其意义 被引量:2
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作者 滕小春 刘海峰 +3 位作者 房殿春 杨仕明 王国安 陈刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期240-242,共3页
目的探讨Na+-H+交换泵-1(Na+-H+exchanger1,NHE-1)反义基因转染对人胃癌细胞内pH值(intracellu-larpH,pHi)的调节作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法构建人NHE-1基因反义真核表达载体,采用脂质体法将其转染至SGC-7901胃癌细胞中,采... 目的探讨Na+-H+交换泵-1(Na+-H+exchanger1,NHE-1)反义基因转染对人胃癌细胞内pH值(intracellu-larpH,pHi)的调节作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法构建人NHE-1基因反义真核表达载体,采用脂质体法将其转染至SGC-7901胃癌细胞中,采用荧光探针检测转染前后细胞内pH值的变化以及对细胞增殖和凋亡的影响。结果转染反义基因的细胞pHi明显降低,增殖能力降低,细胞凋亡率增加。结论NHE-1基因的表达在肿瘤细胞pHi及增殖和凋亡调节中起重要作用。 展开更多
关键词 nhe1基因 真核表达载体 反义基因治疗 胃癌
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过表达NHE1通过上调钙蛋白酶活性降低RAW264.7细胞ABCA1蛋白表达 被引量:4
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作者 莫显刚 王兰 +5 位作者 郭静 洪伟 龙世棋 张莉 向凝 杨涓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期12-16,共5页
目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细... 目的探讨过表达钠氢交换体1(NHE1)对RAW264.7细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达的影响。方法采用Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测NHE1-EGFP融合蛋白细胞内定位,酸负载p H回复检测NHE1活性,Western blot法检测NHE1-EGFP融合蛋白对RAW264.7细胞ABCA1蛋白水平及钙蛋白酶(calpain)活性的影响,加入calpain抑制剂N-乙酰基-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-正亮氨酸(ALLN),Western blot法检测肝脏X受体激动剂TO-901317诱导ABCA1蛋白表达水平的影响。结果 Ad NHE1腺病毒感染RAW264.7细胞后,高表达NHE1-EGFP融合蛋白,定位在细胞质及细胞膜。NHE1-EGFP融合蛋白可降低ABCA1蛋白的表达水平并提高calpain活性,而calpain抑制剂ALLN能阻断ABCA1蛋白表达水平降低。结论 NHE1过表达通过上调calpain活性而降低ABCA1蛋白表达水平。 展开更多
关键词 钠氢交换体1(nhe1) 钙蛋白酶(calpain) RAW264.7细胞 三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1) TO-901317
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NHE1在心肌肥大,心肌纤维化和心衰中的作用 被引量:6
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作者 金振晓 辛梅 +1 位作者 陈涛 周京军 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2005年第6期536-538,共3页
心肌肥大、心肌纤维化是多种慢性心衰的共同病理学改变,钠氢交换体1(NHE1)是多种因子介导的心肌肥大和心肌纤维化的信号转导通路上的共同途径,直接参与了其病理生理学过程,这些因子包括多种生长因子、肾上腺素能受体激动剂、血管紧张素... 心肌肥大、心肌纤维化是多种慢性心衰的共同病理学改变,钠氢交换体1(NHE1)是多种因子介导的心肌肥大和心肌纤维化的信号转导通路上的共同途径,直接参与了其病理生理学过程,这些因子包括多种生长因子、肾上腺素能受体激动剂、血管紧张素、内皮素、凝血酶以及直接作用于细胞上的机械性张力。从理论推理和实验学证据两方面研究NHE1参与心肌肥大、纤维化和心衰的机制具有重要的意义。 展开更多
关键词 心肌 钠氢交换体(nhe1) 心力衰竭 纤维化 肥大
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腺苷通过NHE-1/CaN途径拮抗大鼠低氧性右心室心肌肥厚 被引量:2
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作者 林明静 黄秀兰 +1 位作者 谭建新 王波 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期734-737,共4页
目的观察腺苷及其激动剂拮抗右心室肥厚的作用,并探讨其作用机制。方法 56只Sprague-Dawley大鼠随机分成常氧对照组、低氧对照组、低氧处理组(低氧+腺苷组、低氧+腺苷A1受体激动剂(CPA)、低氧+腺苷A2受体激动剂(NECA)、低氧+CP... 目的观察腺苷及其激动剂拮抗右心室肥厚的作用,并探讨其作用机制。方法 56只Sprague-Dawley大鼠随机分成常氧对照组、低氧对照组、低氧处理组(低氧+腺苷组、低氧+腺苷A1受体激动剂(CPA)、低氧+腺苷A2受体激动剂(NECA)、低氧+CPA+A1受体阻滞剂(DPCPX)、低氧+NECA+A2b受体抑制剂MRS1754组)。大鼠置于低氧仓(氧浓度为9.5%~10.5%)连续低氧21 d。各处理组于低氧第7天使用植入式胶囊渗透压泵给药,持续时间为14 d,实验终点时,测定大鼠右心室肥厚程度,采用PCR法检测右心室心肌组织中NHE-1 mRNA、CnAβmRNA的相对含量。结果 1、慢性低氧对照组大鼠RV/(LV+S)为0.369±0.033、RV/BW比值为0.75±0.095,均明显高于常氧组(0.271±0.010,0.59±0.039)(均P〈0.001)及低氧腺苷处理组(0.281±0.022,0.650±0.077)(P〈0.001,P=0.025)低氧+CPA组(0.313±0.021,0.66±0.067)(均P〈0.001)、低氧+NECA组(0.333±0.019,0.68±0.074)(均P〈0.001);2、右心室心肌NHE-1 mRNA、CnAβmRNA表达在低氧组均高于常氧组(均P〈0.001)及腺苷处理组低氧+CPA、低氧+NECA组(均P〈0.001)。结论腺苷及其受体激动剂可通过NHE-1/CaN信号通路拮抗低氧性右心室心肌肥厚。 展开更多
关键词 腺苷 低氧 心肌肥厚 nhe-1
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人肺癌组织细胞NHE-1 mRNA表达及其意义的研究 被引量:5
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作者 黄桂君 厉为良 钱桂生 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期60-61,共2页
目的 :研究人肺癌组织细胞NHE - 1基因表达水平 ;探讨人肺癌细胞在整体条件下PHi调节的分子机制及其生物学意义。方法 :以半定量逆转录PCR研究了 1 4例人肺癌组织手术新鲜标本的NHE - 1mRNA的表达水平。结果 :人肺癌组织细胞NHE - 1mRN... 目的 :研究人肺癌组织细胞NHE - 1基因表达水平 ;探讨人肺癌细胞在整体条件下PHi调节的分子机制及其生物学意义。方法 :以半定量逆转录PCR研究了 1 4例人肺癌组织手术新鲜标本的NHE - 1mRNA的表达水平。结果 :人肺癌组织细胞NHE - 1mRNA表达水平非常显著地高于正常肺组织 (p <0 0 0 1 ) ,系正常肺组织的 1 1 81倍。结论 :人肺癌组织细胞通过上调NHE - 1基因超表达 ,以增强Na+ /H+ 交换 ,可能是其在整体条件下PHi调节的主要分子机制和特点。 展开更多
关键词 肺癌 组织细胞 nhe-1mRNA
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肝癌组织中NHE1蛋白的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 李杰 窦科峰 +4 位作者 刘艳雷 张洪涛 刘卫辉 李韧 王德盛 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期986-988,共3页
目的:研究人原发性肝癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)中的钠氢交换蛋白1(Na+/H+ exchanger1,NHE1)的表达以及与肝癌侵袭转移的关系,进一步探讨其在临床中的意义。方法:用免疫组织化学方法检测人HCC组织、癌旁组织中NHE1蛋白的表达水平... 目的:研究人原发性肝癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)中的钠氢交换蛋白1(Na+/H+ exchanger1,NHE1)的表达以及与肝癌侵袭转移的关系,进一步探讨其在临床中的意义。方法:用免疫组织化学方法检测人HCC组织、癌旁组织中NHE1蛋白的表达水平,分析人HCC组织中NHE1蛋白的表达情况与临床病理因素之间的相关性。结果:人HCC组织中NHE1蛋白的表达显著高于癌旁组织中NHE1蛋白的表达(t=17.821,P<0.05),其阳性率也显著高于癌旁组织(χ2=42.507,P<0.05)。NHE1蛋白的表达与组织学分级、临床TNM分期以及有无门静脉癌栓密切相关(P<0.05),而与HCC患者的年龄、肿瘤大小、肿瘤个数、血清AFP水平临床病理学指标无关(P>0.05)。结论:NHE1蛋白在人HCC组织中表达水平升高,可能与HCC的恶性程度、疾病的进程以及人HCC的侵袭转移有密切的关系。 展开更多
关键词 nhe1蛋白 肝癌 侵袭 转移
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突变型Braf通过NHE1促进胶质母细胞瘤的侵袭 被引量:1
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作者 石文健 刘志广 +4 位作者 张欢 赵喜庆 李玉凤 刘艳坤 李玉辉 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期1094-1097,共4页
突变型Braf与多种恶性肿瘤的发生密切相关。为了研究Braf对NHE1活性的调控及对胶质瘤侵袭性的影响,本研究选用人神经胶质瘤母细胞系U251细胞,采用Matrigel-transwell方法区分侵袭能力不同的胶质瘤母细胞,通过BCECF荧光探针检测其胞... 突变型Braf与多种恶性肿瘤的发生密切相关。为了研究Braf对NHE1活性的调控及对胶质瘤侵袭性的影响,本研究选用人神经胶质瘤母细胞系U251细胞,采用Matrigel-transwell方法区分侵袭能力不同的胶质瘤母细胞,通过BCECF荧光探针检测其胞内pH值,分析侵袭性不同的胶质瘤母细胞中NHE1活性的差异;并通过实时荧光定量PCR检测侵袭性不同的胶质瘤母细胞中Braf的表达水平。利用BCECF荧光探针实验和Matrigel-transwell方法检测Braf mRNA表达水平对细胞内NHE1活性及细胞侵袭能力的影响。结果表明:胶质母细胞的侵袭性受Braf表达水平的正向调控。Braf可能通过正向调控NHE1的活性,创造有利于胶质母细胞侵袭的微环境,促进细胞侵袭。 展开更多
关键词 人胶质瘤母细胞瘤 突变型 BRAF nhe1
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善胃Ⅰ号方对胃癌前病变大鼠胃粘膜NHE1蛋白及胃内pH值的影响 被引量:2
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作者 刘清君 刘彩梅 +2 位作者 袁红霞 施伟东 宋宁 《中国现代中药》 CAS 2009年第10期34-36,共3页
目的:通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜NHE1蛋白及胃内pH值的影响,从胃内环境角度,探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法:将80只健康Wistar大鼠随机分为4组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物组和善胃Ⅰ号方组,每组20... 目的:通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜NHE1蛋白及胃内pH值的影响,从胃内环境角度,探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法:将80只健康Wistar大鼠随机分为4组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃粘膜NHE1蛋白的表达水平,高精度酸度计测定大鼠胃液pH值的变化。结果:善胃Ⅰ号方组NHE1蛋白的阳性表达率及胃液pH值较模型对照组及阳性药物组均明显降低(P<0.05)。结论:善胃I号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃粘膜NHE1蛋白的表达,降低胃液pH值,有效维持胃内酸性环境,从而起到干预胃癌前病变发展的作用。 展开更多
关键词 善胃Ⅰ号方 胃癌前病变 nhe1蛋白 胃内PH值
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NHE基因家族的研究进展 被引量:2
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作者 黄桂君 钱桂生 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第5期425-429,共5页
Na+/H+交换泵(Na+/H+exchanger,NHE)是存在于所有脊椎动物细胞中的重要跨膜蛋白,该蛋白质涉及细胞的多种功能,包括细胞内pH值调节、细胞体积的控制以及离子转运等.目前已克隆了五个亚型NHE的cDN... Na+/H+交换泵(Na+/H+exchanger,NHE)是存在于所有脊椎动物细胞中的重要跨膜蛋白,该蛋白质涉及细胞的多种功能,包括细胞内pH值调节、细胞体积的控制以及离子转运等.目前已克隆了五个亚型NHE的cDNA,它们构成了脊椎动物细胞离子转运泵的一个基因家族.这五个亚型的表达水平及活性可受多种因素的调节.在肿瘤、高血压及糖尿病等疾病中,已发现NHE1亚型的表达水平和活性显著增高.因此,研究NHE1的转录及活性调节机制,将可能为这些疾病的诊治提供新的手段. 展开更多
关键词 nhe基因家族 钠泵 基因表达调控 肿瘤 高血压
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自发性高血压大鼠NHE-1基因表达与左心室肥厚的相关性 被引量:2
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作者 张卫 宾建平 +1 位作者 李国标 刘启才 《实用医学杂志》 CAS 2007年第13期1962-1964,共3页
目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)NHE-1基因表达与左心室肥厚的相关性。方法:对SHR和同源血压正常大鼠(WKY)进行平均血压、左室重量(LVW)和体重(BW)的测定,同时采用实时定量荧光检测两组大鼠心肌组织中NHE-1mRNA的拷贝数。结果:SHR组与WK... 目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)NHE-1基因表达与左心室肥厚的相关性。方法:对SHR和同源血压正常大鼠(WKY)进行平均血压、左室重量(LVW)和体重(BW)的测定,同时采用实时定量荧光检测两组大鼠心肌组织中NHE-1mRNA的拷贝数。结果:SHR组与WKY组相比,SHR组的LVW、LVW/BW明显高于WKY组(r左室重=0.700,r左室重体重之比/=0.617,P<0.01),大鼠的平均血压与LVW量、LVW/BW呈正相关(P<0.01);SHR组的心肌组织NHE-1mRNA的表达增高(P<0.01)。结论:SHR的心肌组织NHE-1mRNA的表达增高,提示NHE-1可能参与心肌肥厚的发生、发展过程。 展开更多
关键词 高血压 大鼠 近交SHR 左室肥厚 nhe-1基因 荧光PCR
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NHE基因研究进展 被引量:2
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作者 滕小春 刘海峰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期177-179,共3页
关键词 nhe基因 肿瘤 细胞内PH值
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人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建 被引量:1
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作者 黄桂君 吴国明 +1 位作者 张青 钱桂生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期538-540,共3页
目的 构建人肺癌细胞Na+/H+交换泵 1(Na+/H+exchanger 1,NHE 1)基因的反义表达载体 ,为将来能在体内应用抑制NHE 1基因表达的肿瘤治疗奠定基础。方法 采用PCR技术从人肺癌A5 49细胞基因组中克隆出长为 45 4bp的NHE 1基因外显子部分序... 目的 构建人肺癌细胞Na+/H+交换泵 1(Na+/H+exchanger 1,NHE 1)基因的反义表达载体 ,为将来能在体内应用抑制NHE 1基因表达的肿瘤治疗奠定基础。方法 采用PCR技术从人肺癌A5 49细胞基因组中克隆出长为 45 4bp的NHE 1基因外显子部分序列 ,在上、下游引物的 5’ 端带上BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点。然后将该片段反向插入逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点。最后对产生的重组子进行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。结果 经琼脂糖凝胶电泳鉴定 ,所克隆的目的片段大约为 46 7bp ,并成功地连接到pLXSN载体上 ,而DNA测序证实克隆并插入到载体中的片段为目的片段。结论 本实验已成功地克隆了NHE 1的目的片段 ,并将其反向插入到pLXSN中 ,构建了NHE 1反义表达载体pNHE 展开更多
关键词 nhe-1基因 肺肿瘤 反义技术 重组载体 克隆
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