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百脉根AD-cDNA文库的构建及与结瘤因子受体NFR1相互作用蛋白的鉴定 被引量：3
1
作者 朱浩 朱辉 +2 位作者 杨绮 陈春芬 张忠明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期793-798,共6页
以豆科植物百脉根为材料,构建了AD-cDNA表达文库。其库容量达到每3μg DNA 2×106酵母转化子,空载率为12.5%,平均片段长度为1.5 kb。以百脉根结瘤因子受体激酶基因1(nod factor receptor kinase,NFR1)蛋白激酶结构域的DNA片段(NFR1-... 以豆科植物百脉根为材料,构建了AD-cDNA表达文库。其库容量达到每3μg DNA 2×106酵母转化子,空载率为12.5%,平均片段长度为1.5 kb。以百脉根结瘤因子受体激酶基因1(nod factor receptor kinase,NFR1)蛋白激酶结构域的DNA片段(NFR1-PK)为诱饵,利用酵母双杂技术,筛选与NFR1相互作用的基因。结果在含X-gal的四缺选择性培养基上筛选到120个克隆。经质粒抽取、PCR鉴定、回转酵母验证得到80个阳性克隆。对26个确定阳性克隆的外源片段进行测序和同源性分析,通过NCBI数据库比对分析鉴定含有JAB1、AT-RICH结构域等4个与NFR1-PK相互作用的不同基因。通过半定量RT-PCR观察在百脉根中这些基因的表达情况,其结果可为进一步研究NFR1基因的功能和调控机制提供材料。 展开更多
关键词 百脉根 AD-cDNA文库 nfr1 酵母双杂交
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百脉根中Lj5NG4与结瘤因子受体LjNFR1互作调控根瘤菌侵染
2
作者 宋嘉宾 端木德强 《湖北农业科学》 2020年第5期145-151,共7页
以百脉根结瘤因子受体激酶LjNFR1为诱饵,通过建立百脉根根瘤共生不同时期的酵母膜双杂文库筛选获得了一个与之互作的生长素相关转运蛋白Lj5NG4。通过酵母双杂交和烟草Split-Luc等试验进一步证实了Lj5NG4与LjNFR1的蛋白互作。利用CRISPR-... 以百脉根结瘤因子受体激酶LjNFR1为诱饵,通过建立百脉根根瘤共生不同时期的酵母膜双杂文库筛选获得了一个与之互作的生长素相关转运蛋白Lj5NG4。通过酵母双杂交和烟草Split-Luc等试验进一步证实了Lj5NG4与LjNFR1的蛋白互作。利用CRISPR-Cas9基因敲除及超表达技术创建相关转基因材料,研究发现Lj5NG4可能在根瘤菌侵染前期起负调控作用,但对结瘤过程没有显著影响。同时启动子表达也证实了Lj5NG4在侵染前期根毛中强烈表达,成熟根瘤内部不表达。外源施加生长素试验发现低浓度的生长素会减弱Lj5NG4突变体的早期侵染表型,这表明生长素在共生结瘤发育中通过Lj5NG4发挥功能。 展开更多
关键词 百脉根 根瘤菌侵染 Ljnfr1 Lj5NG4 生长素
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基于nRF24E1的射频无线会议系统的设计与实现 被引量：1
3
作者 邵敏 李国新 +1 位作者 高晓芳 唐晓东 《信息技术与信息化》 2006年第6期100-104,共5页
本文利用射频收发芯片nRF24E1以及自行设计的外围电路,实现了一个专门针对中、小型和临时会议的无线会议系统。主要介绍了该会议系统的软、硬件的设计与实现。实验结果表明:本系统具有结构简单、成本低廉、可操作性高和升级能力强等特点。
关键词 无线会议系统 nFR24E1
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基于Keap1/Nfr2/ARE信号通路研究机械相关性肺损伤分子机制 被引量：5
4
作者 许宝胜 刘洪涛 +5 位作者 冶国栋 曹洪超 莫晨玲 童广清 谈燕燕 许欣 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期317-322,共6页
目的基于Keap1/Nfr2/ARE信号通路探索机械通气相关肺损伤(ventilation induced lung injury,VILI)形成的分子机制。方法给予SD大鼠过度机械通气建造VILI模型;HE染色检测对照组(自主呼吸)、正常潮气量(VT)组(VT为8 mL/kg)、大VT组(VT为40... 目的基于Keap1/Nfr2/ARE信号通路探索机械通气相关肺损伤(ventilation induced lung injury,VILI)形成的分子机制。方法给予SD大鼠过度机械通气建造VILI模型;HE染色检测对照组(自主呼吸)、正常潮气量(VT)组(VT为8 mL/kg)、大VT组(VT为40 mL/kg)肺组织病理变化;检测各组肺组织湿重/干重(W/D)比值变化;BCA法检测各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白的变化;ELISA法检测各组BALF和血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-18)以及肺组织中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的水平变化;TBA法检测肺组织中丙二醛(MDA)水平变化;Western blot实验检测巨噬细胞中Nod样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1蛋白以及肺组织中Keap1、Nrf2蛋白的变化;逆转录PCR检测各组肺组织中SOD mRNA、HO-1 mRNA表达变化。结果过度机械通气可损伤肺组织,导致肺泡破裂、炎症细胞浸润和红细胞增多;与对照组和正常VT组相比,大VT组肺组织W/D值、8-OHdG和MDA水平,BALF中总蛋白、IL-1β、IL-18以及血清中IL-1β、IL-18水平均显著上升(P均<0.05),肺泡巨噬细胞中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白以及肺组织中Keap1蛋白表达上升(P均<0.05),肺组织中Nrf2蛋白、SOD mRNA、HO-1 mRNA表达下降(P均<0.05)。结论大VT通气可以使肺组织发生急性炎症性损伤并导致VILI的发生,其机制为过度通气引起Keap1/Nrf2-ARE通路抑制和活性氧(ROS)清除能力的下降,进而引起肺泡巨噬细胞产生NLRP3炎症小体,参与VILI的形成。 展开更多
关键词 呼吸机相关性肺损伤 活性氧 Keap1/Nfr2/ARE信号通路 机制
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基于nRF24E1和MSP430低功耗肌电信号监测系统设计
5
作者 胡大洋 《福建电脑》 2010年第5期148-149,共2页
介绍了利用TI公司新一代16位单片机MSP430F425和nFR24E1射频收发器芯片组成的一种无线表面肌电信号采集系统的设计方案。根据表面肌电信号的特点,设计出了相应的调理电路,并给出了系统的硬件设计、软件设计和通讯协议的实现方案。
关键词 表面肌电信号 nFR24E1 MSP430F425
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头孢他啶通过miR-218-5p调控Nfr2/HO-1信号通路对LPS诱导的慢性支气管炎大鼠模型气道炎症和阻塞的改善作用 被引量：1
6
作者 王梦迪 丁浩 《免疫学杂志》 CSCD 2024年第8期655-662,共8页
目的研究头孢他啶通过调控微小RNA-218-5p(miR-218-5p)介导核因子E2-相关因子2(Nfr2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的慢性支气管炎(CB)大鼠的改善作用。方法在动物水平上,采用气管内注射LPS构建CB模型。将40只大鼠随... 目的研究头孢他啶通过调控微小RNA-218-5p(miR-218-5p)介导核因子E2-相关因子2(Nfr2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的慢性支气管炎(CB)大鼠的改善作用。方法在动物水平上,采用气管内注射LPS构建CB模型。将40只大鼠随机分为对照组、模型组、头孢他啶组(肌肉注射头孢他啶200 mg·kg-1)、头孢他啶+miR-218-5p inhibitor组(肌肉注射头孢他啶200 mg·kg-1+尾静脉注射miR-218-5p inhibitor 100 nmol·ml^(-1)),每组10只,各组给药每天2次,连续3 d。苏木精-伊红染色法(HE)检测大鼠肺部组织病理学;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-218-5p表达;进行气道阻力(RI)检测;酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症介质水平;免疫荧光检测黏蛋白5AC(MUC5AC)、黏蛋白5B(MUC5B)阳性表达;蛋白免疫印迹检测Nfr2/HO-1通路相关蛋白表达。细胞水平上,参照动物水平进行分组,其中头孢他啶组采用10μmol/L头孢他啶处理,头孢他啶+miR-218-5p inhibitor组采用10μmol/L头孢他啶+10μmol/L miR-218-5p inhibitor处理。通过双荧光素酶实验、qRT-PCR、ELISA分别检测各组Nrf2、miR-218-5p、HO-1靶向关系、mRNA表达水平及抗氧化水平。结果动物实验表明,对照组、模型组、头孢他啶组miR-218-5p水平分别为1.00±0.17、0.33±0.06、0.72±0.14;对照组、模型组、头孢他啶组、头孢他啶+miR-218-5p inhibitor组RI分别为(0.23±0.03)、(0.62±0.08)、(0.47±0.06)、(0.59±0.08)cmH_(2)O·s·ml^(-1);IL-6水平分别为(93.84±18.44)(231.16±46.98)(167.89±32.42)、(204.48±40.39)pg·ml^(-1);TNF-α水平分别为(9.06±1.73)、(44.03±8.17)、(31.41±6.72)、(39.15±7.13)pg·ml^(-1);巨噬细胞炎症蛋白1α水平分别为(724.32±133.82)、(1481.18±225.13)、(1007.50±196.69)、(1226.76±207.27)pg·ml^(-1);趋化因子C-C基序配体5水平分别为(166.07±33.61)、(584.20±94.93)、(322.55±57.34)、(463.89±84.04)pg·ml^(-1);MUC5AC阳性率分别为(31.34±5.86)%、(75.48±10.99)%、(58.11±8.71)%、(68.02±9.82)%;MUC5B阳性率分别为(29.62±5.90)%、(69.45±9.33)%、(48.27±8.07)%、(56.85±9.04)%;Nfr2水平分别为1.00±0.18、0.67±0.13、1.36±0.26、0.94±0.15;HO-1水平分别为1.00±0.19、0.52±0.12、0.93±0.15、0.79±0.13;以上指标模型组与对照组、头孢他啶组与模型组、头孢他啶+miR-218-5p inhibitor组与头孢他啶组比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。在细胞水平上,对照组、模型组、头孢他啶组、头孢他啶+miR-218-5p inhibitor的HO-1 WT荧光素酶活性分别为1.00±0.16、0.48±0.07、0.78±0.10、0.65±0.09,头孢他啶组、头孢他啶+miR-218-5p inhibitor组中的Nrf2、miR-218-5p、HO-1mRNA及Nrf2、HO-1蛋白表达水平均高于模型组,且头孢他啶组水平高于头孢他啶+miR-218-5p inhibitor组。与模型组比较,头孢他啶组、头孢他啶+miR-218-5p inhibitor组抗氧化水平升高,且头孢他啶组高于头孢他啶+miR-218-5p inhibitor组,以上差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论头孢他啶可上调Nfr2,诱导miR-218-50表达,进而激活Nfr2/HO-1信号通路,改善LPS诱导的CB大鼠的气道炎症及阻塞。 展开更多
关键词 慢性支气管炎 头孢他啶 微小RNA-218-5p Nfr2/HO-1信号通路 气道炎症 气道黏液高分泌
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