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β-APP和NF-L在评估弥漫性轴索损伤大鼠损伤程度中的价值 被引量:11
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作者 向玲 张雨婷 +3 位作者 韦红 梁平 彭玲珑 李禄生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第22期2255-2260,共6页
目的利用自制装置建立轻、中、重度的弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)大鼠模型,观察不同时间点β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,β-APP)及神经丝蛋白轻链多肽(neurofilament light polypeptide,NF-L)的变化... 目的利用自制装置建立轻、中、重度的弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)大鼠模型,观察不同时间点β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,β-APP)及神经丝蛋白轻链多肽(neurofilament light polypeptide,NF-L)的变化与恢复期的学习记忆能力的相关性。方法健康成年SD大鼠100只,随机分为正常对照组和A、B、C(轻、中、重型致伤)DAI组。伤后6、24、72 h及1、2周取脑组织切片行β-APP免疫组织化学染色;24 h时脑组织切片行HE染色和NF-L免疫组织化学染色;2周时行水迷宫测试。将损伤后24 h各组脑组织切片感兴趣区内测定的β-APP和NF-L累积光密度(IOD)值与损伤后恢复期大鼠的学习记忆能力做相关性分析。结果伤后24 h取脑组织肉眼观察致伤组大脑表面、蛛网膜下腔、脑室等区域未见出血,光镜下可见A、B、C组大鼠的胼胝体区神经束疏松、紊乱,血管淤滞,空泡形成,神经元肿胀变性,细胞核显示不清,突触结构模糊等经典DAI病理特征,NF-L免疫组化鉴定实验组均有典型中线部位轴索损伤改变。实验组伤后6、24、72 h及1、2周与对照组相比各时间点胼胝体β-APP均有升高(P<0.05),组内各时间点呈动态变化,于伤后24 h最高。伤后24 h,实验组NF-L免疫组化染色大脑水管水平脑干轴突和神经元胞体阳性染色较正常组增强,半定量分析A、B、C3组间差异有统计学意义(P<0.05)。水迷宫测试与正常对照组比较,A组大鼠学习记忆功能无明显下降;B、C两组下降明显(P<0.05)。损伤后24 h,A、B、C 3组脑组织切片感兴趣区内测定的β-APP和NF-L累积光密度(IOD)值与损伤后恢复期大鼠的学习记忆能力呈负相关(r分别为-0.937、-0.939)。结论β-APP和NF-L不仅可以反映DAI动物模型轴索损伤的程度,还可以早期预测损伤后大鼠的学习记忆恢复能力,可能成为DAI损伤的特异性分子探针。 展开更多
关键词 弥漫性轴索损伤 免疫组织化学 Β-淀粉样前体蛋白 神经丝蛋白轻链多肽 水迷宫 大鼠
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神经再生素对背根神经节细胞GAP-43和NF-L基因表达的影响 被引量:32
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作者 丁斐 刘梅 顾晓松 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期231-234,共4页
目的 :观察中药有效组分神经再生素作用于神经细胞生长过程中 ,相关基因的表达变化 ,探讨神经再生素促神经生长的分子生物学机制。方法 :采用RT PCR法 ,观察神经再生素在促大鼠背根神经节生长过程中(4h、12h、2 4h) ,生长相关蛋白 43(GA... 目的 :观察中药有效组分神经再生素作用于神经细胞生长过程中 ,相关基因的表达变化 ,探讨神经再生素促神经生长的分子生物学机制。方法 :采用RT PCR法 ,观察神经再生素在促大鼠背根神经节生长过程中(4h、12h、2 4h) ,生长相关蛋白 43(GAP 43)和神经丝蛋白 (NF L)基因表达的变化。结果 :神经再生素可使背根神经节细胞GAP 43和NF LmRNA的表达量增加。结论 :神经再生素可作用于体外培养的神经细胞 。 展开更多
关键词 神经再生素 生长相关蛋白 神经丝蛋白 RT-PCR 基因表达 背根神经节细胞
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醒脑开窍针刺法对脑缺血再灌注大鼠海马细胞骨架相关蛋白MAP-2、NF-L的影响 被引量:27
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作者 程莹莹 倪光夏 徐文韬 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期2999-3002,共4页
目的:探讨醒脑开窍针刺法对脑缺血再灌注大鼠海马细胞骨架调节作用的分子机制。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为正常组、假手术组、模型组、针刺组、对照组。采用改进的Longa线栓法制备大脑中动脉梗塞模型。针刺组采用醒脑开窍针刺法,对... 目的:探讨醒脑开窍针刺法对脑缺血再灌注大鼠海马细胞骨架调节作用的分子机制。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为正常组、假手术组、模型组、针刺组、对照组。采用改进的Longa线栓法制备大脑中动脉梗塞模型。针刺组采用醒脑开窍针刺法,对照组采用传统阳明经针刺法。参考Bederson 6级5分法进行神经功能评分,运用Real-time PCR和Western Blot检测脑缺血后24h大鼠海马MAP-2、NF-L的mRNA及蛋白表达量变化。结果:与模型组相比,针刺组和对照组均可改善缺血再灌注大鼠神经功能缺损症状(P<0.01),针刺组和对照组治疗前后神经功能缺损症状差异具有显著性意义(P<0.01),但治疗后两组神经功能评分比较差异无统计学意义;针刺组和对照组可上调MAP-2、NF-L的mRNA和蛋白表达,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05),且针刺组优于对照组(P<0.05)。结论:醒脑开窍针刺法与传统针刺法均可上调脑缺血再灌注大鼠海马MAP-2、NF-L的表达,且醒脑开窍针刺法的作用更为明显。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 醒脑开窍针刺法 微管相关蛋白-2 神经丝蛋白-L
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重型颅脑损伤病人血清NF-L和TIMP-2水平变化及临床意义 被引量:3
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作者 鲍彤 李静 +2 位作者 孔为园 杨磊 王鹏飞 《中国临床神经外科杂志》 2023年第5期307-310,共4页
目的探讨重型颅脑损伤(TBI)病人血清神经丝蛋白轻链多肽(NF-L)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2的水平变化及临床意义。方法2019年8月~2021年8月前瞻性收集重型TBI共122例,采用酶联免疫吸附试验检查入院血清NF-1和TIMP-2水平;伤后... 目的探讨重型颅脑损伤(TBI)病人血清神经丝蛋白轻链多肽(NF-L)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2的水平变化及临床意义。方法2019年8月~2021年8月前瞻性收集重型TBI共122例,采用酶联免疫吸附试验检查入院血清NF-1和TIMP-2水平;伤后6个月,应用GOS评分评估预后,其中4~5分为预后良好,1~3分为预后不良。结果伤后6个月,预后良好72例,预后不良50例。预后不良组血清NF-L以及TIMP-2水平明显高于预后良好组(P<0.05)。入院血清NF-L水平(r=-0.585)、TIMP-2水平(r=-0.542)与入院GCS评分呈明显负相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,血清NF-L、TIMP-2水平增高是重型TBI伤后6个月预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示血清NF-L1≥54.60 pg/ml联合血清TIMP-2≥42.59 ng/ml预测重型TBI伤后6个月预后不良的曲线下面积为0.854(95%CI 0.789~0.919),灵敏度为82.0%,特异度为70.8。结论重型TBI病人血清NF-L、TIMP-2水平明显增高,是伤后6个月预后不良的危险因素;两者联合应用对病人预后具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 重型颅脑损伤 神经丝蛋白轻链多肽(nf-l) 组织基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2) 血清 预后
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血清NF-L、NSE水平与ICU重症颅脑损伤减压术患者临床预后的关系 被引量:7
5
作者 卢跃 姚靖 +3 位作者 应国政 陈群 夏齐奂 杜斌 《浙江创伤外科》 2020年第3期410-412,共3页
目的探讨血清神经丝蛋白轻链多肽(NF-L)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平与ICU重症颅脑损伤减压术患者临床预后的关系。方法选取2016年至2018年本院ICU重症颅脑损伤患者60例,所有患者均接受标准大骨瓣减压术治疗,依据预后分为不良组和... 目的探讨血清神经丝蛋白轻链多肽(NF-L)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平与ICU重症颅脑损伤减压术患者临床预后的关系。方法选取2016年至2018年本院ICU重症颅脑损伤患者60例,所有患者均接受标准大骨瓣减压术治疗,依据预后分为不良组和良好组,检测两组血清NF-L、NSE水平,分析两种血清与ICU重症颅脑损伤减压术预后的关系。结果ICU重症颅脑损伤患者的血清NF-L、NSE高于健康人员,不良组患者的血清NF-L、NSE高于良好组,有统计学差异(P<0.05)。ROC曲线分析显示,在评估ICU重症颅脑损伤患者预后的敏感度、特异度、准确度中,NF-L>110pg/ml时为76.00%、74.29%、75.00%,NSE>29μg/L时为72.00%、71.43%、71.67%,NF-L联合NSE为88.00%、88.57%、88.33%,NF-L联合NSE明显高于两者单独(P<0.05)。结论血清NF-L、NSE与ICU重症颅脑损伤病情及预后有关,提示其可作为评估ICU重症颅脑损伤减压术预后的重要方法,且NF-L联合NSE检测效能更佳。 展开更多
关键词 血清nf-l、NSE ICU重症颅脑损伤 减压术 预后
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低分子量神经丝蛋白(NF-L)的体外组装
6
作者 佟向军 陈建国 翟中和 《实验生物学报》 CSCD 1998年第3期223-231,共9页
利用超速离心和离子交换层析技术,从牛脊髓中分离纯化了神经丝蛋白三组分:NF-L,NF-M和NF-H。应用电镜负染色和金属投影方法研究神经丝的形态结构与NF-L的体外组装,结果表明:神经丝由10nm的核心纤维与外周的丝状突起组成;在近似生理条件... 利用超速离心和离子交换层析技术,从牛脊髓中分离纯化了神经丝蛋白三组分:NF-L,NF-M和NF-H。应用电镜负染色和金属投影方法研究神经丝的形态结构与NF-L的体外组装,结果表明:神经丝由10nm的核心纤维与外周的丝状突起组成;在近似生理条件下,NF-L可在60min内组装成10nm纤维,纤维由4根亚丝缠绕而成;在碱性缓冲液中,NaCl能促进NF-L装配成短纤维,这种10nm的短纤维无法连接成长纤维。 展开更多
关键词 神经丝蛋白 分离 纯化 体外装配 组装过程
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NF-L蛋白在sf9细胞内表达能单独形成中间纤维样结构 被引量:3
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作者 陈建国 滕俊琳 +2 位作者 翟中和 中川辉良 广川信隆 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1995年第16期1504-1507,共4页
神经丝(neurofilament,NF)是中间纤维的一种类型,组成神经丝的蛋白按其分子量的不同可分为NF-L,NF-M和NF-H三种,分别代表低分子量、中等分子量和高分子量神经丝蛋白.在体外,NF-L能单独装配成10nm纤维,而NF-M或NF-H则只有在NF-L或其它类... 神经丝(neurofilament,NF)是中间纤维的一种类型,组成神经丝的蛋白按其分子量的不同可分为NF-L,NF-M和NF-H三种,分别代表低分子量、中等分子量和高分子量神经丝蛋白.在体外,NF-L能单独装配成10nm纤维,而NF-M或NF-H则只有在NF-L或其它类型的中间纤维蛋白存在的条件下才能一起组装成纤维.当NF基因被转染到成纤维细胞表达时,NF蛋白三组分都能单独与vimentin一起组装成稳定的细胞质纤维网架.利用IF缺陷型细胞SW13进行转染试验的结果显示,与Ⅲ型IF蛋白亚基(如vimentin)不同。 展开更多
关键词 神经丝蛋白 中间纤维 nf-l SF9细胞 细胞表达
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神经丝蛋白NF-L与NF-M杂合分子的表达与组装——中等分子量神经丝蛋白的第1段杆状区(Coil1)是影响装配的结构域 被引量:2
8
作者 佟向军 翟中和 陈建国 《中国科学(C辑)》 CSCD 1999年第4期337-345,共9页
神经丝是神经细胞所特有的中间纤维 ,由NF L ,NF M和NF H 3种蛋白组成 .NF L能在细胞内自组装 ,NF M则无自组装能力 .构建了两种杂合体分子ML和MML .ML由NF M的头部和NF L的其他部分组成 ,MML由NF M的头部加第 1段杆状区和NF L的第 2段... 神经丝是神经细胞所特有的中间纤维 ,由NF L ,NF M和NF H 3种蛋白组成 .NF L能在细胞内自组装 ,NF M则无自组装能力 .构建了两种杂合体分子ML和MML .ML由NF M的头部和NF L的其他部分组成 ,MML由NF M的头部加第 1段杆状区和NF L的第 2段杆状区加尾部组成 .将 2种杂合分子的cDNA转入缺乏内源性中间纤维的Sf9细胞中进行表达 .结果表明 ,ML能在细胞内组装出纤维形态 ,并可与NF M共同组装成平行的纤维束 ,MML无法形成纤维结构 ,说明NF M的第 1段杆状区是影响神经丝组装的结构域 . 展开更多
关键词 杂合分子 组装 nf-l NF-M 神经细胞 神经丝蛋白
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锦灯笼提取物片剂对急性咽炎大鼠的干预作用机制研究
9
作者 王媛媛 姜玲玲 +1 位作者 闫洁 徐保利 《现代中药研究与实践》 2025年第1期44-48,共5页
目的探讨锦灯笼提取物片剂对急性咽炎大鼠的作用及机制。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、锦灯笼提取物片剂低、中、高剂量组,每组8只。采用向大鼠咽喉喷15%氨水的方法建立急性咽炎大鼠模型。各组大鼠灌胃给药,每日2次,持续... 目的探讨锦灯笼提取物片剂对急性咽炎大鼠的作用及机制。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、锦灯笼提取物片剂低、中、高剂量组,每组8只。采用向大鼠咽喉喷15%氨水的方法建立急性咽炎大鼠模型。各组大鼠灌胃给药,每日2次,持续7 d。造模及给药期间每天观察并记录大鼠一般情况,并对咽喉组织情况进行评分;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠咽部组织病理学变化;ELISA法检测大鼠血清白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和前列腺素E2(PGE2)含量;血常规分析仪检测白细胞、淋巴细胞、单核细胞以及中性粒细胞数;Western blot法检测大鼠咽部组织中环氧合酶-2(COX-2)、核转录因子κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、核转录因子κB抑制蛋白(Iκ-B)及p-Iκ-B表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠咽部红肿程度显著增加,咽部组织评分显著升高(P<0.05);血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和PGE2水平均显著上升(P<0.05);白细胞、单核细胞以及中性粒细胞数显著增加(P<0.05),淋巴细胞数也增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,阳性组、锦灯笼给药高剂量、中剂量组大鼠的咽喉组织评分显著下降(P<0.05),阳性组和高剂量组口腔分泌量显著下降(P<0.05),阳性组和高剂量组血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和PGE2水平均显著下降(P<0.05),同时血常规分析得出阳性组、高剂量组和中剂量组白细胞、中性粒细胞数显著降低(P<0.05),低剂量组的淋巴细胞数、单核细胞数和中性粒细胞数显著降低(P<0.05),Western blot检测出锦灯笼组的NF-κB、p-NF-κB、p-Iκ-B、COX-2蛋白表达水平均显著下调(P<0.05),Iκ-B蛋白显著上调(P<0.05)。结论锦灯笼提取物片剂可显著改善急性咽炎大鼠的症状,其机制可能与调控NF-κB/COX-2信号通路有关。 展开更多
关键词 锦灯笼 急性咽炎 NF-ΚB COX-2 Iκ-B
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NF-L和NF-M在上皮细胞内表达并与角蛋白或波形纤维蛋白共组装
10
作者 潘宁 孙玉慧 +2 位作者 陈淑贞 金杨 陈建国 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第4期310-312,T001,共4页
神经丝及细胞质角蛋白纤维都是异源多聚体, 它们只有在与其他合适的中间丝蛋白亚基一起表达时才能装配成中间丝. 为了研究不同类型的中间丝蛋白间的组装特性, 构建了绿色荧光蛋白(GFP)与NF-L或NF-M融合蛋白的重组腺病毒表达载体, 并将... 神经丝及细胞质角蛋白纤维都是异源多聚体, 它们只有在与其他合适的中间丝蛋白亚基一起表达时才能装配成中间丝. 为了研究不同类型的中间丝蛋白间的组装特性, 构建了绿色荧光蛋白(GFP)与NF-L或NF-M融合蛋白的重组腺病毒表达载体, 并将目的基因在vero细胞内表达, 免疫荧光观察结果显示NF-L-GFP或GFP-NF-M不但能与细胞内源性波形纤维蛋白共组装, 而且同样能掺入到角蛋白纤维网络中. 展开更多
关键词 nf-l NF-M 角蛋白 波形纤维蛋白 VERO细胞 上皮细胞 神经丝蛋白 表达 共组装
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NF-Land NF-M are expressed in epithelial cells and coassem-ble with keratin or vimentin
11
作者 Ning Pan Yuhui Sun +2 位作者 Shuzhen Chen Yang Jin Jianguo Chen 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2001年第14期1165-1167,1233,共4页
Neurofilaments (NFs) and cytokeratins are both heteropolymers, which assemble into intermediate filaments (IPs) only when other proper IF subunit proteins are expressed simultaneously. To study the assembly property o... Neurofilaments (NFs) and cytokeratins are both heteropolymers, which assemble into intermediate filaments (IPs) only when other proper IF subunit proteins are expressed simultaneously. To study the assembly property of NFs, we constructed two recombinant adenovirus which could express NF-L or NF-M, fused with green fluorescent protein (GFP) respectively. Then they were introduced into vero cells, and expressed fusion protein. Double labels of GFP fluorescence and immunofluorescence staining indicated that NF-L-GFP or GFP-NF-M not only coassembled with endogenous vimentins, but also coassembled with keratins into a cytoplasmic network of filaments. 展开更多
关键词 nf-l NF-M KERATIN VIMENTIN VERO cell.
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消定膏干预NLRP3/NF-κB/Caspase-1通路治疗急性闭合性软组织损伤的作用机制
12
作者 王玉娟 贾永龙 +5 位作者 刘婧 许宏斌 强胜林 黄凯 陈环环 赵玲 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期328-334,共7页
目的探讨消定膏通过核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/核因子κB(NF-κB)/半胱天冬酶1(Caspase-1)通路抑制细胞焦亡,对急性闭合性软组织损伤的治疗效果。方法选取60只SPF级SD大鼠,随机分为4组:空白组、模型组、阳性对照组(使... 目的探讨消定膏通过核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/核因子κB(NF-κB)/半胱天冬酶1(Caspase-1)通路抑制细胞焦亡,对急性闭合性软组织损伤的治疗效果。方法选取60只SPF级SD大鼠,随机分为4组:空白组、模型组、阳性对照组(使用奇正消痛贴膏)和消定膏组(外用敷贴)。空白组不做任何处理,其余组在制备急性闭合性软组织损伤模型后,进行相应干预,治疗周期为7 d。通过损伤症状评分评估肿胀、疼痛、活动受限等情况。苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠腿部肌肉组织组织病理学变化。ELISA检测血清炎症因子IL-1β、TNF-α水平。TUNEL染色观察细胞焦亡情况。Western blot和免疫组化分析NLRP3、NF-κB、p65、Caspase-1蛋白表达水平,评估消定膏的疗效及作用机制。结果与模型组相比,消定膏组大鼠的肿胀程度、外观变化、活动情况及疼痛行为明显改善(均P<0.05),组织病理学结果显示炎症细胞浸润减少,肌纤维排列趋于正常;血清炎症因子IL-1β、TNF-α水平显著降低(均P<0.05);焦亡阳性细胞数及焦亡阳性率明显下降(均P<0.05);NLRP3、NF-κB、p65及Caspase-1蛋白表达明显降低(均P<0.05)。结论消定膏通过抑制NLRP3炎症小体活化及NF-κB信号通路,阻断Caspase-1依赖性细胞焦亡进程,减少IL-1β、TNF-α炎症因子释放,从而减轻急性软组织损伤后的炎症反应,促进组织修复。 展开更多
关键词 消定膏 急性闭合性软组织损伤 细胞焦亡 NLRP3炎症小体 NF-ΚB信号通路 CASPASE-1 炎症因子
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基于网络药理学和动物实验探讨香青兰总黄酮治疗血管性认知障碍的作用机制
13
作者 马尚佳 王璐 +6 位作者 李华 吕佳瑜 高德旺 张帅强 郭孖 吴丽娥 郭霞 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第4期675-684,共10页
目的基于网络药理学和体内动物实验,探讨香青兰总黄酮(TFDM)治疗血管性认知障碍(VCI)的分子机制及作用通路。方法检索有机小分子(PubChem)、瑞士目标预测(Swiss Target Prediction)数据库及文献检索获取TFDM活性成分及靶点,利用基因卡片... 目的基于网络药理学和体内动物实验,探讨香青兰总黄酮(TFDM)治疗血管性认知障碍(VCI)的分子机制及作用通路。方法检索有机小分子(PubChem)、瑞士目标预测(Swiss Target Prediction)数据库及文献检索获取TFDM活性成分及靶点,利用基因卡片(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库获取VCI的基因靶点,应用Venny软件获取TFDM与VCI的交集靶点。利用Cytoscape软件、String数据库构建蛋白质相互作用(PPI)图。通过注释、可视化和综合发现(DAVID)数据库进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,探讨TFDM治疗VCI的分子机制及信号通路。将24只大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、多奈哌齐(Donepezil)组、香青兰总黄酮(TFDM)组。除Sham组外,其余各组采用双侧颈总动脉永久结扎法造模。连续灌胃21 d后,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠海马CA1区及皮质病理变化,免疫组化检测大鼠脑组织闭锁小带蛋白1(ZO-1)阳性表达,Western blot检测大鼠脑组织核因子κB p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平。结果共得到TFDM成分39种,潜在靶点209个,VCI的基因靶点共10417个,交集靶点有193个。GO富集分析主要有活性氧的反应及代谢过程等,KEGG富集分析主要有TNF、IL-17等信号通路。动物实验表明,TFDM显著改善VCI大鼠学习记忆功能及脑组织病理损伤,显著上调ZO-1阳性表达,显著下调NF-κB p65、TNF-α蛋白水平(P<0.05)。结论TFDM从多通路、多靶点发挥药理作用治疗VCI,其关键机制可能与抑制TNF-α/NF-κB p65信号通路,减轻神经炎症,改善血脑屏障通透性有关。 展开更多
关键词 香青兰总黄酮 血管性认知障碍 网络药理学 神经炎症 TNF-α/NF-κB p65信号通路
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艾纳香总黄酮调控TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路干预大鼠慢性咽炎的作用与机制研究 被引量:1
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作者 魏永耀 刘畅 +3 位作者 刘薇 曹明未 牛梦伟 庞玉新 《药物评价研究》 北大核心 2025年第5期1188-1199,共12页
目的 探究艾纳香总黄酮干预慢性咽炎的作用及其可能机制。方法 利用网络药理学与分子对接分析艾纳香总黄酮干预慢性咽炎的生物调控过程与信号通路,构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络和“成分-靶点”网络。建立氨水诱导的慢性咽炎大鼠... 目的 探究艾纳香总黄酮干预慢性咽炎的作用及其可能机制。方法 利用网络药理学与分子对接分析艾纳香总黄酮干预慢性咽炎的生物调控过程与信号通路,构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络和“成分-靶点”网络。建立氨水诱导的慢性咽炎大鼠模型,给予艾纳香总黄酮干预后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠咽部组织病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)和白细胞介素-10(IL-10)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹(Western blotting)检测大鼠咽部组织Toll样受体4(TLR4)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路上关键基因与蛋白的表达。结果 共获得药物与疾病交集靶点177个,网络药理学与分子对接结果显示艾纳香总黄酮可以调节IL6、磷脂酰肌醇3激酶催化亚单位α(PI3KCA)、蛋白激酶B1(Akt1)、核因子κB1(NF-κB1)等核心靶点,调节异源性刺激反应等生物学过程,调控PI3K/Akt信号通路,从而干预慢性咽炎。体内实验结果表明,艾纳香总黄酮能明显改善大鼠咽部组织病理状态;显著降低大鼠血清中IL-6和PGE2水平(P<0.05、0.01),升高IL-10水平(P<0.01);显著下调大鼠咽部组织TLR4、PI3KCA、磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基1(PI3KR1)、Akt1、核因子κB激酶亚基β抑制因子(IKBKB)和NF-κB1 m RNA表达水平(P<0.01),TLR4、PI3K、Akt、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平及其磷酸化水平(P<0.05、0.01)。结论 艾纳香总黄酮可能通过调控TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路,减轻炎症反应,从而改善慢性咽炎。 展开更多
关键词 艾纳香 慢性咽炎 网络药理学 TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路 炎症反应
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毛壳素对卵巢癌细胞侵袭和迁移的调控机制研究 被引量:1
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作者 吴伟权 苏裕东 +1 位作者 萧丽娟 陈艳雅 《中国计划生育和妇产科》 2024年第4期47-51,58,F0004,共7页
目的体外研究毛壳素(chaetocin)对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响,并通过探讨硫氧还蛋白还原酶-1(TrxR1)和NF-κB通路的作用机制以期发现并验证毛壳素可能的抗癌属性。方法培养卵巢癌细胞系SK-OV-3和OVCAR-3,用毛壳素处理卵巢癌细胞,用CCK-... 目的体外研究毛壳素(chaetocin)对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响,并通过探讨硫氧还蛋白还原酶-1(TrxR1)和NF-κB通路的作用机制以期发现并验证毛壳素可能的抗癌属性。方法培养卵巢癌细胞系SK-OV-3和OVCAR-3,用毛壳素处理卵巢癌细胞,用CCK-8法分析毛壳素的细胞毒性和IC50,用EdU染色验证毛壳素的细胞毒性。将细胞分为6组,包括毛壳素0μm组、毛壳素8μm组、生理盐水+毛壳素0μm组、生理盐水+毛壳素8μm组、NF-κB激活剂1+毛壳素0μm组、NF-κB激活剂1+毛壳素8μm组。体外细胞伤口愈合实验检测细胞迁移率。Transwell细胞侵袭实验检测细胞侵袭率。qRT-PCR检测TrxR1 mRNA的表达。Western blot检测细胞质和细胞核中NF-κB的表达及检测全细胞中TrxR1、p-NF-κB、p-IKKα/β和p-IκBα的表达。结果毛壳素对卵巢癌细胞增殖有较强的抑制作用。毛壳素24 h对SK-OV-3和OVCAR-3细胞的IC50分别为(72.92±9.18)μm和(61.28±8.56)μm。8μm毛壳素为无细胞毒性的最大剂量。与毛壳素0μm组比,毛壳素8μm组抑制了SK-OV-3和OVCAR-3细胞的迁移和侵袭,并显著下调TrxR1、p-NF-κB、p-IKKα/β和p-IκBα的表达。与生理盐水+毛壳素8μm组比,NF-κB激活剂1+毛壳素8μm组显著促进了SK-OV-3和OVCAR-3细胞的迁移和侵袭,并显著上调了TrxR1、p-NF-κB、p-IKKα/β和p-IκBα的表达。结论毛壳素抑制卵巢癌细胞的增殖和TrxR1的表达,并通过抑制NF-κB通路的激活减少卵巢癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 毛壳素 硫氧还蛋白还原酶-1 核因子-ΚB 卵巢癌细胞 侵袭 迁移
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左旋紫草素基于调节NF-κB途径和NLRP3炎性体轴减轻急性胰腺炎动物模型胰腺组织损伤作用 被引量:1
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作者 余洁 杜恒 +2 位作者 秦清 吴安定 万里鹏 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2024年第9期22-27,共6页
目的探究左旋紫草素对急性胰腺炎动物模型胰腺组织损伤的作用及其作用机制。方法选取SD大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、左旋紫草素低剂量组和左旋紫草素高剂量组4组,每组12只。采用胆胰管逆行注射5%牛磺酸钠溶液构建急性胰腺炎模型... 目的探究左旋紫草素对急性胰腺炎动物模型胰腺组织损伤的作用及其作用机制。方法选取SD大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、左旋紫草素低剂量组和左旋紫草素高剂量组4组,每组12只。采用胆胰管逆行注射5%牛磺酸钠溶液构建急性胰腺炎模型,左旋紫草素低剂量组和高剂量组在造模前1 h及造模后分别腹腔注射左旋紫草素(10、20 mg/kg),模型组及假手术组给予等量0.9%氯化钠溶液。采用HE染色观察胰腺及心肌组织病理变化,免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹(Western blot)分析NF-κB信号通路和NLRP3炎性体轴相关蛋白的表达情况,酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠的胰腺及心肌组织出现明显的病理损伤,NF-κB、NLRP3蛋白阳性率及相关蛋白NF-κB p65、p-p56、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、ASC蛋白的相对表达水平显著升高(P<0.01),而IκBα的相对表达水平显著降低(P<0.01),且血清IL-1β、TNF-α、CK-MB水平显著升高(P<0.01)。与模型组相比,左旋紫草素低剂量组和高剂量组大鼠的胰腺及心肌组织损伤程度减轻,NF-κB、NLRP3蛋白阳性率及相关蛋白NF-κB p65、p-p56、NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白的相对表达水平显著降低(P<0.01),IκBα的相对表达水平显著升高(P<0.01),血清IL-1β、TNF-α、CK-MB水平显著降低(P<0.01),且左旋紫草素高剂量组的效果优于低剂量组。结论左旋紫草素能够通过调节NF-κB信号通路和NLRP3炎性体轴减轻急性胰腺炎动物模型胰腺组织损伤,为左旋紫草素在急性胰腺炎的治疗提供重要的参考。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 左旋紫草素 核因子ΚB信号通路 NLRP3炎性体轴
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艾纳香油通过NF-κB非经典信号影响花生四烯酸代谢缓解LPS所致巨噬细胞的炎症反应 被引量:5
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作者 何贤芳 王万林 +3 位作者 王鸿颖 刘瑞秀 易琼 王鲁 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期216-225,共10页
【目的】本文旨在探讨艾纳香油(BBO)通过核转录因子κB(NF-κB)非经典通路影响花生四烯酸(AA)代谢通路发挥抗炎作用。【方法】采用豚鼠离体回肠法检测BBO对慢反应物质(SRS-A)生成的影响,ELISA法检测BBO对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞前列腺... 【目的】本文旨在探讨艾纳香油(BBO)通过核转录因子κB(NF-κB)非经典通路影响花生四烯酸(AA)代谢通路发挥抗炎作用。【方法】采用豚鼠离体回肠法检测BBO对慢反应物质(SRS-A)生成的影响,ELISA法检测BBO对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞前列腺素E_(2)(PGE_(2))及白三烯B_(4)(LTB_(4))产生的影响,qRT-PCR检测BBO对LPS诱导巨噬细胞COX-2、5-LOX、FLAP和RelB表达的影响,Western blot检测BBO对NF-κB非经典通路蛋白肿瘤坏死因子受体作用因子3(TRAF3)、肿瘤坏死因子受体作用因子2(TRAF2)、NF-κB诱导激酶(NIK)、p100和RelB浓度的影响。【结果】在1mg·mL^(-1)的BBO药物浓度下减弱了豚鼠回肠的收缩张力(P<0.001),对SRS-A的生成抑制率达到65.34%;与LPS模型组相比,BBO在40-80μg·mL^(-1)浓度下降低AA代谢通路中PGE_(2)(P<0.05)和LTB_(4)(P<0.05)的浓度,降低COX-2(P<0.05)、5-LOX(P<0.05)和FLAP(P<0.05)的表达;此外,40-80μg·mL^(-1)浓度下BBO还降低LPS导致的NF-κB非经典通路中TRAF3(P<0.05)、TRAF2(P<0.05)和NIK(P<0.05)的浓度,进一步抑制p100蛋白的磷酸化(P<0.05),同时抑制转录因子RelB的表达(P<0.05)和RelB蛋白的水平(P<0.05),而BBO自身不引起这些基因与蛋白的变化。【结论】BBO可能通过抑制NF-κB非经典信号中调节蛋白TRAF3和TRAF2,转录因子RelB的浓度,造成NIK蛋白的诱导激酶作用受到抑制,进一步抑制了p100蛋白的磷酸化及其与转录因子RelB的结合,从而影响到下游AA通路中重要限速酶COX-2、5-LOX和FLAP的表达与炎症介质PGE_(2)和LTB_(4)的水平发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 艾纳香油 脂多糖 NF-κB非经典通路 花生四烯酸代谢 抗炎作用
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辣蓼黄酮缓解猪伪狂犬病病毒诱导的小鼠炎症及相关信号通路研究 被引量:1
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作者 唐敏 谢小东 +5 位作者 蒋丽群 童艳梅 任春芝 易首利 施君 胡庭俊 《动物医学进展》 北大核心 2024年第10期27-33,共7页
为研究辣蓼黄酮乙酸乙酯部分(ethyl acetate of flavonoids from Polygonum hydropiper L,FEA)对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染小鼠诱导的炎症反应及炎症相关信号通路的调节作用,以50~200 mg/kg体重的FEA处理PRV感染的小... 为研究辣蓼黄酮乙酸乙酯部分(ethyl acetate of flavonoids from Polygonum hydropiper L,FEA)对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染小鼠诱导的炎症反应及炎症相关信号通路的调节作用,以50~200 mg/kg体重的FEA处理PRV感染的小鼠炎症模型后,检测各组小鼠免疫器官指数变化,脾脏匀浆液中氧化应激相关因子、炎症相关因子的水平或表达量,以及NF-κB等炎症相关信号通路的活化情况。结果显示,50和200 mg/kg体重的FEA能降低PRV感染的小鼠脾脏指数(P<0.05);50~200 mg/kg体重FEA能不同程度的降低PRV感染的小鼠脾脏细胞中ROS、NO水平,IL-1β、IL-6、MCP-1和TNF-α等细胞因子的含量及mRNA表达,以及XOD、MPO、iNOS的酶活性(P<0.05),升高IL-10的水平和GSH的酶活性(P<0.05)。此外,FEA降低了PRV感染的小鼠脾脏细胞中p-p65/p65、p-JNK/JNK和p-p38/p38等炎症相关信号通路蛋白的磷酸化比值(P<0.05)。结果表明,FEA能减缓PRV诱导的小鼠氧化应激状态和炎症反应,发挥体内抗炎作用,其可能是通过抑制NF-κB和MAPK等炎症相关信号通路的活化发挥作用。 展开更多
关键词 辣蓼黄酮 猪伪狂犬病病毒 氧化应激 炎症 核因子-κB
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大鼠产前手机辐射对子代小脑白质的影响 被引量:3
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作者 杨美丽 洪姗燕 +2 位作者 黄红红 吕国荣 王凌星 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期77-82,共6页
目的:探讨大鼠产前850~1900 MHz手机辐射对成年子代小脑白质的影响。方法:孕鼠随机分为短时产前手机辐射组、长时产前手机辐射组和对照组,短时和长时辐射组于孕期第1~17日分别进行每天6 h和24 h手机辐射,各组雄性子代大鼠(n=8)于3月龄... 目的:探讨大鼠产前850~1900 MHz手机辐射对成年子代小脑白质的影响。方法:孕鼠随机分为短时产前手机辐射组、长时产前手机辐射组和对照组,短时和长时辐射组于孕期第1~17日分别进行每天6 h和24 h手机辐射,各组雄性子代大鼠(n=8)于3月龄取小脑组织,进行苏木精—伊红(HE)染色观察小脑皮质细胞形态,免疫组化和Western blot检测髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经微丝-L(NF-L)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。结果:与对照组比较,短时程和长时程产前手机辐射组子代大鼠小脑浦肯野细胞出现形态学改变;与对照组比较,长时程辐射组MBP、NF-L表达明显减少(P均<0.05),而GFAP表达明显增多(P<0.05);与短时程辐射组比较,长时程组子代大鼠小脑MBP、NF-L表达明显减少(P均<0.05),而GFAP表达明显增多(P<0.05)。结论:产前手机辐射会导致雄性子代大鼠小脑髓鞘和轴突的损害,以及星形胶质细胞的活化,且这种改变与产前手机辐射的时程相关。 展开更多
关键词 产前手机辐射 子代大鼠 髓鞘碱性蛋白(MBP) 神经微丝-L(nf-l) 胶质纤维酸性蛋白(GFAP)
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蒙药黑苏嘎-25促进神经元骨架蛋白表达提高神经递质含量改善阿尔茨海默病小鼠症状 被引量:3
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作者 杨玉秋 高玉峰 王澈力莫格 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期153-158,共6页
目的探讨蒙药黑苏嘎-25治疗阿尔茨海默(AD)小鼠的效果及机制。方法6月龄快速老化模型SAMP8小鼠分为模型组、[360 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理组、[90 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理组、多奈哌齐对照组[0.92 mg/(kg·d)],每组15只... 目的探讨蒙药黑苏嘎-25治疗阿尔茨海默(AD)小鼠的效果及机制。方法6月龄快速老化模型SAMP8小鼠分为模型组、[360 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理组、[90 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理组、多奈哌齐对照组[0.92 mg/(kg·d)],每组15只,另选择15只6月龄正常衰老SAMR1小鼠作为空白对照组。模型组和空白对照组小鼠常规喂养,生理盐水灌胃,其他给药组按照给药剂量灌胃,所有组灌胃均每天1次,共15 d。给药完成后第1天~第5天,各组取3只小鼠采用Morris水迷宫试验检测各组小鼠逃避潜伏期,穿越平台次数和停留时间。尼氏染色观察尼氏体数量,免疫组织化学染色法检测微管相关蛋白2(MAP-2)、低分子量神经丝蛋白(NF-L)表达和分布,Western blot法检测MAP-2、NF-L蛋白水平。ELISA检测小鼠脑组织(皮层、海马)中神经递质乙酰胆碱(ACh)、五羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)的含量。结果与空白对照组相比,模型组逃避潜伏期延长,穿越平台次数和停留时间减少,尼氏体减少,MAP2和NF-L蛋白表达减少;与模型组比较,黑苏嘎-25给药组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数和停留时间增加,尼氏体数量增加,MAP-2和NF-L蛋白表达增加。[360 mg/(kg·d)]黑苏嘎-25处理对上述指标的影响更明显。与空白对照组比较,模型组海马及皮层中ACh、NE、DA及5-HT的含量明显减少,与模型组比较,低剂量组、高剂量组、多奈哌齐对照组ACh、NE、DA及5-HT含量显著增加。结论蒙药黑苏嘎-25治疗可改善AD模型小鼠学习记忆能力,保护小鼠神经功能,可能与促进神经元骨架蛋白表达并提高递质含量有关。 展开更多
关键词 黑苏嘎-25 阿尔茨海默病(AD) 神经递质 微管相关蛋白2(MAP-2) 低分子量神经丝蛋(nf-l)
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