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大豆 GmNF-YB2 基因非生物胁迫诱导表达及蛋白互作分析
1
作者 姜海英 陈炯辛 +5 位作者 滕迁莹 崔明元 王锋 陈香香 孟令媛 翟莹 《大豆科学》 北大核心 2025年第4期20-26,共7页
核因子(Nuclear Factor-Y,NF-Y)是一类能够在植物应对非生物胁迫过程中发挥转录调控作用的转录因子。为探究GmNF-YB2在大豆应对非生物胁迫过程中的功能和分子调控机制,本研究从大豆中克隆GmNF-YB2基因并对其进行生物信息学分析,采用实... 核因子(Nuclear Factor-Y,NF-Y)是一类能够在植物应对非生物胁迫过程中发挥转录调控作用的转录因子。为探究GmNF-YB2在大豆应对非生物胁迫过程中的功能和分子调控机制,本研究从大豆中克隆GmNF-YB2基因并对其进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对GmNF-YB2的表达量进行检测,通过酵母双杂交方法分析GmNF-YB2蛋白与GmNF-YC6蛋白和GmNF-YC15蛋白的互作情况。结果显示:以大豆叶片cDNA为模板,PCR扩增获得678 bp GmNF-YB2基因序列。生物信息学分析结果显示,GmNF-YB2基因编码1个含有225个氨基酸的蛋白质,预测分子量为24.66 kD,等电点为6.97,是不稳定的亲水性蛋白质,定位于细胞核中;GmNF-YB2蛋白序列中含有一段保守的组蛋白折叠基序HFM。蛋白系统进化分析表明,GmNF-YB2与杨树PdNF-YB7和拟南芥AtNF-YB2的亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示,GmNF-YB2在大豆幼苗中能够被干旱、盐和低温胁迫诱导表达,GmNF-YB2在大豆茎中的表达量最高。酵母双杂交结果显示,GmNF-YB2蛋白与GmNF-YC6蛋白和GmNF-YC15蛋白均存在互作关系。结果表明GmNF-YB2可能参与大豆对非生物胁迫的应答。 展开更多
关键词 大豆 核因子 nf-YB Gmnf-YB2 非生物胁迫 酵母双杂交
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NF-κB与TNF-α在子宫内膜息肉组织中的表达及其临床意义
2
作者 杨珊珊 王慧 +2 位作者 刘燕 户燕姣 马德花 《现代生物医学进展》 2025年第18期2881-2889,共9页
目的:探讨核因子κB(NF-κB)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在子宫内膜息肉组织、息肉旁内膜及正常子宫内膜中的表达差异,分析其与子宫内膜局部炎症反应的相关性,为阐明子宫内膜息肉发病机制提供依据。方法:纳入2023年9月至2024年12月青岛... 目的:探讨核因子κB(NF-κB)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在子宫内膜息肉组织、息肉旁内膜及正常子宫内膜中的表达差异,分析其与子宫内膜局部炎症反应的相关性,为阐明子宫内膜息肉发病机制提供依据。方法:纳入2023年9月至2024年12月青岛大学附属医院经宫腔镜确诊的子宫内膜息肉患者36例,术中采集息肉组织及距息肉0.5 cm-1 cm处内膜组织(息肉旁组);另选同期因子宫肌瘤行子宫切除、术后病理证实良性内膜的26例患者作为对照(正常组)。采用免疫组化检测NF-κB与TNF-α蛋白的表达情况,RT-qPCR检测NF-κB及TNF-αm RNA表达水平,Western blot检测其蛋白表达,比较三组间差异。结果:免疫组化结果显示:NF-κB p65主要定位于细胞质和/或细胞核;TNF-α阳性表达主要位于细胞胞浆和/或细胞膜,表现为棕黄色至棕褐色颗粒。NF-κB蛋白阳性表达率在子宫内膜息肉组织中显著高于息肉旁子宫内膜组织及正常子宫内膜组织(P<0.05),但息肉旁组织与正常内膜组织间差异无统计学意义(P>0.05)。TNF-α蛋白阳性表达率呈梯度变化:子宫内膜息肉组织>息肉旁子宫内膜组织>正常子宫内膜组织(各组间比较P均<0.05)。实时荧光定量PCR检测显示,NF-κB与TNF-αmRNA在子宫内膜息肉组织中的表达呈显著梯度趋势:NF-κB m RNA:息肉组(7.15±3.15)>息肉旁组(4.38±2.01)>正常组(1.03±0.30),组间差异均显著(均P<0.05);TNF-αm RNA:息肉组织(17.66±9.25)>息肉旁组织(9.35±5.75)>正常内膜(1.16±0.58),组间差异均具统计学意义(P<0.05)。Western blot蛋白定量分析进一步验证该趋势:NF-κB蛋白:息肉组(0.87±0.11)表达量为正常组(0.39±0.02)的2.23倍(P=0.0007),息肉旁组(0.59±0.07)较正常组升高51%(P=0.0435);TNF-α蛋白:息肉组(1.13±0.21)较息肉旁组(0.58±0.03)升高94.8%(P=0.0036),较正常组(0.19±0.03)升高494.7%(P=0.0002),单因素方差分析显示组间差异显著(F=43.56,P<0.05)。结论:TNF-α介导的NF-κB信号通路在子宫内膜息肉中异常激活,且在息肉发生部位表达最高,提示局部慢性炎症微环境可能通过持续刺激NF-κB通路促进息肉形成,靶向调控该通路为预防息肉复发提供新策略。 展开更多
关键词 子宫内膜息肉 nf-ΚB Tnf-Α 炎症反应 信号通路
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基于TLR4 NF-κB通路-神经相关因子探究依达拉奉对急性脑梗死患者炎症反应与神经损伤的保护机制 被引量：7
3
作者 李莉 姜雪 +1 位作者 姜荣格 李恳 《中国实用神经疾病杂志》 2025年第1期47-52,共6页
目的基于Toll样受体4(TLR4)核因子-κB(NF-κB)通路-神经相关因子探究依达拉奉对急性脑梗死(ACI)患者炎症反应与神经损伤的保护机制。方法选取2020-07—2023-07保定市第一中心医院收治的110例ACI患者,以随机数字表法分为观察组、对照组,... 目的基于Toll样受体4(TLR4)核因子-κB(NF-κB)通路-神经相关因子探究依达拉奉对急性脑梗死(ACI)患者炎症反应与神经损伤的保护机制。方法选取2020-07—2023-07保定市第一中心医院收治的110例ACI患者,以随机数字表法分为观察组、对照组,各55例,对照组给予阿替普酶溶栓,观察组给予阿替普酶溶栓联合依达拉奉治疗。比较2组疗效、神经功能[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、改良Rankin评分]、TLR4 NF-κB通路指标(TLR4、NF-κB)、神经损伤相关因子[神经元特异性烯醇化酶(NSE)、中枢神经特异性蛋白(S-100β)、脑源性神经营养因子(BDNF)]、TLR4 NF-κB通路相关炎症因子[白介素-1β(IL-1β)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、五聚素3(PTX3)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)]。结果观察组总有效率96.36%,高于对照组的83.64%(P<0.05)。治疗1、2周观察组NIHSS评分、改良Rankin评分均低于对照组(P<0.05),观察组TLR4、NF-κB均低于对照组(P<0.05)。相较于治疗前,2组治疗1、2周后S-100β、NSE水平明显下降,BDNF水平明显升高,观察组S-100β、NSE水平均低于对照组,BDNF水平高于对照组(P<0.05)。相较于治疗前,2组治疗1、2周后IL-1β、hs-CRP、TNF-α、PTX3、Lp-PLA2水平均明显下降,观察组IL-1β、hs-CRP、TNF-α、PTX3、Lp-PLA2水平均低于对照组(P<0.05)。结论依达拉奉对ACI患者的疗效显著,有利于缓解炎症反应,改善神经损伤,其保护机制可能与TLR4 NF-κB通路调控神经损伤、炎症反应相关因子有关。 展开更多
关键词 急性脑梗死 TOLL样受体4 核因子-ΚB 依达拉奉 TLR4 nf-κB通路
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基于“微生物-肠-脑轴”探讨补肾通腑方对APP/PS1小鼠肠道菌群及LPS/TLR4/NF-κB通路的影响 被引量：2
4
作者 王旭 张杰 +2 位作者 赵敏 宋晓雨 段建平 《中国药理学通报》 CAS 北大核心 2025年第1期171-178,共8页
目的探讨补肾通腑方调控肠道菌群,改善阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠学习记忆能力的作用机制。方法以APP/PS1小鼠为研究对象,给予补肾通腑方治疗8周,采用Morris水迷宫法观察小鼠空间学习记忆能力变化;16S rDNA检测小... 目的探讨补肾通腑方调控肠道菌群,改善阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠学习记忆能力的作用机制。方法以APP/PS1小鼠为研究对象,给予补肾通腑方治疗8周,采用Morris水迷宫法观察小鼠空间学习记忆能力变化;16S rDNA检测小鼠肠道菌群丰度、多样性变化;HE染色观察海马病理形态学变化;免疫荧光检测海马区小胶质细胞活化情况;Western blot检测TLR4、NF-κB、IL-6等炎症因子表达。结果与模型组相比,补肾通腑方可以缩短AD模型小鼠逃避潜伏期、游泳路径,增加跨越平台次数(P<0.05),提升肠道菌群多样性,调节肠道菌群丰度,促进海马神经元细胞损伤修复,降低iNOS/Iba1共表达,提高Arg1/Iba1共表达(P<0.01),促进小胶质细胞从M1型向M2型转化,下调TLR4、NF-κB、IL-6等促炎因子的表达。结论补肾通腑方改善AD模型小鼠学习记忆能力的作用机制可能与调节肠道菌群介导的LPS/TLR4/NF-κB通路,从而抑制促炎型小胶质细胞活化、减轻中枢神经系统炎症、改善海马区神经元细胞损伤有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 补肾通腑方 肠道菌群 LPS/TLR4/nf-κB通路 16S rDNA 微生物-肠-脑轴
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大黄素调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对慢性肾功能衰竭大鼠肠道菌群结构的影响 被引量：2
5
作者 胡溪 冯立 +6 位作者 高智 冯雪 彭斌 朱双益 熊玮 王建华 翟晓玲 《中国医院药学杂志》 北大核心 2025年第17期1959-1964,1993,共7页
目的:探究大黄素调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠肠道菌群结构的影响。方法:用腺嘌呤灌胃构建CRF大鼠模型,将造模成功的大鼠分为模型组、大黄素低剂量组、大黄素高剂量组、大黄素高剂量+... 目的:探究大黄素调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠肠道菌群结构的影响。方法:用腺嘌呤灌胃构建CRF大鼠模型,将造模成功的大鼠分为模型组、大黄素低剂量组、大黄素高剂量组、大黄素高剂量+LPS(TLR4激活剂)组,另设对照组。检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、精氨酸加压素(AVP)含量、Scr清除率;ELISA检测血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平;HE染色观察大鼠肾脏病理变化;鉴别培养基检测大鼠肠道菌群变化;RTqPCR检测肾脏组织TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA的表达;Western blot检测大鼠肾脏组织Bax、Bcl-2、TLR4、MyD88、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达。结果:对照组大鼠肾组织结构正常;与对照组相比,模型组大鼠肾小球萎缩硬化,肾组织细胞排列紊乱,肾间质显著增宽并伴有大量炎症细胞浸润,上皮细胞变性坏死,大鼠血清BUN、Scr、AVP水平,TNF-α、IL-6和IL-1β水平,肠球菌、肠杆菌水平,肾脏组织TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平,Bax、TLR4、MyD88、pNF-κB/NF-κB蛋白表达水平升高,Scr清除率、双歧杆菌、乳酸杆菌、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05);大黄素低、高剂量组相比于模型组,大鼠肾组织结构形态显著改善,血清BUN、Scr、AVP水平,TNF-α、IL-6和IL-1β水平,肠球菌、肠杆菌水平,肾脏组织TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平,Bax、TLR4、MyD88、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达水平降低,Scr清除率、双歧杆菌、乳酸杆菌和Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05);LPS可减轻大黄素对CRF大鼠的改善作用(P<0.05)。结论:大黄素可促进CRF大鼠肠道有益菌群增长,抑制有害菌,降低炎症和减轻肾脏损伤,可能是通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路实现的。 展开更多
关键词 大黄素 TLR4/MyD88/nf-κB信号通路 慢性肾功能衰竭 肠道菌群
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基于Nrf2/HO-1和NF-κB信号通路探讨清化止泻方对腹泻型肠易激综合征大鼠巨噬细胞极化的影响 被引量：2
6
作者 黄华 王永通 +2 位作者 丁旭枫 蒋捷 季利江 《中成药》 北大核心 2025年第2期438-445,共8页
目的探讨清化止泻方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠的改善作用及其对M1/M2型巨噬细胞极化的影响。方法SD大鼠随机分为空白组、模型组、匹维溴铵组(20 mg/kg)和清化止泻方低、高剂量组(13.64、27.29 g/kg),每组10只,采用慢性束缚应激... 目的探讨清化止泻方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠的改善作用及其对M1/M2型巨噬细胞极化的影响。方法SD大鼠随机分为空白组、模型组、匹维溴铵组(20 mg/kg)和清化止泻方低、高剂量组(13.64、27.29 g/kg),每组10只,采用慢性束缚应激加番泻叶水煎剂灌胃法构建IBS-D大鼠模型,各组给予相应剂量药物14 d。观察各组大鼠进食状况、粪便性状和体质量变化;腹部撤离反射(AWR)测定大鼠肠疼痛敏感性;HE染色观察结肠黏膜组织病理学;TUNEL染色观察结肠组织细胞凋亡情况;免疫荧光染色检测大鼠结肠组织ZO-1、Occludin、Nrf2蛋白表达;流式细胞术检测肠系膜淋巴结中M1型和M2巨噬细胞比值;Western blot法检测结肠组织Nrf2、HO-1、p-IκBα、p-P65蛋白表达。结果与模型组比较,清化止泻方各剂量组大鼠体质量、AWR痛觉阈值升高(P<0.05,P<0.01);结肠组织结构基本完整,上皮细胞排列整齐,未见大量细胞变性脱落;结肠组织ZO-1、Occludin蛋白荧光强度增强(P<0.05,P<0.01);结肠组织细胞凋亡率降低(P<0.05,P<0.01);肠系膜淋巴结巨噬细胞向M2极化(P<0.05,P<0.01);结肠组织Nrf2、HO-1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),p-IκBα/IκBα和p-P65/P65蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论清化止泻方可改善IBS-D大鼠肠上皮黏膜屏障功能,其作用可能与激活Nrf2/HO-1信号通路,抑制NF-κB信号通路活化,调控巨噬细胞向M2极化有关。 展开更多
关键词 清化止泻方 腹泻型肠易激综合征 巨噬细胞 巨噬细胞极化 Nrf2/HO-1信号通路 nf-ΚB信号通路
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ATF3通过NF-κB信号通路调控动脉粥样硬化斑块内的炎症反应 被引量：2
7
作者 夏冰 彭进 +6 位作者 丁九阳 王杰 唐国伟 刘国杰 王沄 万昌武 乐翠云 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1131-1142,共12页
目的 探讨转录激活因子3(ATF3)在动脉粥样硬化斑块内的表达及其调控炎症反应参与动脉粥样硬化(AS)进程的机制。方法 收集尸检案例中的人冠状动脉标本,免疫荧光和Western blotting检测ATF3蛋白表达及分布;高脂饮食12周后的载脂蛋白E基因... 目的 探讨转录激活因子3(ATF3)在动脉粥样硬化斑块内的表达及其调控炎症反应参与动脉粥样硬化(AS)进程的机制。方法 收集尸检案例中的人冠状动脉标本,免疫荧光和Western blotting检测ATF3蛋白表达及分布;高脂饮食12周后的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠尾静脉注射9型腺相关病毒(AAV9)敲低ATF3的表达,继续高脂喂养5周构建ATF3基因敲除的动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠模型。麻醉处死后观察主动脉斑块结构改变,检测斑块内ATF3、炎症相关因子及NF-κB信号通路蛋白表达改变,并在体外构建ATF3的过表达质粒及siRNA干预THP-1诱导的泡沫细胞模型验证ATF3与NF-κB信号通路间关系。结果 在人冠状动脉粥样硬化斑块内,ATF3的表达增高(P<0.05),且与CD68呈部分共表达;在ATF3基因敲除后,小鼠的主动脉斑块体积增大(P<0.05),斑块内炎症相关因子(CD45、CD68、IL-1β、TNF-α)表达增强(P<0.05),NF-κB信号通路相关蛋白(PIKKα/β、P-NF-κB p65)表达增高(P<0.05),VCAM1、MMP9及MMP2表达增强(P<0.05);在离体THP-1细胞实验中验证了沉默ATF3后NF-κB信号通路进一步激活,而过表达ATF3后NF-κB信号受到抑制。结论 动脉粥样硬化诱导ATF3的表达,ATF3的缺乏会促进AS的发生,增强斑块内炎症反应,其机制可能是通过进一步激活NF-κB信号通路导致,ATF3可能是AS潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 转录激活因子3 炎症反应 nf-ΚB 冠心病猝死
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调理脾胃针法肠道菌群移植对糖尿病肾病大鼠Foxp3/NF-κB-p65信号通路及T淋巴细胞稳态的影响 被引量：1
8
作者 卢轩 李梦梦 +3 位作者 吉学群 杨元庆 张智龙 武红 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第6期189-194,I0004,共7页
目的基于Foxp3/NF-κB-p65信号通路和T淋巴细胞稳态探讨调理脾胃针法肠道菌群移植治疗和预防糖尿病肾病的可能分子作用机制。方法随机将30只雄性SD大鼠分为3组,分别为肠道菌群提取物组、模型组和菌群移植组,每组10只,全部大鼠采用高脂... 目的基于Foxp3/NF-κB-p65信号通路和T淋巴细胞稳态探讨调理脾胃针法肠道菌群移植治疗和预防糖尿病肾病的可能分子作用机制。方法随机将30只雄性SD大鼠分为3组,分别为肠道菌群提取物组、模型组和菌群移植组,每组10只,全部大鼠采用高脂高糖饮食联合低剂量腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法制备糖尿病肾病大鼠模型。造模成功后肠道菌群提取物组给予调理脾胃针法连续治疗4周。治疗后,取该组大鼠盲肠内容物,制成调理脾胃针法肠道菌群提取物溶液。菌群移植组给予调理脾胃针法肠道菌群提取物溶液灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。4周后模型组和菌群移植组采用高脂高糖饮食联合低剂量腹腔注射STZ的方法制备糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后,进行各组大鼠取材及指标检测。造模完成后检测各组大鼠尿蛋白(urinary protein,UP)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,CRE)水平;酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠血清和肾脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)、干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)和白细胞介素-17(interleukin 17,IL-17)水平;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测各组大鼠肾脏组织Foxp3/NF-κB-p65信号通路表达水平;苏木素-伊红染液(hematoxylin-eosin staining,HE),过碘酸-雪夫(Periodic Acid-Schiff,PAS)染色和透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)观察肾脏组织病理形态学改变;采集各组大鼠血液,肠道和肾脏标本进行T淋巴细胞的流式分选检测。结果与模型组大鼠比较,菌群移植组大鼠的UP、BUN、CRE和炎症因子水平均明显下降,肾脏病变程度有所改善,菌群移植组大鼠肾脏组织的Foxp3/NF-κB-p65信号通路表达得到改善,同时,菌群移植组大鼠血液,肠道和肾脏组织中不同种类的T淋巴细胞,包括Th1、Th2、Th17和Treg细胞的比例失调得到缓解,T淋巴细胞稳态重新得到恢复。结论调理脾胃针法肠道菌群移植通过调节Foxp3/NF-κB-p65信号通路和恢复T淋巴细胞稳态来减轻糖尿病肾病大鼠肾脏组织损伤,改善糖尿病肾病大鼠不同菌属的物种丰度,有效改善糖尿病肾病大鼠肠道菌群的菌群结构组成和丰度,进而达到治疗和预防糖尿病肾病大鼠的目的。 展开更多
关键词 Foxp3/nf-κB-p65信号通路 糖尿病肾病 肠道菌群移植 调理脾胃针法 T淋巴细胞稳态
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基于TLR4/MyD88/NF-κB通路探索鳖甲煎丸治疗大鼠肝纤维化的作用机制 被引量：1
9
作者 徐薇 王一钦 +1 位作者 刘莉 庞杰 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期965-971,共7页
目的:探讨鳖甲煎丸(Biejiajian pill,BJJP)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导的大鼠肝纤维化损伤的作用,并分析Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-NF-κB信号通路在其中的潜在机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为... 目的:探讨鳖甲煎丸(Biejiajian pill,BJJP)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导的大鼠肝纤维化损伤的作用,并分析Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-NF-κB信号通路在其中的潜在机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、BJJP高、低剂量组,每组10只,采用腹腔注射CCl_(4)制备大鼠肝纤维化模型,BJJP高、低剂量组随后给予两种剂量的BJJP(2.2 g/kg和0.55 g/kg)伴随治疗。治疗8周后,使用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)的血清水平;通过Masson染色和天狼星红染色观察肝组织纤维蛋白沉积情况;采用免疫组化和Western blot法检测肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)相关细胞外基质的表达情况;利用形态学观察及Western blot法评估纤维化相关蛋白的表达。最后,通过Western blot检测TLR4/髓样分化因子88(myeioid differentiation factor 88,MyD88)/NF-κB信号通路中相关蛋白的变化。结果:ELISA结果显示,BJJP的治疗降低了肝纤维化大鼠血清中ALT和AST的水平(P<0.01);苏木精-伊红染色结果证实了BJJP对肝组织具有保护作用。Masson和天狼星红染色、及α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的免疫组织化学染色的形态学结果表明BJJP可有效降低CCl_(4)引起的大鼠肝组织中纤维蛋白的沉积。肝星状细胞激活的其他标志物包括纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白及α-SMA的表达降低(P<0.01)。BJJP治疗可有效抑制CCl_(4)引起的TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活(P<0.05)。结论:BJJP可通过TLR4-NF-κB信号通路抑制HSCs的活化,从而减轻CCl_(4)诱导的大鼠肝脏损伤及肝纤维化形成。 展开更多
关键词 肝纤维化 鳖甲煎丸 TLR4/MyD88/nf-κB通路
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芥菜提取物调节结肠癌小鼠肠道菌群及信号通路Wnt/JNK和NF-κB p65/COX-2 被引量：1
10
作者 田艳 杜海平 +4 位作者 陈兰艳 赵玲艳 徐月炬 赵翊滢 邓放明 《现代食品科技》 北大核心 2025年第3期1-11,共11页
探讨芥菜硫代葡萄糖苷(Glucosinolate,GSL)提取物对结肠癌的恢复作用。紫外法检测芥菜总GSL,氧化偶氮甲烷联合葡聚糖硫酸钠诱导Balb/c小鼠建立结肠炎性相关的结肠癌模型,小鼠分为对照组、模型组和芥菜GSL提取物低、高剂量组,样品干预9周... 探讨芥菜硫代葡萄糖苷(Glucosinolate,GSL)提取物对结肠癌的恢复作用。紫外法检测芥菜总GSL,氧化偶氮甲烷联合葡聚糖硫酸钠诱导Balb/c小鼠建立结肠炎性相关的结肠癌模型,小鼠分为对照组、模型组和芥菜GSL提取物低、高剂量组,样品干预9周后,分析炎症因子水平以及NF-κB p65/COX-2和Wnt/JNK信号通路的表达,通过16S rRNA高通量测序分析肠道菌群。结果显示,芥菜总GSL含量高达127.11μmol/g。与模型组比较,芥菜GSL提取物高剂量组小鼠体质量和结肠长度分别增加了42.11%和20.37%(P<0.05),结肠肿瘤个数显著减少(P<0.05),结肠组织中IL-6、TNF-α和IL-17表达水平分别降低了46.88%、70.22%、20.43%,IFN-γ表达水平升高了98.55%,NF-κB p65、COX-2、Wnt和JNK的蛋白表达分别降低了60.91%、15.57%、63.31%、96.58%(P<0.05);芥菜GSL提取物组显著回调了Bacteroides、Turicibacter、Ruminococcaceae UCG-014、Ruminiclostridium_5、Akkermansia、norank f Clostridiales vadinBB60 group、Prevotellaceae UCG-001和Blautia等菌的丰度,恢复了肠道微生物的平衡状态。综上,芥菜GSL提取物通过改善结肠癌小鼠病理状态、调节炎症因子、信号通路和肠道微生物,展现辅助治疗结肠癌的潜力。 展开更多
关键词 芥菜硫代葡萄糖苷提取物 结肠癌 肠道菌群 Wnt/JNK信号通路 nf-κB p65/COX-2信号通路
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羽扇豆醇调节PI3K/AKT/NF-κB信号通路对溃疡性结肠炎大鼠Th17/Treg免疫平衡的影响 被引量：1
11
作者 鲁慧东 李艳梅 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期1060-1065,共6页
目的:探究羽扇豆醇(Lupeol)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠Th17/Treg免疫平衡的作用,以及对PI3K/AKT/NF-κB信号通路的调节机制。方法:将所有大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药物组(柳氮磺吡啶)、PI3K抑制剂组(LY294002组)、Lupeol组、Lupeol... 目的:探究羽扇豆醇(Lupeol)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠Th17/Treg免疫平衡的作用,以及对PI3K/AKT/NF-κB信号通路的调节机制。方法:将所有大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药物组(柳氮磺吡啶)、PI3K抑制剂组(LY294002组)、Lupeol组、Lupeol+PI3K激活剂组(Lupeol+740Y-P组),每组15只。对大鼠进行UC疾病活动指数(DAI)评分;HE染色观察大鼠结肠病理变化,并进行炎症评分;ELISA检测血清中IL-17、IL-10的水平;流式细胞术检测结肠固有层黏膜中Th17和Treg细胞的水平;Western blot检测结肠组织中RORγt、FOXP3及PI3K/AKT/NF-κB通路相关蛋白的表达情况。结果:与对照组相比,模型组大鼠DAI评分、炎症评分、血清中IL-17含量、结肠组织Th17细胞水平、RORγt表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κBp65/NF-κB p65均升高,IL-10含量、Treg细胞水平和FOXP3表达均降低(P<0.05);与模型组相比,阳性药物组、LY294002组和Lupeol组大鼠DAI评分、炎症评分、血清中IL-17含量、结肠组织Th17细胞水平、RORγt表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低,IL-10含量、Treg细胞水平和FOXP3表达均升高(P<0.05);进一步加入PI3K激活剂740Y-P后发现,740Y-P逆转了Lupeol对Th17细胞的抑制作用及对Treg细胞的促进作用(P<0.05)。结论:Lupeol通过抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路调节UC大鼠Th17/Treg免疫平衡。 展开更多
关键词 羽扇豆醇 PI3K/AKT/nf-κB信号通路 溃疡性结肠炎 TH17/TREG 免疫平衡
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刺五加注射液通过抑制TLR4/NF-κB信号通路减轻糖尿病肾病小鼠肾损伤的研究 被引量：3
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作者 郭金明 付永涛 +4 位作者 索大伟 江旗琳 白敏 郑聪聪 王莉平 《天津中医药》 2025年第1期100-107,共8页
[目的]研究刺五加注射液(ASI)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾损伤的影响。[方法]采用高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素的方法构建DKD小鼠动物模型,设正常对照组、模型组、ASI(75 mg/kg)组、ASI... [目的]研究刺五加注射液(ASI)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾损伤的影响。[方法]采用高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素的方法构建DKD小鼠动物模型,设正常对照组、模型组、ASI(75 mg/kg)组、ASI(75 mg/kg)+瑞沙托维(TAK-242,TLR4抑制剂,0.5 mg/kg)组和ASI(75 mg/kg)+脂多糖(LPS,TLR4激动剂,10 mg/kg)组,每组10只。持续给药8周后,检测小鼠空腹血糖(FBG)和肾功能指标[24 h尿蛋白量(24 h UTP)、尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)],称量体质量、肾脏质量并计算肾脏系数,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾组织炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量,苏木精-伊红(HE)染色法观察肾组织病理改变,马森(Masson)染色和末端标记法(TUNEL)检查肾纤维化和肾细胞凋亡,逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾组织TLR4、NF-κB p65 mRNA表达,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肾组织TLR4、NF-κB p65、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达。[结果]与模型组相比,ASI组和ASI+TAK-242组小鼠FBG、24 h UTP、UA、BUN、Scr、肾脏质量、肾脏系数、IL-1β、IL-6、TNF-α均显著降低,体质量显著升高(P<0.05);肾组织病理改变、纤维化及肾细胞凋亡状况均明显改善,肾组织损伤评分、胶原容积分数(CVF)及细胞凋亡指数(AI)均显著降低(P<0.05);TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量显著降低,Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白表达比值显著降低(P<0.05)。TAK-242能够明显增强ASI对DKD小鼠FBG、肾功能、体质量、肾脏系数、肾组织病变、纤维化、细胞凋亡及TLR4/NF-κB信号通路相关mRNA和蛋白表达的作用;LPS则明显逆转ASI对DKD小鼠的上述作用。[结论]ASI具有减轻DKD小鼠肾损伤并改善其肾功能的作用,其机制可能与下调TLR4/NF-κB信号通路,进而抑制炎症、肾纤维化和细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 刺五加注射液 肾损伤 TLR4/nf-κB信号通路 炎症 凋亡
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理冲生髓饮有效组分通过TRIM44介导NF-κB信号通路对人卵巢癌细胞生物学行为的影响 被引量：2
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作者 于洋 李世颖 +3 位作者 韩明轩 郭滢 付杨 韩凤娟 《现代中西医结合杂志》 2025年第1期1-9,17,共10页
目的研究理冲生髓饮有效组分影响人卵巢癌细胞(SKOV3)恶性生物学行为的相关作用机制。方法构建三方基序蛋白44(TRIM44)稳定过表达SKOV3细胞,制备理冲生髓饮有效组分含药血清,CCK-8法检测顺铂的IC50及最佳药物作用浓度;随机将细胞分为空... 目的研究理冲生髓饮有效组分影响人卵巢癌细胞(SKOV3)恶性生物学行为的相关作用机制。方法构建三方基序蛋白44(TRIM44)稳定过表达SKOV3细胞,制备理冲生髓饮有效组分含药血清,CCK-8法检测顺铂的IC50及最佳药物作用浓度;随机将细胞分为空白组、理冲生髓饮有效组分组、顺铂组、联合组,选用细胞划痕法、Transwell法检测细胞迁移、侵袭情况;TUNEL检测细胞凋亡情况;ELISA法及Western blot法检测细胞中相关通路关键因子及蛋白表达情况。结果与空白组比较,不同剂量的理冲生髓饮有效组分作用于TRIM44过表达SKOV3细胞48 h后,细胞活力明显受到抑制,并且抑制率与药物浓度呈正相关(P均<0.05)。与空白组比较,各用药组细胞迁移愈合率均明显降低(P均<0.05),侵袭、迁移细胞数均明显减少(P均<0.05),细胞凋亡数量均明显增加(P均<0.05);联合组细胞迁移愈合率明显低于顺铂组和理冲生髓饮有效组分组(P均<0.05),迁移细胞数、侵袭细胞数均明显少于顺铂组和理冲生髓饮有效组分组(P均<0.05)。各用药组细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)含量和TRIM44、IκB激酶β(IKKβ)、磷酸化核因子κB抑制蛋白(p-IκBα)、核因子κB p65(NF-κB p65)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白相对表达量均明显低于空白组(P均<0.05),核因子κB抑制蛋白(IκBα)、活化半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白相对表达量均明显高于空白组(P均<0.05);各用药组间比较,联合组TNF-α、IL-1β、IL-8含量和TRIM44、IKKβ、NF-κB p65、Bcl-2、MMP-9蛋白相对表达量均明显低于其他2组(P均<0.05),IκBα、Caspase-3蛋白相对表达量均明显高于其他2组(P均<0.05)。结论理冲生髓饮有效组分能够抑制TRIM44过表达SKOV3细胞的增殖、侵袭、转移,促进细胞凋亡,并协同顺铂增强抗肿瘤的作用,其可能通过下调TRIM44表达,抑制NF-κB信号通路的激活,从而抑制SKOV3细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 理冲生髓饮有效组分 人卵巢癌细胞 三方基序蛋白44 nf-ΚB信号通路 恶性生物学行为
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齐墩果酸对糖尿病肾病大鼠及NF-κB/caspase-9信号通路的影响 被引量：1
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作者 翟倩倩 沈承亮 +4 位作者 李燕 曹萌 王涛 覃艳 朱云峰 《免疫学杂志》 2025年第2期80-85,共6页
目的 探索齐墩果酸对糖尿病肾病大鼠肾组织及NF-κB/caspase-9信号通路的影响。方法 建立糖尿病肾病模型大鼠,并将造模大鼠随机分为齐墩果酸低、中、高剂量组、二甲双胍组和模型组,另选健康SD大鼠作为对照组。测定大鼠给药1周、2周、3... 目的 探索齐墩果酸对糖尿病肾病大鼠肾组织及NF-κB/caspase-9信号通路的影响。方法 建立糖尿病肾病模型大鼠,并将造模大鼠随机分为齐墩果酸低、中、高剂量组、二甲双胍组和模型组,另选健康SD大鼠作为对照组。测定大鼠给药1周、2周、3周时的血糖水平及给药结束后血脂和24 h尿液中尿微量白蛋白(UMA)水平;检测大鼠肾组织病理形态、肾小管、肾小球细胞凋亡情况、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平及肾组织NF-κB/caspase-9信号通路蛋白表达。结果 相较于对照组,模型组大鼠给药1周、2周、3周时的血糖、血脂、UMA、TNF-α及IL-6水平、肾小管及肾小球凋亡细胞比例、肾组织caspase-9蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65增高(P<0.05)。相较于模型组,二甲双胍组及齐墩果酸低、中、高剂量组大鼠肾组织病理损伤均得到改善,给药1周、2周、3周时的血糖、血脂、UMA水平、TNF-α及IL-6水平、肾小管及肾小球凋亡细胞比例、肾组织caspase-9蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65降低,且齐墩果酸各组指标的改变呈剂量依赖性(P<0.05)。结论 齐墩果酸可改善糖脂代谢,减轻糖尿病肾病大鼠肾组织病理损伤,抑制肾小管及肾小球细胞凋亡,并抑制NF-κB/caspase-9通路。 展开更多
关键词 齐墩果酸 糖尿病肾病 nf-κB/caspase-9信号通路 肾组织
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油酸通过TLR4/NF-κB信号通路诱导体外肝细胞脂肪变性的研究 被引量：2
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作者 刘洋 赖铭裕 +1 位作者 陈晖 崔萍 《临床医学研究与实践》 2025年第4期15-19,共5页
目的研究油酸体外诱导WRL68人正常肝细胞脂肪变性的最适浓度,探究肝细胞脂肪变性的可能信号传导通路及评价体外细胞实验的应用前景。方法采用WRL68人正常肝细胞系作为实验材料,根据完全DMEM培养基中油酸浓度的不同共分为7个组,即DMEM对... 目的研究油酸体外诱导WRL68人正常肝细胞脂肪变性的最适浓度,探究肝细胞脂肪变性的可能信号传导通路及评价体外细胞实验的应用前景。方法采用WRL68人正常肝细胞系作为实验材料,根据完全DMEM培养基中油酸浓度的不同共分为7个组,即DMEM对照组、0.4%DMSO组、0.1 mmol/L油酸组、0.3 mmol/L油酸组、0.5 mmol/L油酸组、0.7 mmol/L油酸组和0.9 mmol/L油酸组,各组细胞均体外培养24 h。采用油红Ο染色实验观察细胞脂滴聚集情况;采用CCK-8法检测肝细胞活力;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)及核因子κB(NF-κB)含量,确定最适诱导浓度,建立肝细胞脂肪变性的离体细胞模型。确定模型构建条件后,采用RT-PCR检测模型肝细胞中Toll样受体4(TLR4)、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)基因的相对表达量。结果0.7 mmol/L油酸组、0.9 mmol/L油酸组的肝细胞活力低于DMEM对照组(P<0.05)。0.5 mmol/L油酸组的TG含量高于DMEM对照组(P<0.05)。0.3 mmol/L油酸组、0.5 mmol/L油酸组的AST含量高于DMEM对照组(P<0.05);0.5 mmol/L油酸组的NF-κB含量高于DMEM对照组(P<0.05)。0.5 mmol/L油酸组的TLR4、NF-κB、TNF-α及IL-6基因的相对表达量高于DMEM对照组(P<0.05)。结论在WRL68人正常肝细胞中添加诱导浓度为0.5 mmol/L的油酸可建立离体肝细胞脂肪变性模型,其作用机制是通过调节TLR4/NF-κB信号通路增加肝细胞脂肪变性,这可以为从细胞水平研究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病机制及药物治疗提供实际应用价值。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 TLR4/nf-κB信号通路 油酸
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中医药调控NF-κB信号通路延缓糖尿病肾病进展概述 被引量：1
16
作者 李鑫 潘志 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第2期131-138,共8页
糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的常见并发症,是导致终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)的主要原因。越来越多的证据表明,核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路在DKD的... 糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的常见并发症,是导致终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)的主要原因。越来越多的证据表明,核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路在DKD的发生及发展中起到了关键作用,中医药可通过调控NF-κB信号通路减轻炎症反应,进而延缓DKD进展。就NF-κB信号通路与DKD的关系及中医药干预NF-κB信号通路延缓DKD进展进行综述,旨在为DKD靶向治疗提供新的参考。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 nf-ΚB信号通路 中医药
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基于PI3K/Akt/NF-κB信号通路探讨黄连素对特应性皮炎大鼠皮肤病理变化的治疗作用 被引量：1
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作者 蒋苏 李东霞 +2 位作者 吕新翔 崔艳红 吕李婷 《天津医药》 2025年第7期679-683,共5页
目的 基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核因子κB(NF-κB)信号通路探讨黄连素对特应性皮炎(AD)大鼠的治疗作用及其机制。方法 将60只成年雄性Wistar大鼠随机均分为空白组(正常大鼠)、对照组(构建AD模型,50 mg/kg黄连素治疗)... 目的 基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核因子κB(NF-κB)信号通路探讨黄连素对特应性皮炎(AD)大鼠的治疗作用及其机制。方法 将60只成年雄性Wistar大鼠随机均分为空白组(正常大鼠)、对照组(构建AD模型,50 mg/kg黄连素治疗)以及实验组(构建AD模型,200 mg/kg黄连素治疗)。干预1 d、7 d、14 d时,采用酶联免疫吸附试验检测白细胞介素(IL)-4、IL-13、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;Western blot检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB p65蛋白表达;HE染色观察大鼠皮肤组织病理变化。结果 干预1 d、7 d、14 d时,对照组血清IL-4、IL-13、TNF-α水平及PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB p65蛋白表达水平均高于空白组(P<0.05);干预7 d、14 d时,实验组上述指标水平均低于对照组(P<0.05)。干预14 d时,与空白组相比,对照组和实验组大鼠皮肤组织出现明显的病理改变,表皮层增厚,角质层过度角化,棘层肥厚,真皮层有大量炎性细胞浸润;实验组大鼠皮肤组织的病理损伤明显减轻。结论 黄连素可通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路的激活降低AD大鼠血清炎性因子水平,减轻皮肤组织病理损伤。 展开更多
关键词 皮炎 特应性 小檗碱 磷酸肌醇3-激酶类 原癌基因蛋白质c-akt nf-κB 细胞因子类 皮肤组织
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葫芦茶苷调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路抑制肝星状细胞活化的作用机制 被引量：1
18
作者 卢秋玉 韦璐莹 +2 位作者 李鑫 夏冰雨 唐爱存 《中国现代医学杂志》 2025年第7期48-53,共6页
目的探讨葫芦茶苷调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路抑制肝星状细胞(HSCs)活化的作用机制。方法制备人HSCs的体外细胞(LX-2细胞)模型,采用CCK-8法检测葫芦茶苷对LX-2增殖的影响。将对数生长期的LX-2细胞随机分成5组:空白组、TGF-β_(1... 目的探讨葫芦茶苷调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路抑制肝星状细胞(HSCs)活化的作用机制。方法制备人HSCs的体外细胞(LX-2细胞)模型,采用CCK-8法检测葫芦茶苷对LX-2增殖的影响。将对数生长期的LX-2细胞随机分成5组:空白组、TGF-β_(1)活化组、TGF-β_(1)+葫芦茶苷低剂量组、TGF-β_(1)+葫芦茶苷中剂量组、TGF-β_(1)+葫芦茶苷高剂量组,除空白组外,其余各组分别加入含终浓度为5μg/L的TGF-β_(1)的培养液,使其增殖活化24 h,再对葫芦茶苷低、中、高剂量组加入终浓度分别为20、40和80μg/mL的葫芦茶苷进行干预。CCK-8法检测葫芦茶苷对LX-2细胞增殖的影响。酶联免疫吸附试验检测细胞上清液白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素α(INF-α)表达水平。实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting实验检测细胞中NF-κB、NLRP3、Caspase-1基因和蛋白相对表达量。结果葫芦茶苷能显著抑制LX-2细胞的增殖。与空白组比较,TGF-β_(1)活化组细胞上清液IL-1β、IL-18、IL-6、INF-α表达水平,以及细胞NF-κB、NLRP3、Caspase-1基因和蛋白相对表达量明显上升(P<0.05)。葫芦茶苷干预后,与TGF-β_(1)活化组比较,葫芦茶苷不同剂量组降低细胞上清液IL-1β、IL-18、IL-6、INF-α表达水平,下调细胞NF-κB、NLRP3、Caspase-1基因和蛋白表达(P<0.05)。结论葫芦茶苷能显著抑制HSCs增殖活化,其机制可能与调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路有关。 展开更多
关键词 肝纤维化 葫芦茶苷 肝星状细胞 nf-κB/NLRP3/Caspase-1通路
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环状RNA 0032131调控NF-κB通路对骨关节炎软骨变性的影响
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作者 周巧 刘健 +5 位作者 万磊 汪元 王桂珍 齐亚军 胡月迪 朱艳 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第3期388-396,共9页
目的旨在探讨hsa_circRNA_0032131对白细胞介素(IL)-1β诱导的骨关节炎(OA)软骨变性的作用。方法IL-1β处理的软骨细胞(CHON-001)用作OA的体外模型。细胞转染建立小干扰(si-RNA)和过表达质粒(OE)模型,分为IL-1β、IL-1β+OE-NC、IL-1β+... 目的旨在探讨hsa_circRNA_0032131对白细胞介素(IL)-1β诱导的骨关节炎(OA)软骨变性的作用。方法IL-1β处理的软骨细胞(CHON-001)用作OA的体外模型。细胞转染建立小干扰(si-RNA)和过表达质粒(OE)模型,分为IL-1β、IL-1β+OE-NC、IL-1β+OE-circ_0032131、IL-1β+si-NC和IL-1β+si-circ_0032131共5组。定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0032131、ADAMTS5、MMP13、SOX9、COL2A1和NF-κB p65 mRNA的表达。CCK-8和流式细胞术评估细胞活力。蛋白免疫印迹法(WB)测定ADAMTS5、MMP13、SOX9、COL2A1蛋白水平。免疫荧光检测p-NF-κB p65和p-IKBα的平均荧光强度。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β和IL-4的表达。相关性分析circ_0032131与炎症因子、ECM产物和NF-κB的关系。ROC曲线计算circ_0032131曲线下面积。结果与未处理细胞相比,IL-1β诱导的CHON-001细胞中的circ_0032131上调,IL-4水平下降,ADAMTS5、MMP13和NF-κB p65 mRNA水平升高,SOX9和COL2A1 mRNA水平下降。ROC曲线结果,circ_0032131曲线下的面积为0.9156(0.8136~0.9271),与SOX9、COL2A1和IL-4呈负相关,与MMP13、IL-1β和NF-κB p65呈正相关。circ_0032131敲低减轻IL-1β诱导软骨细胞损伤,与IL-1β+si-NC相比,IL-1β+si-circ_0032131组细胞活力升高,细胞凋亡下降,SOX9和COL2A1蛋白水平升高,ADAMTS5和MMP13蛋白水平下降。过表达circ_0032131后结果相反。此外,与IL-1β+OE-NC组相比,OE-circ_0032131组p-IKBα和p-NF-κB p65平均荧光强度升高,而circ_0032131敲低削弱了NF-κB信号的活性。结论circ_0032131在IL-1β诱导的人软骨细胞中高表达,敲低circ_0032131通过靶向调控NF-кB通路减轻IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、ECM降解和炎症。 展开更多
关键词 环状RNA 0032131 nf-ΚB 骨关节炎 软骨变性 诊断标志物
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基于NF-κB信号通路探讨香砂六君子汤联合电针对术后早期炎性肠梗阻小鼠肠功能的影响
20
作者 李妮矫 张喆 +3 位作者 高春 许卫华 吕冉 赵锐恒 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第8期193-196,I0005,共5页
目的基于NF-κB通路,探讨香砂六君子汤联合电针对术后早期炎性肠梗阻(early postoperative inflammatory small bowel obstruction,EPISBO)小鼠胃肠功能及Cajal间质细胞(interstitial cellsof Cajal,ICC)的影响。方法将40只小鼠随机分... 目的基于NF-κB通路,探讨香砂六君子汤联合电针对术后早期炎性肠梗阻(early postoperative inflammatory small bowel obstruction,EPISBO)小鼠胃肠功能及Cajal间质细胞(interstitial cellsof Cajal,ICC)的影响。方法将40只小鼠随机分为对照组、模型组、中药组(香砂六君子汤)、电针组和中药加电针组,每组8只。除了对照组以外,其余各组小鼠采用肠管表面擦拭法建立小鼠EPISBO模型。建造模型结束后隔一天进行处理,中药组用香砂六君子汤灌肠,电针组使用电针刺激;中药加电针组使用电针刺激,并灌胃服用香砂六君子汤治疗。每日1次,连续1周。取小鼠腹主动脉血清及小肠组织;HE染色检测小鼠小肠组织的结构和病理学变化,测量小肠推进率;ELISA检测小鼠血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的浓度;Western blot检测小肠组织中c-kit(胃肠道Cajal间质细胞的特异性受体)和NF-κB通路中的关键蛋白p-p65和抑制蛋白IkB-α的蛋白表达。结果与对照组比,模型组小鼠的小肠推进率降低,小肠组织炎症程度加重,c-kit和IkB-α蛋白水平降低(P<0.001),IL-6和TNF-α水平及p-p65蛋白表达升高(P<0.001)。与模型组比较,中药组(香砂六君子汤)、电针组和中药加电针组的小肠推进率升高,小肠组织炎症程度减弱,c-kit和IkB-α蛋白水平升高(P<0.001),IL-6和TNF-α水平及p-p65蛋白表达降低(P<0.001)。中药加电针联合治疗的效果高于两者单独治疗的水平。结论香砂六君子汤联合电针可以减轻小鼠的炎症和肠梗阻的症状,并改善小鼠肠道功能,其机制可能与ICC的激活和NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 术后炎性肠梗阻 香砂六君子汤 电针 nf-ΚB CAJAL间质细胞
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