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miR-219a-5p通过调控NEK6基因表达抑制视网膜母细胞瘤增殖、迁移和侵袭的机制 被引量:3
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作者 吴育芝 刘伟仙 林智 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第15期3308-3313,共6页
目的探讨miR-219a-5p对视网膜母细胞瘤(RB)增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法qRT-PCR检测人RB细胞Y79与正常人视网膜血管内皮细胞ACBRI-181中miR-219a-5p和NEK6 mRNA的表达,Western印迹检测NEK6蛋白表达。分别转染miR-219a-5p mim... 目的探讨miR-219a-5p对视网膜母细胞瘤(RB)增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法qRT-PCR检测人RB细胞Y79与正常人视网膜血管内皮细胞ACBRI-181中miR-219a-5p和NEK6 mRNA的表达,Western印迹检测NEK6蛋白表达。分别转染miR-219a-5p mimics和si-NEK6至Y79细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western印迹检测周期蛋白依赖性激酶(CDK)1、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-219a-5p和NEK6的靶向关系。结果Y79细胞中miR-219a-5p低表达,NEK6 mRNA和蛋白高表达。miR-219a-5p过表达或抑制NEK6表达可抑制Y79细胞增殖、迁移和侵袭,下调Y79细胞CDK1、Cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白表达。miR-219a-5p在Y79细胞中靶向负调控NEK6表达,NEK6过表达可逆转miR-219a-5p过表达对Y79细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论miR-219a-5p调控NEK6表达抑制Y79细胞的增殖、迁移和侵袭能力,是治疗RB的新靶点。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 miR-219a-5p nek6 细胞增殖 迁移 侵袭
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Nek6在不同乳腺癌分子分型中的表达及其与临床病理特征的关系及意义 被引量:1
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作者 付琳琳 李静 +2 位作者 顾元忻 方炜 平金良 《浙江实用医学》 2021年第5期409-411,共3页
目的探讨Nek6的表达与乳腺癌分子分型及临床病理参数的关系。方法通过免疫组化检测2010年1月-2017年12月浙江省湖州市中心医院150例乳腺癌石蜡组织标本中Nek6的表达水平,比较不同分子分型及临床病理特征患者Nek6的表达情况。结果Nek6的... 目的探讨Nek6的表达与乳腺癌分子分型及临床病理参数的关系。方法通过免疫组化检测2010年1月-2017年12月浙江省湖州市中心医院150例乳腺癌石蜡组织标本中Nek6的表达水平,比较不同分子分型及临床病理特征患者Nek6的表达情况。结果Nek6的表达与乳腺癌的分子分型相关,且与患者的肿块大小、Ki-67指数有关(P<0.05或P<0.01);Nek6低表达乳腺癌患者术后总生存期高于Nek6高表达患者。结论Nek6在乳腺癌中的表达与其分子分型有关,且与乳腺癌的生长、细胞增殖及患者预后有关,为寻找乳腺癌治疗靶点提供依据。 展开更多
关键词 乳腺癌 nek6 分子分型 临床病理特征
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miR-188-5p靶向Nek6对宫颈癌细胞的影响及机制 被引量:3
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作者 许文丽 邢秀月 徐川微 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第1期142-148,共7页
目的探究微小RNA-188-5p(miR-188-5p)对宫颈癌细胞增殖、侵袭、凋亡、迁移的影响及其作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)对33例宫颈癌患者的癌组织及癌旁组织中的miR-188-5p的表达水平进行检测。常规培养宫颈癌HeLa细... 目的探究微小RNA-188-5p(miR-188-5p)对宫颈癌细胞增殖、侵袭、凋亡、迁移的影响及其作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)对33例宫颈癌患者的癌组织及癌旁组织中的miR-188-5p的表达水平进行检测。常规培养宫颈癌HeLa细胞,利用脂质体分别将miR-188-5p模拟物(mimics)及阴性对照转染至HeLa细胞。采用甲基噻唑基四唑(MTT)与平板克隆形成实验检测细胞存活率及克隆数目。流式细胞仪分析细胞凋亡;Transwell小室法分析侵袭与迁移;利用Targetscan及双荧光素酶报告基因实验分析miR-188-5p对NIMA相关激酶(Nek)6的靶向性作用;构建Nek6小干扰RNA(si-Nek6),观察抑制Nek6的表达对细胞生物学行为的影响。结果宫颈癌组织、癌旁组织中miR-188-5p的相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);转染miR-188-5p mimics或转染si-Nek6可降低细胞增殖、克隆形成能力,减少迁移和侵袭细胞数,并增加细胞凋亡率;miR-188-5p与Nek6基因的3′UTR结合,抑制Nek6的蛋白表达(P<0.05);Nek6过表达可逆转miR-188-5p对HeLa细胞生物学行为的调控作用。结论miR-188-5p可能靶向下调Nek6抑制宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-188-5p nek6 宫颈癌 增殖 迁移 侵袭 凋亡
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NEK6在HepG2细胞中的定位及其在肝癌中的表达和临床意义
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作者 刘心桐 陈剑 《世界肿瘤研究》 2021年第3期67-75,共9页
目的:检测NEK6在HepG2细胞中的定位,肝细胞肝癌组织与正常肝脏组织中的表达水平,分析其与临床病理学资料间的关系。方法:在HepG2细胞中转染pMCV-Nek6-Myc和pMCV-Nek6-Flag,应用间接免疫荧光法测定NEK6在HepG2细胞中的定位;应用RT-qPCR... 目的:检测NEK6在HepG2细胞中的定位,肝细胞肝癌组织与正常肝脏组织中的表达水平,分析其与临床病理学资料间的关系。方法:在HepG2细胞中转染pMCV-Nek6-Myc和pMCV-Nek6-Flag,应用间接免疫荧光法测定NEK6在HepG2细胞中的定位;应用RT-qPCR法检测47例肝细胞肝癌(HCC)组织与相应远癌旁组织(】1 cm)中NEK6 mRNA的表达水平;应用Western blot法检测该47例肝细胞肝癌组织与相应正常肝组织中NEK6蛋白的表达水平。收集并统计该组患者的临床病理学资料,包括性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量(单个/多个)、血清AFP水平(≥400 ng/ml或【400 ng/ml)、Edmondson分级、纤维包膜、微血管侵犯(microvascular invasion, MVI)等,分析NEK6 mRNA表达水平与各临床病理特点的关系。配对样本应用配对t检验,单因素分析用卡方检验,多因素分析用二元Logistic回归分析,以P 【0.05认为结果有统计学意义。结果:免疫荧光实验显示,NEK6主要定位于HepG2细胞的细胞核中,在细胞质中也有少量存在;RT-qPCR结果显示,NEK6 mRNA在HCC中的表达量为(1.405 &#177;0.472),显著高于正常肝组织中的表达量(1.133 &#177;0.474),差异有统计学意义(t = 3.143, P = 0.0029);Western blot结果显示,NEK6蛋白在HCC中的表达量为(1.031 &#177;0.193),显著高于正常肝组织中的表达量(0.906 &#177;0.182),差异有统计学意义(t = 3.464, P = 0.0012)。结论:NEK6主要存在于HepG2细胞的细胞核中,在肝细胞肝癌中表达上调,微血管侵犯是Nek6表达水平的独立相关因素,可能作为肝癌预后不良的判断指标之一。 展开更多
关键词 nek6 亚细胞定位 肝细胞肝癌
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大鼠脊髓损伤后NEK6表达的实验研究
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作者 唐振宇 《淮海医药》 CAS 2011年第6期473-475,共3页
目的探讨大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织中NEK6的表达变化及意义。方法采用改良Allen’s打击法,构建大鼠脊髓T8-T10撞击伤模型,利用蛋白免疫印迹、免疫荧光双标的方法,研究大鼠脊髓损伤后脊髓组织中NEK6表达的时间和空间分布特征。结果脊... 目的探讨大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织中NEK6的表达变化及意义。方法采用改良Allen’s打击法,构建大鼠脊髓T8-T10撞击伤模型,利用蛋白免疫印迹、免疫荧光双标的方法,研究大鼠脊髓损伤后脊髓组织中NEK6表达的时间和空间分布特征。结果脊髓损伤后NEK6表达于撞击后2 h有轻微抬高趋势,损伤后8 h达到高峰,随后逐渐下降,恢复至对照组水平;脊髓损伤后,表达增多的NEK6主要定位于损伤部位脊髓的神经元与星形胶质细胞中。结论脊髓损伤后脊髓组织的神经元及星形胶质细胞中NEK6表达增多,其可能是通过调节神经元及星形胶质细胞的生物学行为参与脊髓损伤的病理过程。 展开更多
关键词 脊髓损伤 nek6 蛋白质印迹 免疫荧光 大鼠
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NEK6与肿瘤关系的研究进展
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作者 马阳阳 岳根全 《临床医学进展》 2024年第9期193-199,共7页
人类NIMA相关激酶(NIMA-related kinases, NEK)是一组在人类细胞中表达的与NIMA同源的蛋白激酶,它们通常在细胞周期的调控中扮演着重要的角色。目前在人类基因组中已经鉴定出NEK1到NEK11等多个成员,其中人类NIMA相关激酶6 (Human NIMA-r... 人类NIMA相关激酶(NIMA-related kinases, NEK)是一组在人类细胞中表达的与NIMA同源的蛋白激酶,它们通常在细胞周期的调控中扮演着重要的角色。目前在人类基因组中已经鉴定出NEK1到NEK11等多个成员,其中人类NIMA相关激酶6 (Human NIMA-related kinases 6, NEK6)正是其中的重要成员之一。NEK6在动物细胞中普遍表达,其主要位于细胞核内,是一种多功能细胞调控因子,它不但可以影响细胞周期的进程和细胞的稳定性,同时还可以作为信号转导因子参与调控多种信号转导通路。随着分子生物学技术的不断发展以及医疗的进步,NEK6与各种肿瘤发生发展的关系也逐步引起了公众的广泛关注。截至目前的研究表明:多种恶性肿瘤的生物学行为显著受到NEK6异常表达的影响,本文将归纳并总结NEK6参与调控乳腺癌、胃癌、肝癌及肾细胞癌等恶性肿瘤的机制并进行综述。Human NIMA-related kinases (NEK) are a group of protein kinases homologous to NIMA expressed in human cells, which generally play an important role in the regulation of the cell cycle. Several members of NEK1 to NEK11 have been identified in the human genome, among which human NIMA-related kinases 6 (NEK6) is one of the important members. NEK6 is widely expressed in animal cells, mainly located in the nucleus, and is a multifunctional cell regulator, which can not only affect the progress of the cell cycle and the stability of cells, but also participate in the regulation of a variety of signal transduction pathways as a signal transduction factor. With the continuous development of molecular biology technology and medical advancement, the relationship between NEK6 and the development of various tumorigenesis has gradually attracted extensive public attention. This article will summarize the mechanism of NEK6 in the regulation of breast cancer, gastric cancer, liver cancer and renal cell carcinoma. 展开更多
关键词 nek6 NEKS 恶性肿瘤 癌症
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Nek6在心力衰竭家兔心脏中的表达增加 被引量:6
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作者 张艳 杨波 +5 位作者 包明威 张炳山 武欣迎 王澈 李海涛 梁锦军 《医学分子生物学杂志》 CAS 2016年第6期317-321,共5页
目的:通过刺破主动脉瓣造成反流加重心脏前负荷联合缩窄腹主动脉加重心脏后负荷制作心力衰竭模型,研究Nek6在心力衰竭家兔心脏的心肌细胞中含量表达的改变,初步探讨Nek6在心力衰竭发生发展中的作用。方法将日本大耳白兔分为心衰组和... 目的:通过刺破主动脉瓣造成反流加重心脏前负荷联合缩窄腹主动脉加重心脏后负荷制作心力衰竭模型,研究Nek6在心力衰竭家兔心脏的心肌细胞中含量表达的改变,初步探讨Nek6在心力衰竭发生发展中的作用。方法将日本大耳白兔分为心衰组和对照组各10只,通过刺破主动脉瓣及缩窄腹主动脉两次手术制作心衰组模型,对照组仅行假手术。2月后使用超声检测心脏各腔室大小及室壁厚度,并计算射血分数;处死家兔后,计算心脏重量与身体重量比值,使用HE染色分析比较心肌细胞面积,使用PSR染色分析比较基质胶原含量,使用Nek6免疫组化染色分析Nek6蛋白含量变化。结果与对照组相比,心衰组家兔左室收缩末期内径及舒张末期内径均增加,射血分数降低,身心比增加,细胞明显增大,胶原增多, Nek6蛋白含量增加。结论 Nek6在心力衰竭家兔心脏的心肌细胞中表达明显上升。 展开更多
关键词 心力衰竭 心脏重构 nek6
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过表达AtNEK6转基因烟草的耐旱耐盐性研究 被引量:1
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作者 翟红红 孟志刚 +4 位作者 张锐 孙国清 孟钊红 李琴 郭三堆 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期29-36,共8页
NEK6基因编码一种丝/苏氨酸蛋白激酶,具有调控植物细胞周期蛋白基因表达和乙烯信号转导的功能,与植物抵抗逆境胁迫相关。将拟南芥At NEK6基因导入烟草,利用甘露醇和Na Cl模拟干旱和盐胁迫环境对T2代转基因烟草进行研究。结果表明,在无... NEK6基因编码一种丝/苏氨酸蛋白激酶,具有调控植物细胞周期蛋白基因表达和乙烯信号转导的功能,与植物抵抗逆境胁迫相关。将拟南芥At NEK6基因导入烟草,利用甘露醇和Na Cl模拟干旱和盐胁迫环境对T2代转基因烟草进行研究。结果表明,在无胁迫处理条件下,转基因烟草根长、侧根数和鲜重显著高于野生型;在干旱和盐胁迫条件下,转基因烟草根长、侧根数和鲜重均极显著高于野生型,表现出较强的耐旱耐盐性;胁迫处理的转基因烟草叶片叶绿素荧光参数值(Fv/Fm)、SOD和CAT活性以及Pro含量极显著高于野生型,MDA含量极显著低于野生型,进一步证明了At NEK6基因能够促进烟草的生长和提高转基因烟草对于干旱与盐碱的抵抗能力。 展开更多
关键词 Atnek6 烟草 生长势 耐旱性 耐盐性
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miR-506-3p对卵巢癌细胞化学治疗敏感性的影响 被引量:1
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作者 李燚 邵琳 《世界临床药物》 2022年第5期533-541,共9页
目的探讨miR-506-3p对卵巢癌(ovarian cancer,OC)细胞化学治疗敏感性的影响及其作用机制。方法用定量反转录聚合酶链反应法检测miR-506-3p和永离有丝分裂基因A相关激酶6(never in mitosis gene A-related kinase 6,NEK6)在OC顺铂(cispla... 目的探讨miR-506-3p对卵巢癌(ovarian cancer,OC)细胞化学治疗敏感性的影响及其作用机制。方法用定量反转录聚合酶链反应法检测miR-506-3p和永离有丝分裂基因A相关激酶6(never in mitosis gene A-related kinase 6,NEK6)在OC顺铂(cisplatin,DDP)耐药细胞系(SKOV3/DDP、A2780/DDP和HeyA8/DDP)及其亲本细胞系(SKOV3、A2780和HeyA8)中的表达水平;用Lipofectamine 2000分别转染构建miR-506-3p过表达SKOV3/DDP细胞和DDP敏感SKOV3细胞;四唑盐比色法测定各转染组SKOV3/DDP细胞和敏感SKOV3细胞的存活率及半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50));TargetScan预测miR-506-3p的潜在靶基因,双荧光素酶实验进行验证;免疫印迹法测定转染后NEK6蛋白的表达水平。结果OC耐药细胞系中miR-506-3p低表达,NEK6高表达。转染miR-506-3p模拟物(mimic)可使SKOV3/DDP细胞和敏感SKOV3细胞存活率、IC_(50)值显著降低;敏感SKOV3细胞存活率、IC_(50)值低于SKOV3/DDP细胞,DDP对SKOV3/DDP细胞IC_(50)值是敏感SKOV3细胞的2.1倍。共转染miR-506-3p mimic和LV-NEK6逆转了miR-506-3p mimic单独转染对SKOV3/DDP细胞化学治疗敏感性的影响。说明NEK6是miR-506-3p的潜在靶基因。miR-506-3p负向调控NEK6蛋白的表达。结论miR-506-3p通过靶向抑制NEK6表达增加了OC耐药细胞的化学治疗敏感性。 展开更多
关键词 卵巢癌 miR-506-3p 永离有丝分裂基因A相关激酶6(nek6) 顺铂 化学治疗敏感性
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