尿α1-MG与血清Cys-C、NEFA在糖尿病肾病预后评估中的应用研究 被引量：1

1

作者 王莹 徐孝敏 +1 位作者 郑贞 王明明 《黑龙江医药科学》 2025年第1期97-98,102,共3页

目的:探究尿α1-微球蛋白(α1-MG)与血清胱抑素(Cys-C)、游离脂肪酸(nonesterified fatty acid,NEFA)在糖尿病肾病(DN)预后评估中的应用价值。方法:选取2021年1月至2023年6月周口市中医院收治的123例DN患者(研究组)及35例糖尿病患者(对... 目的:探究尿α1-微球蛋白(α1-MG)与血清胱抑素(Cys-C)、游离脂肪酸(nonesterified fatty acid,NEFA)在糖尿病肾病(DN)预后评估中的应用价值。方法:选取2021年1月至2023年6月周口市中医院收治的123例DN患者(研究组)及35例糖尿病患者(对照组)为研究对象,比较两组尿α1-MG、血清Cys-C、NEFA水平,依据DN患者预后不同分为预后良好组(n=91)及预后不良组(n=32),对比不同预后DN患者尿α1-MG、血清Cys-C、NEFA水平,Logistic回归分析及ROC曲线分析尿α1-MG、血清Cys-C、NEFA在DN患者预后评估中的应用价值。结果:研究组尿α1-MG、血清Cys-C、NEFA水平均较对照组高(P<0.05)。预后不良组尿α1-MG、血清Cys-C、NEFA水平均较预后良好组高(P<0.05)。α1-MG、血清Cys-C、NEFA水平是DN患者预后的独立影响因素(P<0.05)。尿α1-MG与血清Cys-C、NEFA水平三项联合检测对DN患者预后的预测价值较高。结论:尿α1-MG与血清Cys-C、NEFA在DN预后评估中有较高价值。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 尿Α1-MG CYS-C nefa 预后

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NEFA对奶牛肝细胞葡萄糖代谢相关基因表达的影响

2

作者 杨肖 文艳琼 +2 位作者 刘佳俊 毛思晴 彭涛 《湖南畜牧兽医》 2025年第1期41-45,共5页

试验基于非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)对围产期奶牛高NEFA血症的致病作用,旨在探讨NEFA对奶牛肝细胞中葡萄糖代谢相关基因表达的影响。试验用0、0.3、1.2 mmol/L NEFA处理奶牛肝细胞,通过q-PCR检测葡萄糖代谢相关酶... 试验基于非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)对围产期奶牛高NEFA血症的致病作用,旨在探讨NEFA对奶牛肝细胞中葡萄糖代谢相关基因表达的影响。试验用0、0.3、1.2 mmol/L NEFA处理奶牛肝细胞,通过q-PCR检测葡萄糖代谢相关酶的基因表达,利用葡萄糖含量检测试剂盒检测奶牛肝细胞内葡萄糖浓度。结果表明:与对照组相比,1.2 mmol/L NEFA组的葡萄糖水平显著降低(P<0.001);奶牛肝细胞中GLUT2、SGLT1、G6PC、G6PD、PC、GYS1、PEPCK的m RNA表达水平显著下降(P<0.05);GSK3-β、HK、PK、PYGL、PFK1的m RNA表达水平显著上升(P<0.05)。综上所述,高浓度NEFA可通过调节奶牛肝细胞葡萄糖代谢相关酶的基因表达导致奶牛糖代谢紊乱。 展开更多

关键词 nefa 奶牛肝细胞 葡萄糖 Q-PCR

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添加不同浓度过瘤胃脂肪对奶牛产后MUN、NEFA、BHBA及繁殖的影响 被引量：7

3

作者 淡新刚 韩元 史远刚 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期118-121,共4页

通过对产后高产奶牛添加不同浓度的过瘤胃脂肪,研究过瘤胃脂肪对奶牛产后MUN、NEFA、BHBA及繁殖的影响。结果表明,添加200 g和400 g过瘤胃脂肪都能在一定程度上降低产后泌乳高峰期MUN、NEFA、BHBA的浓度,与空白对照组比较差异显著,后者... 通过对产后高产奶牛添加不同浓度的过瘤胃脂肪,研究过瘤胃脂肪对奶牛产后MUN、NEFA、BHBA及繁殖的影响。结果表明,添加200 g和400 g过瘤胃脂肪都能在一定程度上降低产后泌乳高峰期MUN、NEFA、BHBA的浓度,与空白对照组比较差异显著,后者略好于前者;另外添加400 g过瘤胃脂肪组奶牛产后平均配种次数显著低于对照组(1.4±0.35VS 2.1±0.28),奶牛空怀间隔也显著低于对照组(102±22.5 VS 126±23.6),产后情期受胎率和100 d受胎率明显高于对照组。可见,添加一定量的过瘤胃脂肪在一定程度能够降低高产奶牛产后MUN、NEFA、BHBA的浓度,提高了产后奶牛的繁殖性能。 展开更多

关键词 过瘤胃脂肪 乳尿素氮(MUN) 非酯仅脂肪酸(nefa) β羟丁酸(BHBA) 繁殖性能

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NEFAs对BRL-3A氧化应激的作用

4

作者 邹颖 李铭 +5 位作者 郭寒 杨威 徐闯 夏成 张洪友 张冰冰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1817-1820,1884,共5页

用非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFAs)刺激BRL-3A,添加钙释放激活的钙通道蛋白1(calcium release-activated calcium channel protein 1,CRAR,也叫Orai1)通路抑制剂2-氨基乙酯二苯基硼酸(2-APB),检测不同分组细胞内Orai1 m... 用非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFAs)刺激BRL-3A,添加钙释放激活的钙通道蛋白1(calcium release-activated calcium channel protein 1,CRAR,也叫Orai1)通路抑制剂2-氨基乙酯二苯基硼酸(2-APB),检测不同分组细胞内Orai1 mRNA表达量以及活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平的变化。结果显示,添加NEFAs的BRL-3A细胞中Orai1 mRNA表达量及ROS、MDA水平显著高于对照组,GSH水平显著低于对照组,经过2-APB预处理的NEFAs组细胞的Orai1 mRNA表达量和ROS、MDA水平显著低于NEFAs组,GSH水平显著高于NEFAs组。结果表明,NEFAs通过激活Orai1通路,使BRL-3A细胞的氧化应激水平显著上升,从而导致肝损伤,而抑制Orai1通路可下调NEFAs诱导的大鼠肝细胞氧化应激水平,进而保护肝脏。 展开更多

关键词 BRL-3A nefas CA2+ Orai1 ROS 氧化应激

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靶向沉默CaMKK-AMPK通路对NEFAs介导肝脂损伤的调控机制

5

作者 王爽 任大禹 +6 位作者 张睿锴 杨威 张冰冰 董志昊 赵莹莹 麻芯茹 徐闯 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期322-326,共5页

为探究Ca^(2+)/钙调素依赖性蛋白激酶(CaMKK)-AMP依赖蛋白激酶(AMPK)对非酯化脂肪酸(NEFAs)介导的AML12细胞肝脂损伤的调控机制,本试验通过添加高浓度的NEFAs刺激AML12细胞,RNA靶向沉默CaMKK,检测不同分组细胞内AMPK及固醇调节原件结合... 为探究Ca^(2+)/钙调素依赖性蛋白激酶(CaMKK)-AMP依赖蛋白激酶(AMPK)对非酯化脂肪酸(NEFAs)介导的AML12细胞肝脂损伤的调控机制,本试验通过添加高浓度的NEFAs刺激AML12细胞,RNA靶向沉默CaMKK,检测不同分组细胞内AMPK及固醇调节原件结合蛋白(SREBP1)的蛋白表达水平以及利用流式细胞术检测活性氧(ROS)的产生水平,同时利用激光共聚焦检测细胞内脂滴变化情况。结果显示,siCaMKK+NEFAs组AMPK蛋白表达水平较空白对照组及NEFAs组均显著降低,而SREBP1蛋白表达水平、ROS水平及脂滴数量均显著高于其他各组。结果表明,CaMKK通过AMPK信号通路调控SREBP1及线粒体脂质氧化可调节NEFAs诱导的肝脂损伤过程。 展开更多

关键词 AML12 非酯化脂肪酸(nefas) CaMKK ROS 脂质沉积

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NEFAs在酮病奶牛脂肪动员以及氧化应激中的作用 被引量：4

6

作者 邹苏萍 郝宁 +7 位作者 陶焕青 明鹏飞 徐怡钟 梁婷 冯士彬 王希春 吴金节 李玉 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期99-101,117,共4页

糖脂代谢紊乱导致的营养代谢性疾病是奶牛酮病的病因,在围产奶牛中比较多见。由于围产期奶牛泌乳需要消耗大量能量,而此时能量摄入不足,因此机体需要动员脂肪,大量的脂肪动员会导致血液非酯化脂肪酸和酮体浓度上升。将以围产期酮病奶牛... 糖脂代谢紊乱导致的营养代谢性疾病是奶牛酮病的病因,在围产奶牛中比较多见。由于围产期奶牛泌乳需要消耗大量能量,而此时能量摄入不足,因此机体需要动员脂肪,大量的脂肪动员会导致血液非酯化脂肪酸和酮体浓度上升。将以围产期酮病奶牛脂肪动员产物NEFAs的产生、利用和作用为重点一一论述,旨在为深入研究奶牛酮病的发病机制提供理论依据。 展开更多

关键词 奶牛 酮病 nefas MAPK NF-ΚB 氧化应激

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FMO3调节NEFA介导的犊牛原代肝细胞内质网应激

7

作者 邓清华 宋景旭 +3 位作者 刘婷 张焱 谢志凤 刘国文 《饲料博览》 2020年第9期1-6,共6页

内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)与许多代谢性疾病有关,比如胰岛素抵抗、脂肪肝等营养代谢性疾病。脂肪肝是围产期奶牛常见多发的营养代谢性疾病,严重危害着奶牛养殖业的发展。含黄素单加氧酶3(Flavin containing monooxy... 内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)与许多代谢性疾病有关,比如胰岛素抵抗、脂肪肝等营养代谢性疾病。脂肪肝是围产期奶牛常见多发的营养代谢性疾病,严重危害着奶牛养殖业的发展。含黄素单加氧酶3(Flavin containing monooxygenase,FMO3)是近年来发现的与内质网应激有密切联系的调节分子。因此,我们推测FMO3有可能参与调节奶牛的内质网应激过程,从而影响脂质代谢。试验通过体外培养犊牛原代肝细胞感染FMO3过表达和低表达腺病毒载体,检测FMO3过表达和低表达对NEFA介导的犊牛原代肝细胞内质网应激的影响,以明确FMO3对奶牛肝细胞内质网应激的调节作用。结果发现,FMO3过表达腺病毒载体明显增加了NEFA介导的奶牛肝细胞内质网应激相关因子的mRNA表达水平,低表达腺病毒明显降低了NEFA介导的内质网应激相关因子的mRNA表达水平,这为阐明奶牛内质网应激的发病机制提供了一定的理论依据。 展开更多

关键词 FMO3 脂肪肝 内质网应激 nefa

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NEFA对牛骨骼肌细胞线粒体功能及脂肪酸代谢相关基因的影响 被引量：3

8

作者 黄泳 杨艺 +2 位作者 赵颖 付叶 龚婷 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2115-2125,共11页

【目的】明确非脂化脂肪酸(NEFA)胁迫对牛骨骼肌细胞线粒体功能及脂肪酸代谢过程的影响,为揭示围产期奶牛营养代谢病的作用机理提供参考依据。【方法】建立NEFA胁迫牛骨骼肌细胞模型,经最佳浓度—时间组合刺激后,采用透射电镜观察牛骨... 【目的】明确非脂化脂肪酸(NEFA)胁迫对牛骨骼肌细胞线粒体功能及脂肪酸代谢过程的影响,为揭示围产期奶牛营养代谢病的作用机理提供参考依据。【方法】建立NEFA胁迫牛骨骼肌细胞模型,经最佳浓度—时间组合刺激后,采用透射电镜观察牛骨骼肌细胞线粒体的形态变化,通过油红O染色及BODIPY 493/503染色观察细胞内脂质沉积情况,采用流式细胞术检测线粒体膜电位,利用试剂盒检测细胞内的过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,并以实时荧光定量PCR检测线粒体功能及脂质代谢相关基因表达情况。【结果】综合NEFA对牛骨骼肌细胞存活率及其形态的影响,选取1.5 mmol/L NEFA刺激2 h作为后续试验的最佳浓度—时间组合。经1.5 mmol/L NEFA刺激2 h后,牛骨骼肌细胞线粒体体积变小、基质颜色加深,线粒体嵴排列紊乱,且趋向于融合现象,甚至部分呈空泡状;线粒体膜电位下降的细胞数量明显增多,较对照组(刺激0 h)显著提高38.08%(P<0.05,下同);细胞培养上清液MDA含量较对照组(刺激0 h)显著提高1.38倍,而细胞内的CAT活性极显著降低60.63%(P<0.01,下同),SOD活性显著降低34.21%。实时荧光定量PCR检测结果显示,经1.5 mmol/L NEFA刺激2 h后,调控线粒体基因复制与转录的NRF1和PGC-1α基因、调控线粒体融合的MFN2基因、线粒体呼吸链关键酶基因(除COV基因外)、含Patatin样磷脂酶域2蛋白基因(PNPLA2)及长链脂酸延伸酶6基因(ELOVL6)的相对表达量均极显著降低,而肉毒碱脂酰转移酶1B基因(CPT1B)的相对表达量极显著提高。【结论】高浓度的NEFA对牛骨骼肌细胞具有脂毒性,对线粒体形态、功能与膜电位均产生影响,能引发线粒体功能障碍及导致细胞脂肪酸代谢异常,产生氧化应激,进而诱导脂质异常沉积。 展开更多

关键词 牛 围产期 非酯化脂肪酸(nefa) 骨骼肌细胞 线粒体功能 代谢异常

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Orai1对NEFA诱导内质网应激引起犊牛肝细胞脂质沉积的影响 被引量：3

9

作者 王晶晶 李铭 +7 位作者 温佳楠 朱星蕴 桑一凡 李颖 杨雅慧 李明洋 刘松 张冰冰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1559-1565,共7页

为探究Orai1是否参与非酯化脂肪酸(nonestesterifiedfatty acid,NEFAs)诱导内质网应激引起犊牛肝细胞脂质沉积,本试验首先通过体外添加高浓度NEFAs,运用Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,测定NEFAs对内质网应激标志分子GRP7... 为探究Orai1是否参与非酯化脂肪酸(nonestesterifiedfatty acid,NEFAs)诱导内质网应激引起犊牛肝细胞脂质沉积,本试验首先通过体外添加高浓度NEFAs,运用Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,测定NEFAs对内质网应激标志分子GRP78表达量以及脂肪从头合成ACC1、FAS的表达水平的影响。而后又添加Orai1抑制剂2APB与RNA靶向沉默Orai1。结果显示,抑制或沉默Orai1后NEFAs刺激可明显降低GRP78、Orai1、ACC1、FAS的表达水平以及脂滴含量。结果表明,Orai1参与NEFA诱导的内质网应激引起犊牛肝细胞脂质沉积。 展开更多

关键词 内质网应激 Orai1 非酯化脂肪酸(nefas) 犊牛肝细胞 脂肪从头合成

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NEFA BHBA对体外培养牛肝细胞的HP和SAA mRNA表达的影响 被引量：2

10

作者 宰翔 于啸洋 +4 位作者 于孔森 李明皓 张国庆 王佟 郝景锋 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期62-66,131,共6页

为了验证奶牛酮病发病过程中机体会产生大量的NEFA(非酯化脂肪酸)、BHBA(β-羟丁酸)可能是脂类代谢关键的调节因素。本试验通过对培养的牛肝细胞添加NEFA和BHBA研究NEFA以及BHBA对牛肝细胞的结合珠蛋白(hap-toglobin,HP)和血清淀粉样蛋... 为了验证奶牛酮病发病过程中机体会产生大量的NEFA(非酯化脂肪酸)、BHBA(β-羟丁酸)可能是脂类代谢关键的调节因素。本试验通过对培养的牛肝细胞添加NEFA和BHBA研究NEFA以及BHBA对牛肝细胞的结合珠蛋白(hap-toglobin,HP)和血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A protein,SAA) mRNA表达的影响。根据荧光定量PCR法测定NEFA、BHBA对体外培养牛肝细胞的HP和SAA mRNA表达的影响,以及NEFA、BHBA等代谢产物对急性期反应蛋白HP、SAA表达影响的结果,得出结论,中等浓度的NEFA对于体外新生犊牛肝细胞中的HP、SAA基因的表达具有促进作用,高浓度的NEFA对HP、SAA基因的表达影响较小;中等浓度的BHBA体外新生犊牛肝细胞中的HP、SAA基因的表达具有一定的抑制作用,中高浓度抑制作用不明显,对于SAA基因,只有BHBA在1. 2 mmol/L浓度下抑制作用明显,高浓度的BHBA对HP、SAA基因的表达影响很小。 展开更多

关键词 酮病 nefa BHBA HP SAA

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NEFA对体外培养奶牛中性粒细胞TLR2/4介导的炎症信号通路的影响 被引量：2

11

作者 张玉明 雷林 +6 位作者 蒋兴华 杜希良 高文文 邓清华 王哲 李心慰 刘国文 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期626-630,共5页

分离培养奶牛中性粒细胞(PMN),添加不同浓度的非酯化脂肪酸(NFEA),作用浓度分别为0.125、0.25、0.5、1和2mmol/L。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测炎性通路相关分子基因表达水平,采用ELISA检测炎性因子含量。结果显示,与对照组相比,T... 分离培养奶牛中性粒细胞(PMN),添加不同浓度的非酯化脂肪酸(NFEA),作用浓度分别为0.125、0.25、0.5、1和2mmol/L。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测炎性通路相关分子基因表达水平,采用ELISA检测炎性因子含量。结果显示,与对照组相比,Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)和核转录因子NF-κBp65的mRNA表达水平逐渐增加,且0.5、1和2mmol/L NEFA处理组显著高于对照组(P<0.05,P<0.01);炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量也随着NEFA作用浓度的增加而增加,并且0.5、1和2mmol/L NEFA处理组显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。这些结果表明高浓度NEFA(≥0.5mmol/L)可以激活中性粒细胞TLR2/4介导的炎症信号通路,显著增加IL-1β、IL-6和TNF-α的合成和释放,造成中性粒细胞的炎性损伤,进而影响奶牛免疫机能。 展开更多

关键词 非酯化脂肪酸 中性粒细胞 奶牛 炎性因子

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脑梗死患者血清Hcy、hs-CRP及NEFA水平与患者预后的相关性分析 被引量：18

12

作者 舒银珍 全晖 曾志荣 《标记免疫分析与临床》 CAS 2021年第2期313-317,共5页

目的探讨脑梗死患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及游离脂肪酸(NEFA)水平与患者预后的相关性。方法收集2018年6月至2019年6月医院收治的108例脑梗死患者(研究组)和同期体检70名健康志愿者(对照组)为研究对象。依据脑... 目的探讨脑梗死患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及游离脂肪酸(NEFA)水平与患者预后的相关性。方法收集2018年6月至2019年6月医院收治的108例脑梗死患者(研究组)和同期体检70名健康志愿者(对照组)为研究对象。依据脑梗死病情程度不同分为大梗死组、中梗死组、小梗死组,依据患者神经功能受损程度分为重度组、中度组、轻度组,根据患者预后不同分为预后良好组、预后不良组。比较研究组、对照组基线资料和血清Hcy、hs-CRP及NEFA水平,同时比较研究组各亚组间Hcy、hs-CRP及NEFA水平。结果研究组血清Hcy、hs-CRP及NEFA水平较对照组明显升高(P<0.05),而两组性别、年龄、BMI、吸烟史、饮酒史等基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。大梗死组、中梗死组、小梗死组血清Hcy、hs-CRP及NEFA水平依次明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组、中度组、轻度组血清Hcy、hs-CRP及NEFA水平依次明显降低,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。预后良好组血清Hcy、hs-CRP及NEFA水平较预后不良组明显降低(P<0.05);ROC曲线分析提示血清Hcy、hs-CRP及NEFA水平联合检测诊断脑梗死患者预后的曲线下面积、灵敏度和特异性较三项单独检测的明显提高。结论脑梗死患者血清Hcy、hs-CRP及NEFA水平呈明显升高趋势,且Hcy、hs-CRP及NEFA水平与患者预后密切相关,三者联合检测利于脑梗死患者预后的有效评估。 展开更多

关键词 脑梗死 HCY HS-CRP nefa 预后 相关性

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日粮不同NFC/RDP水平对围产期奶牛血液NEFA、BHBA、ALB和TP浓度的影响 被引量：4

13

作者 赵永生 侯先志 +2 位作者 王海荣 考桂兰 杨帆 《中国奶牛》 2009年第10期12-15,共4页

本文旨在研究围产前期日粮不同NFC/RDP水平对奶牛血液NEFA、BHBA、ALB和TP浓度的影响。选择2～5胎、产奶量、体重和体况评分值相近的围产期荷斯坦牛48头,随机分为六组,每组8头,于产前第28天开始,各组分别饲喂NFC/RDP为5.14(Ⅰ)、3.46(Ⅱ... 本文旨在研究围产前期日粮不同NFC/RDP水平对奶牛血液NEFA、BHBA、ALB和TP浓度的影响。选择2～5胎、产奶量、体重和体况评分值相近的围产期荷斯坦牛48头,随机分为六组,每组8头,于产前第28天开始,各组分别饲喂NFC/RDP为5.14(Ⅰ)、3.46(Ⅱ)、4.00(Ⅲ)、5.12(Ⅳ)、3.35(Ⅴ)、2.87(Ⅵ)的日粮。分娩后各组均饲喂相同的产奶日粮,至产后第7天结束。结果表明,产后第7天,Ⅲ组血清NEFA浓度显著低于Ⅵ组(P<0.05),低于其余四组,但差异不显著(P>0.05);产后第1天,Ⅲ组血清BHBA水平显著低于Ⅵ组(P<0.05),低于其余四组,但差异不显著(P>0.05);从产前第14天到产后第7天,Ⅲ组血清ALB浓度均高于其余五组,但差异不显著(P>0.05);产后第7天,Ⅲ组TP浓度显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05),高于Ⅱ组、Ⅴ组和Ⅵ组,但差异不显著(P>0.05)。在本试验条件下,NFC/RDP为4.00(Ⅲ)的日粮饲喂效果最佳。 展开更多

关键词 围产期奶牛 NFC/RDP 非酯化脂肪酸 Β-羟丁酸 白蛋白 总蛋白

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高浓度NEFAs血症通过抑制PGC-1α引起奶牛肝细胞脂质蓄积 被引量：4

14

作者 王兴慧 朱艺玮 +3 位作者 李伟 李金霞 李心慰 刘国文 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期116-120,共5页

酮病奶牛高脂肪酸(NEFAs)血症可引起肝脂蓄积,但其机制尚未完全明确。因此通过酮病奶牛体内试验和培养奶牛肝细胞体外试验,体外添加NEFAs和过表达过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α),采用蛋白免疫印迹、实时荧光定量... 酮病奶牛高脂肪酸(NEFAs)血症可引起肝脂蓄积,但其机制尚未完全明确。因此通过酮病奶牛体内试验和培养奶牛肝细胞体外试验,体外添加NEFAs和过表达过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α),采用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR和生化检测等技术,检测PGC-1α表达及脂代谢相关指标变化。结果表明:酮病奶牛肝脏PGC-1αmRNA和蛋白表达水平显著低于健康奶牛,高浓度NEFAs(1.2,2.4 mmol/L)可显著抑制奶牛肝细胞PGC-1αmRNA和蛋白及脂肪酸氧化基因ACO、CPT-1和CPT-2的表达,促进脂合成基因FAS、ACC和SCD-1的表达,导致奶牛肝细胞脂蓄积。体外过表达PGC-1α能够逆转NEFAs所引起的脂代谢基因的表达紊乱,并且显著降低高NEFAs所引起的奶牛肝细胞脂蓄积。说明酮病奶牛高NE⁃FAs血症可以通过抑制PGC-1α的表达,引起肝脂代谢酶基因表达紊乱,进而导致肝细胞脂蓄积。 展开更多

关键词 奶牛酮病 PGC-1Α nefas 脂代谢

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NEFA对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子基因表达的影响 被引量：5

15

作者 付世新 邢菲菲 +4 位作者 罗胜缤 曹一鸣 温小庆 李美娟 罗春海 《黑龙江八一农垦大学学报》 2021年第4期40-44,98,共6页

分析NEFA对奶牛子宫内膜上皮细胞内细胞凋亡相关因子mRNA表达的影响。培养奶牛子宫内膜上皮细胞,用CCK-8法检测不同浓度NEFA刺激不同时间后的细胞活性,以筛选出合适的NEFA刺激浓度和时间,再采用qRT-PCR法检测NEFA刺激子宫内膜上皮细胞... 分析NEFA对奶牛子宫内膜上皮细胞内细胞凋亡相关因子mRNA表达的影响。培养奶牛子宫内膜上皮细胞,用CCK-8法检测不同浓度NEFA刺激不同时间后的细胞活性,以筛选出合适的NEFA刺激浓度和时间,再采用qRT-PCR法检测NEFA刺激子宫内膜上皮细胞后细胞凋亡相关因子caspase-3、caspase-8、Bcl-2、Bax的mRNA表达。选取0.2 mM为低浓度、1.2 mM为高浓度、12 h为合适的NEFA刺激细胞浓度和时间。NEFA在低浓度0.2 mM时对细胞内caspase-3、caspase-8、Bcl-2、Bax的基因表达无显著影响,而NEFA在高浓度1.2 mM时,极显著上调促凋亡基因caspase-3、caspase-8、Bax的mRNA表达(P<0.01),显著下调Bcl-2的mRNA表达(P<0.05)。高浓度的NEFA可以通过上调细胞凋亡因子的表达和抑制抗凋亡因子的表达来诱导子宫内膜上皮细胞凋亡,进而影响胎衣不下的发生。 展开更多

关键词 奶牛 胎衣不下 游离脂肪酸 细胞凋亡

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NEFA对奶牛肝细胞活力及形态的影响 被引量：1

16

作者 田媛 刘梓淩 +2 位作者 高鑫 田蕾 彭涛 《湖南畜牧兽医》 2024年第3期45-48,共4页

基于非酯化脂肪酸(NEFA)对奶牛脂肪肝的致病作用,探究NEFA对奶牛肝细胞活力及形态的影响。试验使用CCK8法检测奶牛肝细胞活力,试验第一部分分组为空白对照组、0.3 mmol/L、0.6 mmol/L、1.2 mmol/L、2.4 mmol/L NEFA组,试验第二部分分组... 基于非酯化脂肪酸(NEFA)对奶牛脂肪肝的致病作用,探究NEFA对奶牛肝细胞活力及形态的影响。试验使用CCK8法检测奶牛肝细胞活力,试验第一部分分组为空白对照组、0.3 mmol/L、0.6 mmol/L、1.2 mmol/L、2.4 mmol/L NEFA组,试验第二部分分组为空白对照组、1.2 mmol/L NEFA组、1.2 mmol/L NEFA+1 mg/m L LPS组。结果表明,对奶牛肝细胞处理不同时间的试验确定NEFA的最适处理时间为12 h,对奶牛肝细胞处理不同浓度的试验确定最适处理浓度为1.2 mmol/L。与对照组相比,1.2 mmol/L NEFA组奶牛肝细胞活力显著下降,差异极显著(P <0.0001);与1.2 mmol/L NEFA组相比,1.2 mmol/L NEFA+1μg/m L LPS组奶牛肝细胞活力显著下降,差异显著(P=0.004)。NEFA对奶牛肝细胞的活力有显著影响且存在脂毒性。 展开更多

关键词 nefa 奶牛肝细胞 CCK8 LPS

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血样采集方式对奶牛血浆NEFA浓度的影响 被引量：1

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作者 A.E Brickner 张喜武 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第6期145-145,共1页

本研究探讨了奶牛血样采集方式对血浆NEFA浓度的影响。试验1：选用8头干奶牛,分别从颈静脉血插管采集血样作为零时间点NEFA的浓度,然后驱赶奶牛在运动场运动15 min后返回牛舍以备收集血样。血样收集分别在运动（15 min）后第0、5、15、3... 本研究探讨了奶牛血样采集方式对血浆NEFA浓度的影响。试验1：选用8头干奶牛,分别从颈静脉血插管采集血样作为零时间点NEFA的浓度,然后驱赶奶牛在运动场运动15 min后返回牛舍以备收集血样。血样收集分别在运动（15 min）后第0、5、15、30、60和120 min时进行。结果表明,奶牛血浆NEFA浓度在运动后升高,其中在运后第5 min时上升到最大值（225μEg/L）,而运动后第30 min时的NEFA浓度（110μEg/L）接近零时间点浓度（110μEg/L）。 展开更多

关键词 nefa 血样采集方式 行为学

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NEFA经MMPs途径对奶牛子宫内膜上皮细胞Ⅳ型胶原蛋白表达的影响 被引量：6

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作者 邢菲菲 罗胜缤 +4 位作者 温小庆 曹一鸣 李美娟 罗春海 付世新 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2250-2255,共6页

为了研究体外非酯化脂肪酸(NEFA)对奶牛子宫内膜上皮细胞基质金属蛋白酶(MMPs)、Ⅳ型胶原蛋白(COL-Ⅳ)和炎性因子(IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α)分泌的调节作用,进而探讨NEFA对奶牛胎衣不下(RFM)发生的影响,使用不同浓度的NEFA刺激牛子... 为了研究体外非酯化脂肪酸(NEFA)对奶牛子宫内膜上皮细胞基质金属蛋白酶(MMPs)、Ⅳ型胶原蛋白(COL-Ⅳ)和炎性因子(IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α)分泌的调节作用,进而探讨NEFA对奶牛胎衣不下(RFM)发生的影响,使用不同浓度的NEFA刺激牛子宫内膜上皮细胞,采用qPCR和Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9、COL-Ⅳ、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平。结果表明,与对照组相比,低浓度组和高浓度组的MMP-2和COL-Ⅳ的mRNA表达极显著升高(P<0.01),MMP-9的mRNA极显著下调(P<0.01);IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA表达在高浓度组均极显著上调(P<0.01),在低浓度组,IL-6的mRNA被极显著上调(P<0.01),IL-8和TNF-α的mRNA被显著上调(P<0.05)。Western blot的结果显示,与对照组相比,高浓度组的MMP-2和COL-Ⅳ的蛋白表达极显著上升(P<0.01),MMP-9的蛋白表达显著下降(P<0.05)。结果证实,NEFA可通过调控MMPs、胶原蛋白和炎性因子调控ECM的降解,从而影响RFM的发生。 展开更多

关键词 非酯化脂肪酸 胎衣不下 奶牛 子宫内膜上皮细胞 基质金属蛋白酶 Ⅳ型胶原蛋白 炎性因子

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L-肉碱对NEFA致肝细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量：3

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作者 刘志鹏 于志勇 +2 位作者 迟良 胡学远 刘焕奇 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期18-25,79,共9页

奶牛酮病时引起非酯化脂肪酸(NEFA)增加,造成肝细胞线粒体损伤,引发氧化应激反应。L-肉碱作为一种抗氧化剂,是否对NEFA导致的肝脏氧化应激损伤具有保护作用仍然未知。为探讨L-肉碱对NEFA致细胞氧化应激损伤的保护效果,通过建立NEFA诱导... 奶牛酮病时引起非酯化脂肪酸(NEFA)增加,造成肝细胞线粒体损伤,引发氧化应激反应。L-肉碱作为一种抗氧化剂,是否对NEFA导致的肝脏氧化应激损伤具有保护作用仍然未知。为探讨L-肉碱对NEFA致细胞氧化应激损伤的保护效果,通过建立NEFA诱导小鼠肝细胞AML12氧化应激损伤模型,运用试剂盒检测氧化应激相关指标和线粒体分布及线粒体膜电位。结果表明,与对照组相比,NEFA极显著升高AML12细胞丙二醛和活性氧水平(P<0.01),降低总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.01),导致线粒体异常分布(P<0.01),降低线粒体膜电位(P<0.01);但在NEFA中添加L-肉碱处理后,与NEFA组相比,极显著降低丙二醛和活性氧水平(P<0.01),升高总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.01),极显著降低线粒体异常分布率(P<0.01),升高线粒体膜电位(P<0.05)。试验结果表明,L-肉碱可减轻NEFA引起的小鼠肝细胞氧化应激损伤,为奶牛酮病治疗提供一种新思路。 展开更多

关键词 奶牛酮病 非酯化脂肪酸 L-肉碱 氧化应激 肝细胞

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NEFA对奶牛中性粒细胞跨乳腺上皮迁移功能的影响 被引量：1

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作者 吕观新 王海 武瑞 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1780-1784,共5页

为了体外研究游离脂肪酸(NEFA)对奶牛多形核中性粒细胞(PMN)跨奶牛乳腺上皮迁移功能的影响,用Transwell嵌套构建了跨乳腺上皮迁移模型,并以此模型研究了NEFA对PMN跨乳腺上皮迁移功能的影响。结果显示,不同浓度的油酸(OA)可显著促进PMN... 为了体外研究游离脂肪酸(NEFA)对奶牛多形核中性粒细胞(PMN)跨奶牛乳腺上皮迁移功能的影响,用Transwell嵌套构建了跨乳腺上皮迁移模型,并以此模型研究了NEFA对PMN跨乳腺上皮迁移功能的影响。结果显示,不同浓度的油酸(OA)可显著促进PMN跨乳腺上皮迁移数量(P<0.01),其作用特点呈剂量依赖效应;棕榈酸(PA)及硬脂酸(SA)对PMN跨乳腺上皮迁移数量并无显著影响(P>0.05)。结果表明,NEFA不同组分对奶牛PMN迁移功能具有不同的调控作用,通过改善饲料成份和配比提高OA在奶牛体内NEFA中的占比,可能有助于防治奶牛乳腺炎。 展开更多

关键词 中性粒细胞 TRANSWELL 游离脂肪酸 细胞迁移

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