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鸡盲肠艾美尔球虫Eimeria tenella和毒害艾美尔球虫E.necatrix的发育史及其组织病变 被引量：2
1
作者 洪凌仙 林宇光 《武夷科学》 1986年第1期139-149,共11页
鸡盲肠艾美尔球虫(Eimeria tenella)和毒害艾美尔球虫(E.necatrix)是危害家鸡的二种重要球虫,呈世界性分布。厦门地区前者感染率为80%,后者45%(洪凌仙等,1984)。幼鸡严重感染后,呈厌食、拉粘液血便、生长率明显下降,并导致成批死亡(霍... 鸡盲肠艾美尔球虫(Eimeria tenella)和毒害艾美尔球虫(E.necatrix)是危害家鸡的二种重要球虫,呈世界性分布。厦门地区前者感染率为80%,后者45%(洪凌仙等,1984)。幼鸡严重感染后,呈厌食、拉粘液血便、生长率明显下降,并导致成批死亡(霍夫斯塔,1972)。Tyzzer(1929)曾报道盲肠艾美尔球虫和毒害艾美尔球虫的生活史,但对两种球虫的无性生殖代数不甚明确,特别对毒害艾美尔球虫的发育史较为简略。 展开更多
关键词 小配子体 裂殖子 EIMERIA tenella E.necatrix 发育史
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不同免疫方法对鸡E.necatrix早熟株免疫效果的影响 被引量：2
2
作者 颜静蕊 刘兴国 +1 位作者 古少鹏 郑明学 《中国动物检疫》 CAS 2013年第3期40-42,共3页
研究不同免疫方法对E.necatrix早熟株免疫效果的影响。试验采用灌胃、滴口、拌料、饮水(常量和倍量)四种免疫方法进行免疫,以相对增重率、平均病变记分、病变记分降低率和抗球虫指数等为指标,综合判定疫苗免疫效果。结果表明:灌胃、滴... 研究不同免疫方法对E.necatrix早熟株免疫效果的影响。试验采用灌胃、滴口、拌料、饮水(常量和倍量)四种免疫方法进行免疫,以相对增重率、平均病变记分、病变记分降低率和抗球虫指数等为指标,综合判定疫苗免疫效果。结果表明:灌胃、滴口、饮水倍量免疫组相对增重率高于80%,平均病变积分小于1,病变记分降低率在75%以上,ACI均在171以上,免疫效果良好;拌料及饮水常量免疫组保护效果较差。 展开更多
关键词 E necatrix 早熟株 免疫方法
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鸡胚接种毒害艾美耳球虫Eimeria necatrix的免疫研究 被引量：2
3
作者 蔡建平 谢明权 +3 位作者 卞国志 翁亚彪 覃宗华 叶秀华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期912-917,共6页
给15、17、19日胚龄的鸡胚经羊膜腔分别接种不同剂量的毒害艾美耳球虫Eimeria necatrix孢子化卵囊、孢子囊或子孢子,出雏后在无球虫环境中笼养,收集2～7日龄间全部粪便,以饱和盐水漂浮法检查卵囊的产生,并于17日龄时以1.2×105个/... 给15、17、19日胚龄的鸡胚经羊膜腔分别接种不同剂量的毒害艾美耳球虫Eimeria necatrix孢子化卵囊、孢子囊或子孢子,出雏后在无球虫环境中笼养,收集2～7日龄间全部粪便,以饱和盐水漂浮法检查卵囊的产生,并于17日龄时以1.2×105个/鸡的同源孢子化卵囊攻虫,以相对增重率(RWG)、病变计分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)评价免疫保护效果.结果表明,孢子化卵囊、孢子囊或子孢子经羊膜腔免疫接种后对鸡胚的孵化率无明显影响,所有接种组在出雏后2～7日龄间均能检获后代卵囊,攻虫后各免疫组的相对增重率由攻虫对照的38%～42.9%提高到73.2%～90.5%,病变计分减少率达50%～74.9%,相对卵囊产量为攻虫对照组的28.1%～60.2%,表明以一定剂量的E. necatrix孢子化卵囊、孢子囊或子孢子经羊膜腔免疫接种鸡胚,可诱导鸡在出雏后笼养条件下对同源艾美耳球虫的免疫保护力;比较不同剂量、不同胚龄的免疫效果,发现在试验设定条件下于17日胚龄接种8×104个子孢子/胚的效果最好. 展开更多
关键词 鸡 球虫病 毒害艾美耳球虫 鸡胚免疫
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E.necatrix二次感染雏鸡消化道局部体液Igs含量变化
4
作者 贾富勃 郑世民 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期87-89,共3页
采用间接酶联免疫吸附试验法检测了毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)二次感染雏鸡肠液和胆汁IgA、IgM、IgG含量变化。结果表明,在E.necatrix二次大剂量攻击性感染雏鸡后的初期,三种免疫球蛋白含量呈现一过性下降,随即回升,14d较对照和... 采用间接酶联免疫吸附试验法检测了毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)二次感染雏鸡肠液和胆汁IgA、IgM、IgG含量变化。结果表明,在E.necatrix二次大剂量攻击性感染雏鸡后的初期,三种免疫球蛋白含量呈现一过性下降,随即回升,14d较对照和初次感染雏鸡明显增加,表明球虫初次感染所激发的高水平体液免疫对其二次感染有良好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 雏鸡 消化道 体液免疫
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苹果根腐病拮抗细菌的筛选鉴定及生防作用 被引量：2
5
作者 寸海春 何鹏搏 +6 位作者 何鹏飞 吴毅歆 Shahzad MUNIR 唐萍 孔宝华 张慧 何月秋 《中国南方果树》 北大核心 2025年第2期198-203,共6页
为了绿色、有效地防控苹果根腐病,采用稀释涂板法分离苹果根际细菌,以苹果根腐病病原菌褐座坚壳菌做指示菌,筛选抑菌菌株,并做潜力菌株S-25室内防病试验和菌株鉴定。结果表明,从苹果根际中分离到68株细菌,其中17株能抑制苹果根腐病菌褐... 为了绿色、有效地防控苹果根腐病,采用稀释涂板法分离苹果根际细菌,以苹果根腐病病原菌褐座坚壳菌做指示菌,筛选抑菌菌株,并做潜力菌株S-25室内防病试验和菌株鉴定。结果表明,从苹果根际中分离到68株细菌,其中17株能抑制苹果根腐病菌褐座坚壳菌的生长,其中菌株S-25能定殖于苹果枝条。该菌株对引起苹果病害的病原菌腐皮镰刀菌、葡萄座腔菌及黑腐皮壳菌的抑菌率达到50%以上,对生长速度较快的玉米纹枯病菌的抑菌率仍能达到48.89%。根据形态特征及gyrA、16S rRNA和rpoB多基因序列分析结果,S-25为解淀粉芽孢杆菌。S-25施用12个月后,预防根腐病效果达61.11%,治疗根腐病效果为27.78%,表明提前施用S-25能更好地防控苹果根腐病。 展开更多
关键词 苹果根腐病 褐座坚壳菌 解淀粉芽孢杆菌 生物防治
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毒害艾美耳球虫配子体抗原基因DNA疫苗的构建与免疫保护效果评价
6
作者 冯永翠 Naing Htet Aung +7 位作者 张馨尹 汪飞燕 王乐乐 张露 朱玉 许金俊 陶建平 刘丹丹 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1887-1896,共10页
旨在评估毒害艾美耳球虫配子体抗原基因DNA疫苗的抗球虫免疫保护效果。本研究构建了配子体抗原基因的DNA疫苗pVAX-Engam59,并添加CpG ODN2006佐剂免疫雏鸡,通过间接ELISA和qRT-PCR方法分析雏鸡特异性抗体效价和细胞因子(IL-4、IFN-γ和T... 旨在评估毒害艾美耳球虫配子体抗原基因DNA疫苗的抗球虫免疫保护效果。本研究构建了配子体抗原基因的DNA疫苗pVAX-Engam59,并添加CpG ODN2006佐剂免疫雏鸡,通过间接ELISA和qRT-PCR方法分析雏鸡特异性抗体效价和细胞因子(IL-4、IFN-γ和TGF-β4)转录情况;最后,每只雏鸡经嗉囊感染2.5×10^(4)个毒害艾美耳球虫孢子化卵囊,观察各试验组的临床症状、血便排出情况,感染8 d后检测各试验组的卵囊排出量、增重、病变记分等,并计算抗球虫指数。结果表明,与空载体pVAX-1组、未免疫攻虫组、未免疫未攻虫组相比,pVAX-Engam59、pVAX-Engam59+CpG ODN2006免疫雏鸡后血清特异性抗体水平显著升高(P<0.05),细胞因子IFN-γ、IL-4、TGF-β4表达水平显著升高(P<0.05);卵囊减少率分别为64.65%与64.48%,血便数以及病变记分显著降低、相对增重率显著增加(P<0.05);ACI值分别为156.02与159.72。综上,本研究成功构建了毒害艾美耳球虫配子体抗原基因的DNA疫苗,且与pVAX-Engam59相比,pVAX-Engam59+CpG ODN2006佐剂组免疫保护效果较好,二者均接近抗球虫中效水平,有望成为抗球虫病的候选DNA疫苗。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 配子体抗原基因 DNA疫苗 免疫保护
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鸡毒害艾美耳球虫ROP30蛋白的原核表达及其对鸡免疫保护效果的观察
7
作者 李慧中 张弛 +6 位作者 严丹丽 宋鹏慧 汪飞燕 冯茜茜 刘丹丹 许金俊 陶建平 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1419-1430,共12页
旨在克隆表达鸡毒害艾美耳球虫棒状体En ROP 30基因,并用重组蛋白rEnROP30免疫雏鸡,评价其免疫保护效果。以毒害艾美耳球虫第二代裂殖子(MZ-2)的总RNA为模板,RT-PCR扩增En ROP 30基因,连接至pGEM-T-Easy载体,测序后构建pET28a(+)-EnROP3... 旨在克隆表达鸡毒害艾美耳球虫棒状体En ROP 30基因,并用重组蛋白rEnROP30免疫雏鸡,评价其免疫保护效果。以毒害艾美耳球虫第二代裂殖子(MZ-2)的总RNA为模板,RT-PCR扩增En ROP 30基因,连接至pGEM-T-Easy载体,测序后构建pET28a(+)-EnROP30表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3),重组菌经测序鉴定后诱导表达,并纯化重组蛋白。用重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗rEnROP30的多克隆抗体。利用多克隆抗体,分别用Western blot和间接免疫荧光试验检测子孢子(S Z)和MZ-2中的天然EnROP30蛋白及其定位。最后,应用荧光定量PCR分析En ROP 30基因在SZ和MZ-2中的转录水平。用重组蛋白按高剂量(200μg·羽-1)、中剂量(100μg·羽-1)和低剂量(50μg·羽-1)免疫雏鸡,同时设置未免疫攻虫组和未免疫未攻虫组为对照,以成活率、平均增重、相对增重率、卵囊减少率、病变记分和抗球虫指数(ACI)为指标,评价重组蛋白的免疫保护力。结果显示:该基因全长1605 bp,编码534个氨基酸,推导相对分子质量为55.55 ku;重组蛋白大小约为65 ku,以可溶形式存在,能被小鼠抗His标签单抗和鸡抗毒害艾美耳球虫阳性血清特异性识别;在S Z和MZ-2中均检测到天然EnROP30蛋白,其分子质量大约为62 ku;EnROP30蛋白定位在S Z和MZ-2的顶端;MZ-2中En ROP 30转录水平显著高于S Z(P<0.05)。各试验组的成活率均为100%;免疫组的平均增重增加,病变记分显著降低(P<0.05);中剂量组的相对增重率(92.96%)、卵囊减少率(66.87%)和ACI值(158.96)均为最高。综上:成功克隆表达了En ROP 30基因,重组蛋白rEnROP30对毒害艾美耳球虫具有一定的免疫保护力。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 En ROP 30 克隆 表达 免疫保护力
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苹果白纹羽根腐病菌褐座坚壳菌生物学特性及寄主范围测定
8
作者 罗强 莫艳芳 +5 位作者 施竹丽 王宇 普特 施竹凤 陈齐斌 杨佩文 《西南农业学报》 北大核心 2025年第2期334-340,共7页
【目的】明确苹果白纹羽根腐病菌褐座坚壳菌(Rosellinia necatrix)生物学特性和寄主范围,根据其生长条件偏好及致病能力,制定更加精准有效的管理措施,为该病害的科学防治提供理论依据。【方法】以褐座坚壳菌菌株F4J2-1为材料,采用菌落... 【目的】明确苹果白纹羽根腐病菌褐座坚壳菌(Rosellinia necatrix)生物学特性和寄主范围,根据其生长条件偏好及致病能力,制定更加精准有效的管理措施,为该病害的科学防治提供理论依据。【方法】以褐座坚壳菌菌株F4J2-1为材料,采用菌落生长速率法研究不同pH(4.0~10.0)、温度(5~40℃)、光照(24 h全黑、24 h光照、12 h交替光照)、碳源(乳糖、可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、D-甘露醇和无蔗糖)和氮源(牛肉膏、硝酸钾、蛋白胨、硫酸铵、甘氨酸、硝酸钠、尿素和无氮源)对菌株生长的影响。采用菌丝悬浮液接种法测定菌株对山楂(Crataegus pinnatifida)、茶树(Camellia sinensis)、板栗(Castanea mollissima)、车厘子(Prunus avium)、柿子(Diospyros kaki)以及葡萄(Vitis vinifera)等云南省内广泛种植的不同重要经济作物的侵染能力。【结果】生物学特性研究结果表明,R.necatrix F4J2-1菌株在温度20~25℃时表现出最佳生长状态,且当培养基pH接近中性(pH=7.0)时能够获得最大菌落面积,而在全黑暗培养条件下菌种显示出更旺盛的生命活力,就营养物质供给而言,发现蔗糖为最适宜碳源,牛肉膏为最适宜氮源;寄主范围测定结果表明,R.necatrix F4J2-1具有广泛的植物感染谱,能引起山楂、茶树、板栗、车厘子、柿子、葡萄等作物根部腐烂。【结论】R.necatrix对环境的适应性较强,且对多种作物有致病性。因此,在新果园选址和果苗补栽种植过程中,应避免山楂、茶树、板栗、车厘子、柿子、葡萄等作物混栽,以防宿存的褐座坚壳菌菌株对新植果园或茶园造成危害。 展开更多
关键词 苹果 白纹羽根腐病 褐座坚壳菌菌株 生物学特性 寄主范围
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不同剂量和免疫次数对鸡毒害艾美耳球虫免疫保护力的影响 被引量：17
9
作者 卞国志 蔡建平 +3 位作者 谢明权 翁亚标 覃宗华 叶秀华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期39-42,共4页
以相对增重率(RBWG)、饲料转化率(FCR)和盲肠相对卵囊产量(ROP)为指标,评价了1次或2次分别以1×103个或3×103个毒害艾美耳球虫(E.necatrix)孢子化卵囊(SO)/鸡剂量免疫接种后特异性免疫力的产生和持续时间。笼养岭南黄肉雏鸡于... 以相对增重率(RBWG)、饲料转化率(FCR)和盲肠相对卵囊产量(ROP)为指标,评价了1次或2次分别以1×103个或3×103个毒害艾美耳球虫(E.necatrix)孢子化卵囊(SO)/鸡剂量免疫接种后特异性免疫力的产生和持续时间。笼养岭南黄肉雏鸡于3日龄1次或3日龄和10日龄2次分别接种不同剂量的E.necatrix SO后,于17日龄(2次免疫组为24日龄)、34日龄和50日龄时以14×104SO/鸡剂量的同源卵囊攻虫,结果表明,免疫后2周卵囊接种鸡已产生坚强免疫力,1次免疫接种者(17日龄)高、低2个不同剂量组的RBWG、FCR和ROP分别为95.5%、2.32、24.54%和101.4%、2.32、21.1%;而2次免疫组(24日龄)的上述指标则分别为106.5%、2.44、9.3%和98.2%、2.38、7.48%。至34日龄和50日龄攻虫时,这些指标均有不同程度的下降,且随着时间延长,下降更为明显,但2次免疫处理组的这些指标均明显优于1次免疫者;同一次处理的不同剂量组间无明显差异。结果揭示,雏鸡口服免疫接种一定剂量的E.necatrix孢子化卵囊后可迅速诱导鸡体特异性免疫力的产生,但免疫保护力在笼养条件下持续时间较短。 展开更多
关键词 鸡 毒害艾美耳球虫(E.necatrix) 卵囊 免疫接种 免疫力
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张家界苎麻白纹羽病病原菌分离鉴定及室内杀菌剂筛选
10
作者 朱春晖 程菊娥 +4 位作者 孙书娥 董国云 邬腊梅 宋姗屿 张德咏 《中国麻业科学》 2025年第4期225-230,236,共7页
从张家界苎麻根部分离到一种病原菌,经过显微镜形态学鉴定、ITS测序比对、科赫氏法则验证,此病原菌为引起苎麻白纹羽病的子囊菌亚门褐座坚壳菌。对分离鉴定的褐座坚壳菌进行室内药剂筛选,EC_(50)值最低的是97%甲基硫菌灵原药,为0.2876 m... 从张家界苎麻根部分离到一种病原菌,经过显微镜形态学鉴定、ITS测序比对、科赫氏法则验证,此病原菌为引起苎麻白纹羽病的子囊菌亚门褐座坚壳菌。对分离鉴定的褐座坚壳菌进行室内药剂筛选,EC_(50)值最低的是97%甲基硫菌灵原药,为0.2876 mg/L,其次是98%咯菌腈原药(1.0610 mg/L),再次为97.1%嘧菌酯原药(3.5457 mg/L),生物农药2×10^(8)CFU/mL沼泽红假单胞菌PSB-S悬浮剂的EC_(50)值为2.8587×10^(3)CFU/mL。结果表明,甲基硫菌灵、咯菌腈、嘧菌酯及2×10^(8)CFU/mL沼泽红假单胞菌PSB-S悬浮剂可作为田间防治苎麻白纹羽病的备选药剂。 展开更多
关键词 苎麻白纹羽病 分离 鉴定 杀菌剂筛选
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毒害艾美尔球虫感染对雏鸡肠组织热休克蛋白-70表达的影响 被引量：1
11
作者 翟杰 吕志慧 +5 位作者 马春霞 高雪丽 刘超男 王全杰 吕晓萍 郑世民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1004-1010,共7页
将90只海兰褐雏鸡分为对照组、毒害艾美尔球虫(E.necatrix)1次感染组和2次感染组,应用SP免疫组化法,通过对热休克蛋白(HSP)-70表达的检测,较全面系统地研究了E.necatrix感染雏鸡后,其肠组织HSP-70表达的动态变化。研究发现,雏鸡初次感染... 将90只海兰褐雏鸡分为对照组、毒害艾美尔球虫(E.necatrix)1次感染组和2次感染组,应用SP免疫组化法,通过对热休克蛋白(HSP)-70表达的检测,较全面系统地研究了E.necatrix感染雏鸡后,其肠组织HSP-70表达的动态变化。研究发现,雏鸡初次感染E.necatrix后第5~9天,其肠组织HSP-70表达均不同程度的低于对照雏鸡,其中十二指肠、空肠和盲肠显著或极显著低于对照雏鸡(P【0.05或P【0.01),之后迅速上升,于第14天高于对照雏鸡并达峰值;E.necatrix二次攻击性感染雏鸡后,其十二指肠、空肠HSP-70表达呈现'先显著低于对照雏鸡,随后上升',并逐渐高于对照雏鸡。而E.necatrix1次大剂量感染雏鸡后,其肠组织HSP-70表达则于第6、10、15天高于对照雏鸡。表明E.necatrix初期感染雏鸡肠组织HSP-70表达受到一定程度的抑制,而E.necatrix大剂量感染雏鸡后,HSP-70表达的增高与E.necatrix对机体的损害程度密切相关。该项研究为进一步探讨球虫的致病机制提供了重要参考依据。 展开更多
关键词 雏鸡 E.necatrix 肠组织 HSP-70
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鸡球虫病四价活疫苗对毒害艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫的免疫效果观察 被引量：13
12
作者 刘梅 沈欣悦 +6 位作者 刘丹丹 程旭 李建梅 殷建玫 苏一军 戴亚斌 陶建平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期742-746,共5页
为评价一种商品化鸡球虫病四价活疫苗[柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫]对E.necatrix和E.tenella的免疫保护效果,本研究基于试验鸡血便记分、存活率、相对增重率、病变值、卵... 为评价一种商品化鸡球虫病四价活疫苗[柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫]对E.necatrix和E.tenella的免疫保护效果,本研究基于试验鸡血便记分、存活率、相对增重率、病变值、卵囊值及抗球虫指数(ACI)等指标对其免疫效果进行检测。结果表明,免疫攻虫组抗E.necatrix和E.tenella的ACI分别为157.3和135.6,均低于160,表明该球虫疫苗抗两种球虫的效果均为低效。然而,免疫攻虫组鸡血便数量、血便记分、增重、卵囊产量和病变记分等指标均优于阳性对照组。综合指标显示,该疫苗对E.necatrix和E.tenella具有一定的免疫保护力,但单纯采用疫苗并不能够达到防控鸡球虫病的目的。 展开更多
关键词 鸡 毒害艾美耳球虫 柔嫩艾美耳球虫 球虫疫苗 免疫效果
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EnMIC2重组减毒沙门氏菌的构建及免疫保护效果研究 被引量：14
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作者 谢明权 覃宗华 +4 位作者 蔡建平 艾哈迈德 彭新宇 魏文康 吴惠贤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期705-710,共6页
成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)广东株(GD)微线蛋白2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDSPAGE分析表明,表达产物约占菌体总蛋白的8.6%,分子量大小约为35ku,与抗E.necatrix... 成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)广东株(GD)微线蛋白2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDSPAGE分析表明,表达产物约占菌体总蛋白的8.6%,分子量大小约为35ku,与抗E.necatrix的高免血清进行WesternBlotting,结果为阳性。将重组减毒沙门氏菌以108和109CFU/鸡免疫4日龄岭南黄肉鸡,免疫后2周血清中可检测到特异性IgG,3周时抗体水平达到峰值,同时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫接种后3周,试验鸡分别经口攻击感染500个E.necatrix(GD)孢子化卵囊,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线;但108和109CFU免疫组的卵囊总产量分别能降低26.62%和48.92%。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 微线蛋白-2 减毒沙门氏菌 免疫保护
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毒害艾美耳球虫配子体Engam59基因的克隆表达及其表达产物的免疫原性分析 被引量：7
14
作者 刘丹丹 曹李琴 +2 位作者 朱玉兰 许金俊 陶建平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1510-1516,共7页
提取毒害艾美耳球虫配子体总RNA,应用RT-PCR扩增得到Engam59基因,对其克隆测序并进行序列分析。结果表明,Engam59基因全长为1 473 bp,为一个完整的开放阅读框,编码490个氨基酸,具有1个酪氨酸-丝氨酸富集区和1个脯氨酸-甘氨酸富集区,与... 提取毒害艾美耳球虫配子体总RNA,应用RT-PCR扩增得到Engam59基因,对其克隆测序并进行序列分析。结果表明,Engam59基因全长为1 473 bp,为一个完整的开放阅读框,编码490个氨基酸,具有1个酪氨酸-丝氨酸富集区和1个脯氨酸-甘氨酸富集区,与柔嫩艾美耳球虫Etgam59基因的同源性为93.4%。选择该基因编码的第211~432位氨基酸间的肽段进行截短表达,获得的重组蛋白大小在27.69 ku左右,主要以包涵体的形式存在。Western-blot分析结果显示,该重组蛋白能被小鼠抗重组蛋白多克隆抗体和毒害艾美耳球虫病鸡康复血清识别,表明该重组蛋白具有很好的免疫原性。本研究结果为进一步探析毒害艾美耳球虫配子体蛋白的功能与研制鸡球虫病基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 Engam59基因 克隆 原核表达 免疫原性分析
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毒害艾美耳球虫晚熟系选育及其生活史研究 被引量：5
15
作者 董辉 索勋 +1 位作者 腾可导 汪明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期405-408,共4页
以剂量为1200～20000个孢子化卵囊/羽的毒害艾美耳球虫(E.necatrix)北京株(中熟系)感染3日龄京星黄羽肉仔鸡,收集感染后第11天粪便中卵囊,孢子化后接种无球虫鸡进行连续传代,经传代16次后,发现其排卵囊高峰较母株(中熟系)推迟了2天,即... 以剂量为1200～20000个孢子化卵囊/羽的毒害艾美耳球虫(E.necatrix)北京株(中熟系)感染3日龄京星黄羽肉仔鸡,收集感染后第11天粪便中卵囊,孢子化后接种无球虫鸡进行连续传代,经传代16次后,发现其排卵囊高峰较母株(中熟系)推迟了2天,即由接种后第7天推迟到第9天,且连续3代排卵囊高峰均出现在第9天,有较好的稳定性。生活史研究表明,其各阶段虫体均比母株的大,但潜在期不变,推测可能是选育得到的晚熟系卵囊中尚含有少量中熟系卵囊的缘故。 展开更多
关键词 鸡 毒害 艾美耳球虫 晚熟系 选育 生活史
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鸡毒害艾美耳球虫LZ株MIC5基因的重组表达及其表达产物的抗原性分析 被引量：5
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作者 刘红霞 贾万忠 +4 位作者 郭爱疆 张少华 闫鸿斌 岳城 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1575-1580,共6页
根据已发表的鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)微线蛋白5(Microneme protein 5,MIC-5)基因的核苷酸序列设计引物,以毒害艾美耳球虫(E.necatrix)DNA为模板,利用PCR方法扩增出EnMIC-5部分基因片段。将基因片段与pMD18-T simple载体连接... 根据已发表的鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)微线蛋白5(Microneme protein 5,MIC-5)基因的核苷酸序列设计引物,以毒害艾美耳球虫(E.necatrix)DNA为模板,利用PCR方法扩增出EnMIC-5部分基因片段。将基因片段与pMD18-T simple载体连接,重组质粒测序结果表明EnMIC-5基因大小为1 470 bp,编码490个氨基酸。EnMIC-5与pET-28a(+)载体构建重组表达质粒pET-EnMIC-5,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达。经SDS-PAGE检测,表达产物为相对分子质量约57.5 ku的融合蛋白。Western-blot分析结果表明表达蛋白可被鸡感染E.necatrix阳性血清识别。用重组蛋白免疫昆明鼠,一免后15 d即可检测到相应抗体,且抗体在三免后40 d仍维持较高水平,证实重组蛋白具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生高滴度的特异性抗体。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 微线蛋白5 基因克隆 重组表达 免疫原性
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毒害艾美耳球虫晚熟系生物学特性研究 被引量：4
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作者 董辉 索勋 汪明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期600-604,共5页
本文对毒害艾美耳球虫晚熟系基本生物学特性进行了研究。结果表明,晚熟系的致病性与同等剂量中熟系的相当;繁殖能力高于中熟系,且每羽鸡的排卵囊总量与剂量成正相关,每个卵囊的繁殖能力与剂量成负相关;在同等剂量免疫下,晚熟系的免疫原... 本文对毒害艾美耳球虫晚熟系基本生物学特性进行了研究。结果表明,晚熟系的致病性与同等剂量中熟系的相当;繁殖能力高于中熟系,且每羽鸡的排卵囊总量与剂量成正相关,每个卵囊的繁殖能力与剂量成负相关;在同等剂量免疫下,晚熟系的免疫原性好于中熟系;2次免疫后,晚熟系免疫组的保护力与中熟系的相当,攻虫后卵囊繁殖减少率均在99%以上。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 晚熟系 生物学特性 致病性 繁殖能力 鸡 卵囊 免疫原性
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毒害艾美耳球虫致病性与抗药性研究 被引量：3
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作者 林青 于三科 +3 位作者 崔萍 郑亚娟 何小刚 张松涛 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第6期27-31,共5页
　用毒害艾美耳球虫杨凌株(YLn)感染14日龄雏鸡,检测毒害艾美耳球虫的致病性及其对4种常用抗球虫药的敏感性。以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标,进行综合评定,其抗药程度分为无抗药性、轻度抗... 　用毒害艾美耳球虫杨凌株(YLn)感染14日龄雏鸡,检测毒害艾美耳球虫的致病性及其对4种常用抗球虫药的敏感性。以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标,进行综合评定,其抗药程度分为无抗药性、轻度抗药性、中度抗药性和完全抗药性4个等级。结果表明,该虫株对雏鸡有很强的致病性,每羽鸡经口接种1×105个孢子化卵囊时,致死率达63.3%;该虫株对地克株利有完全抗药性,对马杜拉霉素有轻度抗药性,对氯羟吡啶和氯苯胍无抗药性。 展开更多
关键词 鸡 艾美耳球虫 致病性 抗药性 抗球虫药 球虫病
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毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建 被引量：4
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作者 卞庆松 韩红玉 +5 位作者 赵其平 姜连连 董辉 闫晓菲 张建哲 黄兵 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期196-199,共4页
为构建毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA表达文库，用Trizol试剂提取毒害艾美球虫孢子化卵囊总RNA，采用SMART技术，在逆转录酶的作用下将总RNA反转录成第一链cDNA，经LD-PCR扩增合成双链cDNA（ds cDNA）。经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切，过CHROM... 为构建毒害艾美球虫孢子化卵囊cDNA表达文库，用Trizol试剂提取毒害艾美球虫孢子化卵囊总RNA，采用SMART技术，在逆转录酶的作用下将总RNA反转录成第一链cDNA，经LD-PCR扩增合成双链cDNA（ds cDNA）。经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切，过CHROMA SPIN-400^TM柱去除小于400bp的片段，与λTriplEx2^TM噬菌体载体连接，用GigapackⅢGold^TM载体蛋白包装，构建了cDNA噬菌体表达文库。经测定，原始文库容量为4．72×10^6pfu／mL，扩增后的文库容量为2．62×10^10pfu／mL，重组率为97．5％，插入片段为500～1100bp。证实，该文库质量良好，为毒害艾美球虫新基因的筛选、克隆及功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡 球虫 毒害艾美球虫 孢子化卵囊 CDNA文库 SMART技术
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毒害艾美球虫二次感染雏鸡外周血液免疫功能的变化 被引量：4
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作者 郑世民 刘晶 +1 位作者 胡京友 高雪丽 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期643-646,共4页
将180只14日龄雏鸡随机分为毒害艾美球虫(Eimeria necatrix)初次感染组、二次感染组和对照组,应用免疫SPA菌体花环、间接ELISA及细胞培养技术和四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法对相关免疫学指标进行了检测,以研究毒害艾美球虫二次感染对雏鸡... 将180只14日龄雏鸡随机分为毒害艾美球虫(Eimeria necatrix)初次感染组、二次感染组和对照组,应用免疫SPA菌体花环、间接ELISA及细胞培养技术和四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法对相关免疫学指标进行了检测,以研究毒害艾美球虫二次感染对雏鸡外周血液免疫功能变化的影响。结果显示,毒害艾美球虫二次感染雏鸡外周血液T、B淋巴细胞数量及其对ConA或PMA的增殖反应和血清IgG、IgM、IgA免疫球蛋白含量均不同程度地高于未感染毒害艾美球虫的对照组雏鸡。证实毒害艾美球虫二次感染雏鸡外周血液的细胞免疫和体液免疫功能均明显提高。 展开更多
关键词 毒害艾美球虫 二次感染 雏鸡 外周血液 淋巴细胞数量和功能 免疫球蛋白
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