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miR-186-5p通过下调MYCN轴增强小儿神经母细胞瘤NB1/DDP细胞顺铂敏感性的机制研究 被引量：3
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作者 王荣 张旭铭 +1 位作者 敬晓莉 成彩虹 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1478-1485,共8页
目的 探讨miR-186-5p对小儿神经母细胞瘤NB1/DDP细胞顺铂敏感性的影响。方法 构建小儿神经母细胞瘤细胞顺铂耐药株NB1/DDP后,实验分组为:NC组(未加入DDP的NB1顺铂敏感细胞)、Resistance组(加入0.5 mol·L^(-1)DDP处理的NB1/DDP耐药... 目的 探讨miR-186-5p对小儿神经母细胞瘤NB1/DDP细胞顺铂敏感性的影响。方法 构建小儿神经母细胞瘤细胞顺铂耐药株NB1/DDP后,实验分组为:NC组(未加入DDP的NB1顺铂敏感细胞)、Resistance组(加入0.5 mol·L^(-1)DDP处理的NB1/DDP耐药细胞)、miR-186-5p mimic组(在0.5 mol·L^(-1)DDP处理的NB1/DDP耐药细胞中转染miR-186-5p mimic)、miR-186-5p inhibitor组(在0.5 mol·L^(-1)DDP处理的NB1/DDP耐药细胞中转染miR-186-5p inhibitor)、pcDNA3.1-MYCN组(在0.5 mol·L^(-1)DDP处理的NB1/DDP耐药细胞中转染pcDNA3.1-MYCN)、sh-MYCN组(在0.5 mol·L^(-1)DDP处理的NB1/DDP耐药细胞中转染sh-MYCN)和miR-186-5p mimic+pcDNA3.1-MYCN组(在0.5 mol·L^(-1)DDP处理的NB1/DDP耐药细胞中转染miR-186-5p mimic和pcDNA3.1-MYCN);应用RT-qPCR检测miR-186-5p的表达水平;双荧光素酶报告基因验证miR-186-5p和MYCN的靶向关系;Western blot检测MYCN的表达水平;采用MTT试剂盒和Transwell法分别检测NB1/DDP细胞增殖活力和侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 过表达miR-186-5p显著抑制NB1/DDP细胞增殖和侵袭(P<0.05)并增强NB1/DDP细胞对顺铂的敏感性,而抑制miR-186-5p则相反;miR-186-5p靶向负调控MYCN的表达水平;过表达MYCN逆转了miR-186-5p对NB1/DDP细胞增殖和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论 miR-186-5p通过下调MYCN的表达水平增强NB1/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 miR-186-5p MYCN 小儿神经母细胞瘤 顺铂 nb1/ddp
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