期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到8篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
直组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8的纯化与鉴定
1
作者 周圆 金冬雁 +1 位作者 徐荣辉 侯云德 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第6期719-723,共5页
本文利用SDS-PAGE及蛋白质电泳印迹技术,从带有相应表达质粒的重组大肠杆菌裂解液中,将所表达的重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)转移至聚偏二氟乙烯膜上,直接进行N-末端15个氨基酸的序列分析,从而确证该目标蛋... 本文利用SDS-PAGE及蛋白质电泳印迹技术,从带有相应表达质粒的重组大肠杆菌裂解液中,将所表达的重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)转移至聚偏二氟乙烯膜上,直接进行N-末端15个氨基酸的序列分析,从而确证该目标蛋白得到高效表达和正确加工。随后采用Bio-Gel P30凝胶过滤层析和Mono-S阳离子交换层析对重组人NAP-1/IL-8进行了分离纯化,纯化产品达到SDS-PAGE纯。利用琼脂糖平板法测定了纯化产品的嗜中性白细胞趋化活性,推算其比活为2.8×10~5U/mg蛋白。又利用SDS-PAGE测出重组NAP-1/IL-8的分子量约为8.5kD,但根据凝胶过滤层析的洗脱时间推定,在溶液中确实存在分子量稍大于14.4kD的NAP-1/IL-8二聚体。 展开更多
关键词 nap-1/IL-8 提纯 鉴定
原文传递
人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因的修正及修正基因在大肠杆菌中的表达
2
作者 徐荣辉 金冬雁 +4 位作者 王平 袁劲松 吴淑华 侯云德 梁希若 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第5期535-540,共6页
本文采用寡核苷酸介导的定位诱变技术修正了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因中出现的合成错误,在该基因编码区的201位插入了原来缺失的G残基,从而使之恢复正确读框。经对修正基因进行DNA全序列测定,表明定位诱变的结果... 本文采用寡核苷酸介导的定位诱变技术修正了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因中出现的合成错误,在该基因编码区的201位插入了原来缺失的G残基,从而使之恢复正确读框。经对修正基因进行DNA全序列测定,表明定位诱变的结果符合设计要求。在此基础上,利用原核高效表达载体pBV220在P_RP_L串联启动子的控制下在大肠杆菌中对该基因进行了表达,并测定了重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8的嗜中性白细胞趋化活性。本工作为开展人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8基因工程及蛋白质工程的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞因子 nap-1/IL-8 大肠杆菌
原文传递
一种新的中性粒细胞活化因子—NAP—1/IL-8
3
作者 陈红清 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期318-319,共2页
中性粒细胞在组织中的聚集现象是炎症反应的典型特征之一。在某些病理状态如感染、损伤、缺血及肿瘤等,也可见到此类现象,尤其是在细菌性感染时,中性粒细胞可选择性地被吸引至组织以吞噬并消灭入侵的病原菌。
关键词 中性 粒细胞 活化因子 nap-1 IL-8
暂未订购
pCMV-tag2A/NAP1融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定
4
作者 李峰 周琳琳 尹文婧 《湖南文理学院学报（自然科学版）》 CAS 2011年第4期53-56,共4页
从含有目的基因的cDNA克隆中,利用PCR方法钓取目的基因.将目的基因与酶切线性化的载体进行定向连接,其产物转化细菌感受态细胞.采用菌落PCR方法和核酸序列测定进行阳性克隆鉴定.对构建好的pCMV-tag2A/NAP1融合蛋白表达载体进行超纯去内... 从含有目的基因的cDNA克隆中,利用PCR方法钓取目的基因.将目的基因与酶切线性化的载体进行定向连接,其产物转化细菌感受态细胞.采用菌落PCR方法和核酸序列测定进行阳性克隆鉴定.对构建好的pCMV-tag2A/NAP1融合蛋白表达载体进行超纯去内毒素抽提. 展开更多
关键词 pCMV-tag2A/NAP 1 载体构建 鉴定
在线阅读 下载PDF
可见分光光度法测定人尿中痕量1-萘酚 被引量：1
5
作者 杨小亮 周晓蔚 +2 位作者 袁玉坤 杨群英 周震宇 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第15期2970-2972,共3页
目的:建立一种可见分光光度法单独测尿中痕量1-萘酚的新方法。方法:在碱性介质中,1-萘酚(1-NAP)与氯霉素作用生成蓝色物质导致体系的吸光度增加,2-NAP不干扰测定。结果:该蓝色产物的最大吸收波长λmax=472.0nm,其吸光度与1-NAP摩尔浓度... 目的:建立一种可见分光光度法单独测尿中痕量1-萘酚的新方法。方法:在碱性介质中,1-萘酚(1-NAP)与氯霉素作用生成蓝色物质导致体系的吸光度增加,2-NAP不干扰测定。结果:该蓝色产物的最大吸收波长λmax=472.0nm,其吸光度与1-NAP摩尔浓度在7.64×10^(-7)mol/L～6.31×10^(-4)mol/L范围内线性关系良好,线性回归方程为△A=0.3146C+0.0239,相关系数r=0.9973,检出限为2.29×10^(-7)mol/L,相对标准偏差RSD为3.25%～6.42%,加标回收率为95.3%～105.7%。结论:本方法灵敏、简单、快速、易于推广,用于人尿中1-NAP含量的单独测定结果满意。 展开更多
关键词 1-萘酚 氯霉素 分光光度法
原文传递
核心组蛋白及染色质组装相关因子的分离、表达及纯化 被引量：1
6
作者 莫志成 张勇 +2 位作者 李宏帆 吴宁华 沈(王羽)琲 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第10期948-952,共5页
目的为制备体外组装染色质所需的核心组蛋白及蛋白因子。方法应用密度梯度离心和羟基磷灰石柱分离小牛胸腺细胞核心组蛋白H2A、H2B、H3及H4;应用昆虫表达体系表达了染色质组装相关子NAP-1、ACF(包括Acf-1和ISWI两个同时表达的组分),并... 目的为制备体外组装染色质所需的核心组蛋白及蛋白因子。方法应用密度梯度离心和羟基磷灰石柱分离小牛胸腺细胞核心组蛋白H2A、H2B、H3及H4;应用昆虫表达体系表达了染色质组装相关子NAP-1、ACF(包括Acf-1和ISWI两个同时表达的组分),并用离子交换或亲和层析方法进行了纯化。结果本实验报道了制备几种核内蛋白因子的表达与纯化方法和条件,为体外组装染色质模板提供了必要基础。 展开更多
关键词 染色质组装 组蛋白 nap-1 Acf-1 ISWI
在线阅读 下载PDF
染色质体外组装相关蛋白的表达纯化及组装体系的建立 被引量：1
7
作者 赵忠亮 赵吉成 +2 位作者 代辉 沈珝琲 张业 《医学研究杂志》 2012年第1期19-23,共5页
目的提取并纯化真核细胞核内组蛋白,表达并纯化重组组蛋白、染色质组装相关因子NAP-1(nuclear assemblyprotein-1)及ACF(ATP-utilizing chromatin assembly and remodeling factor),并建立无细胞体外染色质组装体系。方法在大肠杆菌BL2... 目的提取并纯化真核细胞核内组蛋白,表达并纯化重组组蛋白、染色质组装相关因子NAP-1(nuclear assemblyprotein-1)及ACF(ATP-utilizing chromatin assembly and remodeling factor),并建立无细胞体外染色质组装体系。方法在大肠杆菌BL21中表达并应用离子交换层析纯化组蛋白,从真核细胞HeLa细胞核中提取并应用羟基磷灰石纯化组蛋白八聚体,利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞Sf9中表达并纯化组装相关因子,应用纯化得到的蛋白在适宜条件下进行染色质体外组装,并用微球菌核酸酶酶切检测。结果获得了高纯度的原核表达的组蛋白,真核细胞组蛋白八聚体及组蛋白特异伴侣NAP-1和ACF;建立了由质粒DNA、纯化的真核细胞核内重组组蛋白、重组NAP-1、重组ACF及ATP为核心成分的体外染色质组装的无细胞系统,经微球菌核酸酶检测组装成功。结论利用体外分离纯化的多种重组蛋白,可成功构建基因的染色质模板,为在体外染色质模板上进行基因转录的调控机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 组蛋白ACF nap-1染色质组装
暂未订购
人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8基因的半化学半酶促合成及在大肠杆菌的表达 被引量：1
8
作者 金冬雁 徐荣辉 +2 位作者 周圆 王平 侯云德 《中国科学（B辑）》 CSCD 北大核心 1992年第9期951-957,共7页
本文采用半化学半酶促法合成了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)的全基因,并在大肠杆菌系统中利用P_RP_1串联启动子进行了温控型的高效表达,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,在摇瓶培养的大肠杆菌中,NAP... 本文采用半化学半酶促法合成了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8)的全基因,并在大肠杆菌系统中利用P_RP_1串联启动子进行了温控型的高效表达,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,在摇瓶培养的大肠杆菌中,NAP-1/IL-8的表达量可占菌体可溶性蛋白的18.5％,而在实验室规模的发酵试验中,其表达量则占可溶性蛋白的10.9％.经凝胶过滤层析和阳离子交换层析两个简单的纯化步骤,得到SDS-PAGE纯的重组NAP-1/IL-8,采用琼脂糖平板法进行测定,表明所得NAP-1/IL-8纯品在<10ng/ml的水平上显示出强烈的嗜中性白细胞趋化活性,家兔皮肤试验的结果显示,重组人NAP-1/IL-8可在家兔体内引起早发型超敏反应,采用Edman降解法测定重组人NAP-1/IL-8纯品N末端36个氨基酸的序列,与天然人NAP-1/IL-8的成熟分子完全符合。 展开更多
关键词 人 nap-1 IL-8 基因 化学合成
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部