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NAG7基因转染对鼻咽癌细胞生长的影响 被引量：9
1
作者 谭琛 李江 +5 位作者 王洁如 彭聪 谢奕 曹利 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期372-377,共6页
为了探讨鼻咽癌表达下调基因NAG7对鼻咽癌细胞系HNE1生长的影响 ,构建了NAG7基因的真核表达载体pcDNA3 1(+) /NAG7,并采用脂质体转染技术将真核重组体pcDNA3 1(+) /NAG7质粒和真核空载体pcDNA3 1(+)质粒分别导入HNE1细胞 ,经G4 18筛选... 为了探讨鼻咽癌表达下调基因NAG7对鼻咽癌细胞系HNE1生长的影响 ,构建了NAG7基因的真核表达载体pcDNA3 1(+) /NAG7,并采用脂质体转染技术将真核重组体pcDNA3 1(+) /NAG7质粒和真核空载体pcDNA3 1(+)质粒分别导入HNE1细胞 ,经G4 18筛选后获得稳定转染细胞克隆 ,RT PCR和RNA印迹检测NAG7基因的表达 ,并通过细胞生长曲线、裸鼠接种和流式细胞等方法对转染细胞的生物学行为进行检测 .结果显示 :转染NAG7基因后 ,基因表达增加 ,细胞生长倍增时间较空载体转染和HNE1明显延长 ,流式细胞技术检测表明 ,NAG7可延缓细胞由G0～G1期进入S期 ;裸鼠接种实验显示转染NAG7基因后的HNE1细胞致瘤性受到抑制 .上述结果表明 :NAG7基因转染后鼻咽癌细胞生长受到抑制 。 展开更多
关键词 nag7 基因转染 鼻咽癌细胞 细胞转染 基因表达 裸鼠 癌细胞生长
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cDNA微阵列技术分析NAG7基因对鼻咽癌细胞基因表达谱的影响 被引量：6
2
作者 谭琛 李江 +4 位作者 彭聪 张秋红 唐珂 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期99-106,共8页
运用cDNA微阵列技术分析NAG7基因重表达对HNE1细胞基因表达谱的影响 .抽提HNE1细胞和pcDNA3 1(+) /NAG7/HNE1细胞总RNA ,分离 polyAmRNA ,将mRNA逆转录为cDNA ,并在逆转录过程中用33P dATP进行标记 ,与含有 16 15 0个基因和表达序列标签... 运用cDNA微阵列技术分析NAG7基因重表达对HNE1细胞基因表达谱的影响 .抽提HNE1细胞和pcDNA3 1(+) /NAG7/HNE1细胞总RNA ,分离 polyAmRNA ,将mRNA逆转录为cDNA ,并在逆转录过程中用33P dATP进行标记 ,与含有 16 15 0个基因和表达序列标签 (EST)的cDNA表达阵列膜杂交 ,获得基因表达图谱 .ArrayGauge软件分析NAG7基因的重表达所导致的鼻咽癌细胞HNE1基因表达谱改变 ,并用RNA印迹对微阵列杂交结果进行验证 .结果分析表明 ,2倍以上的差异表达基因或EST 179个 ,其中表达上调的 91个 ,表达下调的 88个 ;已明确基因表达产物的上调基因 2 9个 ,下调基因 37个 .在差异表达基因中 ,涉及基因转录调控、信号转导、细胞生长、细胞代谢和细胞凋亡等基因 .RNA印迹证实生长阻滞特异蛋白 1(gas 1)基因表达上调 .特别值得关注的是 ,先前的蛋白质组研究结果亦发现NAG7基因可导致生长阻滞特异蛋白 1表达上调 ,说明gas 1基因在NAG7重表达的HNE1细胞中具有重要作用 ,这为深入研究NAG7基因的作用环节和机理提供了重要的线索 . 展开更多
关键词 CDNA微阵列 nag7基因 gasl基因 鼻咽癌细胞 基因表达谱
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鼻咽癌相关基因NAG7对鼻咽癌细胞周期及凋亡的影响(英文) 被引量：7
3
作者 谭琛 彭聪 +4 位作者 黄宇琛 张秋红 唐珂 李小玲 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期449-455,共7页
背景与目的:NAG7基因是我室克隆的鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因,其功能与作用机制目前尚不清楚。研究鼻咽癌相关的潜在抑瘤基因NAG7对鼻咽癌细胞系(HNE1)细胞周期和细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用脂质体转染技术将NAG7基... 背景与目的:NAG7基因是我室克隆的鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因,其功能与作用机制目前尚不清楚。研究鼻咽癌相关的潜在抑瘤基因NAG7对鼻咽癌细胞系(HNE1)细胞周期和细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用脂质体转染技术将NAG7基因导入HNE1细胞,建立稳定表达NAG7的细胞株,Northernblot分析转染细胞NAG7基因的表达,并采用流式细胞技术检测细胞周期、细胞周期素及细胞凋亡的改变,并用westernblo验证。结果:NAG7基因重表达的HNE1细胞与空载体转染的HNE1和HNE1细胞相比:G0/G1期细胞数增加(P0.05),S期细胞数减少;细胞凋亡数目增加(P<0.05);细胞周期素A、D1、E表达明显降低(P<0.05),细胞周期素B1表达降低,Westernblot检测亦证实cyclin-D1和cyclin-E表达明显下调。结论:NAG7的重表达导致细胞周期素表达下调,从而延缓细胞经G1期进入S周期及诱导细胞凋亡增加进而抑制NPC细胞的过度增殖。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 细胞周期 细胞周期素 细胞凋亡 nag7基因
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NAG7基因转染HNE1细胞后下调蛋白质的鉴定及其意义(英文) 被引量：3
4
作者 谭琛 李江 +4 位作者 王洁如 张小梅 曹莉 梁宋平 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期687-692,共6页
NAG7基因是我室克隆的与鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因 .将NAG7编码框的cDNA片段克隆至pGEM3.1(+ )的表达载体 ,经脂质体转染入HNE1细胞 ,经G4 18筛选 ,并运用PCR技术证实 .建立含NAG7基因稳定转染的细胞系 ,抽提细胞总蛋白质 ,双向凝... NAG7基因是我室克隆的与鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因 .将NAG7编码框的cDNA片段克隆至pGEM3.1(+ )的表达载体 ,经脂质体转染入HNE1细胞 ,经G4 18筛选 ,并运用PCR技术证实 .建立含NAG7基因稳定转染的细胞系 ,抽提细胞总蛋白质 ,双向凝胶电泳分离蛋白质 ,对表达下调的蛋白质点进行质谱分析 ,获得的肽质指纹经SWISS PROT数据库分析以鉴定蛋白质点 .鉴定出的 7个下调蛋白质包括纤溶酶原、收缩蛋白、Ras 相关蛋白Rab 36及ARF 相关蛋白等 .通过对蛋白质性质和功能的分析 ,发现这些蛋白质参与了细胞信号的转导、蛋白质的转运及细胞代谢等众多事件 .因此 。 展开更多
关键词 蛋白质组 nag7基因 二维电泳 质谱 信号传导 表达下调 鼻咽癌 肿瘤抑制候选基因
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鼻咽癌相关基因NAG7编码产物的表达和定位分析
5
作者 谭琛 董利 +4 位作者 李江 曹利 彭聪 李小玲 李桂源 《生命科学研究》 CAS CSCD 2002年第1期74-78,共5页
为了研究NAG7基因编码产物的特性和在活细胞内定位与表达 ,首先利用生物信息学分析NAG7编码蛋白的一般性质并预测其定位 ,再通过构建增强型绿色荧光蛋白 (Enhancegreenfluorescentprotein ,EGFP)与NAG7融合基因的真核表达载体pEGFP C2 ... 为了研究NAG7基因编码产物的特性和在活细胞内定位与表达 ,首先利用生物信息学分析NAG7编码蛋白的一般性质并预测其定位 ,再通过构建增强型绿色荧光蛋白 (Enhancegreenfluorescentprotein ,EGFP)与NAG7融合基因的真核表达载体pEGFP C2 NAG7,通过脂质体介导分别转染非洲绿猴肾细胞系COS7和人鼻咽癌细胞系HNE1 ,瞬时表达后荧光显微镜观察NAG7基因编码蛋白的活细胞内定位及表达 .研究结果表明NAG7的编码产物可在COS7细胞中高表达并定位于细胞浆 ,而在HNE1细胞中虽也定位于胞浆 ,但仅有极少数细胞存在表达 。 展开更多
关键词 鼻咽癌 nag7基因 绿色荧光蛋白 细胞定位 编码产物 表达
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