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五子衍宗方激活SIRT1-自噬改善2型糖尿病雄性小鼠性腺功能
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作者 殷梦婷 沈夕 +3 位作者 刘慧慧 周洋洋 韦晓 郑仁东 《中国中西医结合杂志》 北大核心 2026年第1期92-97,共6页
目的 观察五子衍宗方对2型糖尿病雄性小鼠性腺功能的影响。方法 20只8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机选取5只设为正常对照组,其余15只采用STZ成功建立2型糖尿病小鼠模型后随机分为3组:模型组、五子衍宗方低、高剂量组,每组5只。正常对照... 目的 观察五子衍宗方对2型糖尿病雄性小鼠性腺功能的影响。方法 20只8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机选取5只设为正常对照组,其余15只采用STZ成功建立2型糖尿病小鼠模型后随机分为3组:模型组、五子衍宗方低、高剂量组,每组5只。正常对照组予标准饮食饲养,模型组予高糖高脂饲料,五子衍宗方低、高剂量组分别给予五子衍宗方3、12 g/(kg·d),均灌胃5周。观察各组一般情况。干预前后测量小鼠体重、空腹血糖(FBG)及血清睾酮水平。HE染色观察睾丸组织病理学变化,并计算精子数量。Western Blot检测小鼠睾丸间质细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)、管关联蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平。结果 模型组小鼠活动减少,体重显著增加,出现三多症状(多饮、多食、多尿),反应能力下降,生精小管大部分结构破坏、萎缩变形、排列疏松,生精细胞数量减少。五子衍宗方低、高剂量组小鼠干预后上述情况均好转。与正常对照组比较,模型组小鼠体重及FBG增加,血清睾酮水平、睾丸SIRT1蛋白表达下降(P<0.05)。与模型组同期比较,五子衍宗方低、高剂量组小鼠干预后体重及FBG下降,血清睾酮水平、睾丸SIRT1蛋白表达、LC3-2/LC3-1比值升高(P<0.05)。结论 五子衍宗方可通过激活SIRT1-自噬途径显著改善2型糖尿病小鼠的性腺功能。 展开更多
关键词 五子衍宗方 sirt1 自噬 2型糖尿病 性腺功能
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人参皂苷Rh1通过Sirt3/Nrf2/HO-1通路调控氧化应激和改善紫外线诱导的皮肤老化作用研究
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作者 苏放 王小芳 +6 位作者 何谷 黄崑 徐世燚 李茗蔚 朱玲娟 刘金平 刘博 《药学学报》 北大核心 2026年第1期173-183,共11页
皮肤老化是由内源性代谢失调与外源性紫外线(UV)辐射共同介导的复杂病理过程,其中活性氧(ROS)过度积累导致的氧化应激是核心驱动因素。稀有人参皂苷Rh1是一种具有抗氧化和抗炎活性的天然化合物,但其对UV诱导的皮肤光老化的作用机制尚不... 皮肤老化是由内源性代谢失调与外源性紫外线(UV)辐射共同介导的复杂病理过程,其中活性氧(ROS)过度积累导致的氧化应激是核心驱动因素。稀有人参皂苷Rh1是一种具有抗氧化和抗炎活性的天然化合物,但其对UV诱导的皮肤光老化的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨Rh1对UV诱导皮肤老化的保护作用及其分子机制。所有动物实验均获得四川大学华西医院动物伦理委员会批准(批准号:20241230001)。通过构建UV诱导的BALB/c小鼠皮肤光老化模型及人真皮成纤维细胞光老化模型,评估Rh1的体内外抗光老化效果。体内实验显示,Rh1(25和50μmol·L^(-1))显著缓解UV引起的皮肤增厚、红斑及水分流失,降低促凋亡蛋白Bax表达并上调抗凋亡蛋白Bcl-2。体外实验表明,Rh1(12.5、25和50μmol·L^(-1))可减少UVB(UV波长280~320 nm)诱导的ROS积累、氧化损伤及衰老相关β-半乳糖苷酶阳性细胞比例。机制研究表明,Rh1通过激活沉默调节蛋白3(Sirt3)促进核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)核转位,上调下游血红素氧合酶1(HO-1)表达。Sirt3 siRNA实验证实,基因沉默可阻断Rh1对Nrf2/HO-1通路的激活,削弱其抑制ROS生成及延缓细胞老化的作用。综上,Rh1通过Sirt3/Nrf2/HO-1信号轴减轻UV诱导的氧化损伤与皮肤老化,为靶向抗氧化通路的抗光老化药物开发提供了新策略。 展开更多
关键词 人参皂苷RH1 sirt3/Nrf2/HO-1信号通路 活性氧 光老化 紫外线
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SIRT5介导的PKM2对香烟烟雾提取物诱导的巨噬细胞极化的影响及其作用机制
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作者 崔萌萌 徐丹 李风森 《新疆医科大学学报》 2026年第1期9-15,共7页
目的 观察沉默信息调节因子5(Silent information regulator 5,SIRT5)介导的丙酮酸激酶M2受体(Pyruvate kinase type 2,PKM2)通过调节巨噬细胞极化对香烟烟雾诱导的炎症水平的影响,探讨其可能存在的作用机制。方法 以小鼠巨噬细胞为研... 目的 观察沉默信息调节因子5(Silent information regulator 5,SIRT5)介导的丙酮酸激酶M2受体(Pyruvate kinase type 2,PKM2)通过调节巨噬细胞极化对香烟烟雾诱导的炎症水平的影响,探讨其可能存在的作用机制。方法 以小鼠巨噬细胞为研究对象,香烟烟雾提取物(Cigarette smoke extract, CSE)作为刺激因素,诱导体外炎症模型,分为空白对照组(正常培养RAW264.7细胞,不进行任何干预)、CSE干预组(培养细胞,并进行CSE干预)、SIRT5-NC组(CSE干预细胞,只用于感染过程中的对照)、SIRT5-siRNA-2组(CSE干预细胞,转染SIRT5-siRNA)和SIRT5-siRNA-2+OE-PKM2组(CSE干预细胞,转染SIRT5-siRNA后,加入PKM2激动剂)。实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测SIRT5及PKM2 mRNA的表达。蛋白质印迹(Western blot)法检测各组细胞模型SIRT5和PKM2的蛋白表达。流式细胞术检测各组细胞M1、M2型巨噬细胞表型分布。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清中白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-10、IL-12和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果 在细胞模型中,与空白对照组和siRNA-NC组相比,SIRT5-siRNA-2组的PKM2表达水平明显降低,差异有统计学意义。CSE干预后M1型促炎巨噬细胞表达增高,M2型抑炎巨噬细胞减少。M1型巨噬细胞随着SIRT5沉默而减少,过表达PKM2后又增多,差异有统计学意义(P<0.01)。与空白对照组相比,M2型巨噬细胞则在炎症模型中均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果显示,与空白对照组相比,CSE干预组促炎因子IL-6、IL-12、TNF-α表达增高,抑炎因子IL-10表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与CSE干预组相比,SIRT5-siRNA-2组下调了促炎因子表达同时也上调了抑炎因子水平,差异具有统计学意义(P<0.01)。SIRT5-siRNA-2+OE-PKM2组较SIRT5-siRNA-2组相比,又上调了IL-6、IL-12、TNF-α,同时IL-10的表达也增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 SIRT5介导的PKM2通过降低IL-6、IL-12、TNF-α表达,促进IL-10表达,从而减轻香烟烟雾提取物诱导的巨噬细胞极化产生的炎症反应。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 sirt5 PKM2 巨噬细胞 炎症
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基于SIRT1/Nrf2/HO-1信号通路探讨二精丸改善肌少症骨骼肌细胞炎症反应和细胞凋亡的机制
4
作者 石龙 李扬 +2 位作者 颜鸿宇 周天乐 张志文 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第3期57-66,共10页
目的:探讨经典中药复方二精丸通过调控沉寂信息调节因子1(SIRT1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路对肌少症小鼠模型骨骼肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响及其机制。方法:将40只C57/BL6雄性小鼠随机分为正常组,模型... 目的:探讨经典中药复方二精丸通过调控沉寂信息调节因子1(SIRT1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路对肌少症小鼠模型骨骼肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响及其机制。方法:将40只C57/BL6雄性小鼠随机分为正常组,模型组,二精丸低、中、高剂量组(8、16、32 g·kg^(-1)),采用D-半乳糖诱导骨骼肌衰老建立肌少症模型。检测不同剂量二精丸影响下小鼠体质量、握力以评估其生理功能;苏木素-伊红(HE)染色及马松(Masson)染色观察小鼠骨骼肌病理变化及纤维化程度;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量,生化检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠SIRT1、Nrf2、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白表达量及mRNA表达水平。结果:药物干预4周后,与正常组比较,模型组体质量、握力降低(P<0.01);与模型组比较,二精丸各剂量组小鼠体质量均在第8周显著上升(P<0.01),握力自第6周起显著上升(P<0.01)。HE染色结果显示,正常组肌纤维结构清晰;模型组肌纤维断裂萎缩;二精丸组肌纤维结构呈剂量依赖性修复。Masson染色显示,正常组胶原纤维少、纤维化轻;模型组胶原纤维增生、纤维化重;二精丸组胶原增生且呈剂量依赖性抑制纤维化。ELISA检测结果显示,与正常组比较,模型组小鼠血清中TNF-α、IL-6的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,二精丸低剂量组小鼠血清中TNF-α含量下降(P<0.05);二精丸中、高剂量组小鼠血清中TNF-α、IL-6的含量均显著降低(P<0.01)。生化检测结果显示,与正常组比较,模型组中SOD、GSH水平显著下降(P<0.01),MDA水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,二精丸中、高剂量组中SOD、GSH水平显著升高(P<0.01),MDA水平显著下降(P<0.01)。Western blot及Real-time PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组小鼠肌肉组织SIRT1、Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0.01),而Bax蛋白及mRNA表达水平则显著升高(P<0.01)。与模型组比较,经二精丸干预后,各剂量组小鼠肌肉组织中SIRT1、Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01);Bax蛋白及mRNA的表达水平均显著降低(P<0.01),低剂量组Nrf2、HO-1 mRNA表达水平均升高(P<0.05,P<0.01),中、高剂量组SIRT1、Nrf2、HO-1、Bcl-2 mRNA表达水平均显著升高(P<0.01)。结论:二精丸可降低肌少症小鼠模型骨骼肌细胞炎症因子含量,提高抗氧化能力,减轻肌肉病理变化和纤维化程度,其机制可能与SIRT1/Nrf2/HO-1通路协同调控炎症反应及细胞凋亡网络有关。 展开更多
关键词 二精丸 肌少症 沉寂信息调节因子1(sirt1)/核因子E2相关因子(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路 炎症因子 细胞凋亡
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南葶苈子对慢性心力衰竭大鼠心功能及SIRT2/NF-κB通路的影响 被引量:1
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作者 李超 陈云 +2 位作者 李梅 盛晓生 余晗俏 《中成药》 北大核心 2025年第5期1741-1745,共5页
目的 探究南葶苈子提取液对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能的影响。方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、南葶苈子组(10 g/kg)、AGK2组(SIRT2抑制剂,82 mg/kg)和南葶苈子(10 g/kg)+AGK2(82 mg/kg)组。采用腹主动脉缩窄法建立CHF... 目的 探究南葶苈子提取液对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能的影响。方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、南葶苈子组(10 g/kg)、AGK2组(SIRT2抑制剂,82 mg/kg)和南葶苈子(10 g/kg)+AGK2(82 mg/kg)组。采用腹主动脉缩窄法建立CHF大鼠模型,给药8周后,超声心动图检测大鼠心功能,HE和Masson染色观察心肌组织形态学变化,ELISA法检测血清心肌损伤标志物以及炎症和氧化应激指标,Western blot和RT-qPCR法检测心肌组织SIRT2、NF-κB p65蛋白和mRNA表达。结果 与模型组比较,南葶苈子组大鼠心功能改善;心肌纤维化程度降低(P<0.01);血清cTnI、CK、BNP水平降低(P<0.01);血清和心肌组织MDA、TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性升高(P<0.01);心肌组织SIRT2 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),NF-κB p65 mRNA和p-NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01)。SIRT2抑制剂AGK2预处理在一定程度上抵消了南葶苈子提取液对CHF大鼠的保护作用。结论 南葶苈子提取液可通过调控SIRT2/NF-κB通路改善CHF大鼠的心功能,抑制心肌纤维化,减轻心肌氧化应激和炎症。 展开更多
关键词 南葶苈子提取液 慢性心力衰竭 sirt2/NF-κB通路 炎症反应 氧化应激
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基于CYP2E1和SIRT1/PGC-1α信号通路探讨同仁乌鸡白凤丸治疗酒精性肝病的作用机制
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作者 刘丹 张思玉 +3 位作者 朱晓光 李晋生 陈霞 张朝华 《药物评价研究》 北大核心 2025年第12期3484-3493,共10页
目的探讨同仁乌鸡白凤丸(WJBF)对酒精性肝病的治疗作用及作用机制。方法雌性C57BL/6N小鼠随机分为6组:对照组、模型组、水飞蓟素(阳性药,63 mg·kg^(-1))组和WJBF高、中、低剂量(5.40、2.70、1.35 g·kg^(-1))组,除对照组外,其... 目的探讨同仁乌鸡白凤丸(WJBF)对酒精性肝病的治疗作用及作用机制。方法雌性C57BL/6N小鼠随机分为6组:对照组、模型组、水飞蓟素(阳性药,63 mg·kg^(-1))组和WJBF高、中、低剂量(5.40、2.70、1.35 g·kg^(-1))组,除对照组外,其余组采用Lieber-DeCarli液体饲料复制酒精性肝病小鼠模型。观察WJBF对模型小鼠体质量、肝脏指数和肝脏病理改变的影响;试剂盒法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)指标的含量;取小鼠肝脏组织并测定肝脏组织中TC、TG、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)以及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平;用Western blotting法测定肝脏组织中细胞色素P4502E1(CYP2E1)、沉寂信息调节因子(SIRT1)和过氧化物酶增殖激活受体-γ共激活子-1α(PGC-1α)蛋白表达水平。结果与模型组相比,WJBF中剂量能明显减缓模型小鼠体质量降低(P<0.01);WJBF中、低剂量能明显降低模型小鼠肝脏指数(P<0.05、0.01);WJBF高、中、低剂量能明显降低模型小鼠血清ALT和AST活性(P<0.05、0.01);WJBF高、中、低剂量能明显降低血清和肝脏组织中TG水平(P<0.01);WJBF能明显改善模型小鼠肝脏组织病理学变化;WJBF高、中、低剂量能明显升高模型小鼠肝脏组织中ADH和ALDH的活性(P<0.05、0.01);WJBF中、低剂量能明显升高模型小鼠肝脏组织内SOD活性(P<0.05);WJBF高、中、低剂量能明显降模型小鼠肝脏组织中MDA水平(P<0.01);WJBF高、中、低剂量能明显降低肝脏组织中8-OHdG水平(P<0.01);WJBF高、中、低剂量能明显降低模型小鼠肝脏组织中代谢酶CYP2E1表达水平(P<0.05、0.01);WJBF高剂量能明显升高模型小鼠肝脏组织中SIRT1蛋白表达水平(P<0.05);WJBF高、中、低剂量能明显升高模型小鼠肝脏组织中PGC-1α蛋白表达水平(P<0.01)。结论WJBF对酒精性肝病有较好的治疗作用,其作用机制与药物加快酒精在体内代谢、抑制肝组织中代谢酶CYP2E1、激活SIRT1/PGC-1α信号通路有关。 展开更多
关键词 同仁乌鸡白凤丸 小鼠 酒精性肝病 CYP2E1 sirt1 PGC-1Α
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基于SIRT6/NRF2通路研究健脾固肾化瘀方治疗糖尿病肾脏病的机制
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作者 刘珍 董礼 +5 位作者 陈晓婷 张辉 潘保朝 苏秀海 王庆海 吕树泉 《中医药导报》 2025年第1期32-36,41,共6页
目的:研究健脾固肾化瘀方(JPGS)治疗糖尿病肾脏病的效果并从沉默调节蛋白6(SIRT6)/核因子类红细胞相关因子2(NRF2)通路介导的氧化应激与炎症反应研究JPGS治疗糖尿病肾脏病的作用机制。方法:60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后,随机分为正... 目的:研究健脾固肾化瘀方(JPGS)治疗糖尿病肾脏病的效果并从沉默调节蛋白6(SIRT6)/核因子类红细胞相关因子2(NRF2)通路介导的氧化应激与炎症反应研究JPGS治疗糖尿病肾脏病的作用机制。方法:60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后,随机分为正常组(n=50)及造模组(n=50)。正常组小鼠给予正常小鼠维持饲料,造模组小鼠高糖高脂饮食喂养8周。8周后,造模组小鼠腹腔注射STZ进行造模。模型成功的小鼠随机分为模型组、SIRT6激动剂组、JPGS低剂量组、JPGS中剂量组及JPGS高剂量组,每组10只。采用试剂盒测定小鼠24 h尿蛋白定量,血清肌酐、尿素氮。对肾脏同一部位进行苏木素-伊红、Masson染色。采用试剂盒测定小鼠肾组织丙二醛水平,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、活性氧水平、白细胞介素-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α水平。采用Western blotting检测SIRT6/NRF2通路相关因子[SIRT6、NRF2、血红素氧合酶-1、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基、NAD(P)H醌氧化还原酶1]表达,采用RT-qPCR检测GCLC mRNA、NQO1 mRNA、SOD1 mRNA、GPX1 mRNA表达。结果:JPGS能降低糖尿病肾脏病小鼠的Cr、BUN、24 h-UPQ,减轻肾组织病理损伤,降低MDA、ROS水平,增强SOD、GSH-PX活性,降低IL-1β、IL-6、TNF-α水平,升高SIRT6、NRF2、HO-1、GCLC、NQO1表达水平,升高GCLC mRNA、NQO1 mRNA、SOD1 mRNA及GPX1 mRNA的表达。结论:JPGS可以激活SIRT6/NRF2通路抑制氧化应激与炎症反应以缓解糖尿病肾脏病的肾损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾脏病 健脾固肾化瘀方 氧化应激 炎症 sirt6 NRF2
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基于SIRT3/AMPK通路探究雷公藤内酯酮调控M2型巨噬细胞极化抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭
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作者 孙月萍 高瑜 +2 位作者 张洁 刘晓丽 黄海伟 《解剖学研究》 2025年第6期525-531,共7页
目的基于SIRT3/AMPK通路探究雷公藤内酯酮能否调控M2型巨噬细胞极化抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭。方法将对数期的SKOV3细胞随机分为Col组和TN组;诱导分化M1型和M2型巨噬细胞,共培养M2型巨噬细胞和SKOV3细胞,并随机分为M2-Col组、M2-TN组、... 目的基于SIRT3/AMPK通路探究雷公藤内酯酮能否调控M2型巨噬细胞极化抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭。方法将对数期的SKOV3细胞随机分为Col组和TN组;诱导分化M1型和M2型巨噬细胞,共培养M2型巨噬细胞和SKOV3细胞,并随机分为M2-Col组、M2-TN组、M2-TN+3-TYP组、M2-TN+Compound C组。RT-PCR检测M1型和M2型巨噬细胞标志物;CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测细胞中SIRT3、AMPK、p-AMPK蛋白表达。结果M1型巨噬细胞中M1型巨噬细胞标志物CD86和iNOS相对表达量均高于M0型巨噬细胞,M2型巨噬细胞标志物CD86和iNOS相对表达量均低于M0型巨噬细胞(P<0.01)。M2型巨噬细胞中M2型巨噬细胞标志物CD206和Arg-1相对表达量均高于M0型巨噬细胞,M1型巨噬细胞中CD206和Arg-1相对表达量均低于M0型巨噬细胞(P<0.01)。与Col组比较,TN组SKOV3细胞侵袭数目及M2型巨噬细胞标志物CD206和Arg-1相对表达量明显降低,细胞凋亡率及M1型巨噬细胞CD86和iNOS相对表达量明显增加(P<0.01)。与Col组比较,M2-Col组卵巢癌细胞存活率和侵袭细胞数均明显增加,细胞凋亡率明显降低(P<0.01);与M2-Col组比较,M2-TN组卵巢癌细胞存活率和侵袭细胞数均明显降低,细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。与M2-Col组比较,M2-TN组细胞中SIRT3蛋白表达及p-AMPK/AMPK比值均明显升高(P<0.01);与M2-TN组比较,M2-TN+3-TYP组和M2-TN+Compound C组细胞中SIRT3蛋白表达及p-AMPK/AMPK比值均明显降低(P<0.01)。结论雷公藤内酯酮可能通过激活SIRT3/AMPK信号通路抑制M2型巨噬细胞极化,从而对卵巢癌细胞增殖和侵袭发挥抑制作用,对卵巢癌细胞凋亡发挥促进作用。 展开更多
关键词 雷公藤内酯酮 卵巢癌 sirt3/AMPK通路 M2型巨噬细胞 增殖 侵袭
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SIRT2对AngⅡ诱导的小鼠心肌成纤维细胞增殖与迁移影响的研究 被引量:1
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作者 林丽婵 刘芷言 +6 位作者 刘震宇 刘鹏 毛遂 张云森 胡宪文 李锐 陶辉 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第4期589-595,603,共8页
目的探讨去乙酰化酶2(SIRT2)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下对小鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与迁移的作用。方法对1~2 d内的C57BL/6乳鼠心脏进行无菌摘取,碎化为组织匀浆、消化、过滤后提取分离的CFs。CFs贴壁生长至70%~80%汇合度后,加入An... 目的探讨去乙酰化酶2(SIRT2)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下对小鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与迁移的作用。方法对1~2 d内的C57BL/6乳鼠心脏进行无菌摘取,碎化为组织匀浆、消化、过滤后提取分离的CFs。CFs贴壁生长至70%~80%汇合度后,加入AngⅡ诱导构建体外CFs活化增殖模型,AngⅡ刺激24 h后分别向各组CFs转染空载质粒及SIRT2过表达质粒,后继续培养1~2 d。应用RT-qPCR方法检测SIRT2、增殖细胞核抗原(PCNA)、骨膜素(POSTN)和Ⅰ型胶原A1(Col1A1)的mRNA相对表达量;Western blot方法探测SIRT2、PCNA、POSTN和Col1A1的蛋白相对表达量;CCK-8法与EdU法探测CFs增殖活力;Transwell实验检测CFs迁移能力。结果与CFs空白对照组相比,AngⅡ导致CFs的SIRT2表达量减少与细胞外基质蛋白表达增多,同时CFs的活化增殖明显增高。使用质粒过表达SIRT2上调AngⅡ诱导环境下CFs SIRT2表达后,与空载组相比,过表达组SIRT2表达上调,胶原纤维蛋白表达量降低,同时CFs的增殖与活化明显减少。结论过表达SIRT2能抑制AngⅡ诱导的胶原纤维沉积与CFs活化增殖,SIRT2通过调节AngⅡ诱导环境下CFs活化与增殖,也为心肌纤维化的干预与治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 sirt2 心肌成纤维细胞 AngⅡ 增殖 迁移 心肌纤维化
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益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠肾功能及SIRT3/SOD2/GPX4通路、铁死亡的影响 被引量:1
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作者 季晗舒 宋纯东 +8 位作者 王旭 樊艳敏 方虹 姜浩然 卜继常 宋珂 陈晨晨 任献青 王墨 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期488-492,共5页
目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DN)大鼠肾功能的影响及可能机制。方法:42只SD大鼠采用随机数字表法分为正常对照组(6只)和建模组(36只,采用高脂高糖饲料喂养联合单次腹腔注射链脲佐菌素建立DN模型)。造模成功的32只大鼠随机分为... 目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DN)大鼠肾功能的影响及可能机制。方法:42只SD大鼠采用随机数字表法分为正常对照组(6只)和建模组(36只,采用高脂高糖饲料喂养联合单次腹腔注射链脲佐菌素建立DN模型)。造模成功的32只大鼠随机分为模型组、缬沙坦组(阳性对照组)、益气养阴活血方颗粒低剂量组(低剂量组)及高剂量组,每组8只,分别给予生理盐水、缬沙坦溶液(8.33 mg/kg)、益气养阴活血方颗粒溶液(11.0和22.0 g/kg)灌胃,持续6周。留取血样、24 h尿液,采用AU5800型全自动生化分析仪检测大鼠24 h尿总蛋白定量(24 h-UTP),血清肌酐(SCr)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、白蛋白(ALB),采用速率法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),ELISA法检测血清丙二醛(MDA)水平。处死大鼠取肾组织,HE染色观察病理改变,采用实时荧光定量PCR法、Western blot法检测肾组织中沉默信息调控因子3(SIRT3)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)mRNA和蛋白的表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠肾脏病理损伤较重,24 h-UTP,血清SCr、GLU、TG、ALT、MDA均升高,ALB降低(P<0.05),肾组织中SIRT3、SOD2、GPX4、SLC7A11 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组相比,低、高剂量组肾脏病理损伤均减轻,上述指标均较模型组改善(P<0.05),且两组改善情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益气养阴活血方可能通过激活SIRT3/SOD2/GPX4信号通路抑制氧化应激及铁死亡,从而减轻DN大鼠肾损害。 展开更多
关键词 益气养阴活血方 糖尿病肾病 sirt3/SOD2/GPX4 氧化应激 铁死亡 大鼠
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NAD+/SIRT2途径调节衰老卵母细胞成熟质量的分子机制 被引量:3
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作者 徐德军 赵中权 赵永聚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1657-1667,共11页
卵母细胞成熟质量不仅是哺乳动物繁殖能力的基础,更能直接决定后代的优劣。卵巢早衰通常引起卵子数量和质量下降,如何提高其成熟质量成为生殖衰老领域的研究热点。近年来,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶家族Sirtuins(SIRT1... 卵母细胞成熟质量不仅是哺乳动物繁殖能力的基础,更能直接决定后代的优劣。卵巢早衰通常引起卵子数量和质量下降,如何提高其成熟质量成为生殖衰老领域的研究热点。近年来,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶家族Sirtuins(SIRT1-7)在生殖衰老中的功能愈发受到关注,尤其抗衰老因子SIRT2的乙酰化底物直接与卵母细胞成熟事件相关。本文从乙酰化修饰调控卵母细胞衰老与成熟的全新视角,重点综述了NAD+/SIRT2通过减数分裂、能量代谢、线粒体氧化应激、线粒体质量控制等重要生理环节改善衰老卵母细胞成熟质量的最新研究进展,以期为提高老龄母畜的卵母细胞质量及延长繁殖利用年限提供新思路。 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸/沉默信息调节因子2 卵母细胞 成熟质量 衰老 线粒体
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身痛逐瘀汤调控SIRT1/Nrf2信号通路改善大鼠椎间盘退变的作用 被引量:5
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作者 黄家俊 吴迪友 +3 位作者 陶广义 赵宇 黄俊卿 杨彬 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第3期29-39,共11页
目的:探讨身痛逐瘀汤对大鼠椎间盘退变(IDD)的影响及其保护作用机制。方法:体外研究:40只雄性大鼠分别灌胃给予生理盐水、身痛逐瘀汤低、中、高剂量(3.38、6.75、13.5 g·kg^(-1)),连续给药7 d后收集血清。另取10只雄性大鼠,分离髓... 目的:探讨身痛逐瘀汤对大鼠椎间盘退变(IDD)的影响及其保护作用机制。方法:体外研究:40只雄性大鼠分别灌胃给予生理盐水、身痛逐瘀汤低、中、高剂量(3.38、6.75、13.5 g·kg^(-1)),连续给药7 d后收集血清。另取10只雄性大鼠,分离髓核细胞。以白细胞介素-1β(IL-1β)处理来构建IDD细胞模型,分别加入身痛逐瘀汤含药血清和铁死亡抑制剂(Fer-1),探究身痛逐瘀汤含药血清对髓核细胞增殖及铁死亡的影响。为研究沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)在身痛逐瘀汤含药血清调控髓核细胞铁死亡中的作用,在IL-1β和身痛逐瘀汤高剂量含药血清处理的同时,分别加入SIRT1抑制剂Ex 527和Nrf2抑制剂ML385干预。细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测细胞活力,EdU染色检测细胞增殖,比色法检测Fe^(2+)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)、蛋白聚糖(Aggrecan)、SIRT1、Nrf2蛋白表达,免疫荧光检测SIRT1蛋白表达。体内研究:以雄性大鼠为研究对象,采用纤维环穿刺法构建IDD大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、身痛逐瘀汤组(13.5 g·kg^(-1))及阳性药组(尼美舒利分散片,0.18 mg·kg^(-1)),给药体积为1 mL·kg^(-1)。假手术组和模型组则灌胃等体积的生理盐水。给药1次/d,连续28 d。末次给药结束后采用苏木素-伊红(HE)染色法结合Masuda评分法,观察大鼠椎间盘组织病理变化并进行病理学评分。Western blot检测髓核组织中SIRT1、Nrf2、GPX4和CollagenⅡ蛋白表达。结果:与空白组比较,IL-1β组髓核细胞中Fe^(2+)和MDA含量及ACSL4蛋白水平明显升高(P<0.05),而细胞存活率、GSH浓度和GPX4、CollagenⅡ、Aggrecan蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与空白组比较,身痛逐瘀汤含药血清和Fer-1干预逆转了IL-1β对髓核细胞活力和铁死亡的影响,髓核细胞中的CollagenⅡ和Aggrecan蛋白水平明显升高(P<0.05)。此外,IL-1β组髓核细胞中Sirt1和Nrf2蛋白表达降低(P<0.05)。与IL-1β组比较,身痛逐瘀汤高剂量含药血清+IL-1β组髓核细胞中SIRT1和Nrf2蛋白表达均明显增加(P<0.05)。与身痛逐瘀汤高剂量含药血清+IL-1β组比较,ML385组细胞中Nrf2和GPX4蛋白水平及GSH浓度明显降低,Fe^(^(2+))含量和MDA水平均明显增加(P<0.05)。此外,Ex 527组细胞中的SIRT1、Nrf2和GPX4蛋白水平均降低,较身痛逐瘀汤高剂量含药血清+IL-1β组差异有统计学意义(P<0.05)。体内研究结果表明,与假手术组比较,模型组大鼠的椎间盘组织严重退变,病理学评分和ACSL4蛋白水平明显增加(P<0.05),而SIRT1、Nrf2、GPX4和CollagenⅡ蛋白水平则明显降低(P<0.05)。与模型组比较,身痛逐瘀汤组大鼠椎间盘退变得到明显改善,病理学评分和ACSL4蛋白水平明显降低(P<0.05),SIRT1、Nrf2、GPX4和CollagenⅡ蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论:身痛逐瘀汤可能激活SIRT1/Nrf2信号通路,抑制IDD大鼠髓核细胞铁死亡,从而延缓IDD进程。 展开更多
关键词 身痛逐瘀汤 椎间盘退变 髓核细胞 铁死亡 沉默信息调节因子1(sirt1)/核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)信号通路
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鸡蛔虫凤阳株线粒体ATP 6、NAD 1和NAD 2基因遗传变异分析
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作者 缪欣怡 陈玉晴 +6 位作者 石家鑫 潘言迪 方林克 黄阳 李文超 顾有方 刘欣超 《动物医学进展》 北大核心 2025年第11期87-94,共8页
为了探究鸡蛔虫的遗传变异情况,对分离自安徽省凤阳县的2株鸡蛔虫线粒体ATP合成酶F0亚单位6(ATP 6)基因、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位Ⅰ(NAD 1)基因和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位Ⅱ(NAD 2)基因序列进行PCR扩增和测序,用DNAS... 为了探究鸡蛔虫的遗传变异情况,对分离自安徽省凤阳县的2株鸡蛔虫线粒体ATP合成酶F0亚单位6(ATP 6)基因、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位Ⅰ(NAD 1)基因和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位Ⅱ(NAD 2)基因序列进行PCR扩增和测序,用DNAStar和Dnasp6.0等软件分析3个基因的核酸序列,并用MEGA11.0构建系统进化树。结果显示,鸡蛔虫凤阳分离株ATP 6、NAD 1和NAD 2基因的开放阅读框片段大小分别为597 bp、876 bp和843 bp,2株鸡蛔虫3个基因的核苷酸同源性分别为99.0%、98.1%和97.8%。遗传距离分析显示,鸡蛔虫凤阳分离株的ATP 6、NAD 1和NAD 2基因与其他鸡蛔虫同源基因的遗传距离均小于或者等于0.024,3个基因分别检测到13、7和4个单倍型,总的单倍型多样性分别为0.971、0.819和0.900,核苷酸多样性分别为0.01141、0.00665和0.01096。以ATP 6、NAD 1和NAD 23个基因序列构建的种系进化树均显示,鸡蛔虫凤阳分离株与其他已知鸡蛔虫分离株聚类在一个分支,其次与鸽蛔虫聚类成禽蛔科支系,与其他蛔虫所属的分支均相距较远,能够鉴别不同种的蛔虫。研究表明,鸡蛔虫凤阳分离株存在遗传变异,但程度较低,且NAD 2基因比ATP 6、NAD 1基因更适合作为鸡蛔虫遗传变异研究的分子标记。 展开更多
关键词 鸡蛔虫 ATP 6基因 nad 1基因 nad 2基因 遗传变异
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中药复方益糖康方通过调控SIRT6/PPARα信号通路促脂肪棕色化防治2型糖尿病的机制 被引量:1
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作者 高佳 于嘉祥 +5 位作者 张瀚文 石岩 吴怡 王一霖 程玥凤 张文顺 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第19期259-267,共9页
目的:通过观察中药复方益糖康方(YTK)对调控沉默信息调节因子6(SIRT6)/过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)信号通路改善2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢水平及脂肪组织形态的影响,探讨YTK治疗T2DM可能的作用机制。方法:选取8周龄SPF级... 目的:通过观察中药复方益糖康方(YTK)对调控沉默信息调节因子6(SIRT6)/过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)信号通路改善2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢水平及脂肪组织形态的影响,探讨YTK治疗T2DM可能的作用机制。方法:选取8周龄SPF级健康雄性Wistar大鼠96只,使用随机数字表法分为空白组,模型组,YTK高、中、低剂量组(40、20、10 g·kg^(-1)),西药组(利拉鲁肽组,0.108 mg·kg^(-1)),采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型。模型判定成功后,连续灌胃8周后取材。检测大鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察脂肪组织病理形态学变化;免疫组化法及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠脂肪中核受体共激活剂(NCOA2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1β(PGC-1β)、PPARα、PR结构域蛋白16(PRDM16)、SIRT6的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠FBG、TG、LDL-C水平升高,HDL-C水平显著下降(P<0.01);大鼠脂肪组织直径明显增大、大量空泡状细胞彼此挤压呈多边形,边缘不清晰;脂肪组织NCOA2蛋白阳性表达明显升高,PGC-1α、PGC-1β、PPARα、PRDM16、SIRT6蛋白阳性表达显著减少(P<0.01)。与模型组比较,各治疗组均能显著降低FBG、TG、LDL-C水平,显著升高HDL-C水平(P<0.01);大鼠脂肪组织可见细胞较直径减小、数目增多、形态规则;NCOA2蛋白阳性表达明显降低,PGC-1α、PGC-1β、PPARα、PRDM16、SIRT6蛋白阳性表达显著升高(P<0.01)。结论:YTK对STZ诱导的T2DM大鼠有良好的治疗作用,其作用机制可能与激活SIRT6/PPARα信号通路,促进白色脂肪棕色化有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 益糖康方 沉默信息调节因子6(sirt6)/过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)信号通路 白色脂肪棕色化
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SIRT2对冷处理后小鼠肝脏组织紧密连接及内质网应激的影响
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作者 赵天睿 薛琳琳 +3 位作者 聂君书 张怀秀 李辰辰 郭景茹 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第7期1469-1477,共9页
为了探明SIRT2对冷处理后小鼠肝脏组织紧密连接及内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)的影响,选取5周龄雄性C57BL/6型小鼠和SIRT2敲除型小鼠各10只,随机分为野生型室温对照组(WT Control)、野生型冷处理组(WT Cold)、SIRT2敲... 为了探明SIRT2对冷处理后小鼠肝脏组织紧密连接及内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)的影响,选取5周龄雄性C57BL/6型小鼠和SIRT2敲除型小鼠各10只,随机分为野生型室温对照组(WT Control)、野生型冷处理组(WT Cold)、SIRT2敲除+室温对照组(KO Control)和SIRT2敲除+冷处理组(KO Cold)。室温对照组小鼠在温度为(24±2)℃的环境中饲养,冷处理组置于(4±2)℃人工气候室中每天随机刺激3 h,连续刺激3周。采用H&E、Masson染色以及透射电镜观察小鼠肝脏组织显微及超微结构;通过生化分析仪检测小鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)浓度;利用Western blot试验对肝脏组织中紧密连接相关(Claudin1、Occludin)、ERS相关蛋白(GRP78、CHOP、XBP1、p-eIF2α、eIF2α)和促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的表达量进行检测。结果显示,与WT Control组相比,WT Cold组与KO Control组小鼠肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,胞质松散,出现白色空泡,少量胶原沉积和纤维增生,肝脏细胞中线粒体轻度肿胀,内质网(endoplasmic reticulum, ER)分布不均,血清中AST及ALT的浓度升高(P<0.050、P<0.010),肝脏组织中Occludin、Claudin1的表达量降低(P<0.050、P<0.010、P<0.001),GRP78、CHOP、XBP1、p-eIF2α/eIF2α、TNF-α、IL-6和IL-1β的蛋白表达量升高(P<0.050、P<0.010、P<0.001);与KO Control组相比,KO Cold组小鼠肝脏组织出现大量白色空泡、少量气球样变、炎性细胞浸润以及明显的胶原沉积和纤维增生,肝脏细胞中线粒体肿胀,线粒体嵴减少,ER增粗,血清中AST及ALT浓度升高(P<0.010),肝脏组织中Occludin、Claudin1的蛋白表达量降低(P<0.010),GRP78、CHOP、XBP1、p-eIF2α/eIF2α、TNF-α、IL-6和IL-1β的蛋白表达量升高(P<0.050、P<0.010、P<0.001)。结果表明,SIRT2敲除会加重冷处理所导致的小鼠肝脏组织紧密连接受损,诱导ERS,并进一步促进炎症反应的发生。 展开更多
关键词 sirt2 肝脏 冷处理 紧密连接 内质网应激 小鼠
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杂交河鲀抗氧化相关基因Nrf2、SIRT1、OXR1的分子特征和功能分析 被引量:1
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作者 姚云龙 王超宇 +4 位作者 高原野 石硕 王萌萌 赵哲 史燕 《水生生物学报》 北大核心 2025年第9期55-64,共10页
为探讨杂交河鲀(Takifugu rubripes×Takifugu obscurus)对氧化应激的反应机理,文章克隆了杂交河鲀抗氧化的关键基因Nrf2、SIRT1、OXR1的cDNA序列,并进行了基因的分子特征与功能分析。利用荧光定量PCR方法检测了3个基因在心、皮肤... 为探讨杂交河鲀(Takifugu rubripes×Takifugu obscurus)对氧化应激的反应机理,文章克隆了杂交河鲀抗氧化的关键基因Nrf2、SIRT1、OXR1的cDNA序列,并进行了基因的分子特征与功能分析。利用荧光定量PCR方法检测了3个基因在心、皮肤、肝、脑、脾、眼、肾和肌肉中的分布情况,结果显示Nrf2在肝、脾和肌肉中高表达,SIRT1在心、肝、脑、脾等多个组织中高表达,OXR1则在肝、脑和眼中高表达。蛋白结构预测分析发现,Nrf2的Neh1(Nrf2-ECH homology 1)功能域保守,推测其功能与其他物种相似。进一步通过Nrf2的真核表达实验发现Nrf2的转染可以引起FHM(Fathead minnow)细胞中ho-1基因的上调表达,并在氧化应激条件下提高细胞存活率,降低细胞活性氧含量,提示Nrf2具有一定的抗氧化功能。研究结果增加了对河鲀抗氧化基因的认识,也有利于深入了解河鲀面对氧化应激的生理生化机制。 展开更多
关键词 氧化应激 NRF2 sirt1 OXR1 活性氧 河鲀
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α-亚麻酸植物甾醇酯调控SIRT3改善酒精诱导的HepG2细胞脂肪变性和氧化应激
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作者 韩艳阳 郭慧敏 +3 位作者 郑明明 董亚静 吉舒琪 韩浩 《营养学报》 北大核心 2025年第1期52-59,共8页
目的探讨α-亚麻酸植物甾醇酯(PS-ALA)对酒精(EtOH)诱导的肝细胞脂肪变性和氧化应激的改善作用,并基于SIRT3进一步探索潜在的分子机制。方法采用EtOH诱导HepG2细胞脂肪变性和氧化应激模型,给予PS-ALA干预,油红O染色观察细胞脂质沉积,DCF... 目的探讨α-亚麻酸植物甾醇酯(PS-ALA)对酒精(EtOH)诱导的肝细胞脂肪变性和氧化应激的改善作用,并基于SIRT3进一步探索潜在的分子机制。方法采用EtOH诱导HepG2细胞脂肪变性和氧化应激模型,给予PS-ALA干预,油红O染色观察细胞脂质沉积,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)水平,免疫荧光染色检测SIRT3的表达水平,蛋白免疫印迹检测SIRT3、PPARα、CPT-1A、SOD2和CYP2E1蛋白表达水平。结果与对照组相比,EtOH组细胞内出现了大量的脂质沉积并产生大量的ROS;PS-ALA干预后显著改善EtOH诱导的细胞内脂质沉积,并有效抑制ROS生成;进一步的研究显示,PS-ALA显著上调脂肪酸β氧化关键调控信号分子SIRT3、PPARα和CPT-1A蛋白表达水平,同时增加SOD2蛋白表达,降低CYP2E1表达。结论PS-ALA能够抑制EtOH诱导的HepG2细胞脂肪变性和氧化应激,其机制可能与上调SIRT3表达水平和促进脂肪酸β氧化有关。 展开更多
关键词 α-亚麻酸植物甾醇酯 脂肪变性 sirt3 HEPG2细胞
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红景天苷调控SIRT1/Nrf2介导铁死亡抑制oxLDL诱导内皮细胞黏附分子表达的机制研究 被引量:2
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作者 张梦 萧闵 +2 位作者 李晶晶 李蒋凤 樊光辉 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第10期2787-2797,共11页
探讨红景天苷(salidroside,SAL)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)诱导的小鼠主动脉内皮细胞(mouse aortic endothelial cell,MAEC)黏附分子表达的影响及机制。构建oxLDL诱导的内皮细胞损伤模型,筛选SAL安... 探讨红景天苷(salidroside,SAL)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)诱导的小鼠主动脉内皮细胞(mouse aortic endothelial cell,MAEC)黏附分子表达的影响及机制。构建oxLDL诱导的内皮细胞损伤模型,筛选SAL安全浓度和作用时间。将细胞分为对照组,oxLDL组,SAL低、高浓度组和铁抑素-1(ferrostatin-1,Fer-1)组,CCK-8法检测细胞存活率;比色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量;免疫荧光检测细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)及血管细胞黏附分子-1(recombinant vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)的表达水平;试剂盒检测细胞Fe2+、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)水平;DCFH-DA探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测细胞谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、沉默信息调节因子1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)和核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的表达;使用Nrf2、SIRT1抑制剂,将内皮细胞分为对照组、oxLDL组、SAL组、Nrf2抑制剂(ML385)组及SIRT1抑制剂(EX527)组,电镜观察线粒体超微结构;流式仪检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平;Western blot检测细胞SIRT1、Nrf2、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、GPX4、膜铁运转蛋白1(ferroportin 1,FPN1)、铁蛋白重链1(ferritin heavy polypeptide 1,FTH1)、ICAM-1及VCAM-1的表达。结果显示,与Fer-1作用相似,低、高浓度的SAL能够提高oxLDL诱导的内皮细胞存活率,抑制LDH释放和ICAM-1、VCAM-1表达(P<0.05或P<0.01),与SAL提高细胞GSH水平,降低Fe2+、ROS、MDA、4-HNE水平,上调SIRT1、Nrf2和GPX4表达抑制铁死亡有关(P<0.05或P<0.01),以高浓度SAL组干预效果最为显著;而ML385、EX527能够部分抵消SAL对线粒体结构和MMP的保护作用,逆转SAL上调SIRT1、Nrf2、SLC7A11、GPX4、FPN1和FTH1表达,下调ICAM-1、VCAM-1表达的效应(P<0.05或P<0.01)。综上,SAL减少oxLDL诱导的内皮细胞ICAM-1、VCAM-1的表达,与激活SITR1/Nrf2介导的SLC7A11/GPX4抗氧化信号通路,上调FPN1、FTH1表达抑制铁死亡有关。 展开更多
关键词 红景天苷 铁死亡 sirt1/Nrf2/SLC7A11/GPX4通路 ICAM-1 VCAM-1
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SIRT1调控Nrf2/HO-1信号通路在脓毒症急性肾损伤中的作用机制
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作者 王敬杰 任彤 +2 位作者 高子翔 于湘友 王毅 《中华实用诊断与治疗杂志》 2025年第9期796-803,共8页
目的探讨SIRT1调控Nrf2/HO-1信号通路对脓毒症相关急性肾损伤(S-AKI)大鼠氧化应激、炎性反应的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、激动剂组、抑制剂组各6只。脓毒症组、激动剂组、抑制剂组采用盲肠结扎穿孔术制备脓... 目的探讨SIRT1调控Nrf2/HO-1信号通路对脓毒症相关急性肾损伤(S-AKI)大鼠氧化应激、炎性反应的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、激动剂组、抑制剂组各6只。脓毒症组、激动剂组、抑制剂组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症模型,假手术组仅开腹关腹。造模前2h,激动剂组腹腔注射SRT1720,抑制剂组腹腔注射EX527,假手术组和脓毒症组腹腔注射等体积DMSO+生理盐水混合液,剂量均为50mg/kg。造模后24h腹主动脉取血,检测血清肾损伤分子(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。取血后处死大鼠取肾脏组织,采用HE染色观察组织病理学改变;采用免疫组织化学DAB法检测SIRT1、Nrf2、HO-1阳性面积百分比;采用实时荧光定量PCR法检测SIRT1、Nrf2、HO-1 mRNA相对表达量;采用Western blot法检测SIRT1、Nrf2、HO-1蛋白相对表达量;采用比色法测定肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)含量;采用硫代巴比妥酸法检测肾脏组织丙二醛(MDA)含量;采用微板法检测肾脏组织还原型谷胱甘肽(GSH)、髓过氧化物酶(MPO)含量。结果(1)4组大鼠血清KIM-1、NGAL、IL-1β、IL-6、TNF-α水平比较差异均有统计学意义(F=14.71~702.62,P均<0.05)。脓毒症组大鼠血清KIM-1、NGAL、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于假手术组、激动剂组(P<0.05),均低于抑制剂组(P<0.05)。(2)假手术组大鼠肾脏组织结构完整,肾小管上皮细胞及肾小球细胞均未发现明显的病理改变;脓毒症组大鼠肾小球充血,有较多红细胞,肾小管上皮细胞排列紊乱,管型形成,出现不同程度的肿胀、变性,可见部分细胞坏死及核碎裂;激动剂组大鼠肾小管肿胀变性程度较脓毒症组减轻;抑制剂组大鼠肾小管严重肿胀变性,较脓毒症组有更多管型形成。(3)4组大鼠肾脏组织SIRT1、Nrf2、HO-1阳性面积百分比比较差异均有统计学意义(F=195.24、177.21、421.36,P均<0.05)。脓毒症组大鼠肾脏组织SIRT1、Nrf2、HO-1阳性面积百分比均低于假手术组、激动剂组(P<0.05),均高于抑制剂组(P<0.05)。(4)4组大鼠肾脏组织SIRT1、Nrf2、HO-1mRNA及蛋白相对表达量比较差异均有统计学意义(F=4.51~62.43,P均<0.05)。脓毒症组大鼠肾脏组织SIRT1、Nrf2、HO-1mRNA及蛋白相对表达量均低于假手术组、激动剂组(P<0.05),均高于抑制剂组(P<0.05)。(5)4组大鼠肾脏组织SOD、MDA、MPO和GSH含量比较差异均有统计学意义(F=33.65~234.82,P均<0.05)。脓毒症组大鼠肾脏组织SOD、GSH含量均低于假手术组、激动剂组(P<0.05),均高于抑制剂组(P<0.05);脓毒症组大鼠肾脏组织MDA和MPO含量均高于假手术组、激动剂组,均低于抑制剂组(P<0.05)。结论上调SIRT1可激活Nrf2/HO-1信号通路,抑制炎性因子释放,对抗氧化应激损伤,减轻S-AKI。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肾损伤 sirt1 Nrf2/HO-1信号通路 氧化应激
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达格列净经AMPK/SIRT3通路对2型糖尿病合并慢性心力衰竭患者心功能及发生MACE的影响 被引量:1
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作者 吴勇 于芳 +1 位作者 丁冠瑶 叶燕 《检验医学与临床》 2025年第13期1830-1835,共6页
目的探讨达格列净经AMP依赖蛋白激酶(AMPK)/NAD依赖性脱乙酰酶(SIRT3)通路对2型糖尿病(T2DM)合并慢性心力衰竭(CHF)患者心功能及发生主要心血管不良事件(MACE)的影响。方法选取2019年10月至2022年5月陕西省咸阳市第一人民医院收治的90例... 目的探讨达格列净经AMP依赖蛋白激酶(AMPK)/NAD依赖性脱乙酰酶(SIRT3)通路对2型糖尿病(T2DM)合并慢性心力衰竭(CHF)患者心功能及发生主要心血管不良事件(MACE)的影响。方法选取2019年10月至2022年5月陕西省咸阳市第一人民医院收治的90例T2DM合并CHF患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组和治疗组,每组45例。对照组采用常规糖尿病和CHF综合治疗,治疗组在对照组的基础上增加达格列净进行治疗,2组均持续治疗24周。比较2组治疗前后血糖相关指标[空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)]和心功能相关指标[左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)、心输出量(CO)、舒张期室间隔厚度(IVST)]水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测2组血清AMPK mRNA、SIRT3 mRNA相对表达水平。统计随访1年期间2组MACE发生情况。结果治疗组临床总有效率(95.56%)明显高于对照组(84.44%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组FBG、2 h PG、HbA1c水平均低于治疗前,且治疗组治疗后FBG、2 h PG、HbA1c水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组LVEDD、IVST均低于治疗前,CO、LVEF高于治疗前,且治疗组治疗后LVEDD、IVST低于对照组,CO、LVEF高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组血清SIRT3 mRNA、AMPK mRNA水平均高于治疗前,且治疗组治疗后血清SIRT3 mRNA、AMPK mRNA水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访期间,治疗组与对照组MACE总发生率比较(4.44%vs.11.11%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论在T2DM合并CHF患者治疗中应用达格列净联合常规综合治疗效果显著,能有效降低患者的血糖指标水平,提升患者的心脏功能,降低MACE发生风险,其机制可能与激活AMPK/SIRT3通路有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 慢性心力衰竭 达格列净 AMP依赖的蛋白激酶 nad依赖性脱乙酰酶 心功能 主要心血管不良事件
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