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2015—2018年大连市流感监测及甲型H1N1流感病毒HA基因特征分析 被引量：1
1
作者 韩焱 吕秋月 +3 位作者 纪颖 刘大鹏 滕雪 孙楠 《医学动物防制》 2025年第3期209-214,共6页
目的本研究旨在了解2015—2018年大连市流感病毒的流行特征并分析甲型H1N1流感病毒的血凝素(hemagglutinin,HA)基因的遗传变异情况,为流感防控提供参考。方法对2015年7月—2018年6月流感监测哨点医院采集的3936份流感样病例(influenza-l... 目的本研究旨在了解2015—2018年大连市流感病毒的流行特征并分析甲型H1N1流感病毒的血凝素(hemagglutinin,HA)基因的遗传变异情况,为流感防控提供参考。方法对2015年7月—2018年6月流感监测哨点医院采集的3936份流感样病例(influenza-like illness,ILI)标本,采用实时荧光定量PCR方法进行流感病毒核酸检测,检测结果用SPSS 22.0软件进行统计分析。核酸阳性标本使用犬肾(madin-darby canine kidney,MDCK)细胞进行病毒分离,并随机选取每年的甲型H1N1流感病毒毒株进行基因测序,使用MEGA 5.0软件分析其HA1基因特征。结果流感病毒核酸检测阳性共590份,阳性率总体呈上升趋势,2017—2018年流感病毒阳性率最高(20.1%),2015—2016年流感病毒阳性率最低(10.9%),不同年份流感病毒阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=45.124,P<0.001)。共分离出甲型流感病毒H1N1亚型毒株94株,将随机选取的39株分离株的HA编码区与疫苗株及参考株的HA编码区进行比较,所有分离株均观察到P83S、D97N、K163Q、S185T、S203T和K283E位点突变。高比例的毒株(84.6%)具有S84N、S162N和I216T位点突变。结论系统发育分析证实,大多数在流行的毒株与上一流行季分离的参考株及疫苗株A/Michigan/45/2015亲缘关系较近,而与A/California/7/2009疫苗株的亲缘关系较远,揭示毒株积累氨基酸变异和形成新的系统发育群的趋势。 展开更多
关键词 流感监测 甲型流感病毒H1n1亚型 HA基因 进化分析 变异分析
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2023年中国A(H1N1)pdm09亚型流感病毒抗原和基因特性分析
2
作者 成艳辉 隗合江 +7 位作者 李希妍 曾晓旭 肖宁 唐静 谢怡然 杨磊 王大燕 黄维娟 《疾病监测》 北大核心 2025年第4期492-498,共7页
目的分析2023年中国分离的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒的抗原和基因特性。方法对2148株A(H1N1)pdm09亚型流感毒株用红细胞凝集抑制试验进行抗原分析,对其中505株毒株进行序列测定和分析。结果2023年检测的2148株毒株中,95.00%以上的毒株... 目的分析2023年中国分离的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒的抗原和基因特性。方法对2148株A(H1N1)pdm09亚型流感毒株用红细胞凝集抑制试验进行抗原分析,对其中505株毒株进行序列测定和分析。结果2023年检测的2148株毒株中,95.00%以上的毒株抗原性与疫苗株A/Victoria/4897/2022和A/West Virginia/30/2022类似;98.42%(497/505)测序毒株的血凝素(HA)基因属于C.1分支,在此分支中存在多个有共同氨基酸位点变异的小分支;在测序毒株中,11株毒株有已知对神经氨酸酶抑制剂耐药的E119A、Q136K和H275Y氨基酸位点变异。结论2023年中国流行的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒与同期的疫苗株抗原性匹配,但HA基因存在多样性的特点。 展开更多
关键词 A(H1n1)pdm09亚型流感病毒 抗原性 基因特性
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植物乳杆菌N1发酵蜂王浆前后的抗癌及降血糖活性变化
3
作者 何荣军 任玫 +2 位作者 沈佶儿 王晓宇 孙培龙 《现代食品科技》 北大核心 2025年第9期56-64,共9页
通过构建BPA诱导MCF-7细胞增殖模型,观察植物乳杆菌N1发酵的蜂王浆产物对模型BPA-MCF-7细胞的活力、迁移能力、侵袭能力及细胞周期与凋亡的影响。以BPA-MCF-7细胞为模型,设置空白组、对照组及药物组,检测蜂王浆发酵前后细胞活力、细胞... 通过构建BPA诱导MCF-7细胞增殖模型,观察植物乳杆菌N1发酵的蜂王浆产物对模型BPA-MCF-7细胞的活力、迁移能力、侵袭能力及细胞周期与凋亡的影响。以BPA-MCF-7细胞为模型,设置空白组、对照组及药物组,检测蜂王浆发酵前后细胞活力、细胞迁移、细胞侵袭能力及细胞凋亡与周期的变化;此外又通过体内外降血糖活性检测蜂王浆发酵前后的降血糖活性的变化。与对照组相比,未发酵蜂王浆和蜂王浆发酵物的细胞增殖能力下降,蜂王浆发酵物能明显抑制BPA-MCF-7细胞的生长。与对照组相比,蜂王浆发酵物的细胞迁移率和侵袭率分别为67.06%和79.00%,可以抑制BPA-MCF-7细胞的侵袭和迁移能力。流式细胞结果显示,蜂王浆发酵物可以诱导BPA-MCF-7细胞的凋亡,主要阻滞在G2/M期。通过体内斑马鱼降血糖活性实验发现蜂王浆发酵物表现出比蜂王浆未发酵物更强的降血糖活性。因此,蜂王浆经过发酵后可以诱导BPA-MCF-7细胞的凋亡,抗癌活性更强,并且降血糖活性也得到了提高,为蜂王浆的开发利用提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 蜂王浆 植物乳杆菌n1 发酵 双酚A 乳腺癌 降血糖
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粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性及其时空分异规律
4
作者 段海来 刘畅 杜尧东 《生态学杂志》 北大核心 2025年第7期2377-2382,共6页
基于粤港澳大湾区逐日气象资料与甲型H1N1流感病例数据,运用气候适宜度模型对粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性及其时空差异进行了计算、评价和预测。结果表明:12月下旬到次年2月中旬气候适宜性指数较高,且变异系数较小,其... 基于粤港澳大湾区逐日气象资料与甲型H1N1流感病例数据,运用气候适宜度模型对粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性及其时空差异进行了计算、评价和预测。结果表明:12月下旬到次年2月中旬气候适宜性指数较高,且变异系数较小,其中1月下旬适宜性指数最高,是甲型H1N1流感传播的最适宜时期;近42年来粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性指数呈下降趋势,2015年以后适宜性指数降幅较大;从冬季各月来看,12月和1月呈现一致性增加趋势,2月呈现显著下降趋势;粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性呈现西北向东南递减的区域分异规律,其中西北地区适宜性指数是东南沿海地区的1.5~2.0倍;从变化趋势来看,珠江口以西区域的东部以及惠州部分地区的H1N1传播适宜性呈上升趋势,尤其以佛山和中山地区升幅最为显著,增加速度达到1.0(10 a)^(-1)以上,沿海地区则在下降,减少速度在0.05(10 a)^(-1)以上。由此可见,粤港澳大湾区甲型H1N1流感传播的关键时期是冬至前后至翌年立春前后,重点关注区域是珠江口以西核心城市。 展开更多
关键词 气候适宜性指数 甲型H1n1流感 气候变化 粤港澳大湾区
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衰老抑制C57BL/6J小鼠肺部CD8^(+)T细胞对甲型H1N1流感病毒的记忆性免疫应答
5
作者 王超 李顺 +4 位作者 任晓楠 杨华 陈丽香 徐春华 周晓辉 《实验动物与比较医学》 2025年第5期515-523,共9页
目的比较年轻与老年C57BL/6J小鼠感染甲型H1N1流感病毒后肺组织中CD8^(+)T细胞在收缩期及记忆性免疫应答期的功能差异。方法摘取未行流感病毒感染的年轻(3月龄)与老年(24月龄)雌性C57BL/6J小鼠肺组织,制备单细胞悬液,分别用佛波酯(phorb... 目的比较年轻与老年C57BL/6J小鼠感染甲型H1N1流感病毒后肺组织中CD8^(+)T细胞在收缩期及记忆性免疫应答期的功能差异。方法摘取未行流感病毒感染的年轻(3月龄)与老年(24月龄)雌性C57BL/6J小鼠肺组织,制备单细胞悬液,分别用佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)/离子霉素或分化簇(cluster of differentiation,CD)3/CD28抗体(T细胞抗原受体/共刺激信号)进行非特异性抗原刺激,通过流式细胞术对肺CD8^(+)T细胞行细胞内细胞因子染色(flow cytometry intracellular cytokine staining,ICS)以检测其分泌肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的能力。以490 PFUPR8流感病毒滴鼻感染年轻和老年C57BL/6J小鼠,28天后进行同源流感病毒的二次感染,于初次感染后第28天(收缩期)、第32天(记忆性免疫应答期)分离肺组织,采用流感病毒特异性MHC-Ⅰ四聚体染色法检测病毒特异性CD8^(+)T细胞在肺组织CD8^(+)T细胞中的比例,ICS法分析CD8^(+)CD44^(high) T细胞亚群TNF-α、IFN-γ及颗粒酶B(granzyme B)的表达。结果非特异性抗原刺激后,老年组小鼠的肺组织CD8^(+)T细胞中TNF-α、IFN-γ分泌能力显著高于年轻组(P<0.05)。病毒特异性抗原刺激后,收缩期的两组小鼠间病毒特异性CD8^(+)T细胞比例以及TNF-α、IFN-γ、granzymeB的表达水平差异均无统计学意义(P>0.05);而在记忆性免疫应答期,老年组小鼠的病毒特异性CD8^(+)T细胞比例以及TNF-α、IFN-γ、granzymeB的表达水平均显著低于年轻组(P<0.05)。结论老年小鼠肺部CD8^(+)T细胞在非特异性抗原刺激下免疫相关因子表达功能正常,但在抗原特异性记忆免疫应答阶段的免疫相关因子表达功能受损,提示衰老导致CD8^(+)T细胞免疫记忆形成或维持发生缺陷。 展开更多
关键词 甲型H1n1流感病毒 CD8^(+)T细胞 免疫衰老 记忆性免疫应答 小鼠
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抗感方对实验小鼠免疫调节及抗H1N1流感病毒作用探究
6
作者 王祺 白长川 +4 位作者 于雪峰 张宏 甘雨 翟娜 孟硕 《辽宁中医药大学学报》 2025年第7期10-15,共6页
目的探讨抗感方对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用及抗H1N1流感病毒作用。方法采用小鼠网状内皮系统吞噬能力试验(非特异性免疫),小鼠血清溶血素生成试验(体液免疫),小鼠迟发超敏反应试验(细胞免疫),小鼠免疫因子调控试验,观察抗感方对... 目的探讨抗感方对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用及抗H1N1流感病毒作用。方法采用小鼠网状内皮系统吞噬能力试验(非特异性免疫),小鼠血清溶血素生成试验(体液免疫),小鼠迟发超敏反应试验(细胞免疫),小鼠免疫因子调控试验,观察抗感方对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用;采用药物对流感病毒感染BALB/C小鼠死亡的保护实验,观察抗感方抗H1N1流感病毒作用。结果与模型组比较,各给药组小鼠网状内皮系统吞噬能力有升高的趋势,玉屏风颗粒组(1.95 g/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠血清溶血素生成OD值都有升高的趋势,其中抗感方高剂量组(27.30 g生药/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)升高差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠迟发超敏反应有下降的趋势,其中抗感方低剂量组(6.82 g生药/kg)、高剂量组(27.30 g生药/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)降低明显(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组比较,抗感方高剂量组(27.30 g生药/kg)、玉屏风颗粒组(1.95 g/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)能够促进IL-4分泌(P<0.05或P<0.01),抗感方高剂量组(27.30 g生药/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)能够促进IFN-γ的分泌(P<0.01、P<0.05),抗感方高剂量组(27.30 g生药/kg)能够抑制TNF-α的分泌(P<0.05)。与模型组比较,抗感方中剂量组(13.65 g生药/kg)、奥司他韦胶囊组(19.50 mg/kg)平均生存日数延长(P<0.05或P<0.01)。结论抗感方具有提高机体免疫力及抗H1N1流感病毒作用,其机制可能与促进IL-4、IFN-γ分泌,抑制TNF-α的生成有关。 展开更多
关键词 免疫调节作用 抗感方 H1n1流感病毒
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莫诺拉韦在体外/体内抗H1N1流行性感冒病毒感染特点的研究 被引量：1
7
作者 冯茜莉 王进千 +3 位作者 杨宣叶 胡欣妍 丁玉林 马晓霞 《中国感染控制杂志》 北大核心 2025年第4期478-485,共8页
目的分析莫诺拉韦在体内和体外对流行性感冒(流感)病毒的抗病毒效果。方法检测莫诺拉韦对流感病毒H1N1 PR8毒株在体外和体内的抗病毒能力。以人源非小细胞肺癌细胞系(A549细胞)作为PR8感染的体外模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-... 目的分析莫诺拉韦在体内和体外对流行性感冒(流感)病毒的抗病毒效果。方法检测莫诺拉韦对流感病毒H1N1 PR8毒株在体外和体内的抗病毒能力。以人源非小细胞肺癌细胞系(A549细胞)作为PR8感染的体外模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹试验(WB)、噬斑的方法,分析莫诺拉韦体外对病毒复制、蛋白合成及病毒颗粒形成方面的抗病毒效果。以PR8滴鼻感染C57BL/6雌性小鼠为体内感染模型,分别从病毒载量、病理变化及免疫组化方面,对对照组、给药组、接毒组和接毒-给药组进行检测,以评估莫诺拉韦的抗病毒能力。结果体外试验结果显示,莫诺拉韦对流感病毒的复制、蛋白合成及病毒颗粒形成没有明显抑制作用(均P>0.05)。小鼠体内试验结果显示,与单纯感染H1N1小鼠相比,接受莫诺拉韦治疗的小鼠肺组织病毒载量明显下降,病理变化程度较轻,免疫组化检测显示核蛋白(NP)抗原信号明显减弱,干扰素(IFN)-α、白细胞介素(IL)-4和IL-6在肺中的表达水平较低(均P<0.01)。结论作为具有抗病毒活性的前体物,莫诺拉韦无法在体外培养的肺源细胞中发挥抗病毒活力,但可以在宿主体内转化为活性形式,显著降低H1N1流感病毒在肺增殖的能力,进而减轻病毒对肺组织的损伤。 展开更多
关键词 莫诺拉韦 流行性感冒 抗病毒 感染模型 病理变化 H1n1
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欧亚类禽H1N1猪流感病毒适应性突变氨基酸的鉴定及其功能分析 被引量：1
8
作者 万云飞 杨玉莹 +4 位作者 张乃心 许萌萌 于钦浩 乔传玲 陈化兰 《中国农业科学》 北大核心 2025年第10期2035-2044,共10页
【目的】A型流感病毒通过适应性突变跨越种间屏障,感染包括人类在内的多种哺乳动物,对全球公共卫生构成持续威胁。基于细胞传代培养鉴定流感病毒发生的适应性突变,并对突变氨基酸的功能进行分析,为流感的监测和防控提供理论指导。【方... 【目的】A型流感病毒通过适应性突变跨越种间屏障,感染包括人类在内的多种哺乳动物,对全球公共卫生构成持续威胁。基于细胞传代培养鉴定流感病毒发生的适应性突变,并对突变氨基酸的功能进行分析,为流感的监测和防控提供理论指导。【方法】将一株欧亚类禽H1N1猪流感病毒(EA H1N1 SIV)(A/swine/Zhejiang/199/2013,简称ZJ199)在MDCK细胞中传代培养,测序发现病毒在第3代发生适应性突变,并将其命名为ZJ199-P3。之后比较ZJ199与ZJ199-P3病毒在体内外的复制能力和对小鼠的感染性。建立ZJ199的反向遗传系统,并以rZJ199为骨架拯救分别含有单点突变的重组病毒,测定亲本病毒和单点突变重组病毒在体外的复制能力,确定影响病毒复制的关键氨基酸位点;通过测定病毒聚合酶活性、神经氨酸酶活性以及ISRE和NF-κB报告基因活性,确定病毒适应性突变对病毒生物学活性的影响。【结果】分析比较ZJ199与ZJ199-P3病毒的氨基酸序列,结果发现ZJ199-P3病毒在NP、NA和NS2蛋白分别含有A234T、S21G和M100I突变。测定ZJ199-P3病毒在体内外的复制能力,结果与ZJ199病毒相比,ZJ199-P3病毒在体内外的复制能力均下降。利用反向遗传技术,分别拯救了病毒rZJ99及单点突变病毒rZJ199-NA-S21G、rZJ199-NP-A234T和rZJ199-NS2-M100I;体外复制能力测定结果显示与rZJ199病毒相比,NP蛋白A234T突变导致rZJ199-NP-A234T病毒复制能力下降,而NA蛋白S21G和NS2蛋白M100I突变对病毒的复制能力无明显影响。进一步研究发现,NP蛋白A234T突变导致病毒聚合酶活性下降;NA蛋白S21G突变导致病毒神经氨酸酶活性下降;NS2蛋白M100I突变减弱了对ISRE和NF-κB报告基因活性的抑制作用。【结论】通过在细胞上的传代培养,鉴定了EA H1N1 SIV的3个适应性突变氨基酸,发现NP蛋白A234T突变通过降低病毒聚合酶活性,使得病毒的体外复制能力下降;NA蛋白S21G突变和NS2蛋白M100I突变均影响病毒的生物学活性。以上突变氨基酸的发现,提示我们需进一步加强流感病毒的监测,为流感的防控提供科学依据。 展开更多
关键词 H1n1 猪流感病毒 复制 适应性突变
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2.3.4.4b分支H5N1亚型HPAIV的广泛传播对“同一健康”的挑战与影响 被引量：1
9
作者 徐婉旖 毛秋艳 +3 位作者 彭程 刘朔 刘华雷 蒋文明 《中国动物检疫》 2025年第4期34-39,共6页
H5N1亚型高致病性禽流感(HPAI)在流行病学和生态学层面的演变,给全球野生鸟类、家禽及野生哺乳动物带来了严重影响。H5N1亚型禽流感病毒起源于家禽,通过野生鸟类在全球扩散,感染了更多哺乳动物和鸟类物种。2024年2.3.4.4b分支H5N1亚型... H5N1亚型高致病性禽流感(HPAI)在流行病学和生态学层面的演变,给全球野生鸟类、家禽及野生哺乳动物带来了严重影响。H5N1亚型禽流感病毒起源于家禽,通过野生鸟类在全球扩散,感染了更多哺乳动物和鸟类物种。2024年2.3.4.4b分支H5N1亚型毒株在奶牛中传播,并引发人间病例。H5N1亚型HPAI的生态变化对野生动物、生态系统、家畜、粮食安全和人类健康构成了巨大挑战。因此,动物、环境和人类相关部门间需开展协同合作,采取“同一健康”策略预防H5N1亚型HPAI大流行。应采取行动防止HPAI在家畜、野生动物及人类间传播,关注疫情暴发的上游驱动因素,及时应对人兽共患病疫情并做好风险评估,以降低未来疫情风险。 展开更多
关键词 2.3.4.4b H5n1 高致病性禽流感病毒 同一健康
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亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1参与血管平滑肌细胞钙化
10
作者 王凯茹 付士哲 +7 位作者 李家辉 燕茹 马玉茹 师波 冶从燕 闫瑞 丛广志 贾绍斌 《中国组织工程研究》 北大核心 2025年第32期6836-6842,共7页
背景:多胺在组织钙化中发挥重要作用。亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1作为调控细胞内多胺代谢的关键限速酶,其异常表达与多种病理过程相关,但在血管钙化中的作用尚未明确。目的:探讨亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1在大鼠血管平滑肌细胞钙化中的... 背景:多胺在组织钙化中发挥重要作用。亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1作为调控细胞内多胺代谢的关键限速酶,其异常表达与多种病理过程相关,但在血管钙化中的作用尚未明确。目的:探讨亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1在大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用。方法:①生物信息学分析:通过GEO数据集分析亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1在人颈动脉粥样硬化斑块及其周围健康颈动脉组织中的表达差异;通过PanglaoDB公共基因表达数据库单细胞测序观察亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1细胞群的表达丰度和定位。②将大鼠血管平滑肌细胞分为3组,对照组用DMEM培养基培养,钙化组用含10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠和3 mmol/L氯化钙的DMEM培养基诱导细胞钙化,50,100μmol/L二乙酰胺三氮脒组在钙化培养基的基础上,用50,100μmol/L亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1抑制剂二乙酰胺三氮脒处理细胞。培养7-10 d,进行茜素红S染色以及细胞钙含量和碱性磷酸酶活性检测,Western blot检测Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、α-平滑肌肌动蛋白和亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1的蛋白表达,免疫荧光染色检测Runt相关转录因子2和亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1的表达。结果与结论:①生物信息学分析显示,与健康颈动脉组织相比,颈动脉粥样硬化斑块中亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1和Runt相关转录因子2的表达显著上调(P<0.05);单细胞测序数据库分析证实了亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1在血管平滑肌细胞中表达;②与对照组比较,钙化组Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1、钙含量和碱性磷酸酶活性明显增加,而α-平滑肌肌动蛋白表达明显减少(均P<0.05);与钙化组比较,50,100μmol/L二乙酰胺三氮脒组Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、钙含量和碱性磷酸酶活性明显降低,而α-平滑肌肌动蛋白表达明显增加(均P<0.05);③免疫荧光实验显示,与钙化组比较,50,100μmol/L二乙酰胺三氮脒组Runt相关转录因子2的表达强度明显降低。结果证实,亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1可能通过上调Runt相关转录因子2的表达,促进血管平滑肌细胞钙化。 展开更多
关键词 大鼠血管平滑肌细胞 亚精胺/精胺n1-乙酰转移酶1(SAT1) Runt相关转录因子2 血管钙化 生物信息学 平滑肌肌动蛋白
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欧亚类禽H1N1亚型猪流感全病毒灭活疫苗的免疫保护效力评价
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作者 陈荣琳 邢燕茹 +13 位作者 王娟 李健楠 高硕磊 刘清艳 祝宇翔 周艳君 单同领 童武 郑浩 刘长龙 姜一峰 孔宁 童光志 于海 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期35-42,共8页
本研究以Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞作为培养基质扩增猪流感病毒,并选择甲醛和β-丙内酯(BPL)两种化学灭活剂对病毒灭活。这两种灭活试剂最佳灭活条件为0.1%甲醛终浓度及37℃灭活24 h,以及0.02%BPL终浓度及4℃灭活18 h,灭活后抗原血凝... 本研究以Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞作为培养基质扩增猪流感病毒,并选择甲醛和β-丙内酯(BPL)两种化学灭活剂对病毒灭活。这两种灭活试剂最佳灭活条件为0.1%甲醛终浓度及37℃灭活24 h,以及0.02%BPL终浓度及4℃灭活18 h,灭活后抗原血凝效价比原始病毒低1个滴度左右。在不同灭活剂基础上分别配伍油佐剂ISA 201 VG和水佐剂HA 208乳化,在BALB/c小鼠上对灭活疫苗进行免疫评估及攻毒保护评价,攻毒使用剂量为1×10~6 TCID50/只。甲醛灭活苗相比BPL灭活苗更能刺激小鼠产生高水平的HI抗体,佐剂选用油佐剂ISA 201 VG相比水佐剂HA 208所产生的HI抗体效价更高。攻毒后疫苗免疫组的存活率均达到100%,与对照组相比免疫组肺脏样品中病毒含量明显减少。据以上试验结果,初步认为甲醛+ISA 201 VG佐剂灭活苗对BALB/c小鼠所产生的免疫效果最佳并能较好地抵抗欧亚类禽猪流感病毒的攻击。以上研究结果为后续猪流感全病毒灭活疫苗的设计以及病毒灭活生产工艺提供了一定的研究基础。 展开更多
关键词 欧亚类禽H1n1 甲醛 BPL 全病毒灭活疫苗 免疫效力评价
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1株鸭源H4N1亚型禽流感病毒的遗传进化及致病性分析
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作者 毛秋艳 司汇通 +4 位作者 张雅馨 刘朔 彭程 蒋文明 刘华雷 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第5期1002-1008,共7页
为探究我国H4N1亚型禽流感病毒(AIV)的遗传进化特征和生物学特性,本研究对2020年从南方地区活禽市场分离到的1株鸭源H4N1亚型AIV(DK/GX/E1424/20)进行了全基因组测序、遗传进化分析及BALB/c小鼠的致病性试验。结果显示,该分离株的HA蛋... 为探究我国H4N1亚型禽流感病毒(AIV)的遗传进化特征和生物学特性,本研究对2020年从南方地区活禽市场分离到的1株鸭源H4N1亚型AIV(DK/GX/E1424/20)进行了全基因组测序、遗传进化分析及BALB/c小鼠的致病性试验。结果显示,该分离株的HA蛋白裂解位点基序为PEKASR/GLF,符合低致病性AIV的特征;8个基因片段均位于欧亚谱系,与野生水禽体内分离的H1N1、H3N8、H4N6、H6N1及H10N8亚型AIV相关基因的同源性最高,为重组病毒株;未经提前适应可在小鼠的肺脏和鼻甲中有效复制,病毒滴度分别为3.00和2.08 log10EID50/mL,并导致感染小鼠的体质量下降。结果表明,该H4N1亚型AIV具有显著的遗传多样性,对小鼠呈低致病性,但具备感染哺乳动物的潜在风险。 展开更多
关键词 H4n1 禽流感病毒 遗传进化 重组病毒 致病性
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小型猪听觉皮层诱发电位P1-N1-P2波的特性研究
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作者 杨崇灵 唐菲 +3 位作者 钟旻璇 郭维维 吕萍 刘军 《中华耳科学杂志》 北大核心 2025年第8期953-957,共5页
目的建立小型猪听觉皮层诱发电位(cortical auditory evoked potential,CAEP)检测方法,分析正常听力小型猪P1-N1-P2波形特点.方法选用正常听力雄性小型猪4头,在麻醉状态下予以短纯音刺激,记录CAEP P1-N1-P2波形,并分析其潜伏期及幅值.结... 目的建立小型猪听觉皮层诱发电位(cortical auditory evoked potential,CAEP)检测方法,分析正常听力小型猪P1-N1-P2波形特点.方法选用正常听力雄性小型猪4头,在麻醉状态下予以短纯音刺激,记录CAEP P1-N1-P2波形,并分析其潜伏期及幅值.结果4头(8耳)小型猪均记录到CAEP P1-N1-P2波,检出率100%,P1波潜伏期平均为(45.13±14.07)ms,N1波潜伏期平均为(96.00±10.72)ms,P2波潜伏期平均为(135.13±13.95)ms,P1-N1平均幅值(2.21±1.04)μV,N1-P2平均幅值(1.37±0.37)μV.结论小型猪的CAEP可反映小型猪听皮层功能,P1-N1-P2波与人类相似;小型猪有望作为听皮层功能研究的动物模型. 展开更多
关键词 小型猪 听皮层 听觉皮层诱发电位 P1-n1-P2 潜伏期 幅值
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血清CRP、SAA、IL-6水平联合检测对甲型H1N1流感的诊断价值 被引量：1
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作者 赵静 杜豪伟 杨翠 《淮海医药》 2025年第1期5-8,共4页
目的:探究甲型H1N1流感患者血清C-反应蛋白(CRP)、淀粉酶A蛋白(SAA)、白细胞介素-6(IL-6)水平并分析其对甲型H1N1流感的诊断价值。方法:选取2020年6月—2023年6月某院收治的102例甲型H1N1流感患儿为甲流组,乙型流感病毒患儿102例为乙流... 目的:探究甲型H1N1流感患者血清C-反应蛋白(CRP)、淀粉酶A蛋白(SAA)、白细胞介素-6(IL-6)水平并分析其对甲型H1N1流感的诊断价值。方法:选取2020年6月—2023年6月某院收治的102例甲型H1N1流感患儿为甲流组,乙型流感病毒患儿102例为乙流组,另选取同期健康志愿者34例为对照组。比较3组血清CRP、SAA、IL-6水平及实验室指标,依据病情严重程度将甲流组分为轻症者76例、重症者26例,比较其血清CRP、SAA、IL-6水平,分析血清CRP、SAA、IL-6水平与实验室指标、病情严重程度相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析各血清指标对甲型H1N1流感的诊断价值。结果:甲流组血清CRP、SAA、IL-6水平分别为(5.62±1.47)mg/L、(43.26±11.42)mg/L、(15.96±4.32)ng/mL,高于乙流组的(4.11±1.30)mg/L、(36.57±11.19)mg/L、(12.24±3.08)ng/mL和对照组的(2.18±0.70)mg/L、(12.52±4.08)mg/L、(6.85±2.18)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。重症者血清CRP、SAA、IL-6水平分别为(8.16±2.52)mg/L、(52.32±11.44)mg/L、(24.55±6.18)ng/mL,高于轻症者的(4.75±1.38)mg/L、(40.16±10.38)mg/L、(13.02±3.34)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。血清CRP、SAA、IL-6水平与中性粒细胞百分比呈负相关,与单核细胞百分比、病情严重程度呈正相关(P<0.05);血清CRP、SAA、IL-6水平单项及联合诊断甲型H1N1流感的AUC值分别为0.761、0.746、0.780、0.932。结论:甲型H1N1流感患儿血清CRP、SAA、IL-6水平升高,且与病情严重程度呈正相关,联合检测对甲型H1N1流感具有一定诊断价值。 展开更多
关键词 甲型H1n1流感 C-反应蛋白 淀粉酶A蛋白 白细胞介素-6 诊断价值
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基于甲型H1N1流感病毒继发金黄色葡萄球菌感染小鼠模型探究金银花药效及作用机制
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作者 王晨 李勋 +7 位作者 高燕 毛志海 周思琴 吴高峰 才太吉 高树华 张永文 赵渤年 《药物评价研究》 北大核心 2025年第5期1155-1166,共12页
目的建立甲型H1N1流感病毒(H1N1)继发金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus感染模型,探讨金银花水提物(LJAE)对该模型药效及机制。方法小鼠按体质量随机分为对照组、模型组、磷酸奥司他韦(OT,抗病毒阳性药,11 mg·kg^(-1),临床等效... 目的建立甲型H1N1流感病毒(H1N1)继发金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus感染模型,探讨金银花水提物(LJAE)对该模型药效及机制。方法小鼠按体质量随机分为对照组、模型组、磷酸奥司他韦(OT,抗病毒阳性药,11 mg·kg^(-1),临床等效剂量)组、头孢克洛缓释片(CF,抗菌阳性药,106.38 mg·kg^(-1),临床等效剂量)组和LJAE低、中、高剂量(6.5、13.0、26.0 mL·kg^(-1))组,除对照组外,建立致死型H1N1继发S.aureus模型,连续给药5 d,观察死亡率;除对照组外,建立亚致死性H1N1继发S.aureus模型,连续给药5 d,测定肺指数,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肺病毒量,平板法检测肺菌量,苏木精-伊红(HE)染色观察肺损伤;瑞氏-吉姆萨染色法测定肺泡灌洗液中巨噬细胞和中性粒细胞数目;通过qRT-PCR法检测肺单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、趋化因子(C-X-C基序)配体1(CXCL-1)m RNA表达量;ELISA法检测肺组织MCP-1、TNF-α、IFN-γ水平;流式细胞术测定外周血CD4+IFN-γ+(Th1)和CD4+IL-4+(Th2)细胞比例。结果与模型组比较,LJAE显著降低致死型H1N1继发S.aureus模型小鼠的死亡率(P<0.05、0.01、0.001),显著降低亚致死型H1N1继发S.aureus模型小鼠的肺指数(P<0.001)、肺病毒量(P<0.001)和肺菌量(P<0.001),减轻肺病理损伤;LJAE显著减少肺部中性粒细胞和巨噬细胞的募集(P<0.001),显著降低趋化因子MCP-1和促炎细胞因子TNF-α和IFN-γmRNA和蛋白的表达(P<0.001),降低外周血单核细胞CD4+IFN-γ+/CD4+IL-4+(P<0.001)。结论LJAE具有显著的抗H1N1继发S.aureus感染的活性,能够通过调节过激的Th1型免疫反应,抑制Th1型细胞因子MCP-1、TNF-α和IFN-γ的释放,减轻肺部炎症细胞的过度浸润,修复H1N1继发S.aureus引发的肺损伤。 展开更多
关键词 金银花 甲型H1n1流感病毒 金黄色葡萄球菌 继发感染 巨噬细胞 TH1/TH2
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上感颗粒对H1N1流感病毒感染小鼠免疫功能及JAK2/STAT3信号通路的影响 被引量：2
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作者 郭志洪 李修元 +3 位作者 张梦楠 刘林洁 杨峰 敖素华 《中成药》 北大核心 2025年第2期606-611,共6页
目的观察上感颗粒对甲型H1N1流感病毒感染小鼠肺部炎症反应的作用。方法42只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、奥司他韦组(1.25 mg/kg)和上感颗粒低、中、高剂量组(4、8、12 g/kg),鼻腔接种H1N1流感病毒建立流感病毒肺部感染小... 目的观察上感颗粒对甲型H1N1流感病毒感染小鼠肺部炎症反应的作用。方法42只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、奥司他韦组(1.25 mg/kg)和上感颗粒低、中、高剂量组(4、8、12 g/kg),鼻腔接种H1N1流感病毒建立流感病毒肺部感染小鼠模型,给药干预7 d。记录小鼠的死亡情况,检测肺组织含水量,HE染色观察肺组织病理变化,透射电镜观察肺组织超微结构损伤,ELISA法检测肺组织IL-4、IFN-γ、CCL3、CCL25、CXCL-10水平,流式细胞术检测外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞数,RT-qPCR和Western blot法检测肺组织JAK2、STAT mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,上感颗粒各剂量组小鼠肺组织含水量降低(P<0.01),肺泡灌洗液病毒滴度降低(P<0.01),肺组织损伤减轻,肺组织IL-4水平升高(P<0.05,P<0.01),IFN-γ、CCL3、CCL25、CXCL-10水平降低(P<0.05,P<0.01),外周血CD3^(+)、CD4^(+)T细胞数量和CD4^(+)/CD8^(+)比值均降低(P<0.01),肺组织JAK2、STAT 3 mRNA和p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论上感颗粒可以通过调节T细胞免疫和相关炎症因子的表达,增强流感病毒感染小鼠免疫能力和减轻流感病毒感染小鼠的肺组织损伤,其机制可能与下调JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 上感颗粒 H1n1流感病毒 炎症反应 细胞免疫 JAK2/STAT信号通路
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H5N1 HPAIV在哺乳动物中的流行事件及相关大流行的风险控制
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作者 徐婉旖 张富友 +3 位作者 刘朔 彭程 刘华雷 蒋文明 《中国动物检疫》 2025年第5期28-36,共9页
H5N1高致病性禽流感病毒(HPAIV)已从禽类扩散至全球多个哺乳动物物种。本文系统分析了2.3.4.4b分支H5N1 HPAIV在哺乳动物中的跨物种传播特征及其大流行风险。通过分析欧洲皮草动物(水貂、狐狸)、南美洲海洋哺乳动物(海狮、海豚)及美国... H5N1高致病性禽流感病毒(HPAIV)已从禽类扩散至全球多个哺乳动物物种。本文系统分析了2.3.4.4b分支H5N1 HPAIV在哺乳动物中的跨物种传播特征及其大流行风险。通过分析欧洲皮草动物(水貂、狐狸)、南美洲海洋哺乳动物(海狮、海豚)及美国奶牛群3个典型H5N1 HPAIV传播案例,揭示病毒可通过基因重配(如BB、B3.2、B3.13基因型)和获得哺乳动物适应性突变(如PB2 E627K、Q591K、D701N、M631L)等方式,突破宿主屏障传播。病毒在奶牛中通过乳腺组织嗜性实现乳汁传播,在海洋哺乳动物中呈现沿美洲海岸的扩散模式,同时发现人-动物界面(如污染环境、乳制品)存在溢出风险。诸多研究显示,病毒引发大流行需满足血凝素(HA)抗原新颖性、聚合酶适应性突变(PB2/PB1/PA)、HA稳定性改变三大条件,而基因组重组会加速宿主范围扩展。美国奶牛疫情中,病毒已形成规模化传播链(17州989个农场),伴随70例人类感染病例(41例与奶牛相关)。建议进一步强化监测,提升生物安全水平,加强疫苗研发,深入研究病毒传播机制和途径等,为H5N1 HPAIV的跨物种传播预警及大流行防控提供重要依据和有效策略。 展开更多
关键词 H5n1 HPAIV 哺乳动物 大流行 防控
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疏风解毒胶囊对甲型流感病毒H1N1特异性抗体的影响
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作者 李欣颖 包蕾 +7 位作者 李舒冉 赵荣华 孙静 谢丹 鲍岩岩 郭姗姗 崔晓兰 耿子涵 《中国药物警戒》 2025年第8期841-850,862,共11页
目的探讨疏风解毒胶囊(SFJD)对甲型流感病毒(H1N1)感染小鼠特异性抗体分泌的影响,并通过体外模型研究其对B细胞激活的调控机制。方法建立H1N1非致死性感染小鼠模型,随机分为正常组,PR8模型组,阳性药磷酸奥司他韦组(27.5 mg·kg^(-1)... 目的探讨疏风解毒胶囊(SFJD)对甲型流感病毒(H1N1)感染小鼠特异性抗体分泌的影响,并通过体外模型研究其对B细胞激活的调控机制。方法建立H1N1非致死性感染小鼠模型,随机分为正常组,PR8模型组,阳性药磷酸奥司他韦组(27.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)),SFJD高、中剂量组(2.288 g·kg^(-1)·d^(-1)、1.144 g·kg^(-1)·d^(-1)),并将各组小鼠随机分为感染第0、2、4、6、8天共计5个时间点组。第0至第4天进行灌胃给药,于以上时间点对各组小鼠取材,分别称量各组小鼠肺重和体重,计算肺指数;采用高通量液相蛋白芯片多因子法,检测肺泡灌洗液中的总IgA、IgM、IgG;采用酶联免疫吸附法(ELISA),检测H1N1特异性IgA、IgM与IgG。于第8天,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-Time PCR)法,检测各组小鼠肺组织病毒载量;使用Micro-CT,观察小鼠肺部影像;采用流式分析法,检测外周血和肺泡灌洗液B细胞百分比。将人肺上皮细胞(BEAS-2B)分为正常对照组,病毒感染组,阳性药组(62.5μmol·L^(-1)),SFJD高、中剂量组(15.6、7.8μg·mL^(-1));小鼠肺上皮细胞(MLE12)分为正常对照组,病毒感染组,阳性药组(250μmol·L^(-1)),SFJD高、中剂量组(62.5、31.3μg·mL^(-1))。采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法,检测SFJD对呼吸道上皮细胞B细胞刺激因子(BAFF)表达的影响。结果SFJD可降低第4天至第8天H1N1感染小鼠的肺指数(P<0.05);降低第8天病毒载量(P<0.01),减轻炎症病变,升高外周血及肺组织中的B细胞比例(P<0.01,P<0.001);降低第8天肺泡灌洗液中总IgA水平,升高总IgM水平(P<0.01);降低第4天肺泡灌洗液中特异性IgA(P<0.0001)的分泌、促进第8天特异性IgM(P<0.0001)、IgG(P<0.0001)的分泌;同时,SFJD可抑制呼吸道上皮细胞系BAFF表达(P<0.05,P<0.001)。结论SFJD在H1N1感染早期给药,可恢复外周血B细胞比例,促进其向肺组织浸润,增强病毒特异性IgM和IgG分泌,发挥抗病毒效果。同时,SFJD通过抑制呼吸道上皮细胞BAFF表达,防止B细胞过度激活,进而调节感染后的体液免疫应答。 展开更多
关键词 甲型流感病毒H1n1 病毒性肺炎 疏风解毒胶囊 B细胞刺激因子 特异性抗体
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儿童甲型H1N1流行性感冒相关性脑病死亡危险因素分析 被引量：1
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作者 李珊珊 胡丹丹 《临床儿科杂志》 北大核心 2025年第3期177-183,190,共8页
目的寻找儿童甲型H1N1流行性感冒(简称流感)相关性脑病(IAE)死亡的危险因素,为临床早期诊断及干预提供依据。方法回顾性分析2014年1月至2020年12月医院收治的甲型H1N1 IAE患儿的临床资料,按预后分为存活组与死亡组。通过二分类logistic... 目的寻找儿童甲型H1N1流行性感冒(简称流感)相关性脑病(IAE)死亡的危险因素,为临床早期诊断及干预提供依据。方法回顾性分析2014年1月至2020年12月医院收治的甲型H1N1 IAE患儿的临床资料,按预后分为存活组与死亡组。通过二分类logistic回归分析与甲型H1N1 IAE患儿死亡相关的危险因素。结果共纳入甲型H1N1 IAE 59例患儿,男39例、女20例,中位年龄为42(21~73)个月,<5岁患儿占66.1%(39/59)。出现神经系统症状与发热相距时间中位数为1(0.5~2)天。33例(55.9%)患儿并发重症肺炎、呼吸衰竭,其中1例并发塑型性支气管炎。58例患儿使用奥司他韦抗流感治疗,发病至使用抗流感药物中位时间为2(1~4)天。好转出院48例,死亡11例(18.6%),入院至死亡中位时间为3(1~5)天。与存活组相比,死亡组意识障碍、呼吸衰竭、脑疝发生率以及需要机械通气治疗的比例更高,中性粒细胞计数更高,降钙素原、血糖、天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶水平更高,凝血酶原时间更长,头颅CT异常比例更高,单核细胞计数更低,差异均有统计学意义(P<0.05)。二分类logistic回归分析结果发现,中性粒细胞计数以及乳酸脱氢酶水平升高可能与甲型H1N1 IAE患儿死亡发生相关(P<0.05)。结论对于甲型H1N1 IAE患儿,如中性粒细胞计数和乳酸脱氢酶水平升高时,发生死亡的风险可能增加,需引起重视。 展开更多
关键词 甲型H1n1流感 脑病 死亡 危险因素 儿童
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利用反向遗传学技术拯救重组H1N1 pdm09亚型流感病毒
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作者 黎燕 周克茹 +1 位作者 季旻珺 王桂芹 《南京医科大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期319-326,共8页
目的:利用反向遗传学技术拯救重组H1N1 pdm09病毒,评价其在MDCK细胞和鸡胚内的生长特性以及对BALB/c小鼠的致病性。方法:RT-PCR技术扩增A/Puerto Rico/8/1934(简称PR8)病毒基因片段,并克隆至pHW2000双向表达载体上。全球共享流感数据倡... 目的:利用反向遗传学技术拯救重组H1N1 pdm09病毒,评价其在MDCK细胞和鸡胚内的生长特性以及对BALB/c小鼠的致病性。方法:RT-PCR技术扩增A/Puerto Rico/8/1934(简称PR8)病毒基因片段,并克隆至pHW2000双向表达载体上。全球共享流感数据倡议组织(global initiative of sharing all influenza data,GISAID)数据库中下载A/Wisconsin/588/2019(H1N1)的血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)序列,将其HA非编码区替换为A/California/07/2009(H1N1)的HA非编码区。全基因合成A/Wisconsin/588/2019的HA和NA片段,分别克隆至pHW2000双向表达载体上。将PR8病毒6个内部基因重组质粒与A/Wisconsin/588/2019的HA和NA重组质粒共转染293T细胞与MDCK细胞,拯救重组病毒。对重组病毒进行血凝效价测定和RT-PCR鉴定以判断是否拯救成功。将重组病毒接种MDCK细胞和9~10日龄鸡胚,评价其生长特性并绘制生长曲线。将重组病毒以滴鼻方式感染BALB/c小鼠,记录小鼠体重变化和生存率以评价其致病性。结果:成功拯救出重组A/Wisconsin/588/2019病毒,血凝效价为1∶8,测序鉴定其HA和NA序列与预期一致,重组病毒接种MDCK细胞后72 h,大部分细胞完全脱落,病毒滴度为10^(5.38)TCID_(50)/mL,复制高峰期为接种后60 h,接种鸡胚后的血凝效价最高可达1∶2^(8)。重组病毒(病毒稀释比为1∶1)滴鼻BALB/c小鼠后第8天,小鼠全部死亡,对小鼠的半数致死剂量为10^(-1.38)/50μL。结论:成功拯救一株重组H1N1pdm09病毒,该病毒在MDCK细胞上生长良好且具有良好的鸡胚适应性,对小鼠具有致病性和致死性,为反向遗传学技术快速拯救流感病毒提供新思路。 展开更多
关键词 季节性流感 H1n1 反向遗传学技术
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