目的建立美洲大蠊的HPLC指纹图谱,并运用一测多评法(quantitative analysis of multi-components with a singlemarker,QAMS)测定9种氨基酸的含量,综合评价美洲大蠊氨基酸质量差异。方法样品在6 mol∙L^(−1)盐酸溶液中120℃水解6 h,再与...目的建立美洲大蠊的HPLC指纹图谱,并运用一测多评法(quantitative analysis of multi-components with a singlemarker,QAMS)测定9种氨基酸的含量,综合评价美洲大蠊氨基酸质量差异。方法样品在6 mol∙L^(−1)盐酸溶液中120℃水解6 h,再与异硫氰酸苯酯(phenylisothiocyanate,PITC)40℃水浴1 h进行衍生化反应。衍生化产物分析采用Kromasil 100-5-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1 mol∙L^(−1)乙酸钠溶液(pH 6.5±0.05)-乙腈(97∶3)为流动相A,乙腈-水(4∶1)为流动相B,梯度洗脱,流速0.8 mL∙min^(−1),检测波长254 nm,柱温40℃,进样量2μL。对指纹图谱进行相似度评价、聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)。建立内参物丙氨酸与甘氨酸、精氨酸、苏氨酸、酪氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸及苯丙氨酸的相对校正因子(f)并对其耐用性考察。采用外标法(external standard method,ESM)与QAMS分别测定16批美洲大蠊中9个氨基酸含量,并用独立样本t检验比较验证QAMS方法的准确性。结果采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)、SPSS 27.0与SIMCA 14.1分析16批美洲大蠊的氨基酸指纹图谱:标定17个共有峰,明确15个已知成分;16批次的相似度在0.888~0.982,表明其质量一致性较好;CA与PCA结果均分为3大类,意味着不同产地质量存在一定差异;OPLS-DA筛选了脯氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、亮氨酸、丙氨酸及共有峰9共8个主要的质量差异标志物。含量测定方面,9个成分的专属性、线性关系(r≥0.9999)、精密度、重复性、稳定性均良好,平均加样回收率在98.70%~101.93%,RSD在1.05%~2.24%。QAMS方法学验证内参物丙氨酸与8个氨基酸的f分别为甘氨酸0.8338、精氨酸1.9641、苏氨酸1.4489、酪氨酸1.8306、缬氨酸1.2767、异亮氨酸1.3816、亮氨酸1.4082、苯丙氨酸1.6542。t检验结果ESM法与QAMS法含量测定结果差异无统计学意义。结论本研究所构建的HPLC指纹图谱与QAMS结合方法操作简便、专属性强、重现性好,能够有效评价美洲大蠊氨基酸的组成,为美洲大蠊药材及其提取物中氨基酸成分的质量控制奠定理论基础。展开更多
目的建立积雪草提取物的薄层色谱法(thin-layer chromatography,TLC)鉴别方法和高效液相色谱定量方法,并结合一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)实现积雪草苷、积雪草苷B和羟基积雪草苷的定...目的建立积雪草提取物的薄层色谱法(thin-layer chromatography,TLC)鉴别方法和高效液相色谱定量方法,并结合一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)实现积雪草苷、积雪草苷B和羟基积雪草苷的定量测定。方法首先采用TLC对积雪草提取物进行定性鉴别,确保样品的真实性;其次采用高效液相色谱法进行含量测定,流动相分别为2 mmol/Lβ-环糊精溶液和乙腈,检测波长为205 nm。以羟基积雪草苷为参照物,计算其他两种物质的相对校正因子,并将测定含量与外标法测定结果进行比较。结果3种成分在10~500 mg/L范围内线性关系良好,不同浓度水平的加标回收率范围为87.0%~108.2%,相对标准偏差为3.1%~5.2%,方法具有良好的精密度、重复性和稳定性。QAMS与外标法测定积雪草提取物中3种特征性成分的含量一致性良好。结论TLC鉴别方法结合QAMS方法实现定性定量检测,能够对积雪草提取物的质量控制提供技术支持。展开更多
目的建立一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)同时测定小陷胸汤中次黄嘌呤、香草酸、木兰花碱、去亚甲基小檗碱、非洲防己碱、药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量。方法本实...目的建立一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)同时测定小陷胸汤中次黄嘌呤、香草酸、木兰花碱、去亚甲基小檗碱、非洲防己碱、药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量。方法本实验采用色谱柱Spursil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液加磷酸调pH=4.0为流动相,检测波长:0~20 min:290 nm;20~45 min:300 nm,柱温30℃,进样量10μL。以盐酸小檗碱为内参物,分别计算其余8个成分的相对校正因子并计算各成分含量,比较外标法(external standard method,ESM)和QAMS法结果的差异。结果小陷胸汤9个成分在一定浓度范围与峰面积呈良好的线性关系(r>0.9980),平均加样回收率为94.36%~105.57%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.52%~3.48%,QAMS法与ESM法测定的结果无显著性差异。结论本研究建立的小陷胸汤QAMS法结果准确可靠,该方法简便易行,可用于小陷胸汤的质量控制。展开更多
目的:建立一测多评法(QAMS)同时测定蒙古族成药每粒清热八味胶囊中胆红素、羟基红花黄色素A、芦丁、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅰ、肉桂酸、槲皮素、紫堇灵、山柰素的质量。方法:采用高效液相色谱法,安捷伦Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱(250...目的:建立一测多评法(QAMS)同时测定蒙古族成药每粒清热八味胶囊中胆红素、羟基红花黄色素A、芦丁、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅰ、肉桂酸、槲皮素、紫堇灵、山柰素的质量。方法:采用高效液相色谱法,安捷伦Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^(–1),检测波长分别为275、370、403 nm,柱温为35℃。以羟基红花黄色素A和胡黄连苷Ⅰ为双标化合物,使用双标线性校正法(LCTRC)预测tR。以胡黄连苷Ⅰ为内参物,建立与其他8个成分的相对校正因子,并计算每粒中9个待测成分的质量,实现一测多评。同时与外标法进行比较,验证QAMS的准确性和可行性。结果:9个成分在各自质量浓度范围内的线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率为93.0%~99.8%,RSD为0.23%~1.53%;建立的QAMS可用于测定每粒清热八味胶囊中9个指标成分的质量,并对6批清热八味胶囊进行测定,其计算值与测定值的差异无统计学意义。结论:QAMS测定清热八味胶囊中9个成分准确且可行,可用于清热八味胶囊的质量控制。展开更多
文摘目的建立积雪草提取物的薄层色谱法(thin-layer chromatography,TLC)鉴别方法和高效液相色谱定量方法,并结合一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)实现积雪草苷、积雪草苷B和羟基积雪草苷的定量测定。方法首先采用TLC对积雪草提取物进行定性鉴别,确保样品的真实性;其次采用高效液相色谱法进行含量测定,流动相分别为2 mmol/Lβ-环糊精溶液和乙腈,检测波长为205 nm。以羟基积雪草苷为参照物,计算其他两种物质的相对校正因子,并将测定含量与外标法测定结果进行比较。结果3种成分在10~500 mg/L范围内线性关系良好,不同浓度水平的加标回收率范围为87.0%~108.2%,相对标准偏差为3.1%~5.2%,方法具有良好的精密度、重复性和稳定性。QAMS与外标法测定积雪草提取物中3种特征性成分的含量一致性良好。结论TLC鉴别方法结合QAMS方法实现定性定量检测,能够对积雪草提取物的质量控制提供技术支持。
文摘目的建立一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)同时测定小陷胸汤中次黄嘌呤、香草酸、木兰花碱、去亚甲基小檗碱、非洲防己碱、药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量。方法本实验采用色谱柱Spursil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液加磷酸调pH=4.0为流动相,检测波长:0~20 min:290 nm;20~45 min:300 nm,柱温30℃,进样量10μL。以盐酸小檗碱为内参物,分别计算其余8个成分的相对校正因子并计算各成分含量,比较外标法(external standard method,ESM)和QAMS法结果的差异。结果小陷胸汤9个成分在一定浓度范围与峰面积呈良好的线性关系(r>0.9980),平均加样回收率为94.36%~105.57%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.52%~3.48%,QAMS法与ESM法测定的结果无显著性差异。结论本研究建立的小陷胸汤QAMS法结果准确可靠,该方法简便易行,可用于小陷胸汤的质量控制。
文摘目的:建立一测多评法(QAMS)同时测定蒙古族成药每粒清热八味胶囊中胆红素、羟基红花黄色素A、芦丁、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅰ、肉桂酸、槲皮素、紫堇灵、山柰素的质量。方法:采用高效液相色谱法,安捷伦Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^(–1),检测波长分别为275、370、403 nm,柱温为35℃。以羟基红花黄色素A和胡黄连苷Ⅰ为双标化合物,使用双标线性校正法(LCTRC)预测tR。以胡黄连苷Ⅰ为内参物,建立与其他8个成分的相对校正因子,并计算每粒中9个待测成分的质量,实现一测多评。同时与外标法进行比较,验证QAMS的准确性和可行性。结果:9个成分在各自质量浓度范围内的线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率为93.0%~99.8%,RSD为0.23%~1.53%;建立的QAMS可用于测定每粒清热八味胶囊中9个指标成分的质量,并对6批清热八味胶囊进行测定,其计算值与测定值的差异无统计学意义。结论:QAMS测定清热八味胶囊中9个成分准确且可行,可用于清热八味胶囊的质量控制。
