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雷公藤多苷片通过VDR/DDIT4/mTOR信号通路调控糖尿病肾病大鼠的自噬机制
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作者 梁爽 宋纯东 +5 位作者 段凤阳 张博 张霞 丁樱 任献青 翟文生 《中华中医药杂志》 北大核心 2026年第1期72-77,共6页
目的:探讨雷公藤多苷片(GTW)对糖尿病肾病(DKD)大鼠VDR/DDIT4/mTOR信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机分为空白组6只、造模组24只,空白组采用普通饮食喂养,造模组采用高脂高糖饲料+一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造模法,造模成功后随... 目的:探讨雷公藤多苷片(GTW)对糖尿病肾病(DKD)大鼠VDR/DDIT4/mTOR信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机分为空白组6只、造模组24只,空白组采用普通饮食喂养,造模组采用高脂高糖饲料+一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造模法,造模成功后随机分为模型组、代文组、雷公藤多苷(GTW)组,自第9周起开始灌胃,空白组和模型组予等体积蒸馏水,代文组予缬沙坦灌胃,GTW组予GTW灌胃,连续灌胃6周后,检测各组大鼠血清白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、葡萄糖(GLU)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、24小时尿蛋白总量(24 h-UTP),HE染色观察肾脏组织学病变,分别用PCR和Western Blot检测大鼠肾组织中VDR、DDIT4、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、自噬基因unc-51样激酶1(ULK1)mRNA及蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠24 h-UTP、BUN、SCr、ALT、CHO、TG、GLU均显著升高(P<0.01),ALB显著下降(P<0.01);肾组织中VDR、DDIT4、ULK1蛋白及mRNA表达均显著下降(P<0.01),mTOR蛋白及mRNA表达均显著升高(P<0.01),p-mTOR蛋白表达显著升高(P<0.01);肾组织病理明显损伤。与模型组比较,各给药组大鼠24 h-UTP、BUN、SCr、ALT、CHO、TG、GLU均显著降低(P<0.01),ALB显著升高(P<0.01);肾组织中VDR、DDIT4、ULK1蛋白及mRNA表达均显著升高(P<0.01),mTOR蛋白及mRNA表达均显著下降(P<0.01),p-mTOR蛋白表达显著下降(P<0.01);肾小球形态基本正常、系膜细胞增生及炎性细胞浸润减轻。结论:GTW可以降低DKD大鼠24 h-UTP,保护肾功能,降低血脂,改善肾脏病理损伤,其机制可能与其调节VDR/DDIT4/mTOR信号通路表达,改善自噬有关。 展开更多
关键词 雷公藤多苷片 糖尿病肾病 VDR/DDIT4/mtor信号通路 自噬 肾损伤 机制
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基于PTEN/AKT/mTOR通路探讨补心泻肺方改善慢性心力衰竭小鼠心肌纤维化的作用机制
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作者 黄培红 孙丹淳 +2 位作者 马惠旋 王远平 靳利利 《中药新药与临床药理》 北大核心 2026年第1期52-60,共9页
目的基于PTEN/AKT/mTOR通路探讨补心泻肺方改善慢性心力衰竭(CHF)小鼠心肌纤维化的作用及分子机制。方法采用腹腔注射盐酸异丙肾上腺素(5 mg·kg^(-1),每日2次,共14 d)建立C57/BL6J小鼠慢性心力衰竭模型,将小鼠随机分为对照组、模... 目的基于PTEN/AKT/mTOR通路探讨补心泻肺方改善慢性心力衰竭(CHF)小鼠心肌纤维化的作用及分子机制。方法采用腹腔注射盐酸异丙肾上腺素(5 mg·kg^(-1),每日2次,共14 d)建立C57/BL6J小鼠慢性心力衰竭模型,将小鼠随机分为对照组、模型组及补心泻肺方低(2.9 g·kg^(-1))、中(5.8 g·kg^(-1))、高(11.6 g·kg^(-1))剂量组和培哚普利组(0.41 mg·kg^(-1))。补心泻肺方各剂量组和培哚普利组灌胃相应药物,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,共4周。采用小动物心脏彩超检测左心室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)水平;HE染色法观察小鼠心脏组织病理变化;Masson染色观察心肌纤维化变化;qRT-PCR法检测心脏组织中α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢmRNA表达水平;Western Blot法检测心脏组织α-SMA、CollagenⅠ、Collagen III、PTEN、p-AKT、p-mTOR、AKT、mTOR蛋白表达水平。结果(1)与对照组比较,模型组小鼠的LVEF和LVFS值明显降低(P<0.01),LVEDD、LVESD、LVEDV和LVESV值明显升高(P<0.01);HE染色显示模型组小鼠的心肌细胞边缘界限不清晰,细胞肿胀,局部炎症细胞浸润;Masson染色显示心肌纤维沉积;心脏组织α-SMA,CollagenⅠ和CollagenⅢ的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01);PTEN蛋白表达水平明显升高(P<0.01),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值明显降低(P<0.01)。(2)与模型组比较,补心泻肺方低、中、高剂量组小鼠的LVEF、LVFS值明显升高(P<0.01),LVEDD、LVESD、LVEDV和LVESV值明显降低(P<0.01);心脏组织病理损伤和纤维化明显改善;心脏组织α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);PTEN蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR比值明显升高(P<0.01)。结论补心泻肺方能够有效改善慢性心力衰竭小鼠心功能,抑制心室重构,其作用机制可能与调节PTEN/AKT/mTOR信号通路介导的心肌纤维化有关。 展开更多
关键词 补心泻肺方 慢性心力衰竭 心肌纤维化 心室重构 PTEN/AKT/mtor通路 小鼠
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异氟醚调节AMPK/mTOR信号通路减轻大鼠缺氧/复氧所致的心肌细胞损伤
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作者 陈艳林 张晓敏 +3 位作者 刘娜 袁慧敏 邢珍 姚杰 《中国医科大学学报》 北大核心 2026年第3期259-264,271,共7页
目的探讨异氟醚调节AMPK/mTOR信号通路减轻大鼠缺氧/复氧(H/R)所致的心肌细胞损伤的作用机制。方法以不同浓度异氟醚处理H/R诱导的大鼠心肌H9c2细胞,采用MTT法筛选异氟醚的最佳作用浓度。将大鼠心肌H9c2细胞随机分为空白组、H/R组、异... 目的探讨异氟醚调节AMPK/mTOR信号通路减轻大鼠缺氧/复氧(H/R)所致的心肌细胞损伤的作用机制。方法以不同浓度异氟醚处理H/R诱导的大鼠心肌H9c2细胞,采用MTT法筛选异氟醚的最佳作用浓度。将大鼠心肌H9c2细胞随机分为空白组、H/R组、异氟醚组、化合物C(CC)组、异氟醚+CC组,除空白组外的其余各组进行H/R处理,用异氟醚和AMPK抑制剂CC分组干预后,采用CCK-8法、JC-1荧光染色、流式细胞术分别检测各组细胞活力、线粒体膜电位(ΔΨm)及凋亡率;用透射电镜观察各组H9c2细胞超微结构;用流式细胞术检测各组细胞活性氧(ROS)水平;测定各组H9c2细胞抗氧化酶活性与炎性细胞因子水平;用Western blotting检测各组H9c2细胞AMPK/mTOR信号通路蛋白表达。结果与空白组相比,H/R组细胞活力、ΔΨm、过氧化氢酶(CAT)与超氧化物歧化酶(SOD)活性水平、p-AMPK/AMPK降低,凋亡率、ROS水平、白细胞介素-6(IL-6)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05)。与H/R组相比,异氟醚组细胞活力、ΔΨm升高,凋亡率、ROS水平、IL-6与TNF-α水平、p-mTOR/mTOR降低;CC组细胞各指标变化与异氟醚组相反(P均<0.05)。与异氟醚组相比,异氟醚+CC组细胞活力、ΔΨm降低,凋亡率、ROS水平、IL-6与TNF-α水平、p-mTOR/mTOR升高(P均<0.05)。结论异氟醚可通过激活AMPK/mTOR信号通路减轻H/R心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 异氟醚 AMPK/mtor 缺氧/复氧 心肌细胞 保护作用
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基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨电针对慢性睡眠剥夺大鼠神经元自噬的影响
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作者 吴建丽 蔡品一 +4 位作者 张淑香 陆阁玲 郭晨 贾坤平 张淼 《中国针灸》 北大核心 2026年第2期236-243,共8页
目的:观察电针“风池”和“供血”对慢性睡眠剥夺(CSD)模型大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路和海马神经元自噬的影响,探讨电针治疗CSD相关认知损伤的可能作用机制。方法:从筛选出的65只认知... 目的:观察电针“风池”和“供血”对慢性睡眠剥夺(CSD)模型大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路和海马神经元自噬的影响,探讨电针治疗CSD相关认知损伤的可能作用机制。方法:从筛选出的65只认知功能正常Wistar大鼠中随机取12只为对照组,其余大鼠采用改良的多平台水环境法制备CSD模型,将造模成功的48只大鼠随机分为模型组、电针组、激活剂组和电针+激活剂组,每组12只。电针组予电针双侧“风池”和“供血”,每次20 min,每天1次。激活剂组大鼠腹腔注射PI3K激活剂740Y-P溶液(0.02 mg/kg),每天1次。电针+激活剂组大鼠在电针干预后,进行腹腔注射740Y-P溶液。以上各组连续干预14 d。采用水迷宫试验评价大鼠的认知能力,高尔基染色法观察大鼠海马CA1区树突分支形态和树突棘数量,Western blot法检测大鼠海马组织磷酸化PI3K(p-PI3K)、PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)、AKT、磷酸化m TOR(p-m TOR)、m TOR、微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、苄氯素-1(Beclin-1)蛋白表达,免疫荧光染色法检测大鼠海马CA1区Beclin-1、LC3阳性表达。结果:与对照组比较,模型组和激活剂组大鼠逃避潜伏期延长、穿越平台次数减少(P<0.05),海马CA1区锥体神经元主干树突分支较少,树突棘密度降低(P<0.05),海马CA1区Beclin-1和LC3阳性表达降低(P<0.05),海马组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-m TOR/m TOR比值升高(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组、激活剂组和电针+激活剂组比较,电针组大鼠逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增加(P<0.05),海马CA1区树突分支丰富,树突棘密度升高(P<0.05),海马CA1区Beclin-1和LC3阳性表达升高(P<0.05),海马组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-m TOR/m TOR的比值降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论:电针“风池”“供血”能够促进树突棘的形成,提高突触可塑性,改善CSD大鼠的神经认知功能,其机制可能与抑制PI3K/AKT/m TOR通路,激活海马神经元自噬有关。 展开更多
关键词 慢性睡眠剥夺 认知障碍 电针 神经元自噬 突触 PI3K/AKT/mtor信号通路
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和厚朴酚调节mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路对烟曲霉菌性角膜炎大鼠角膜组织损伤的影响
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作者 王敏 霍楠 +1 位作者 安伟乔 赵军波 《局解手术学杂志》 2026年第2期139-144,共6页
目的探究和厚朴酚(HNK)调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对烟曲霉菌性角膜炎(AFK)大鼠角膜组织损伤的影响。方法随机将SD大鼠分为Ctrl组(5μL DMSO溶剂)、模型组(5μL DMSO... 目的探究和厚朴酚(HNK)调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对烟曲霉菌性角膜炎(AFK)大鼠角膜组织损伤的影响。方法随机将SD大鼠分为Ctrl组(5μL DMSO溶剂)、模型组(5μL DMSO溶剂)、低剂量HNK(L-HNK)组(2μg/mL HNK)、中剂量HNK(M-HNK)组(4μg/mL HNK)、高剂量HNK(H-HNK)组(8μg/mL HNK)和mTOR激活剂+H-HNK组(10 mg/kg MHY1485+8μg/mL HNK)。除Ctrl组外,其余组均采用角膜接触镜法制备AFK大鼠模型。裂隙灯显微镜下观察、评估角膜组织损伤程度;平板菌落计数法评估角膜组织中烟曲霉菌含量;HE染色观察角膜组织病理学变化;ELISA检测角膜组织中炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot测定角膜组织中mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平。结果与Ctrl组比较,模型组大鼠角膜组织损伤评分、菌落数及IL-1β、TNF-α、IL-6表达增加(P<0.05),同时角膜胶原纤维排列紊乱、肿胀,大量炎性细胞浸润,坏死组织脱落;与模型组比较,L-HNK组、M-HNK组、H-HNK组大鼠角膜组织损伤评分、菌落数及IL-1β、TNF-α、IL-6表达减少(P<0.05),角膜组织上述变化均减轻,且H-HNK组减轻最为明显;与H-HNK组比较,mTOR激活剂+H-HNK组大鼠角膜组织损伤评分、菌落数及IL-1β、TNF-α、IL-6表达增加(P<0.05),角膜组织上述变化均加重。与Ctrl组比较,模型组大鼠角膜组织中mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达增加(P<0.05);与模型组比较,H-HNK组大鼠角膜组织中上述蛋白表达均减少(P<0.05);与H-HNK组比较,mTOR激活剂+H-HNK组大鼠角膜组织中上述蛋白表达均增加(P<0.05)。结论HNK能够减轻AFK大鼠角膜组织损伤,可能通过抑制mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路而实现。 展开更多
关键词 和厚朴酚 mtor/HIF-1α/VEGF信号通路 烟曲霉菌性角膜炎 角膜组织损伤
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苦参碱调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对创伤性脑损伤大鼠神经元自噬的影响
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作者 罗明 王孟阳 +2 位作者 张修民 马兰 王远 《广州中医药大学学报》 2026年第2期449-455,共7页
【目的】探讨苦参碱通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/UNC-51样激酶1(AMPK/mTOR/ULK1)通路对创伤性脑损伤(TBI)大鼠神经元自噬的影响。【方法】构建TBI大鼠模型并将其随机分为模型组,苦参碱低、中、高剂量组,苦参碱... 【目的】探讨苦参碱通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/UNC-51样激酶1(AMPK/mTOR/ULK1)通路对创伤性脑损伤(TBI)大鼠神经元自噬的影响。【方法】构建TBI大鼠模型并将其随机分为模型组,苦参碱低、中、高剂量组,苦参碱高剂量+Metformin(AMPK激活剂)组,每组24只。另设假手术组(24只大鼠)。水迷宫试验评估大鼠认知功能,Nissl染色法观察海马组织病理变化,TUNEL法观察海马神经元凋亡情况,透射电镜观察神经元自噬,Western Blot法检测海马组织p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、p-ULK1、ULK1及自噬相关蛋白Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达量。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠认知功能减弱,脑含水量升高,神经元凋亡占比增加,神经元形态不规则,尼氏体染色变浅,神经元中有较多的溶酶体和自噬体,p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1比值及Beclin-1和LC3蛋白表达量显著增多,p-mTOR/mTOR比值显著降低(P<0.05);与模型组比较,苦参碱低、中、高剂量组大鼠认知功能恢复,脑含水量减少,神经元形态结构趋于完整,尼氏体染色变深,神经元中的溶酶体和自噬体以及神经元凋亡部分减少,p-AMPK/AMPK、p-ULK1/ULK1比值及Beclin-1和LC3蛋白表达量降低,p-mTOR/mTOR比值变大(P<0.05),呈剂量依赖效应;与苦参碱高剂量组比较,苦参碱高剂量+Metformin组大鼠神经元形态结构破坏、认知功能减弱,脑含水量及神经元凋亡占比增多,自噬增强,提示Metformin逆转了苦参碱对TBI大鼠神经元自噬的抑制作用。【结论】苦参碱可通过抑制AMPK/mTOR/ULK1信号通路,减轻TBI大鼠神经元自噬,改善神经损伤。 展开更多
关键词 苦参碱 创伤性脑损伤 神经元自噬 AMPK/mtor/ULK1通路 大鼠
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越鞠丸通过AMPK/mTOR信号通路促进肝星状细胞自噬缓解肝纤维化的分子机制研究
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作者 张金颖 赵洪霄 陈俊玲 《现代中西医结合杂志》 2026年第3期306-313,共8页
目的探讨越鞠丸缓解肝纤维化的分子机制。方法将80只6~7周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、越鞠丸组、越鞠丸+AMPK抑制剂组、越鞠丸+溶剂组,每组16只。除正常组外,其余组小鼠均建立胆碱缺乏L-氨基酸限制饮食诱导的肝纤维化... 目的探讨越鞠丸缓解肝纤维化的分子机制。方法将80只6~7周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、越鞠丸组、越鞠丸+AMPK抑制剂组、越鞠丸+溶剂组,每组16只。除正常组外,其余组小鼠均建立胆碱缺乏L-氨基酸限制饮食诱导的肝纤维化模型。造模第14周开始,越鞠丸组给予1 mg/mL越鞠丸冻干粉水溶液灌胃,越鞠丸+AMPK抑制剂组给予1 mg/mL越鞠丸冻干粉水溶液灌胃和AMPK抑制剂2μg皮下注射,越鞠丸+溶剂组给予1 mg/mL越鞠丸冻干粉水溶液灌胃和无菌生理盐水皮下注射,均1次/d,连续干预8周。末次干预结束后,每组随机取8只小鼠,称量体重、肝脏质量,ELISA法检测血清丙氨酸转氨酶水平和肝脏羟脯氨酸含量,HE染色、Masson染色观察肝脏组织病理形态和肝纤维化情况;每组剩余小鼠处死后,分离肝脏原代肝星状细胞(HSCs),qPCR法检测HSCs中Ⅰ型胶原α1(COL1A1)和Ⅰ型胶原α2(COL1A2)mRNA表达情况,Western blot法检测HSCs中结蛋白(Desmin)、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、p62蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)以及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)、腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达情况。结果与正常组比较,模型组和越鞠丸+AMPK抑制剂组小鼠体重、肝脏质量、血清丙氨酸转氨酶水平和肝脏羟脯氨酸含量均明显升高(P均<0.05);小鼠肝细胞肥大,可见细胞内脂滴,肝细胞间隙存在大量纤维化组织;原代HSCs中COL1A1和COL1A2 mRNA相对表达量及Desmin、α-SMA、Bax、Cleaved Caspase-3、p-mTOR蛋白相对表达量,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高(P均<0.05),p62、Bcl-2、p-AMPKα蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。与模型组和越鞠丸+AMPK抑制剂组比较,越鞠丸组和越鞠丸+溶剂组小鼠体重、肝脏质量、血清丙氨酸转氨酶水平和肝脏羟脯氨酸含量均明显降低(P均<0.05);肝组织病理学改变得到缓解;原代HSCs中COL1A1和COL1A2 mRNA相对表达量及Desmin、p62、α-SMA、Bax、Cleaved Caspase-3、p-mTOR蛋白相对表达量,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显降低(P均<0.05),p62、Bcl-2、p-AMPKα蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。结论越鞠丸可能通过激活AMPK、抑制mTOR而促进HSCs自噬,抑制其凋亡,从而缓解肝纤维化。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 肝纤维化 越鞠丸 肝星状细胞 AMPK/mtor信号通路
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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨火针治疗坐骨神经损伤大鼠的作用机制
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作者 李晓阳 李冠男 +3 位作者 徐宁 张丙祥 王锐 王玲姝 《湖南中医药大学学报》 2026年第1期62-69,共8页
目的基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探究火针治疗坐骨神经损伤大鼠的作用机制。方法采用止血钳挤压法构建坐骨神经压迫损伤模型大鼠,将造模成功的36只大鼠随机均分为模型组与火针组,... 目的基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探究火针治疗坐骨神经损伤大鼠的作用机制。方法采用止血钳挤压法构建坐骨神经压迫损伤模型大鼠,将造模成功的36只大鼠随机均分为模型组与火针组,未进行造模处理(仅暴露神经不进行钳夹处理)的18只大鼠作为假手术组。造模成功后,假手术组与模型组大鼠仅捆绑固定处理,火针组大鼠在捆绑固定后于患侧环跳、委中穴进行火针干预,每隔1天干预1次,疗程14 d。在干预1、7、14 d后检测各组大鼠坐骨神经功能指数(SFI)以评估其运动功能,腓肠肌湿重比与Masson染色评估患侧肌肉萎缩程度,透射电镜观察坐骨神经超微形态变化,免疫荧光检测髓鞘碱性蛋白(MBP)表达,Western blot检测p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR相对表达。结果干预7、14 d后,与假手术组相比,模型组大鼠步态出现明显无力、拖拽现象,SFI评分显著降低(P<0.01),患侧腓肠肌湿重比显著降低(P<0.01),透射电镜下坐骨神经轴索萎缩、髓鞘板层明显分离,MBP蛋白表达显著降低(P<0.01),坐骨神经p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR相对表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,火针组大鼠步态逐渐恢复正常,足趾印记逐步清晰,SFI评分显著升高(P<0.01),腓肠肌湿重比显著升高(P<0.05,P<0.01),肌肉萎缩程度大幅改善,透射电镜下坐骨神经轴突和髓鞘逐渐恢复,MBP蛋白表达显著升高(P<0.01),坐骨神经p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR相对表达升高(P<0.05,P<0.01)。与干预1 d后比较,火针组干预7、14 d后SFI评分、MBP蛋白表达及坐骨神经p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR相对表达均升高(P<0.05,P<0.01),干预7 d后患侧腓肠肌湿重比显著降低(P<0.01);与干预7 d后比较,火针组干预14 d后SFI评分、患侧腓肠肌湿重比、MBP蛋白表达及坐骨神经p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR相对表达均升高(P<0.05,P<0.01)。结论火针干预可有效促进坐骨神经损伤大鼠的神经恢复,改善其运动功能,其机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR信号信号通路,促进神经再生和再髓鞘化有关。 展开更多
关键词 坐骨神经损伤 火针 PI3K/Akt/mtor信号通路 腓肠肌湿重比 坐骨神经功能指数 髓鞘碱性蛋白
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mTORC1 and mTORC2 synergy in human neural development, disease, and regeneration 被引量:1
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作者 Navroop K.Dhaliwal Julien Muffat Yun Li 《Neural Regeneration Research》 2026年第4期1552-1553,共2页
The mechanistic target of rapamycin(m TOR) is a serine/threonine kinase that plays a pivotal role in cellular growth, proliferation, survival, and metabolism. In the central nervous system(CNS), the mTOR pathway regul... The mechanistic target of rapamycin(m TOR) is a serine/threonine kinase that plays a pivotal role in cellular growth, proliferation, survival, and metabolism. In the central nervous system(CNS), the mTOR pathway regulates diverse aspects of neural development and function. Genetic mutations within the m TOR pathway lead to severe neurodevelopmental disorders, collectively known as “mTORopathies”(Crino, 2020). Dysfunctions of m TOR, including both its hyperactivation and hypoactivation, have also been implicated in a wide spectrum of other neurodevelopmental and neurodegenerative conditions, highlighting its importance in CNS health. 展开更多
关键词 m tor neural development mtorc central nervous system cns mtor neurodevelopmental disorders neurodegenerative conditions
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沉默PAK1通过阻断PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导胶质母细胞瘤细胞自噬发挥抗肿瘤效应 被引量:1
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作者 秦立鹏 康婧 +2 位作者 贾培雷 王凯 薛松林 《中国医科大学学报》 北大核心 2026年第1期41-47,共7页
目的探讨沉默p21活化激酶1(PAK1)表达对人胶质母细胞瘤(GBM)细胞生长活性的抑制效应及可能机制。方法通过GEPIA在线数据库分析GBM患者癌组织中PAK1 mRNA表达及其与患者预后的关系。采用实时定量PCR检测人正常胶质细胞系NHA及不同人GBM... 目的探讨沉默p21活化激酶1(PAK1)表达对人胶质母细胞瘤(GBM)细胞生长活性的抑制效应及可能机制。方法通过GEPIA在线数据库分析GBM患者癌组织中PAK1 mRNA表达及其与患者预后的关系。采用实时定量PCR检测人正常胶质细胞系NHA及不同人GBM细胞系中PAK1 mRNA表达。将U251细胞分为沉默阴性对照(si-NC)组、si-PAK1组、si-PAK1+通路激活剂(740Y-P)组和si-PAK1+自噬抑制剂氯喹(CHQ)组。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,平板克隆法检测细胞克隆形成能力,Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测细胞中PAK1 m RNA表达,Western blotting检测细胞中通路及自噬相关蛋白表达。结果GBM组织中PAK1 mRNA表达水平明显高于正常脑组织(P<0.05),且PAK1 mRNA高表达的患者预后较差。沉默PAK1表达可明显降低细胞增殖活性(P<0.05),减少细胞克隆团数量,降低细胞迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡(P<0.05),下调细胞中p-PI3K、p-AKT、p-m TOR和p62蛋白表达水平,上调Beclin-1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值(P<0.05)。740Y-P或CHQ干预处理后,沉默PAK1表达引发的上述变化均被逆转。结论沉默PAK1表达可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导细胞自噬,从而阻止GBM恶性进展。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 p21活化激酶1 PI3K/AKT/mtor信号通路 自噬
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miR-21靶向抑制PTEN/AKT/mTOR通路改善小鼠慢性肾纤维化的机制研究
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作者 祁娇 许珊珊 +3 位作者 其其格 孟彦 赵建荣 张丽英 《安徽医科大学学报》 北大核心 2026年第2期217-224,共8页
目的研究miR-21靶向调节磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路改善小鼠慢性肾纤维化的机制。方法32只慢性肾病模型小鼠随机分为模型组、miR-21过表达组、miR-21抑制组、miR-21抑制+MK-2206组... 目的研究miR-21靶向调节磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路改善小鼠慢性肾纤维化的机制。方法32只慢性肾病模型小鼠随机分为模型组、miR-21过表达组、miR-21抑制组、miR-21抑制+MK-2206组各8只,将8只健康小鼠纳入对照组。miR-21过表达组、miR-21抑制组、miR-21抑制+MK-2206组尾静脉注射慢病毒(50μL,每只1×10^(8)TU),每周1次,连续3周。对照组、模型组注射等量空载体(LV-NC)。miR-21抑制+MK-2206组同时另灌胃AKT/mTOR通路抑制剂MK-2206480 mg/kg,每周1次,连续3周。比较各组miR-21表达、24 h尿蛋白定量、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN),肾组织I型胶原蛋白(Collagen I)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、PTEN蛋白表达及p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR;HE染色观察肾组织病理改变,Masson染色观察肾组织纤维化程度;双荧光素酶实验验证miR-21与PTEN的靶向关系。结果与模型组比较,miR-21过表达组肾组织miR-21表达升高(P<0.05),miR-21抑制组肾组织miR-21表达降低(P<0.05)。与模型组比较,miR-21过表达组24 h尿蛋白定量、Scr、BUN,肾组织Collagen I、CollagenⅢ、α-SMA蛋白表达均升高(P<0.05),而miR-21抑制组均降低(P<0.05);与miR-21抑制组比较,miR-21抑制+MK-2206组24 h尿蛋白定量、Scr、BUN,肾组织CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA蛋白表达均降低(P<0.05)。与模型组比较,miR-21过表达组PTEN蛋白表达降低(P<0.05),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05);miR-21抑制组PTEN蛋白表达升高(P<0.05),p-AKT/AKT、pmTOR/mTOR均降低(P<0.05);与miR-21抑制组比较,miR-21抑制+MK-2206组p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR均降低(P<0.05),PTEN蛋白表达差异无统计学意义。HE和Masson染色显示,对照组肾脏结构正常,几乎无纤维化;模型组出现肾小球增大、毛细血管袢粘连及局灶性纤维化;miR-21过表达组肾小球结构严重破坏,伴广泛纤维化和肾小管萎缩;miR-21抑制组病理变化和纤维化程度减轻;而miR-21抑制+MK-2206组仅见轻微病理改变和轻度纤维化,间质基本正常。与PTEN-WT+NC mimics组比较,PTEN-WT+miR-21 mimics组相对荧光素酶活性降低(P<0.001),PTEN-WT+NC mimics组和PTEN-MUT+miR-21 mimics组相对荧光素酶活性差异无统计学意义。结论miR-21可能通过靶向调控PTEN进而抑制AKT/mTOR通路改善慢性肾病小鼠肾功能指标,减轻肾纤维化程度。 展开更多
关键词 肾病 纤维化 肾功能 AKT/mtor通路 MIR-21 靶向
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槲皮素通过调控AKT/mTOR通路及其介导的自噬促进糖尿病足大鼠创面愈合
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作者 张立贇 王翼华 +1 位作者 崔建蕾 刘曙艳 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第2期377-382,共6页
目的:探究槲皮素通过调控蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)通路及其介导的自噬对糖尿病足溃疡(DFU)大鼠创面愈合的影响。方法:75只大鼠随机分为对照组(Control)、DFU组、槲皮素低剂量组(Quercetin-L)、槲皮素高剂量组(Querce... 目的:探究槲皮素通过调控蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)通路及其介导的自噬对糖尿病足溃疡(DFU)大鼠创面愈合的影响。方法:75只大鼠随机分为对照组(Control)、DFU组、槲皮素低剂量组(Quercetin-L)、槲皮素高剂量组(Quercetin-H)、AKT/mTOR通路抑制剂(MK-2206)组,每组15只。制备DFU大鼠模型,DFU组、Quercetin-L组、Quercetin-H组、MK-2206组大鼠高糖高脂饲料喂养4周,并一次性腹腔注射STZ溶液(65 mg/kg);Control组大鼠以普通饲料喂养4周,并注射等量生理盐水。Quercetin-L组、Quercetin-H组、MK-2206组大鼠分别灌胃槲皮素(50、100 mg/kg)和MK-2206(120 mg/kg)溶液;Control组、DFU组灌胃等量生理盐水,1次/d,连续15 d。灌胃期间观察大鼠创面愈合情况,并计算创面愈合率。HE染色和Masson染色检测创面组织病理损伤;ELISA检测血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平;免疫组化染色检测创面组织增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平;透射电镜观察创面组织自噬小体形成;Western blot检测创面组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin1、p62、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白水平。结果:Control组大鼠创面愈合较快,创面组织存在少量炎症浸润,新生血管和自噬小体数量较多;与Control组相比,DFU组大鼠创面愈合较慢,创面组织存在大量炎症浸润,新生血管和自噬小体数量较少,创面愈合率降低,血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高,创面组织PCNA、VEGF、LC3II/I、Beclin1水平降低,p62、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平升高(P<0.05)。与DFU组相比,Quercetin-L组、Quercetin-H组、MK-2206组大鼠创面愈合情况明显改善,且槲皮素剂量越高,作用越明显(P<0.05)。结论:槲皮素能够促进DFU大鼠创面愈合,可能通过抑制AKT/mTOR通路,并激活自噬发挥作用。 展开更多
关键词 槲皮素 AKT/mtor通路 自噬 糖尿病足溃疡 创面愈合
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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨补肾通络降浊方改善慢性肾脏病大鼠肾纤维化的作用机制
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作者 包新翠 赵保胜 +8 位作者 秦灵灵 王海焱 杨靖 王友 吴利佳 李昱锦 高明 吕翠岩 刘铜华 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第6期100-108,共9页
目的:探究补肾通络降浊方通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路改善慢性肾脏病(CKD)大鼠肾纤维化的作用机制。方法:70只SPF级SD大鼠随机分为空白组15只及造模组55只,造模组大鼠予2.5%的腺... 目的:探究补肾通络降浊方通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路改善慢性肾脏病(CKD)大鼠肾纤维化的作用机制。方法:70只SPF级SD大鼠随机分为空白组15只及造模组55只,造模组大鼠予2.5%的腺嘌呤混悬液200 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃4周制备CKD模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组,厄贝沙坦组(20.25 mg·kg^(-1)·d^(-1)),补肾通络降浊方低、中、高剂量组(5.82、11.64、23.28 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只,各组分别予等体积的生理盐水、相应浓度的厄贝沙坦和补肾通络降浊方灌胃12周。动态检测大鼠体质量及肾功能指标;采用全自动生化仪检测大鼠血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、尿白蛋白肌酐比(ACR)、24 h尿蛋白定量(24 hUTP)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)情况;苏木素-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色观察肾脏组织病理变化;免疫组化法(IHC)检测大鼠PI3K、Akt、磷酸化(p)-Akt、mTOR的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR的蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肾组织中PI3K、Akt、mTOR mRNA表达水平。结果:与模型组比较,厄贝沙坦组及补肾通络降浊方低、中、高剂量组大鼠SCr、BUN、ACR、24 hUTP、IL-1β、IL-6、TNF-α均显著降低(P<0.01),AST显著升高(P<0.01),ALT差异无统计学意义;同时各给药组较模型组大鼠肾组织病理结果显示,肾小管上皮细胞水肿、坏死及肾小囊扩张减轻,肾组织炎症细胞浸润减少,肾间质及肾小球纤维化改善明显,以补肾通络降浊方高剂量组效果最佳。Real-time PCR结果显示,补肾通络降浊方高剂量组PI3K、Akt、mTOR的mRNA表达显著下调(P<0.01)。IHC结果显示补肾通络降浊方高剂量组肾组织中PI3K、p-Akt表达水平显著降低(P<0.01)。Western blot结果显示补肾通络降浊方高剂量组PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR表达水平显著降低(P<0.01)。结论:补肾通络降浊方能改善CKD大鼠的肾功能指标,减少肾组织内胶原蛋白沉积,降低血清炎症因子水平,并通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路激活自噬,改善肾纤维化,保护肾功能。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 补肾通络降浊方 肾纤维化 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路
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加味独活寄生合剂调控PI3K/Akt/mTOR信号通路对膝骨关节炎兔滑膜细胞焦亡的影响
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作者 叶子丰 院一蔚 +4 位作者 邱礼国 谭旭仪 欧梁 邝高艳 卢敏 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第1期170-179,共10页
目的:探讨加味独活寄生合剂(JDJM)治疗膝骨关节炎(KOA)滑膜病变的可能机制。方法将43只新西兰雄性大白兔随机分为空白组(Control组,8只)、模型组(35只)。通过在兔右侧后肢固定高分子树脂石膏绷带建立KOA模型,模型构建周期为6周,成功构... 目的:探讨加味独活寄生合剂(JDJM)治疗膝骨关节炎(KOA)滑膜病变的可能机制。方法将43只新西兰雄性大白兔随机分为空白组(Control组,8只)、模型组(35只)。通过在兔右侧后肢固定高分子树脂石膏绷带建立KOA模型,模型构建周期为6周,成功构建模型32只。随机分为模型组(Model组)、塞来昔布组(Celecoxib组)、JDJM组与JDJM+740Y-P组,每组8只。Celecoxib组予塞来昔布灌胃,单次剂量为0.0093 g·kg^(-1),JDJM组给予JDJM单次生药量6.8 mL·kg^(-1),即4.5152 g·kg^(-1)灌胃,JDJM+740Y-P组予以4.5152 g·kg^(-1)生药灌胃+耳缘静脉注射0.15μmol·kg^(-1)740Y-P,其余各组予以等剂量生理盐水灌胃,每日1次,持续6周。给药结束后测定各组兔膝关节疼痛阈值、膝关节周径,苏木素-伊红(HE)染色检测滑膜组织病理学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测关节液中白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测滑膜组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)mRNA表达;免疫组化(IHC)检测滑膜组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜组织磷酸化(p)-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达。结果与Control组比较,Model组兔膝关节周径明显升高,痛阈明显降低,滑膜组织病理评分明显升高(P<0.05),关节液中IL-1β、IL-18、TNF-α含量显著升高(P<0.01),PI3K、Akt、mTOR磷酸化激活且mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01),NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01);与Model组比较,Celecoxib组与JDJM组兔膝关节周径明显减小,痛阈明显升高,滑膜组织病理评分明显降低(P<0.05),关节液中IL-1β、IL-18、TNF-α含量显著降低(P<0.01),p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01);与JDJM组比较,JDJM+740Y-P组滑膜病变改善程度明显下降,兔膝关节周径明显升高,痛阈明显降低,滑膜组织病理评分明显降低(P<0.05),且关节液中的IL-1β、IL-18、TNF-α含量显著升高(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论JDJM对膝骨关节炎疗效明确,可改善KOA膝关节滑膜炎症反应,其作用机制可能涉及对滑膜组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的调节,进而抑制细胞焦亡从而减少炎性因子释放,保护骨性结构有关。 展开更多
关键词 加味独活寄生合剂 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mtor)信号通路 细胞焦亡 膝骨关节炎
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牛蒡子苷调控PI3K/Akt/mTOR信号通路促进肝细胞脂噬作用机制
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作者 申炎炎 张效威 +3 位作者 张振强 徐江雁 高改 谢治深 《中药新药与临床药理》 北大核心 2026年第2期235-244,共10页
目的以游离脂肪酸(FFA)诱导的HepG2细胞脂质堆积为细胞模型,探讨牛蒡子苷改善肝脏脂质蓄积的作用机制。方法MTT法检测牛蒡子苷对HepG2细胞活性的影响;设立正常对照组,模型组,阳性药洛伐他汀组(10µmol·L^(-1)),雷帕霉素组(100 ... 目的以游离脂肪酸(FFA)诱导的HepG2细胞脂质堆积为细胞模型,探讨牛蒡子苷改善肝脏脂质蓄积的作用机制。方法MTT法检测牛蒡子苷对HepG2细胞活性的影响;设立正常对照组,模型组,阳性药洛伐他汀组(10µmol·L^(-1)),雷帕霉素组(100 nmol·L^(-1)),牛蒡子苷低、中、高剂量组(10、20、30µmol·L^(-1)),自噬抑制剂氯喹组(10µmol·L^(-1));采用油红O染色检测细胞内脂滴形成情况;试剂盒检测细胞中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平;激光共聚焦显微镜观察荧光标记的微管相关蛋白轻链3(LC3)与脂滴以及溶酶体标志物的共定位;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测LC3、溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)、泛素结合蛋白p62(p62/SQSTM1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化(p)-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR蛋白表达情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测自噬相关蛋白5(ATG5)、自噬相关蛋白7(ATG7)、自噬相关蛋白12(ATG12)、LAMP2及脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)和激素敏感性脂肪酶(HSL)的mRNA表达情况。结果MTT结果显示牛蒡子苷在0~30µmol·L^(-1)范围内无明显的细胞毒性;与正常对照组比较,模型组脂滴增加(P<0.001),TC、TG水平升高(P<0.001),LC3-Ⅱ、LAMP2蛋白表达降低(P<0.05),p62/SQSTM1蛋白表达升高(但差异无统计学意义,P>0.05),ATG5、ATG7、ATG12、LAMP2的mRNA水平降低(P<0.01,P<0.001),PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达量升高(P<0.01,P<0.001);与模型组比较,牛蒡子苷高剂量组明显改善游离脂肪酸诱导的HepG2细胞的脂质蓄积(P<0.001),TC、TG水平下降(P<0.001),LC3-Ⅱ、LAMP2的蛋白表达水平明显升高(P<0.001),p62/SQSTM1蛋白表达水平降低(P<0.001),ATG5、ATG7、ATG12、LAMP2的mRNA水平呈上升趋势(P<0.001),PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达量呈下降趋势(P<0.001);共定位结果发现牛蒡子苷干预促进了LC3的表达,并增加了LC3与脂滴和溶酶体标志物的共定位;而ATGL及HSL等脂解酶的mRNA水平无明显变化(P>0.05);使用自噬抑制剂氯喹后,牛蒡子苷对游离脂肪酸诱导的HepG2细胞中TC、TG的下调作用被逆转(P<0.001)。结论牛蒡子苷通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路调控肝细胞脂噬改善肝脏脂质蓄积。 展开更多
关键词 牛蒡子苷 肝细胞脂噬 脂质蓄积 PI3K/Akt/mtor信号通路 HEPG2细胞
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双酚F调控PI3K/Akt/mTOR通路对雄性小鼠免疫失衡的影响
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作者 刘慧伶 李文欣 +4 位作者 黄参 陈可儿 钟宇杰 易锟 张晓东 《生态毒理学报》 北大核心 2026年第1期549-558,共10页
基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨双酚F(BPF)染毒诱导小鼠免疫系统失衡的分子机制。50只SPF级雄性昆明小鼠随机分成5组,每组10只,分别为对照组、溶剂对照组和BPF染毒组(低剂量、中剂量、高剂量组)。对照组和溶剂对照组给予生理盐水和玉米油,... 基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨双酚F(BPF)染毒诱导小鼠免疫系统失衡的分子机制。50只SPF级雄性昆明小鼠随机分成5组,每组10只,分别为对照组、溶剂对照组和BPF染毒组(低剂量、中剂量、高剂量组)。对照组和溶剂对照组给予生理盐水和玉米油,染毒组给予不同浓度的BPF(0.5、5、50μg·kg^(-1)·d^(-1),对应BPF染毒组0.5、5、50 mg·kg^(-1)),连续灌胃8周。染毒结束,记录体质量和脾脏质量,ELISA检测血清中白介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)水平。HE染色和免疫组化观察脾脏组织病理学改变。流式细胞术检测调节性T细胞(Treg细胞)和辅助性T细胞17(Th17细胞)数量。Western blot检测脾脏组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达。结果显示,BPF导致小鼠体质量和脾脏质量均降低(P<0.05);BPF导致小鼠相关炎症因子水平均升高。HE染色检验显示脾脏组织红髓扩张,淋巴细胞浸润。免疫组化结果显示染毒组脾脏组织均有白介素-6(IL-6)、TNF-α、转换生长因子-β(TGF-β)阳性表达。流式细胞术结果显示低剂量组和中剂量组小鼠脾脏Th17细胞表达量增加,高剂量组小鼠脾脏Th17细胞表达量降低;低剂量组CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)Treg细胞比例及数量降低,中剂量和高剂量组CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)Treg细胞比例及数量升高。Western blot结果显示PI3K、Akt、mTOR蛋白表达显著降低。BPF染毒下调PI3K/Akt/mTOR相关蛋白表达,导致小鼠免疫失衡。 展开更多
关键词 双酚F 昆明小鼠 免疫组化 脾脏 炎症因子 PI3K/Art/mtor通路
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补肾化痰方调控mTOR/NLRP3通路介导自噬促进小鼠胚胎成骨细胞骨形成
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作者 熊梦欣 朱伟 +3 位作者 陈颖庆 张昊雪 蒋泽宇 向楠 《中药新药与临床药理》 北大核心 2026年第3期395-403,共9页
目的基于哺乳动物雷帕霉素蛋白(mTOR)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路探讨补肾化痰方诱导小鼠胚胎成骨细胞(MC3T3-E1)自噬促进骨形成的作用机制。方法以不同浓度(0、0.01、0.05、0.1、0.5、1、2 mg·mL^(-1))补肾化... 目的基于哺乳动物雷帕霉素蛋白(mTOR)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路探讨补肾化痰方诱导小鼠胚胎成骨细胞(MC3T3-E1)自噬促进骨形成的作用机制。方法以不同浓度(0、0.01、0.05、0.1、0.5、1、2 mg·mL^(-1))补肾化痰方分别干预MC3T3-E1细胞12、24、48、72 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,筛选补肾化痰方最佳干预浓度及时间。将对数生长期MC3T3-E1细胞随机分为空白组、补肾化痰方组(0.1 mg·mL^(-1))、二甲双胍组(0.5 mmol·L^(-1))、雷帕霉素组(100 nmol·L^(-1)),分别干预48 h。采用碱性磷酸酶(ALP)染色法及茜素红(ARS)染色法检测MC3T3-E1细胞成骨活性;Western Blot法检测细胞Runt相关转录因子2(Runx2)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、mTOR、p-mTOR、NLRP3蛋白表达水平;RT-qPCR法检测细胞TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达水平;透射电镜观察细胞中自噬小体的数量;Lipofectamine^(TM) 2000瞬时转染LC3质粒检测细胞自噬流。结果与空白组比较,补肾化痰方组、二甲双胍组、雷帕霉素组MC3T3-E1细胞的ALP、ARS染色阳性表达面积均显著增加(P<0.01),Runx2蛋白表达显著上调(P<0.01),TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白及mRNA表达均显著下调(P<0.01),细胞中的自噬小体及自噬溶酶体数量均明显增多(P<0.05,P<0.01),p-mTOR/mTOR、NLRP3蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。补肾化痰方组、二甲双胍组、雷帕霉素组之间比较,上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾化痰方能够通过抑制mTOR/NLRP3通路增强MC3T3-E1细胞的自噬活性,下调炎症因子表达,促进MC3T3-E1细胞骨形成。 展开更多
关键词 补肾化痰方 小鼠胚胎成骨细胞 骨形成 自噬 炎症因子 mtor/NLRP3通路
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mTOR对免疫细胞影响的研究进展
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作者 杨婷羽 崔嘉露 +4 位作者 林琳 徐同佳 高也卉 高月 马增春 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期207-213,共7页
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路的下游介质,能调节细胞生长、增殖、存活和代谢等多种细胞功能。调节免疫细胞平衡是治疗免疫系统疾病和提高机体免疫力的重要环节。有研究表明,mTOR是免疫应答的关键... 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路的下游介质,能调节细胞生长、增殖、存活和代谢等多种细胞功能。调节免疫细胞平衡是治疗免疫系统疾病和提高机体免疫力的重要环节。有研究表明,mTOR是免疫应答的关键调节因子,能够直接或间接影响各种免疫细胞的发育、分化、成熟、衰竭等,调节机体细胞/体液免疫,影响机体免疫环境平衡。而抑制mTOR可以改善免疫系统功能,从而预防免疫系统疾病的发生。本文就mTOR调控免疫细胞的研究进行综述。 展开更多
关键词 mtor 免疫细胞 PI3K/AKT
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涤痰益智汤通过PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制自噬改善血管性痴呆大鼠认知障碍的机制研究
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作者 吴凡 顾梦宇 +10 位作者 孙烈乾 王凯漪 杨佳 郑莉 谌向忠 夏丽秀 赖星 马哲 易在凤 黄芳 杨超 《中国中医药信息杂志》 2026年第1期99-107,共9页
目的观察涤痰益智汤对血管性痴呆(VaD)大鼠PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路及自噬的影响,探讨其改善VaD认知障碍的作用机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、涤痰益智汤+抑制剂组、涤痰益智汤组、盐酸多奈哌齐组,每组8只,... 目的观察涤痰益智汤对血管性痴呆(VaD)大鼠PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路及自噬的影响,探讨其改善VaD认知障碍的作用机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、涤痰益智汤+抑制剂组、涤痰益智汤组、盐酸多奈哌齐组,每组8只,假手术组仅分离颈总动脉不结扎,其余组大鼠采用改良双侧颈总动脉永久性结扎法制备VaD模型。分别予相应处理4周。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,HE染色及尼氏染色观察海马组织神经元形态,透射电镜观察神经元自噬情况,ELISA检测血清脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)含量,Western blot及免疫组化检测海马组织磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、p-蛋白激酶B(AKT)、p-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、p-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、p62、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少(P<0.01);海马CA1区神经元间隙增大,细胞形态不规则,边界模糊,神经元固缩,尼氏体溶解破碎、数量减少,透射电镜显示神经元内自噬体数目增多;血清BDNF、NGF含量显著降低(P<0.01);海马组织PTEN、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著升高(P<0.01),p-AKT、p-mTOR、p-PI3K、p62蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,涤痰益智汤组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多(P<0.01);海马CA1区神经元数量增多,形态正常,排列整齐,尼氏体丰富,透射电镜可见自噬体及自噬小体减少;血清BDNF、NGF含量显著升高(P<0.01);海马组织PTEN、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著降低(P<0.01),p-AKT、p-mTOR、p-PI3K、p62蛋白表达显著升高(P<0.01)。使用PI3K抑制剂可抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,逆转涤痰益智汤对自噬的抑制作用。结论涤痰益智汤可以改善Va D大鼠学习记忆能力与神经元形态,其机制可能与调控PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制自噬有关。 展开更多
关键词 血管性痴呆 PTEN/PI3K/AKT/mtor信号通路 自噬 涤痰益智汤 神经元 大鼠
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异类叶升麻苷调控PI3K/Akt/mTOR通路抑制人食管鳞状癌ECA109细胞增殖及迁移的机制研究
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作者 宋文潇 孙鹏 +2 位作者 孙少林 张乐宁 贾春祎 《中国实验诊断学》 2026年第2期248-253,共6页
目的探究异类叶升麻苷基于PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制人食管鳞状癌ECA109细胞增殖及迁移的作用机制。方法采用不同浓度异类叶升麻苷处理ECA109细胞,通过CCK-8与克隆形成实验评估细胞增殖活性;根据CCK-8检测结果分为对照组和异类叶升麻苷... 目的探究异类叶升麻苷基于PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制人食管鳞状癌ECA109细胞增殖及迁移的作用机制。方法采用不同浓度异类叶升麻苷处理ECA109细胞,通过CCK-8与克隆形成实验评估细胞增殖活性;根据CCK-8检测结果分为对照组和异类叶升麻苷低(150μM)、中(300μM)和高(400μM)剂量组,通过划痕愈合实验评估细胞迁移能力,Western blot检测细胞PI3K p85、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR蛋白表达及磷酸化水平,RT-qPCR定量检测细胞PI3K、Akt、mTOR的mRNA表达水平。结果CCK-8及划痕愈合实验结果显示,异类叶升麻苷低剂量组可明显促进细胞增殖及迁移,中、高剂量组可明显抑制其增殖及迁移,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01),计算半数抑制浓度(IC_(50))为423.0μM;Western blot检测结果显示,异类叶升麻苷高剂量组细胞PI3K p85、Akt、mTOR蛋白及其磷酸化水平p-PI3K、p-Akt、p-mTOR均显著性降低,低、中剂量组仅部分蛋白表达水平降低,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);RT-qPCR检测结果显示,异类叶升麻苷各剂量组细胞PI3K、Akt、mTOR的mRNA表达水平均显著降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论异类叶升麻苷可通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路活性,抑制人食管鳞状癌ECA109细胞增殖及迁移,从而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 异类叶升麻苷 人食管鳞状癌 ECA109 PI3K/Akt/mtor信号通路
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