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黑曲霉葡萄糖吸收定量检测的方法建立及其在MstC功能研究中的应用
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作者 高凯月 郭雨婷 +5 位作者 杜奕谋 郑小梅 马欣荣 赵伟 郑平 孙际宾 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期71-80,共10页
黑曲霉是有机酸与酶制剂重要的工业生产菌株,具有强大的水解酶系与葡萄糖转运系统,可快速响应胞外碳源变化,摄取环境中葡萄糖供给细胞生长和产物合成。作为重要的碳源底物与关键的信号分子,葡萄糖的摄取吸收直接影响黑曲霉细胞生长与发... 黑曲霉是有机酸与酶制剂重要的工业生产菌株,具有强大的水解酶系与葡萄糖转运系统,可快速响应胞外碳源变化,摄取环境中葡萄糖供给细胞生长和产物合成。作为重要的碳源底物与关键的信号分子,葡萄糖的摄取吸收直接影响黑曲霉细胞生长与发酵性能。针对目前丝状真菌缺乏简便葡萄糖吸收能力定量表征方法的问题,本文以2-(N-(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑-4-氨基)-2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)作为葡萄糖吸收探针,通过将预培养的黑曲霉孢子与2-NBDG孵育后,利用荧光显微成像与流式细胞分析,建立了丝状真菌的葡萄糖吸收的定量检测方法。结果发现,2-NBDG的最佳使用浓度为150μmol/L,最佳孵育时间为4 h。进一步利用该定量分析方法,发现低亲和力葡萄糖转运蛋白MstC的过表达使黑曲霉葡萄糖吸收提高1.44倍,同时在前期研究的基础上,利用多序列比对分析,设计了MstC的突变体R188K,通过检测发现该点突变可直接导致MstC葡萄糖转运活性的丧失,这表明Arg188是影响MstC葡萄糖转运能力的关键氨基酸位点。本文葡萄糖摄取定量检测方法的建立及其在MstC功能研究上的应用,不仅加深了丝状真菌葡萄糖吸收的定量认识,也为葡萄糖转运系统的改造优化提供了技术支撑。 展开更多
关键词 黑曲霉 葡萄糖吸收 2-NBDG 葡萄糖转运蛋白 mstc 荧光成像 流式细胞检测
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MSTC与NRS2002在消化道恶性肿瘤患者中的应用比较
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作者 吴建程 曾金娣 +3 位作者 曾俊权 黄无浪 肖勋立 盛忠兰 《江西医药》 CAS 2023年第8期944-947,共4页
目的初步验证一种肿瘤患者营养筛查工具(Malnutrition Screening Tool for Cancer patients,MSTC)对消化道恶性肿瘤患者进行营养风险筛查的适用性。方法对2020年7月至12月在我院采用不同治疗方式进行治疗的消化道肿瘤患者进行横断面调... 目的初步验证一种肿瘤患者营养筛查工具(Malnutrition Screening Tool for Cancer patients,MSTC)对消化道恶性肿瘤患者进行营养风险筛查的适用性。方法对2020年7月至12月在我院采用不同治疗方式进行治疗的消化道肿瘤患者进行横断面调查研究,每名患者同时采用MSTC量表及营养风险筛查2002(NRS 2002)评分表进行营养风险筛查及评估。采用二分类交叉列表方式评价两种方法的相关性、灵敏度、特异度、阳性及阴性预测值等指标。结果共158例符合条件患者完成调查,根据NRS 2002评分有营养风险患者占55.1%;MSTC营养风险指数P临界值为0.7285时,MSTC模型灵敏度为98.9%,特异性为74.6%,阳性预测值和阴性预测值分别为82.7%、98.1%,与NRS2002评价结果高度一致(kappa值0.752,P<0.0001)。结论MSTC与NRS 2002在消化道肿瘤患者的营养风险筛查结果具有高度一致性。 展开更多
关键词 mstc NRS 2002 营养风险 消化道恶性肿瘤
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