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题名紫花苜蓿HSC70-2基因克隆及其时空表达
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作者
杜红旗
姜山
史莹华
王成章
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机构
河南农业大学牧医工程学院
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出处
《家畜生态学报》
北大核心
2017年第11期53-57,共5页
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基金
农业部公益性行业科研专项项目(No.201403048-6)
国家牧草产业技术体系(No.CARS-35)
国家星火计划项目(No.2015GA750003)
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文摘
研究应用RNA-seq和聚合酶链式反应确定了一个热休克同源蛋白70-2(MsHSC70-2)基因以及应用荧光定量PCR检测紫花苜蓿不同季节和不同器官中MsHSC70-2的mRNA含量。结果表明:该基因的mRNA序列含有2 025bp,开放阅读框1 950bp,编码649个氨基酸,该基因的蛋白分子量约70.97kDa,等电点4.74。同一器官不同季节MsHSC70-2mRNA含量不同(P<0.05),夏季时不同器官间含量存在差异(P<0.01),该基因在根、茎、叶和顶芽中的表达趋势从四月份到九月份都是先升高后降低,表明MsHSC70-2的表达受日照长度和温度的调节,其表达量变化影响了各器官的生长发育,高表达促进苜蓿的生长发育,低表达抑制苜蓿的生长发育,该基因表达的降低可能参与秋眠型苜蓿秋眠的发生。研究结果为进一步研究紫花苜蓿HSC70-2的功能提供了依据。
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关键词
mshsc70-2
苜蓿
耐热性
时空表达
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Keywords
MsISC70 - 2
Alfalfa
heat resistance
spatio-temporal expression
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分类号
S811.5
[农业科学—畜牧学]
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题名粘虫hsc70克隆及其密度胁迫下的表达模式
被引量：5
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作者
李鸿波
戴长庚
张昌容
何永福
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机构
贵州省农业科学院植物保护研究所
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出处
《应用昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期825-833,共9页
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基金
公益性(农业)科研专项(201403031)
贵州省自然科学基金(黔科合J字[2014]2121)
+2 种基金
国家自然科学基金(31601633)
贵州省农科院博士启动项目(201301
企业服务行动计划(黔2015-4012)
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文摘
【目的】昆虫种群密度的升高往往成为一种胁迫因子。粘虫在低密度下形成散居型,而在高密度下则形成群居型。本研通过比较hsc70在两型粘虫中的表达模式,究旨在探索hsc70在粘虫Mythimna separata响应密度胁迫中的作用。【方法】采用RT-PCR和RACE技术克隆粘虫hsc70cDNA全长序列,利用生物信息学软件分析该基因及其编码蛋白质的序列特性;运用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)分析该基因在两型粘虫不同发育阶段(卵、1-6龄幼虫、蛹和成虫)、5龄幼虫不同组织(头、表皮、前肠、中肠、后肠和马氏管)以及群居和分离处理后mRNA表达量的变化。【结果】克隆得到的HSC70基因命名为Mshsc70(GenBank登录号:MH669276),全长cDNA长2 184 bp,开放阅读框为1 965 bp,编码653个氨基酸。序列分析发现MsHSC70具有HSP70家族典型的结构域,即IDLGTTYS(11-18aa),IFDLGGGTFDVSLL (198-211 aa)和IVLVGGSTRIPKVQQ (341-355 aa)。序列比对结果显示,MsHSC70与斜纹夜蛾Spodopteralitura,棉铃虫Helicoverpaarmigera,大螟Sesamiainferens、甘蓝夜蛾Mamestra brassicae HSC70的相似性高达99%;基于HSC70的系统发育分析显示,粘虫与夜蛾科(Noctuidae)昆虫的亲缘关系最近。Mshsc70在两型粘虫的各个发育阶段均表达,hsc70的表达量在1龄和5龄中的表达量较散居型显著上调,而在2-3龄中的表达量显著下调。除表皮和前肠外,群居型粘虫的其他组织中hsc70的表达量显著高于散居型。散居型粘虫经群聚饲养36h后,hsc70显著上调表达,表达量是对照的3.17倍,而群居型粘虫经分离饲养36 h后,hsc70的表达量与对照无显著差异。【结论】粘虫的种群密度是决定粘虫hsc70表达的一个重要因子。
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关键词
粘虫
mshsc70
种群密度
实时荧光定量PCR
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Keywords
Mythimana separata
mshsc70
population density
quantitative real-time PCR
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分类号
S433.4
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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