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偏关苜蓿MsMYB44基因的克隆、亚细胞定位及表达分析
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作者 李迪娜 王凯 +4 位作者 陶佳丽 许涛 李青秀 朱慧森 岑慧芳 《草地学报》 北大核心 2026年第1期33-42,共10页
MYB(V-myb Avian myeloblastosis viral Oncogene Homolog)基因家族是植物中最大的转录因子家族之一,广泛参与植物的生长发育和逆境胁迫等过程。本研究以‘偏关’苜蓿(Medicago sativa‘Pianguan’)为材料,通过基因克隆、生物信息学分... MYB(V-myb Avian myeloblastosis viral Oncogene Homolog)基因家族是植物中最大的转录因子家族之一,广泛参与植物的生长发育和逆境胁迫等过程。本研究以‘偏关’苜蓿(Medicago sativa‘Pianguan’)为材料,通过基因克隆、生物信息学分析、亚细胞定位及表达模式分析来探究MsMYB44基因的特性。结果显示:‘偏关’苜蓿MsMYB44基因长966 bp,共编码321个氨基酸。MsMYB44蛋白与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtMYB44蛋白高度同源且定位于细胞核内。MsMYB44基因在‘偏关’苜蓿不同生育期的不同部位均有表达,表现出组织表达特异性。MsMYB44基因对干旱、盐胁迫及ABA处理均有响应。干旱胁迫下,MsMYB44相对表达量呈现出先升高后降低再升高的趋势,并在12 h时达到峰值;盐胁迫下,MsMYB44相对表达量在48 h后逐渐升高,且在72 h时达到最高值;ABA处理下,MsMYB44在12 h时相对表达量最高,随后逐渐降低。研究结果有望为阐释MsMYB44基因调控紫花苜蓿非生物胁迫响应机制提供一定理论参考。 展开更多
关键词 msmyb44 ‘偏关’苜蓿 克隆鉴定 亚细胞定位 表达模式 非生物胁迫
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海棠花青苷调控基因MsMYB44-likes的克隆与鉴定
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作者 陈雅晴 薛星月 +3 位作者 符嘉庆 马宇航 李增林 段瑛 《南方农业学报》 北大核心 2025年第8期2363-2374,共12页
【目的】克隆和鉴定海棠花青苷生物合成相关转录因子(MYB44-likes),为揭示MsMYB44-likes基因在海棠叶片着色过程中的调控机制及海棠观赏性状改良提供参考依据。【方法】以海棠品种海棠花为研究对象,对海棠组织培养幼苗进行喷施25μmol/... 【目的】克隆和鉴定海棠花青苷生物合成相关转录因子(MYB44-likes),为揭示MsMYB44-likes基因在海棠叶片着色过程中的调控机制及海棠观赏性状改良提供参考依据。【方法】以海棠品种海棠花为研究对象,对海棠组织培养幼苗进行喷施25μmol/L脱落酸(ABA)处理,以喷施清水作为对照(CK)。PCR克隆海棠嫩叶中3个MsMYB44-likes基因(MYB44-like1、MsMYB44-like2和MsMYB44-like3),并对3个MsMYB44-likes基因进行生物信息学分析、编码蛋白亚细胞定位和系统发育分析。在苹果表皮中对MsMYB44-like2基因进行瞬时过表达,并通过凝胶迁移试验(EMSA)研究MsMYB44-like2蛋白与花青苷生物合成途径中结构基因[海棠类黄酮糖基转移酶基因(MsUFGT)]的启动子结合情况。【结果】成功克隆获得3个MsMYB44-likes基因(MsMYB44-like1、MsMYB44-like2和MsMYB44-like3),其cDNA序列全长分别为954、960和942 bp,分别编码317、319和313个氨基酸残基;3个MsMYB44-likes蛋白结构中均以α-螺旋和无规则卷曲占比较高,且这3个蛋白与拟南芥、小麦、水稻、梨同源蛋白序列均含有典型的MYB-DNA结合结构域,MsMYB44-like1、MsMYB44-like2与梨的同源蛋白聚为一支。3个MsMYB44-likes蛋白均定位于细胞核。瞬时转化试验结果表明,注射含pCAMBIA2300-MsMYB44-like2农杆菌菌液后,苹果表皮的注射点周围呈黄绿色,说明该基因抑制苹果表皮花青苷的生物合成。与CK相比,经ABA处理后MsMYB44-like2基因的相对表达量显著降低(P<0.05)。EMSA试验结果显示,MsMYB44-like2蛋白与MsUFGT基因启动子片段的结合导致迁移率上移。【结论】3个MsMYB44-likes蛋白均含有典型的MYB-DNA结合结构域,均定位于细胞核。MsMYB44-like2基因表达受ABA负调控,该蛋白通过与MsUFGT基因的启动子直接结合抑制海棠花青苷的生物合成。 展开更多
关键词 海棠 花青苷 msmyb44-likes转录因子 脱落酸
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