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题名重组小鼠白细胞介素4在大肠杆菌中的高效表达
被引量：1
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作者
王锦娟
田季德
李晨
姚智
陈慰峰
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机构
北京医科大学免疫学教研室
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1992年第1期9-13,共5页
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基金
美国中华医学基金(CMB)资助课题
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文摘
应用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及 DNA 重组技术,我们成功地构建了重组小鼠 IL-4表达克隆,命名为 pBV-mIL4.该质粒含有 P_RP_L 串联启动子,合成 SD 序列和温度敏感的CIts857基因,并且去除了完整小鼠 IL—4 cDNA 中3′侧翼非编码区,以原核系统高频使用的强终止密码子TAA 代替了原小鼠 IL-4基因的终止密码子 TAG,经 SDS-PAGE 及凝胶密度扫描分析,表达的重组小鼠 IL-4分子量约为14.2KDa,占总菌体蛋白量的25～30%.用 HT-2细胞株的~3H-TdR 掺入法测定表明:表达的重组小鼠 IL-4具有 TCGF 样活性,约每升细菌培养物可获1x10^7单位重组小鼠 IL-4,且这种 TCGF 样活性可被抗小鼠 IL-4单克隆抗体特异性中和.在大肠杆菌中表达具有生物活性的重组小鼠 IL-4,为其实验室研究及应用以及批量生产提供了可能.
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关键词
PCR
大肠杆菌
白细胞介素4
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Keywords
mril-4
PCR
Expression
Escherichia coli
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分类号
R392－33
[医药卫生—免疫学]
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