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基于转录组与代谢组联合分析马尔尼菲篮状菌毒力蛋白Mp1p对巨噬细胞的影响
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作者 刘宇轩 韦吴迪 +6 位作者 包秀丽 陈丽香 詹佰丽 何小桃 叶力 蒋俊俊 梁浩 《中国热带医学》 CAS 北大核心 2024年第3期265-270,共6页
目的通过转录组学联合代谢组学探索Mp1p对宿主巨噬细胞的影响。方法使用慢病毒构建稳定表达Mp1p的THP-1巨噬细胞株(THP-1-Mp1p^(+))。采用RNA高通量测序(RNA sequencing,RNA-Seq)技术,在转录组学分析中,检测细胞内mRNA的表达量,确定差... 目的通过转录组学联合代谢组学探索Mp1p对宿主巨噬细胞的影响。方法使用慢病毒构建稳定表达Mp1p的THP-1巨噬细胞株(THP-1-Mp1p^(+))。采用RNA高通量测序(RNA sequencing,RNA-Seq)技术,在转录组学分析中,检测细胞内mRNA的表达量,确定差异表达基因;在代谢组学分析中,通过数据库比对进行代谢物鉴定,对差异代谢物进行通路分析,揭示潜在作用机制。将代谢组学和转录组学结果联合分析,将差异代谢物和差异基因进行联合分析,进一步阐述Mp1p对巨噬细胞的作用机制。结果转录组分析表明,THP-1-Mp1p^(+)组相较于阴性对照组,共有1180个差异基因,上调基因345个、下调基因835个。基因本体论(gene ontology,GO)富集分析显示,差异表达基因有135个,其中BP 105个、CC 28个、MF 2个。京都基因和基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析结果显示,Mp1p对THP-1巨噬细胞的作用与肿瘤坏死因子信号通路高度相关。代谢组分析发现,正、负离子模式下空白对照组和THP-1-Mp1p^(+)巨噬细胞组在质量控制样本之间都能达到很好的分离。显著差异的阈值为:VIP≥1且T-test P<0.05,筛选出差异代谢物488个,其中正离子模式230个、负离子258个,将鉴定出的代谢产物进行通路富集分析,显著富集到了代谢途径上。联合分析结果显示,发现肿瘤坏死因子信号通路、白介素-17信号通路、NFkappaB信号通路是其中重要的代谢途径。结论毒力因子Mp1p可能通过调节肿瘤坏死因子信号通路、白介素-17信号通路、NF-kappaB信号通路影响宿主巨噬细胞。研究结果有助于进一步理解Mp1p的作用机制,并为未来筛选相关的诊断和治疗靶点提供了可能的方向。 展开更多
关键词 马尔尼菲篮状菌 mp1p TNF通路 转录组 代谢组
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双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p抗体 被引量:10
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作者 王艳芳 曾磊 +6 位作者 陈学东 郝卫 杨梅 蔡建飘 王压娣 袁国勇 车小燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期439-443,共5页
目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心EL... 目的建立一种检测马尔尼菲青霉特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法。方法利用毕赤酵母系统表达重组马尔尼菲青霉特异性甘露糖蛋白Mp1p,并利用改良过碘酸钠法标记Mp1p,经棋盘滴定法建立一种可检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,并检测100例健康人群对照血清、21例血培养确诊其他真菌感染病人血清和15例血培养确诊马尔尼菲青霉病人血清,联合本实验室前期建立的马尔尼菲青霉抗原检测方法评价其临床应用价值。结果成功建立一种检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,经健康人群对照及其他真菌感染病人血清评价特异度为100%(121/121),检测15例马尔尼菲青霉病人血清,Mp1p特异性抗体2例阳性,Mp1p特异性抗原12例阳性,Mp1p抗体与抗原联合检测可明显提高灵敏度,达到93.3%(14/15)。结论双抗原夹心ELISA法检测马尔尼菲青霉Mp1p特异性抗体具有高度的特异性,联合抗原检测可提高马尔尼菲青霉感染诊断率。 展开更多
关键词 马尔尼菲青霉 双抗原夹心ELISA法 真菌 mp1p 抗体检测
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广西人类免疫缺陷病毒感染者/艾滋病患者合并马尔尼菲篮状菌感染的特征及Mp1p抗原快速筛检的研究 被引量:12
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作者 韩静 蒋忠胜 +8 位作者 王刚 张鹏 胡家光 韦吴迪 张洪 何锦豪 李玥琪 宁传艺 梁浩 《微生物与感染》 CAS 2021年第1期19-25,共7页
为调查广西人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者/艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)患者合并马尔尼菲篮状菌(Talaromyces marneffei,TM)感染的特征并评价TM Mp1p(一种甘露糖蛋白)抗原试剂盒(酶联... 为调查广西人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者/艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)患者合并马尔尼菲篮状菌(Talaromyces marneffei,TM)感染的特征并评价TM Mp1p(一种甘露糖蛋白)抗原试剂盒(酶联免疫吸附试验)的临床检测效果,本研究收集广西壮族自治区柳州市人民医院2018年8月—2019年6月确诊的200例HIV感染者/AIDS患者的信息并采集其血浆和咽拭子,获得血浆样本118份、咽拭子样本111份,用TM抗原试剂盒检测,并与病原学培养结果进行比较。结果显示,200例HIV感染者/AIDS患者中TM总体感染率为10%,且CD4^(+)T细胞计数越低者TM感染率越高,CD4^(+)T细胞≤50/μL时TM感染率高达29%。差异性分析显示,与HIV-1感染者相比,20例HIV-1合并TM感染者的CD4^(+)T细胞、淋巴细胞、血红蛋白、白蛋白、血小板水平下降,差异有统计学意义(P<0.001),门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、AST/丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和D-二聚体升高,差异有统计学意义(P<0.05)。以病原学培养结果为金标准,TM抗原试剂盒检测118份血浆样本的灵敏度为80%(95%CI:51.1~94.7),特异度为97.1%(95%CI:91.1~99.2),检测111例咽拭子样本的灵敏度为41.7%(95%CI:16.5~71.4),特异度为100%(95%CI:0.95~1)。结果表明,TM抗原试剂盒检测血浆样本的灵敏度良好,特异度高,适合临床TM感染的筛检。因此,对CD4^(+)T细胞计数低的HIV感染者/AIDS患者应及早进行Mp1p抗原快速筛检,做到早发现、早治疗,从而降低TM感染的发病率和死亡率。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 艾滋病 马尔尼菲篮状菌 合并感染 mp1p抗原 双抗体夹心酶联免疫吸附试验
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抗肌萎缩蛋白基因内MP1P位点多态性的银染法检测
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作者 初海鹰 黄尚志 +2 位作者 许顺滨 周郁 罗会元 《中国优生与遗传杂志》 1995年第2期9-10,共2页
应用银染聚丙烯酰胺凝胶法,对抗肌萎缩蛋白基因3'非翻译区MP1P位点进行了扩增片段长度多态性分析。此位点在中国人中有多态性,共检出3个等位片段,汉族人群中3个等位片段的频率分别为0.141、0.703、0.156,P... 应用银染聚丙烯酰胺凝胶法,对抗肌萎缩蛋白基因3'非翻译区MP1P位点进行了扩增片段长度多态性分析。此位点在中国人中有多态性,共检出3个等位片段,汉族人群中3个等位片段的频率分别为0.141、0.703、0.156,PIC为0.462;回族人群中的频率分别为0.182,0.591,0.227,PIC为0.566。此位点与3'不翻译区的3'CA位点存在连锁不平衡性,在连锁分析中可替代3'CA作为基因3'端的遗传标志。 展开更多
关键词 抗肌萎缩蛋白 基因 多态性 银染法 人中 遗传标志 检出 3′非翻译区 位点 回族人群
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ELISA法和荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌抗原的应用价值 被引量:7
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作者 柳丽娟 李圣聪 +2 位作者 谢海花 周淑燕 吴绍贵 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第11期831-832,共2页
目的评价双抗体夹心ELISA法和荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌Mp1p抗原的临床应用价值。方法用ELISA法和荧光免疫层析法检测335例住院患者血清中的马尔尼菲蓝状菌抗原,比较2种方法检测结果与血培养结果的一致性。结果以血培养结果为... 目的评价双抗体夹心ELISA法和荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌Mp1p抗原的临床应用价值。方法用ELISA法和荧光免疫层析法检测335例住院患者血清中的马尔尼菲蓝状菌抗原,比较2种方法检测结果与血培养结果的一致性。结果以血培养结果为金标准,ELISA与荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌抗原的敏感性分别为75.0%和78.1%,特异性均为100%,准确度分别为97.6%和97.9%,Kappa值分别为0.844和0.866。结论双抗体夹心ELISA法和荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌抗原快速、简便,结果可靠,适用于临床急性期马尔尼菲蓝状菌感染的辅助诊断。 展开更多
关键词 马尔尼菲蓝状菌 马尔尼菲青霉 mp1p抗原 ELISA 荧光免疫层析法
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南方地区低CD4^+T淋巴细胞艾滋病病人筛查马尔尼菲蓝状菌抗原和隐球菌荚膜抗原的临床意义 被引量:6
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作者 李凌华 李丽雅 +7 位作者 何耀祖 胡凤玉 兰芸 王浩迪 何凯茵 陈谐捷 唐小平 蔡卫平 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期14-17,60,共5页
目的探讨我国南方地区低CD4^+T淋巴细胞(简称CD4细胞)艾滋病病人接受高效抗反转录病毒治疗(HAART)前筛查马尔尼菲蓝状菌抗原和隐球菌荚膜抗原(CrAg)的临床意义。方法以广州市第八人民医院236例艾滋病病毒1型阳性且CD4细胞<100个/μL... 目的探讨我国南方地区低CD4^+T淋巴细胞(简称CD4细胞)艾滋病病人接受高效抗反转录病毒治疗(HAART)前筛查马尔尼菲蓝状菌抗原和隐球菌荚膜抗原(CrAg)的临床意义。方法以广州市第八人民医院236例艾滋病病毒1型阳性且CD4细胞<100个/μL的初诊病人为研究对象,检测其外周血马尔尼菲蓝状菌特异性甘露糖蛋白(Mp1p)和半乳甘露聚糖(GM)及CrAg,分析这些检测抗原的临床意义。结果 236例病人,男194例,女42例,平均年龄(41.21±13.13)岁,CD4细胞计数均<100个/μL,中位数24个/μL。检测Mp1p阳性者46例(19.49%),GM阳性38例(16.10%),CrAg阳性8例(3.39%)。CD4细胞计数<50个/μL组与≥50个/μL组比较,有临床症状组与无症状组比较,其外周血Mp1p和GM抗原阳性率更高(P均<0.05),但CrAg抗原检出率无明显差异(P均≥0.05)。共44例Mp1p阳性、38例GM阳性及8例CrAg阳性病人接受病原检测,分别97.73%(43/44)、78.95%(30/38)发现马尔尼菲蓝状菌,62.50%(5/8)发现新型隐球菌。共131例Mp1p阴性、137例GM阴性及167例CrAg阴性病人接受病原检测,分别4.58%(6/131)与13.87%(19/137)发现马尔尼菲蓝状菌,无一例发现新型隐球菌。Mp1p阳性组和CrAg阳性组1年时的死亡率明显高于阴性组(P均<0.05),但外周血GM阳性组和阴性组12周及1年时的死亡率无明显差异(P均≥0.05)。结论我国南方低CD4细胞艾滋病病人接受HAART前筛查马尔尼菲蓝状菌抗原和CrAg,有助于早期诊断和治疗,降低死亡率。 展开更多
关键词 艾滋病 甘露糖蛋白 半乳甘露聚糖 隐球菌荚膜抗原 抗原筛查
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