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甘薯小孢子活力FDA荧光染色法优化及应用
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作者 陈敬辉 高润红 +6 位作者 焦伟静 王颖帅 胡亚亚 陈典典 刘兰服 马志民 刘艳芬 《河北农业科学》 2025年第2期102-108,共7页
为了快速、准确地统计甘薯小孢子活力,确定合适的培养方式,以甘薯栽培品种“冀紫3号”单核期小孢子为试验材料,从工作液浓度、染色温度和染色时间3个方面,对FDA荧光染色法进行优化;并采用优化后的方法,对不同减数分裂时期和采用不同液... 为了快速、准确地统计甘薯小孢子活力,确定合适的培养方式,以甘薯栽培品种“冀紫3号”单核期小孢子为试验材料,从工作液浓度、染色温度和染色时间3个方面,对FDA荧光染色法进行优化;并采用优化后的方法,对不同减数分裂时期和采用不同液体培养基培养的小孢子进行了活力检测。结果表明:常温(25℃)下FDA工作液浓度8μg/mL、染色5min,可以简便、有效地检测甘薯单核期小孢子的活力。该方法还可应用于小孢子母细胞时期小孢子活力的检测,但是不适用于甘薯小孢子四分体时期和成熟花粉粒期的小孢子活力测定。培养过程中4种液体培养基培养的小孢子活力变化趋势基本一致,均表现为培养开始后活力快速降低,第2天时小孢子活力仅为培养开始时的50%左右,第10天时小孢子活力趋于0。研究结果不仅可为甘薯小孢子活力测定提供依据,还可为甘薯单倍体育种提供一定的参考。 展开更多
关键词 甘薯 FDA荧光染色 小孢子活力 单核期
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强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞中急性时相反应蛋白的差异表达研究 被引量:3
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作者 蔡安季 戴勇 +2 位作者 李武县 李紫微 涂植光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期2084-2087,共4页
目的检测强直性脊柱炎外周血单个核细胞中急性时相反应蛋白表达水平,探讨其与强直性脊柱炎发病的关系。方法收集10例强直性脊柱炎患者和9例健康对照,提取外周血单个核细胞,采用相对和绝对定量的等量异位标签串联质谱技术检测强直性脊柱... 目的检测强直性脊柱炎外周血单个核细胞中急性时相反应蛋白表达水平,探讨其与强直性脊柱炎发病的关系。方法收集10例强直性脊柱炎患者和9例健康对照,提取外周血单个核细胞,采用相对和绝对定量的等量异位标签串联质谱技术检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞中的急性时相反应蛋白表达水平,并运用Western blot方法进行验证差异表达的触珠蛋白(Hp)和铜蓝蛋白(Cp)。结果基于质谱分析的蛋白组学显示,19种急性时相反应蛋白在强直性脊柱炎外周血单个核细胞中蛋白表达水平明显升高(P<0.05),主要包括补体C3、纤粘蛋白(FN1)、血浆酶原(PLG)、转铁蛋白(TF)、Hp和Cp;Western blot检测Hp和Cp的表达水平与相对和绝对定量的等量异位标签串联质谱技术检测结果具有相同的变化趋势。结论急性时相反应蛋白差异表达可能参与了强直性脊柱炎的发生、发展,有望作为强直性脊柱炎的临床生物标记物。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 外周血单个核细胞 急性时候反应蛋白 差异表达 相对和绝对定量的等量异位标签技术
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞周期变化的初步研究 被引量:1
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作者 汤红峰 曾凡钦 +1 位作者 谭国珍 郭庆 《岭南皮肤性病科杂志》 2009年第2期86-88,共3页
目的:探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)细胞周期的变化。方法:采用流式细胞仪检测SLE患者PB-MCs植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激前后细... 目的:探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)细胞周期的变化。方法:采用流式细胞仪检测SLE患者PB-MCs植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激前后细胞周期变化,并与正常人比较。结果:PHA刺激前,SLE患者PBMCs细胞周期构成与正常人无明显差异;刺激后SLE患者PBMCs G0/G1期比例降低,S期比例增高,与正常人比较差异有统计学意义。结论:SLE患者PBMCs较正常人易于活化及增殖。 展开更多
关键词 细胞周期 外周血单个核细胞 系统性红斑狼疮
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中急性期蛋白反应因子的表达
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作者 彭学标 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期380-381,384,共3页
目的 探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血单个核细胞 (PBMC)中急性期蛋白反应因子 (APRF)的活性水平 ,以及IL 6和IL 10对APRF表达的影响。方法 采用凝胶阻滞电泳 (EMSA)的方法检测 4 0例SLE患者及 2 0例正常对照组PBMC中DNA结合蛋白A... 目的 探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血单个核细胞 (PBMC)中急性期蛋白反应因子 (APRF)的活性水平 ,以及IL 6和IL 10对APRF表达的影响。方法 采用凝胶阻滞电泳 (EMSA)的方法检测 4 0例SLE患者及 2 0例正常对照组PBMC中DNA结合蛋白APRF的表达水平。结果 所有活动期SLE患者均出现APRF电泳条带 ,17例非活动期SLE患者中有 10例出现APRF条带 ,而正常人对照组无 1例出现。 7例未出现APRF电泳条带的非活动期SLE患者PBMC加IL 10处理后均出现不同程度的APRF表达 ,而加IL 6处理时仍未出现APRF电泳条带。结论 SLE患者存在APRF的异常表达。在SLE中 ,IL 10信号转导途径中的某些调控机制 (如蛋白激酶 )可能发生改变 ,从而使得核内的APRF激活转录 ,提示IL 10很可能是通过APRF在SLE的发病机制中起作用 ,相反IL 6在SLE发病的作用机制很可能与APRF无关。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 外周血单个核细胞 急性期蛋白反应因子
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雷公藤多甙治疗类风湿关节炎的机理——Ⅲ.对正常人及RA患者周围血单个核细胞体外分泌免疫球蛋白的抑制作用 被引量:3
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作者 叶文浩 陶学濂 张乃峥 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期217-222,共6页
在体外用雷公藤多甙(TⅡ)处理17例正常人及8例类风湿关节炎(RA)患者的外周血单个核细胞或淋巴细胞或单核细胞,不同组合的细胞在南陆素刺激下培养2周,用双夹心固相免疫放射法测定培养上清液中的IgG及IgM水平。结果发现TⅡ对正常人及RA患... 在体外用雷公藤多甙(TⅡ)处理17例正常人及8例类风湿关节炎(RA)患者的外周血单个核细胞或淋巴细胞或单核细胞,不同组合的细胞在南陆素刺激下培养2周,用双夹心固相免疫放射法测定培养上清液中的IgG及IgM水平。结果发现TⅡ对正常人及RA患者PBMC体外分泌IgG及IgM的抑制作用相近,TⅡ单独处理单核细胞或/及淋巴细胞均可抑制Ig的分泌,但对后者的抑制作用明显强于前者。此结果与全制剂、青霉胺等抗风湿药有所不同。本实验结果与该药的临床资料相一致,提示TⅡ的治疗作用与它的免疫抑制作用相关。 展开更多
关键词 雷公藤多甙 类风湿关节炎 粘附细胞
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外周血单个核细胞GTSE1水平与上皮性卵巢癌预后的相关性
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作者 孙丽妍 宋永祯 +1 位作者 李娅茹 李桂芬 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第12期2308-2314,共7页
目的:探究外周血单个核细胞G_(2)/S期应答相关蛋白1(G_(2)and S phase-expressed-1,GTSE1)水平与上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)预后的关系。方法:GEPIA和Kaplan-Meier Plotter分析GTSE1在卵巢癌组织中的表达及其与预后... 目的:探究外周血单个核细胞G_(2)/S期应答相关蛋白1(G_(2)and S phase-expressed-1,GTSE1)水平与上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)预后的关系。方法:GEPIA和Kaplan-Meier Plotter分析GTSE1在卵巢癌组织中的表达及其与预后的关系。选择2017年04月至2020年10月本院126例EOC患者(EOC组)和40例同期无EOC的健康体检者(对照组)作为研究对象。Ficoll密度梯度离心法分离外周血中单个核细胞,蛋白质免疫印迹法检测GTSE1水平。Spearman相关分析EOC组织和外周血单个核细胞中GTSE1水平的关系。随访了解EOC预后,用COX回归分析EOC预后的风险因素。结果:GEPIA和Kaplan-Meier Plotter分析结果显示,卵巢癌组织中GTSE1水平高于正常卵巢组织(P<0.05),GTSE1低水平卵巢癌患者的中位无进展生存时间高于GTSE1高水平卵巢癌患者(P<0.05)。随访期间复发98例(77.8%),其中铂类敏感型65例,铂类耐药型33例;死亡41例(32.5%)。EOC组的外周血单个核细胞中GTSE1 mRNA和GTSE1蛋白水平均高于对照组(P<0.001)。EOC患者癌组织和外周血单个核细胞中GTSE1水平呈正相关关系(r_(s)=0.225,P=0.011)。国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)Ⅰ-Ⅱ期患者的GTSE1水平低于Ⅲ-Ⅳ期的患者(P<0.001);未复发患者的GTSE1水平低于铂类敏感型和铂类耐药型的患者(P<0.05);生存患者的GTSE1水平低于死亡患者(P<0.001)。GTSE1高水平患者的无复发生存时间和总生存时间均低于GTSE1低水平患者(P<0.001)。COX回归分析结果显示,FIGO分期高(HR=2.110,95%CI:1.465~3.038,P<0.001;HR=2.261,95%CI:1.212~4.216,P=0.011)、初次手术残存灶>1 cm(HR=1.724,95%CI:1.130~2.631,P=0.012;HR=2.465,95%CI:1.246~4.874,P=0.010)和GTSE1>1.29(HR=2.071,95%CI:1.304~3.291,P=0.002;HR=5.634,95%CI:2.410~13.169,P<0.001)是EOC预后(复发和生存)的独立危险因素,应用贝伐单抗(HR=0.293,95%CI:0.116~0.738,P=0.010;HR=0.141,95%CI:0.056~0.357,P<0.001)是EOC预后的独立保护因素。结论:EOC患者外周血单个核细胞中GTSE1水平高提示预后不良风险高。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 G_(2)/S期应答相关蛋白1 外周血单个核细胞 预后
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