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桑树花青素合成相关基因MnANS和MnFLS的克隆及其在番茄中过表达分析
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作者 代洁 唐清霞 +9 位作者 曾益春 刘江 何琴 危玲 佟万红 姚永权 郑继川 李永远 刘刚 黄盖群 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期2602-2608,共7页
【目的】探究桑树(Morus notabilis)花青素生物合成途径中花青素合酶(Anthocyanidin synthase/Leucoanthocyanidin dioxygenase,ANS/LDOX)和黄酮醇合酶(Flavonol synthase,FLS)基因的功能,为桑椹品质改良提供理论基础。【方法】克隆2个... 【目的】探究桑树(Morus notabilis)花青素生物合成途径中花青素合酶(Anthocyanidin synthase/Leucoanthocyanidin dioxygenase,ANS/LDOX)和黄酮醇合酶(Flavonol synthase,FLS)基因的功能,为桑椹品质改良提供理论基础。【方法】克隆2个桑树花青素合成途径的关键基因MnANS和MnFLS,将这2个基因构建至过表达载体中,并通过农杆菌介导的遗传转化将2个载体转化至番茄Micro-Tom中。【结果】基因和蛋白序列分析表明,桑树MnFLS基因编码含335个氨基酸残基的蛋白,预测分子量为38.3 kDa,等电点为5.91;MnANS基因编码含358个氨基酸残基的蛋白,预测分子量为40.9 kDa,等电点为5.62。MnFLS蛋白和MnANS蛋白均含有Fe2OG-dioxygenase保守结构域。经转基因阳性鉴定,获得含MnFLS和MnANS基因的转基因番茄植株。表型观察结果显示,转MnANS基因番茄植株的茎秆呈深紫色,表明MnANS蛋白对花青素的积累具有潜在影响。转MnFLS基因番茄植株并未表显出明显的表型变化。【结论】通过对转基因番茄植株表型和基因表达量的综合分析,初步揭示MnANS基因在桑树花青素合成中的作用,并为桑树品质改良提供重要的分子生物学信息和进一步研究桑果颜色和花青素代谢工程奠定基础。 展开更多
关键词 桑树 花青素生物合成 mnans基因 MnFLS基因 基因克隆 番茄过表达分析
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