目的比较探针和抗线粒体蛋白抗体标记细胞及组织中线粒体的效果,为相关研究选取适合的标记方法提供参考。方法在经体积分数4%多聚甲醛固定的HepG2细胞中,分别使用100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗葡萄糖调节蛋白75(Grp75)抗体...目的比较探针和抗线粒体蛋白抗体标记细胞及组织中线粒体的效果,为相关研究选取适合的标记方法提供参考。方法在经体积分数4%多聚甲醛固定的HepG2细胞中,分别使用100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗葡萄糖调节蛋白75(Grp75)抗体标记线粒体;在经体积分数4%多聚甲醛固定的HeLa细胞中,分别使用75 nmol/L、100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗Grp75抗体标记线粒体;取人肝组织冰冻切片,经4%多聚甲醛固定后,分别使用150 nmol/L MitoTracker Deep Red和抗Grp75抗体标记线粒体。共聚焦显微镜下观察。结果MitoTracker Deep Red探针标记细胞线粒体的效果不如抗Grp75抗体标记清晰,且在HeLa细胞中有非特异性染色,抗体标记可更清楚地反映线粒体的点状和管状分布;在组织中MitoTracker Deep Red探针标记的单个细胞更均匀,标记线粒体的特异性更高,效果优于抗体染色。结论在细胞中使用抗Grp75抗体标记线粒体效果更好,能直观反映线粒体的分裂融合状态;在组织中使用MitoTracker Deep Red染色效果更佳。展开更多
目的:分析线粒体活性对人类精子活动力的影响。方法:以线粒体特异性荧光染料--mitotracker deep red 633(MTDR对不同活力的精子进行染色,然后用流式细胞术测定精子线粒体活性(即MTDR荧光强度值)。用雷帕霉素(rapamycin,RP)和羟氯喹(hydr...目的:分析线粒体活性对人类精子活动力的影响。方法:以线粒体特异性荧光染料--mitotracker deep red 633(MTDR对不同活力的精子进行染色,然后用流式细胞术测定精子线粒体活性(即MTDR荧光强度值)。用雷帕霉素(rapamycin,RP)和羟氯喹(hydroxychloroquineon,HCQ)调控精子活性水平,测定精子活动力的变化。结果:MTDR荧光强度值与前向运动速率(progressive motility,PR)不相关(r=0.182,P=0.268)。5 nmol/L和100 nmol/L的RP均可明显降低线粒体活性,50μmol/L HCQ可明显提高线粒体活性(P<0.05),但它们对精子活动力影响都不明显(P>0.05)。结论:线粒体活性对人类精子活力影响不明显。展开更多
文摘目的比较探针和抗线粒体蛋白抗体标记细胞及组织中线粒体的效果,为相关研究选取适合的标记方法提供参考。方法在经体积分数4%多聚甲醛固定的HepG2细胞中,分别使用100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗葡萄糖调节蛋白75(Grp75)抗体标记线粒体;在经体积分数4%多聚甲醛固定的HeLa细胞中,分别使用75 nmol/L、100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗Grp75抗体标记线粒体;取人肝组织冰冻切片,经4%多聚甲醛固定后,分别使用150 nmol/L MitoTracker Deep Red和抗Grp75抗体标记线粒体。共聚焦显微镜下观察。结果MitoTracker Deep Red探针标记细胞线粒体的效果不如抗Grp75抗体标记清晰,且在HeLa细胞中有非特异性染色,抗体标记可更清楚地反映线粒体的点状和管状分布;在组织中MitoTracker Deep Red探针标记的单个细胞更均匀,标记线粒体的特异性更高,效果优于抗体染色。结论在细胞中使用抗Grp75抗体标记线粒体效果更好,能直观反映线粒体的分裂融合状态;在组织中使用MitoTracker Deep Red染色效果更佳。
文摘目的:分析线粒体活性对人类精子活动力的影响。方法:以线粒体特异性荧光染料--mitotracker deep red 633(MTDR对不同活力的精子进行染色,然后用流式细胞术测定精子线粒体活性(即MTDR荧光强度值)。用雷帕霉素(rapamycin,RP)和羟氯喹(hydroxychloroquineon,HCQ)调控精子活性水平,测定精子活动力的变化。结果:MTDR荧光强度值与前向运动速率(progressive motility,PR)不相关(r=0.182,P=0.268)。5 nmol/L和100 nmol/L的RP均可明显降低线粒体活性,50μmol/L HCQ可明显提高线粒体活性(P<0.05),但它们对精子活动力影响都不明显(P>0.05)。结论:线粒体活性对人类精子活力影响不明显。
