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MitoCur-1通过靶向抑制泛素特异性蛋白酶14对肝细胞癌的影响
1
作者 李怡 李国艳 +4 位作者 程丽 李格格 李艾铭 杨子琰 崔红梅 《职业卫生与应急救援》 2025年第2期239-245,258,共8页
目的探究MitoCur-1通过抑制泛素特异性蛋白酶14(USP14)对肝细胞癌增殖、迁移的影响,为MitoCur-1的抗肿瘤作用提供理论依据。方法首先,体外培养HepG2细胞,应用CCK-8实验和克隆形成实验检测MitoCur-1对细胞增殖能力的影响;应用划痕实验检... 目的探究MitoCur-1通过抑制泛素特异性蛋白酶14(USP14)对肝细胞癌增殖、迁移的影响,为MitoCur-1的抗肿瘤作用提供理论依据。方法首先,体外培养HepG2细胞,应用CCK-8实验和克隆形成实验检测MitoCur-1对细胞增殖能力的影响;应用划痕实验检测MitoCur-1对细胞迁移能力的影响;应用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测MitoCur-1作用于HepG2后细胞内USP14的mRNA和蛋白表达水平的变化;放线菌酮(CHX)实验检测MitoCur-1对蛋白半衰期的影响;其次,构建动物模型,应用苏木精-伊红染色(HE)和免疫组织化学(IHC)法,检测MitoCur-1在体内的抗肿瘤效应。结果HepG2的细胞活力随MitoCur-1浓度的升高而降低,细胞的IC50为3.62μmol/L。与对照组相比,0.2、0.4、0.8μmol/L MitoCur-1处理后,HepG2细胞的克隆形成能力均有下降(均P<0.05)。1、2、4μmol/L的MitoCur-1处理48 h,HepG2细胞迁移能力均下降(均P<0.05)。与对照组相比,1、2、4μmol/L MitoCur-1处理HepG2细胞24 h,USP14的mRNA和蛋白表达水平均下降(均P<0.05)。CHX实验结果提示,MitoCur-1缩短了USP14的蛋白半衰期(P<0.05)。体内实验显示,15 mg/kg(以体重计)MitoCur-1给药组小鼠肿瘤体积增长速度减缓,肿瘤体积明显低于对照组(P<0.05),但小鼠体重总体上增长,与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论MitoCur-1能抑制USP14的表达,降低HepG2细胞的增殖、迁移能力,诱导肿瘤细胞发生凋亡,促进自噬,抑制肝细胞癌的发展。 展开更多
关键词 泛素特异性蛋白酶14 肝细胞癌 mitocur-1 靶向 抗肿瘤 HEPG2细胞
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