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Lycium barbarum L.-Derived miR162a Functions on Osteoporosis Through Directly Promoting Osteoblast Formation
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作者 Chunyan Gu Xichao Yu +13 位作者 Xiaozhu Tang Leilei Gong Jingquan Tan Yuanjiao Zhang Huili Zheng Ze Wang Chenqian Zhang Yejin Zhu Zuojian Zhou Heming Yu Kai Xu Jinao Duan Xiaosong Gu Ye Yang 《Engineering》 2025年第3期162-171,共10页
Traditional Chinese medicine(TCM)can help prevent or treat diseases;however,there are few studies on the active substances of TCM.For example,Lycium barbarum L.has been proven to be effective in treating osteoporosis ... Traditional Chinese medicine(TCM)can help prevent or treat diseases;however,there are few studies on the active substances of TCM.For example,Lycium barbarum L.has been proven to be effective in treating osteoporosis for thousands of years,but its active substance remains to be unknown.Prompted by the efforts to modernize TCM,the present study focused on the novel active substance of Lycium barbarum L.to reinforce kidney essence to produce bone marrow.Illumina deep sequencing analysis and stemloop polymerase chain reaction(PCR)assay revealed that miR162a,a Lycium barbarum L.-derived microRNA,can pass through the gastrointestinal tract to target the bone marrow in mice.Immunofluorescence staining showed that miR162a was absorbed through systemic RNA interference defective transmembrane family member 1(SIDT1)in the stomach.Bioinformatics prediction and luciferase reporter assay identified that miR162a targeted nuclear receptor corepressor(NcoR).Alizarin red staining and micro-computed tomography(microCT)confirmed that miR162a promoted osteogenic differentiation in bone marrow mesenchymal stem cells,zebrafish,and a mouse model of osteoporosis.In addition,transgenic Nicotiana benthamiana(N.benthamiana)leaves overexpressing miR162a were developed by agrobacterium infiltration method.microCT and tartrate-resistant acid phosphatase staining confirmed that transgenic N.benthamiana leaves effectively protected against osteoporosis in mice.Our study mechanistically explains how Lycium barbarum L.improves osteoporosis and supports that Lycium barbarum L.reinforces kidney essence,thereby strengthening the bone.miR162a expressed by transgenic plants may represent a novel and safe treatment for human osteoporosis. 展开更多
关键词 Traditional Chinese medicine Lycium barbarum L. mir162a OSTEOPOROSIS Nuclear receptor corepressor Transgenic plants
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转基因玉米MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化 被引量:9
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作者 张广远 孙红炜 +3 位作者 李凡 杨淑珂 路兴波 赵蕾 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1141-1147,共7页
转基因玉米MIR162是美国先正达公司开发的新型抗鳞翅目昆虫的转基因玉米品种。本研究目的在于建立该品系转化事件特异性定性、定量检测方法并形成定性检测国家标准。定性PCR体系经实验室内部比对及实验室间循环验证结果表明,该体系特异... 转基因玉米MIR162是美国先正达公司开发的新型抗鳞翅目昆虫的转基因玉米品种。本研究目的在于建立该品系转化事件特异性定性、定量检测方法并形成定性检测国家标准。定性PCR体系经实验室内部比对及实验室间循环验证结果表明,该体系特异性强,灵敏度较高(0.1%),具有良好的重复性和再现性。TaqMan探针实时荧光PCR检测结果表明,所设计的探针特异性强,检测低限(LOD)在0.01%以下;定量标准曲线R2均为0.999,扩增效率为98.622%和99.602%,SD范围为0.014~0.209,RSD的范围为0.049%~0.879%,稳定性好;对转基因含量为1.0%、0.5%、0.1%的样品定量结果相对偏差在8.0%以内,结果较为准确。本研究建立的方法完全可用于含转基因玉米MIR162成分样品的检测。 展开更多
关键词 转化体特异性 mir162 定性PCR TaqMan探针实时荧光PCR 标准化
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转基因玉米Mir162品系的实时PCR及可视芯片检测方法研究 被引量:7
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作者 邓婷婷 黄文胜 +2 位作者 吴亚君 韩建勋 陈颖 《植物检疫》 北大核心 2012年第5期14-18,共5页
本研究以转基因玉米品系Mir162的性状基因vip3a为靶标,建立了实时荧光PCR和可视芯片检测方法。结果表明两种方法都能特异性检测玉米Mir162品系,其中实时荧光PCR检测的相对灵敏度可达0.001%,可视芯片检测灵敏度达0.01%。本研究建立的方... 本研究以转基因玉米品系Mir162的性状基因vip3a为靶标,建立了实时荧光PCR和可视芯片检测方法。结果表明两种方法都能特异性检测玉米Mir162品系,其中实时荧光PCR检测的相对灵敏度可达0.001%,可视芯片检测灵敏度达0.01%。本研究建立的方法可用于进境转基因玉米中Mir162品系的检测。 展开更多
关键词 转基因玉米 mir162 实时PCR 可视芯片检测
原文传递
多重实时荧光PCR TaqMan-MGB杂交探针标记法快速鉴定转基因玉米MIR162 被引量:1
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作者 王凤军 许海锋 +2 位作者 陈强 杨伊平 金浩然 《保鲜与加工》 CAS 2023年第3期56-61,共6页
为对转基因玉米MIR162的进口实行监测、规范转基因玉米在国内市场中的流通,建立一种转基因玉米MIR162准确快速的检测方法,通过设计转基因玉米MIR162品系特异性序列的引物和探针,摸索和优化多重荧光PCR体系和参数,开发建立多重实时荧光PC... 为对转基因玉米MIR162的进口实行监测、规范转基因玉米在国内市场中的流通,建立一种转基因玉米MIR162准确快速的检测方法,通过设计转基因玉米MIR162品系特异性序列的引物和探针,摸索和优化多重荧光PCR体系和参数,开发建立多重实时荧光PCR TaqMan-MGB杂交探针标记法快速鉴定转基因玉米MIR162。结果表明,转基因玉米MIR162品系标准品和平行样品中内标基因和品系特异性基因均出现明显扩增曲线,其他转基因玉米品系标准品仅内标基因有扩增曲线,空白对照无扩增曲线,说明该TaqMan-MGB探针对转基因玉米MIR162品系具有扩增特异性。该方法可作为鉴定筛查转基因玉米MIR162品系及其转化体成分的有效方法,用于规范管理转基因产品在市场上的流通。 展开更多
关键词 转基因玉米mir162 多重实时荧光PCR TaqMan-MGB杂交探针标记法 快速鉴定
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进口玉米酒糟粕中转基因品系检测方法的比较研究 被引量:1
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作者 李婷 高东微 +3 位作者 张隽 武目涛 陈源树 刘津 《粮食与饲料工业》 CAS 2017年第3期55-62,共8页
以美国进口玉米酒糟粕(DDGS)中转基因玉米品系MIR162的实时荧光PCR检测方法为研究内容,分别采用3种常见商业化试剂盒提取基因组DNA,采用3个检测标准中规定的实时荧光PCR方法进行MIR162定性检测,比较了9种方法组合在检测玉米酒糟粕中转... 以美国进口玉米酒糟粕(DDGS)中转基因玉米品系MIR162的实时荧光PCR检测方法为研究内容,分别采用3种常见商业化试剂盒提取基因组DNA,采用3个检测标准中规定的实时荧光PCR方法进行MIR162定性检测,比较了9种方法组合在检测玉米酒糟粕中转基因成分的检测技术性能。结果表明,使用TIANGEN?植物基因组DNA提取试剂盒和《SN/T 1196—2012转基因成分检测玉米检测方法》规定的荧光PCR方法,检测灵敏度最高,符合现行检验监管法规要求。考虑到大宗农产品及其加工产品的国际贸易普遍存在转基因成分低水平混杂的情况,进一步探讨了进口农产品转基因成分检验监管分类管理的必要性,提出针对不同风险级别的进口农产品采用灵敏度相适宜的检测方法。 展开更多
关键词 玉米酒糟粕 转基因品系mir162 基因组DNA 实时荧光PCR 低水平混杂
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