背景与目的:微小RNA(microRNA,miRNA)已被证实与子宫颈癌的发病相关。分析miR-496与SFMBT1的相互关系,阐明miR-496在子宫颈癌中的作用及其机制。方法:预测并验证miR-496的靶基因。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence qu...背景与目的:微小RNA(microRNA,miRNA)已被证实与子宫颈癌的发病相关。分析miR-496与SFMBT1的相互关系,阐明miR-496在子宫颈癌中的作用及其机制。方法:预测并验证miR-496的靶基因。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-496 mimics对SFMBT1表达的影响。使用免疫荧光和Western blot分析SFMBT1在子宫颈癌组织中的表达变化。细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法和transwell实验分别检测miR-496和SFMBT1对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。观察miR-496在BALB/c裸小鼠移植瘤模型中对肿瘤生长的影响。结果:相比癌旁正常组织,SFMBT1在子宫颈癌组织中的mRNA(1.69±0.23 vs 1.00±0.12)以及蛋白(1.73±0.28 vs 1.00±0.15)均呈高表达,miR-496能通过特异性结合SFMBT1的3’-UTR抑制SFMBT1的mRNA(0.81±0.07 vs 1.00±0.15)以及蛋白表达(0.26±0.02 vs 1.00±0.14);细胞实验中相比对照组,miR-496 mimics处理组能抑制HeLa细胞增殖(1.39±0.10 vs 2.01±0.09)、迁移(40.50±3.17 vs 28.42±1.21)和侵袭能力(15.03±1.67 vs 25.71±2.56),但相比miR-496 mimics处理组,miR-496+SFMBT1处理组迁移(33.21±2.66 vs 19.28±1.50)和侵袭能力增强(30.11±2.73 vs 15.03±1.67)。子宫颈癌裸小鼠移植瘤模型发现,相比对照组miR-496组裸小鼠中移植瘤体积、重量均明显降低。miR-496组裸小鼠中病变程度、SFMBT1表达和Ki-67增殖指数均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-496通过靶向调控SFMBT1抑制子宫颈癌细胞的生物学行为和裸小鼠移植瘤的生长。展开更多
目的:检测卵巢浆液性癌中微小RNA-496(microRNA-496,miR-496)的表达,关注其表达意义及与同源异型蛋白SIX1(homologous heteroprotein SIX1,SIX1)的靶向关系。方法:选择75例卵巢浆液性癌作为观察组,选择75例卵巢浆液性囊腺瘤作为对照组,...目的:检测卵巢浆液性癌中微小RNA-496(microRNA-496,miR-496)的表达,关注其表达意义及与同源异型蛋白SIX1(homologous heteroprotein SIX1,SIX1)的靶向关系。方法:选择75例卵巢浆液性癌作为观察组,选择75例卵巢浆液性囊腺瘤作为对照组,应用实时荧光定量PCR法检测2组中miR-496的表达,应用免疫组化法检测观察组中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,BAX)的表达,应用Western blot检测观察组中SIX1的表达。选择人卵巢浆液性癌细胞系SKOV-3,设置空白对照组、miR-496转染组、miR-496和SIX1共转染组,采用双荧光素酶基因实验验证miR-496与靶基因SIX1的关系。结果:miR-496在观察组的表达量明显低于对照组(1.52±0.36 vs.2.03±0.25,t=7.56,P=0.001),miR-496的表达在不同肿瘤最大径(1.65±0.36 vs. 1.42±0.33,t=5.32,P=0.012)、病理分级(1.64±0.35 vs. 1.43±0.40,t=5.11,P=0.010)、有无脉管累犯(1.60±0.44 vs. 1.35±0.43,t=5.11,P=0.011)、是否双侧发生(1.61±0.36 vs.1.40±0.32,t=5.11,P=0.010)、有无淋巴结转移(1.62±0.42 vs. 1.35±0.41,t=5.66,P=0.008)和不同TNM分期(1.70±0.37 vs.1.42±0.39,t=5.65,P=0.009)的分组中有统计学差异。miR-496与生存时间有关(χ2=4.13,P=0.010),miR-496与PCNA(r=-0.54,P=0.0186)、miR-496与SIX1(r=-0.58,P=0.0130)均具有负相关性,miR-496与BAX(r=0.52,P=0.0110)具有正相关性。双荧光素酶基因实验显示,miR-496能引起转染pGL3-SIX1-WT的细胞系中荧光素酶活性明显降低。结论:卵巢浆液性癌中miR-496的表达下降,是促进肿瘤形成和进展的重要分子因素,检测miR-496对判断预后可能有一定价值。miR-496可能通过负向调节靶基因SIX1调控肿瘤细胞的增殖和凋亡。展开更多
文摘背景与目的:微小RNA(microRNA,miRNA)已被证实与子宫颈癌的发病相关。分析miR-496与SFMBT1的相互关系,阐明miR-496在子宫颈癌中的作用及其机制。方法:预测并验证miR-496的靶基因。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-496 mimics对SFMBT1表达的影响。使用免疫荧光和Western blot分析SFMBT1在子宫颈癌组织中的表达变化。细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法和transwell实验分别检测miR-496和SFMBT1对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。观察miR-496在BALB/c裸小鼠移植瘤模型中对肿瘤生长的影响。结果:相比癌旁正常组织,SFMBT1在子宫颈癌组织中的mRNA(1.69±0.23 vs 1.00±0.12)以及蛋白(1.73±0.28 vs 1.00±0.15)均呈高表达,miR-496能通过特异性结合SFMBT1的3’-UTR抑制SFMBT1的mRNA(0.81±0.07 vs 1.00±0.15)以及蛋白表达(0.26±0.02 vs 1.00±0.14);细胞实验中相比对照组,miR-496 mimics处理组能抑制HeLa细胞增殖(1.39±0.10 vs 2.01±0.09)、迁移(40.50±3.17 vs 28.42±1.21)和侵袭能力(15.03±1.67 vs 25.71±2.56),但相比miR-496 mimics处理组,miR-496+SFMBT1处理组迁移(33.21±2.66 vs 19.28±1.50)和侵袭能力增强(30.11±2.73 vs 15.03±1.67)。子宫颈癌裸小鼠移植瘤模型发现,相比对照组miR-496组裸小鼠中移植瘤体积、重量均明显降低。miR-496组裸小鼠中病变程度、SFMBT1表达和Ki-67增殖指数均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-496通过靶向调控SFMBT1抑制子宫颈癌细胞的生物学行为和裸小鼠移植瘤的生长。
文摘目的:检测卵巢浆液性癌中微小RNA-496(microRNA-496,miR-496)的表达,关注其表达意义及与同源异型蛋白SIX1(homologous heteroprotein SIX1,SIX1)的靶向关系。方法:选择75例卵巢浆液性癌作为观察组,选择75例卵巢浆液性囊腺瘤作为对照组,应用实时荧光定量PCR法检测2组中miR-496的表达,应用免疫组化法检测观察组中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,BAX)的表达,应用Western blot检测观察组中SIX1的表达。选择人卵巢浆液性癌细胞系SKOV-3,设置空白对照组、miR-496转染组、miR-496和SIX1共转染组,采用双荧光素酶基因实验验证miR-496与靶基因SIX1的关系。结果:miR-496在观察组的表达量明显低于对照组(1.52±0.36 vs.2.03±0.25,t=7.56,P=0.001),miR-496的表达在不同肿瘤最大径(1.65±0.36 vs. 1.42±0.33,t=5.32,P=0.012)、病理分级(1.64±0.35 vs. 1.43±0.40,t=5.11,P=0.010)、有无脉管累犯(1.60±0.44 vs. 1.35±0.43,t=5.11,P=0.011)、是否双侧发生(1.61±0.36 vs.1.40±0.32,t=5.11,P=0.010)、有无淋巴结转移(1.62±0.42 vs. 1.35±0.41,t=5.66,P=0.008)和不同TNM分期(1.70±0.37 vs.1.42±0.39,t=5.65,P=0.009)的分组中有统计学差异。miR-496与生存时间有关(χ2=4.13,P=0.010),miR-496与PCNA(r=-0.54,P=0.0186)、miR-496与SIX1(r=-0.58,P=0.0130)均具有负相关性,miR-496与BAX(r=0.52,P=0.0110)具有正相关性。双荧光素酶基因实验显示,miR-496能引起转染pGL3-SIX1-WT的细胞系中荧光素酶活性明显降低。结论:卵巢浆液性癌中miR-496的表达下降,是促进肿瘤形成和进展的重要分子因素,检测miR-496对判断预后可能有一定价值。miR-496可能通过负向调节靶基因SIX1调控肿瘤细胞的增殖和凋亡。
