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Rg1通过调控miR-34a-5p/DDX17轴改善非酒精性脂肪性肝病分子机制的研究
1
作者 姜华 陈徐佳 +7 位作者 高建鹏 易春艳 张志波 杨明慧 丁蕊 钱丽柏 胡阳 王辉 《胃肠病学和肝病学杂志》 2025年第7期1023-1031,共9页
目的研究人参皂苷Rg1对TGF-β1诱导的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs-T6)活力、增殖能力、炎性因子含量和纤维化水平的改善作用及其分子机制。方法使用TGF-β1诱导HSCs-T6细胞构建肝纤维化细胞模型后,用不同浓度Rg1处理细胞,通... 目的研究人参皂苷Rg1对TGF-β1诱导的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs-T6)活力、增殖能力、炎性因子含量和纤维化水平的改善作用及其分子机制。方法使用TGF-β1诱导HSCs-T6细胞构建肝纤维化细胞模型后,用不同浓度Rg1处理细胞,通过CCK-8检测筛选出最佳作用浓度和时间。采用质粒转染用来干预HSCs-T6细胞中DDX17、miR-34a-5p的表达水平,分别用CCK-8和EdU试剂盒检测HSCs-T6细胞活力和增殖能力,ELISA检测炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-10)的含量,qRT-PCR实验检测纤维化相关蛋白(α-SMA、COL1、TIMP-1)基因的mRNA表达水平,Western blotting检测纤维化相关蛋白(α-SMA、COL1、TIMP-1)的表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验和RIP实验验证miR-34a-5p和DDX17的靶向结合关系。结果Rg1(2.5μg/mL)处理HSCs-T6细胞24 h显著降低TNF-α和IL-6的水平,增加了抗炎的IL-10的水平,显著降低α-SMA、COL1、TIMP-1基因的mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。与TGF-β组相比,过表达DDX17能够改善TGF-β1诱导的HSCs-T6细胞活力、增殖能力、炎症因子和α-SMA、COL1、TIMP-1基因mRNA和蛋白的表达(P<0.05),而沉默DDX17则产生相反作用(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-34a-5p mimic降低DDX17-WT的荧光素酶活性(P<0.05)。与TGF-β1组相比,过表达miR-34a-5p促进HSCs-T6细胞活力、增殖能力、促炎因子、纤维化相关基因mRNA和蛋白的表达;干扰miR-34a-5p则产生相反作用。在回复实验中,与TGF-β1/Rg1相比,过表达miR-34a-5p可显著降低HSCs-T6细胞活力和增殖能力、促炎因子、α-SMA、COL1、TIMP-1基因mRNA和蛋白的表达,而同时过表达miR-34a-5p和DDX17则逆转了miR-34a-5p的上述作用。结论人参皂苷Rg1通过调节miR-34a-5p/DDX17轴改善非酒精性脂肪性肝病的肝纤维化。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 人参皂苷RG1 miR-34a-5p DDX17 肝纤维化
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血清lncRNASNHG7与miR-34a-5p水平表达在血流感染诊断及预后评估中的价值
2
作者 龚晓波 彭翠翠 +2 位作者 莫滨榕 林勇清 于晓钧 《现代检验医学杂志》 2025年第5期67-72,共6页
目的探究血清长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7(lncRNA SNHG7)与微小RNA(miR)-34a-5p表达在血流感染(BSI)诊断及预后评估中的价值。方法选取广西梧州市红十字会医院2022年3月~2023年3月急诊科收治的193例疑似BSI患者为研究对象,经诊断后... 目的探究血清长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7(lncRNA SNHG7)与微小RNA(miR)-34a-5p表达在血流感染(BSI)诊断及预后评估中的价值。方法选取广西梧州市红十字会医院2022年3月~2023年3月急诊科收治的193例疑似BSI患者为研究对象,经诊断后将BSI患者作为感染组(n=100),非BSI患者作为非感染组(n=93);BSI患者治疗28天后根据预后情况,分为死亡组(n=32)和生存组(n=68)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p表达水平;Target Scan Human网站预测miR-34a-5p与lncRNA SNHG7的靶向关系。Pearson法分析血清lncRNA SNHG7水平与miR-34a-5p水平的相关性;多因素Logistic回归分析BSI患者预后的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p对预后的评估价值。结果感染组血清lncRNA SNHG7(1.47±0.35)水平显著高于非感染组(1.03±0.15),miR-34a-5p水平(0.85±0.21)显著低于非感染组(1.02±0.13),差异具有统计学意义(t=11.203,6.703,均P<0.05)。与生存组比较,死亡组血清lncRNASNHG(1.68±0.21 vs 1.37±0.19)、C反应蛋白(CRP)(85.74±9.16mg/Lvs 63.18±7.68mg/L)、降钙素原(PCT)水平(56.37±8.72ng/ml vs 34.69±5.54ng/ml)、白蛋白(92.51±10.18g/L vs 65.27±7.24g/L)、急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分(28.15±5.12分vs 16.35±4.31分)升高,血清miR-34a-5p水平(0.67±0.14 vs 0.93±0.16)降低,差异具有统计学意义(t=7.357~15.340,均P<0.05)。lncRNA SNHG7与miR-34a-5p有靶向结合位点,且lncRNA SNHG7与miR-34a-5p呈负相关(r=-0.568,P<0.05)。血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p为BSI患者预后的影响因素(均P<0.05)。血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p二者联合评估BSI患者预后的曲线下面积(AUC)优于血清lncRNA SNHG7,miR-34a-5p各自单独检测(Z=2.001,2.304,均P<0.05),其灵敏度和特异度分别为78.12%,97.06%。结论BSI患者血清lncRNA SNHG7水平明显升高,而血清miR-34a-5p水平明显降低,二者与BSI患者预后密切相关,且二者联合对BSI患者预后有较好的评估价值。 展开更多
关键词 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7 微小RNa-34a-5p 血流感染
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微小核糖核酸-34a-5p、胰岛素样生长因子结合蛋白3对子宫内膜异位症患者腹腔镜手术后妊娠结局的影响
3
作者 李慧颖 张佩柔 +4 位作者 孙丽佳 张玉虹 刘晓娟 樊捷婷 陈江平 《腹腔镜外科杂志》 2025年第7期534-539,544,共7页
目的:探讨血清微小核糖核酸-34a-5p(miR-34a-5p)、胰岛素样生长因子结合蛋白质3(IGFBP3)表达水平变化对子宫内膜异位症患者腹腔镜手术后妊娠结局的影响。方法:选取2020年6月至2022年6月共106例行腹腔镜手术的子宫内膜异位症患者为观察组... 目的:探讨血清微小核糖核酸-34a-5p(miR-34a-5p)、胰岛素样生长因子结合蛋白质3(IGFBP3)表达水平变化对子宫内膜异位症患者腹腔镜手术后妊娠结局的影响。方法:选取2020年6月至2022年6月共106例行腹腔镜手术的子宫内膜异位症患者为观察组,根据妊娠结局46例自然妊娠成功者为妊娠组,51例自然妊娠失败者为未妊娠组,另选择106例健康体检志愿者为对照组。实时荧光定量聚合酶链式反应测定血清miR-34a-5p含量;酶联免疫吸附法测定血清IGFBP3浓度;双荧光素酶报告实验验证miR-34a-5p与IGFBP3基因靶向关系;Pearson法分析患者血清miR-34a-5p、IGFBP3表达水平相关性;多因素Logistic分析患者术后妊娠结局的影响因素;受试者工作特征曲线评估血清miR-34a-5p、IGFBP3水平对患者术后自然妊娠结局的预测价值。结果:与对照组相比,观察组血清miR-34a-5p表达水平下降,IGFBP3表达水平升高(P<0.05),未妊娠组血清miR-34a-5p表达水平低于妊娠组,IGFBP3表达水平较高(P<0.05);双荧光素酶实验结果显示,miR-34a-5p靶向调控IGFBP3表达;Pearson分析结果显示,子宫内膜异位症患者血清miR-34a-5p、IGFBP3表达水平呈负相关(r=-0.549,P<0.001)。多因素Logistic分析表明血清抗精子蛋白17抗体、抗顶体蛋白酶抗体、糖类抗原125、miR-34a-5p、IGFBP3是术后妊娠结局的影响因素(P<0.05);受试者工作特征曲线表明,血清miR-34a-5p、IGFBP3水平联合预测患者术后自然妊娠失败曲线下面积为0.969,大于miR-34a-5p(曲线下面积=0.876,Z=2.206,P=0.027)与IGFBP3(曲线下面积=0.863,Z=2.691,P=0.007)单独预测。结论:子宫内膜异位症患者血清miR-34a-5p表达水平下降,IGFBP3表达水平升高,与腹腔镜手术后妊娠结局具有相关性。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 妊娠结局 微小核糖核酸-34a-5p 胰岛素样生长因子结合蛋白质3 腹腔镜检查 预测
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桥本甲状腺炎患者血清miR-21-5p、miR-34a-5p表达对肠道菌群、炎症因子及甲状腺功能的影响
4
作者 熊慧丽 张珍安 +2 位作者 赵晓宏 王佳丹 井欢 《联勤军事医学》 2025年第11期965-971,共7页
目的探讨桥本甲状腺炎(hashimoto thyroiditis,HT)患者血清miR-21-5p、miR-34a-5p表达对肠道菌群、炎症因子和甲状腺功能的影响。方法选取2021-06/2024-06月作者医院收治的114例HT患者(HT组)和114例体检健康志愿者(对照组)。检测两组研... 目的探讨桥本甲状腺炎(hashimoto thyroiditis,HT)患者血清miR-21-5p、miR-34a-5p表达对肠道菌群、炎症因子和甲状腺功能的影响。方法选取2021-06/2024-06月作者医院收治的114例HT患者(HT组)和114例体检健康志愿者(对照组)。检测两组研究对象血清miR-21-5p、miR-34a-5p的表达、炎症因子水平和甲状腺功能,应用16S rDNA高通量测序法分析肠道菌群Alpha多样性指数、门水平相对丰度。采用Pearson相关分析血清miR-21-5p、miR-34a-5p表达与肠道菌群Alpha多样性指数、门水平相对丰度、炎症因子以及甲状腺功能指标之间相关性。结果HT组患者血清miR-21-5p、miR-34a-5p表达,肠道菌群厚壁菌门、变形菌门、放线菌门、梭杆菌门、疣微菌门相对丰度,血清干扰素γ(interferon gamma,IFN-γ)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、IL-12、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)水平高于对照组(P均<0.05)。肠道菌群Chao 1指数、Shannon指数,拟杆菌门相对丰度,血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT_(3))、游离甲状腺素(free thyroxine,FT_(4))水平均低于对照组(P均<0.05)。相关性分析结果显示,HT患者血清miR-21-5p、miR-34a-5p表达与Chao 1指数、Shannon指数,拟杆菌门相对丰度,血清FT_(3)、FT_(4)水平呈负相关(P均<0.05),与厚壁菌门、变形菌门、放线菌门、梭杆菌门、疣微菌门相对丰度,血清IFN-γ、IL-6、IL-12、TNF-α、TSH水平呈正相关(P均<0.05)。结论HT患者血清miR-21-5p、miR-34a-5p表达显著上调,并且与肠道菌群多样性降低、菌群失衡、炎症反应加重以及甲状腺功能障碍有关。 展开更多
关键词 桥本甲状腺炎 肠道菌群 炎症因子 甲状腺功能 miR-21-5p miR-34a-5p
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胰腺癌组织中miR-34a-5p表达对预后不良的预测分析
5
作者 董立军 李洁 +1 位作者 柴豆豆 牟洪超 《局解手术学杂志》 2025年第9期817-821,共5页
目的分析胰腺癌组织中微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)表达对患者术后预后不良的预测价值。方法收集123例胰腺癌患者手术切除的胰腺癌组织和癌旁正常组织,检测胰腺癌组织和癌旁正常组织中miR-34a-5p表达。比较不同临床病理特征患者胰腺癌组... 目的分析胰腺癌组织中微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)表达对患者术后预后不良的预测价值。方法收集123例胰腺癌患者手术切除的胰腺癌组织和癌旁正常组织,检测胰腺癌组织和癌旁正常组织中miR-34a-5p表达。比较不同临床病理特征患者胰腺癌组织中miR-34a-5p的表达。根据预后情况将患者分为预后不良组和预后良好组,并比较2组患者临床资料。采用Cox回归模型分析胰腺癌患者预后不良的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析胰腺癌组织中miR-34a-5p表达对患者预后不良的预测价值。结果胰腺癌组织中miR-34a-5p表达低于癌旁正常组织(P<0.05)。分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况不同的患者胰腺癌组织中miR-34a-5p表达差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组患者低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、切缘R1占比和糖类抗原199(CA199)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)水平均高于预后良好组(P<0.05),miR-34a-5p表达低于预后良好组(P<0.05)。Cox回归分析显示,低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、切缘R1、miR-34a-5p表达降低和CA199、NLR、PLR水平升高均是患者预后不良的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,胰腺癌组织中miR-34a-5p表达预测胰腺癌患者预后不良的最佳临界值为0.48,敏感度为78.82%,特异度为89.47%,曲线下面积为0.855,具有良好预测价值。结论胰腺癌组织中miR-34a-5p表达低于癌旁正常组织,且其表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,亦是胰腺癌患者术后预后不良的危险因素和预测因子。 展开更多
关键词 胰腺癌 miR-34a-5p 临床病理特征 手术 预后 危险因素
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miR-34a-5p下调激活PINK1/Parkin通路减轻脑出血大鼠神经功能障碍
6
作者 马岩朋 韩韶 +3 位作者 李建波 高小恒 郭静川 周涛 《免疫学杂志》 2025年第5期305-311,共7页
目的探讨微小RNA(miR)-34a-5p调节PTEN诱导激酶1(PINK1)/Parkin通路对脑出血(ICH)大鼠神经功能的影响。方法将SD大鼠分为假手术组(Sham)、ICH组、inhibitor-NC组、miR-34a-5p inhibitor组、miR-34a-5p inhibitor+DMSO组和miR-34a-5p inh... 目的探讨微小RNA(miR)-34a-5p调节PTEN诱导激酶1(PINK1)/Parkin通路对脑出血(ICH)大鼠神经功能的影响。方法将SD大鼠分为假手术组(Sham)、ICH组、inhibitor-NC组、miR-34a-5p inhibitor组、miR-34a-5p inhibitor+DMSO组和miR-34a-5p inhibitor+Mdivi-1组,每组8只。神经功能缺损评分(mNSS)评估大鼠神经功能变化;HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;透射电镜观察脑组织自噬情况;TUNEL染色观察细胞凋亡情况;qRT-PCR实验检测大鼠脑组织中miR-34a-5p、PINK1和Parkin mRNA水平;Western blot实验检测大鼠脑组织中PINK1、Parkin、Beclin1和P62蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验测定miR-34a-5p与PINK1的靶向关系。结果与inhibitor-NC组相比,miR-34a-5p inhibitor组大鼠神经细胞坏死减轻,红细胞、炎性细胞和自噬空泡数量减少,mNSS评分、TUNEL阳性率和miR-34a-5p水平降低,PINK1、Parkin mRNA及蛋白表达和Beclin1蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平降低(P<0.05);与miR-34a-5p inhibitor+DMSO组相比,miR-34a-5p inhibitor+Mdivi-1组大鼠的上述指标改变均被逆转(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验中,miR-34a-5p mimic和PINK1-WT共转染组细胞相对荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论miR-34a-5p下调可能通过调控PINK1/Parkin通路,减轻ICH大鼠神经功能损伤。 展开更多
关键词 微小RNa-34a-5p pTEN诱导激酶1/parkin通路 脑出血 神经功能
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miR-34a-5p对颞叶癫痫大鼠海马神经元凋亡的影响及其机制
7
作者 李佳芮 杨振林 +2 位作者 高帆 郭晶晶 李今子 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期939-947,共9页
目的:探讨微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)对颞叶癫痫大鼠海马组织中神经元凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:52只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-34a-5p抑制剂组和抑制剂阴性对照组,每组13只。采用PONEMAH 6.X实验动物遥测平台... 目的:探讨微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)对颞叶癫痫大鼠海马组织中神经元凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:52只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-34a-5p抑制剂组和抑制剂阴性对照组,每组13只。采用PONEMAH 6.X实验动物遥测平台记录各组大鼠脑电图,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠海马组织中miR-34a-5p表达水平,HE染色观察各组大鼠海马组织形态表现,TUNEL法检测各组大鼠海马神经元凋亡率,免疫组织化学法检测各组大鼠海马组织中CDK6、p-Rb和E2F1蛋白阳性表达率,Western blotting法检测各组大鼠海马组织中细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)、磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白(p-Rb)和E2F转录因子1(E2F1)蛋白表达水平。结果:对照组大鼠无异常表现;模型组、miR-34a-5p抑制剂组和抑制剂阴性对照组大鼠出现不同程度流口水、颤抖、血泪、凝视和咀嚼震颤,随后点头眨眼,最后有前肢痉挛、直立及跌倒。与对照组比较,模型组大鼠癫痫发作总时间明显延长(P<0.01);与模型组比较,miR-34a-5p抑制剂组大鼠癫痫发作总时间缩短(P<0.01);与miR-34a-5p抑制剂组比较,抑制剂阴性对照组大鼠癫痫发作总时间延长(P<0.01)。RT-qPCR法,与对照组比较,模型组大鼠海马组织中miR-34a-5p表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,miR-34a-5p抑制剂组大鼠海马组织中miR-34a-5p表达水平降低(P<0.05);与miR-34a-5p抑制剂组比较,抑制剂阴性对照组大鼠海马组织中miR-34a-5p表达水平升高(P<0.01)。HE染色,与对照组比较,模型组细胞排列紊乱;与模型组比较,miR-34a-5p抑制剂组细胞排列整齐;与miR-34a-5p抑制剂组比较,抑制剂阴性对照组细胞形态不规整。TUNEL染色,与对照组比较,模型组大鼠海马CA1区神经元凋亡率升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,miR-34a-5p抑制剂组大鼠海马CA1区神经元凋亡率降低(P<0.05);与miR-34a-5p抑制剂组比较,抑制剂阴性对照组大鼠海马CA1区神经元凋亡率升高(P<0.05)。免疫组织化学法,与对照组比较,模型组大鼠海马组织中CDK6、p-Rb和E2F1蛋白阳性表达率均升高(P<0.01);与模型组比较,miR-34a-5p抑制剂组大鼠海马组织CA1区中CDK6、p-Rb和E2F1蛋白阳性表达率降低(P<0.05);与miR-34a-5p抑制剂组比较,抑制剂阴性对照组大鼠海马组织中CDK6、p-Rb和E2F1蛋白阳性表达率均升高(P<0.05或P<0.01)。Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠海马组织中CDK6、p-Rb和E2F1蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,miR-34a-5p抑制剂组大鼠海马组织中CDK6、p-Rb和E2F1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01);与miR-34a-5p抑制剂组比较,抑制剂阴性对照组大鼠海马组织中CDK6、p-Rb和E2F1蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论:颞叶癫痫大鼠海马组织中miR-34a-5p表达上调,神经元凋亡率升高,抑制miR-34a-5p表达能减少海马神经元凋亡,其机制可能与miR-34a-5p调控海马组织中CDK6、p-Rb和E2F1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 微小RNa-34a-5p 癫痫 细胞凋亡 细胞周期蛋白依赖性激酶6 磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白 E2F转录因子1
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酸枣仁提取物抑制小鼠脑组织miR-34a-5p表达促进骨骼增长的作用机制
8
作者 裴圆圆 谢艳 +4 位作者 殷娜 马文龙 邢伟鹏 王桂芝 王庆丰 《中国骨伤》 2025年第10期1061-1070,共10页
目的:探讨酸枣仁提取物通过干预脑组织miR-34a-5p的表达,促进小鼠骨骼增长的作用机制。方法:将小鼠分为正常对照组、用药组(灌胃酸枣仁提取物0.320 mg·g^(-1)体质量),阳性对照组(灌胃酸枣仁皂苷0.013 mg·g^(-1)体质量)和用药... 目的:探讨酸枣仁提取物通过干预脑组织miR-34a-5p的表达,促进小鼠骨骼增长的作用机制。方法:将小鼠分为正常对照组、用药组(灌胃酸枣仁提取物0.320 mg·g^(-1)体质量),阳性对照组(灌胃酸枣仁皂苷0.013 mg·g^(-1)体质量)和用药+5-羟色胺2A受体(5-hydroxytryptamine 2A receptor,5-HT2AR)激动剂组(灌胃酸枣仁提取物同时最后3 d每天每只侧脑室注射8μg的P-MPPF),20 d后观察药物对小鼠骨骼增长、血清生长激素(growth hormone,GH)水平及脑组织5-HT2AR表达的影响。基因芯片法筛选由酸枣仁提取物引起的骨骼增长小鼠与普通小鼠脑组织差异表达的微小RNAs(microRNAs,miRNAs),并进行定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chainreaction,RT-qPCR)验证和双荧光素酶报告基因实验,证实筛选的miR-34a-5p与5-HT2AR的调控关系。利用miR-34a-5p抑制剂组和模拟剂组及正常对照组、用药组、阳性对照组和用药+miR-34a-5p抑制剂组,观察各组小鼠脑组织5-HT2AR表达的变化及小鼠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)与5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine 1A receptor,5-HT1AR)结合活性。结果:正常对照组、用药组体长分别为(8.9±0.3)、(10.4±0.4)cm;股骨长分别为(8.5±0.3)、(9.1±0.5)mm;胫骨长分别为(10.7±0.3)、(11.2±0.4)mm;GH含量分别为(58.6±8.2)、(72.9±6.1)ng·ml^(-1);5-HT2AR含量分别为(32.0±5.0)、(21.9±5.5)ng·ml^(-1)。与正常对照组比较,用药组可以促进小鼠体长、股骨和胫骨的增长,促进GH分泌,差异有统计学意义(P<0.05);同时,降低脑组织5-HT2AR含量,差异有统计学意义(P<0.01)。基因芯片法筛选出差异表达的miRNAs个数为16个,其中上调有13个,下调有3个。生物信息学预测上调的miR-34a-5p可以调控5-HT2AR表达,且双荧光素酶报告基因试验证实二者有直接的调控关系。同时证明过表达和沉默小鼠miR-34a-5p后,其脑组织/细胞5-HT2AR表达、5-HT与5-HT1AR结合活性均产生相应改变。结论:酸枣仁提取物可以通过升高脑组织miR-34a-5p的表达,降低5-HT2AR表达丰度,提高5-HT与5-HT1AR结合活性,延长慢波睡眠,从而促进生长激素的分泌,最终促进动物骨骼增长。 展开更多
关键词 酸枣仁 提取物 miR-34a-5p 小鼠 骨骼增长 脑组织
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血清miR-34a-5p和SIRT1在白内障术后眼内炎患者中的表达水平及意义
9
作者 郝莉莉 庞星宇 阎晓庆 《国际眼科杂志》 2025年第4期627-631,共5页
目的:研究白内障术后眼内炎患者血清微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)和沉默信息调节因子T1(SIRT1)的表达变化及意义。方法:选取2020-05/2024-05白内障术后发生眼内炎患者为感染组(20例),未发生眼内炎患者为对照组(74例)。ELISA法检测血清SI... 目的:研究白内障术后眼内炎患者血清微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)和沉默信息调节因子T1(SIRT1)的表达变化及意义。方法:选取2020-05/2024-05白内障术后发生眼内炎患者为感染组(20例),未发生眼内炎患者为对照组(74例)。ELISA法检测血清SIRT1水平;qRT-PCR检测血清miR-34a-5p水平;采用Pearson法分析miR-34a-5p和SIRT1的相关性;采用Logistic回归分析白内障术后发生眼内炎的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-34a-5p和SIRT1水平对白内障术后发生眼内炎的诊断价值。结果:与对照组相比,感染组患者血清miR-34a-5p水平显著升高(P<0.001),SIRT1水平显著降低(P<0.001)。相关性分析结果显示miR-34a-5p和SIRT1呈负相关关系(r=-0.421,P<0.001)。Logistic多因素回归分析结果显示,miR-34a-5p是白内障术后眼内炎感染的危险因素(OR=3.532,P<0.05),SIRT1是白内障术后眼内炎感染的保护因素(OR=0.875,P<0.05)。ROC曲线显示,血清miR-34a-5p和SIRT1二者联合诊断白内障术后发生眼内炎的曲线下面积(AUC)为0.933(95%CI:0.861-0.975)。结论:白内障术后眼内炎患者血清miR-34a-5p高表达,SIRT1低表达,与白内障术后眼内炎的发生发展密切相关。 展开更多
关键词 白内障术后眼内炎 微小RNa-34a-5p(miR-34a-5p) 沉默信息调节因子T1(SIRT1)
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miR-34a-5p调控巨噬细胞极化在急性肺损伤中的作用
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作者 孔德峰 《医师在线》 2025年第10期27-31,共5页
目的探讨miR-34a-5p靶向调控巨噬细胞功能,影响其M1表型的极化并在急性肺损伤(ALI)发生机制中的作用。方法选用6~8周龄健康C57BL/6雄性小鼠18只,随机分为三组[巨噬细胞(RAW264.7细胞)组为对照组、脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞组为ALI模型组... 目的探讨miR-34a-5p靶向调控巨噬细胞功能,影响其M1表型的极化并在急性肺损伤(ALI)发生机制中的作用。方法选用6~8周龄健康C57BL/6雄性小鼠18只,随机分为三组[巨噬细胞(RAW264.7细胞)组为对照组、脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞组为ALI模型组、LPS诱导巨噬细胞miR-34a-5p基因敲除组为干预组],每组6只小鼠;各组体外培养巨噬细胞48 h后,经尾静脉注射等量巨噬细胞悬液(100μL)至小鼠体内,继续饲养12 h后处死小鼠,取肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,并根据Murata法计算肺损伤评分(IQA);采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法和Western blot法检测各组肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)的蛋白和信使核糖核酸(mRNA)表达水平;采用免疫组化染色法检测各组巨噬细胞集落刺激因子-1受体(CSF-1R)阳性的表达情况。结果模型组IQA评分显著高于对照组,而干预组IQA评分则显著低于模型组(P<0.05)。模型组肺组织中TNF-α、IL-6、IL-10和TGF-β蛋白表达水平均显著高于对照组;干预组TNF-α、IL-6蛋白表达水平低于模型组,IL-10、TGF-β蛋白表达水平高于模型组(P<0.05)。模型组肺组织TNF-α、IL-6、IL-10和TGF-β的mRNA表达水平均显著高于对照组;干预组TNF-α、IL-6的mRNA表达水平低于模型组,IL-10、TGF-β的mRNA表达水平高于模型组(P<0.05)。模型组肺组织CSF-1R阳性表达率显著高于对照组,干预组CSF-1R阳性表达率则低于模型组(P<0.05)。结论巨噬细胞M1表型可能参与ALI的发生,而miR-34a-5p可靶向调控巨噬细胞活化功能。因此,特异性敲除miR-34a-5p可诱导巨噬细胞向M2表型极化,从而促进组织修复。 展开更多
关键词 miR-34a-5p 巨噬细胞 急性肺损伤 炎症 集落刺激因子-1受体
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木犀草素通过上调microRNA-34a-5p诱导肺癌细胞株H460凋亡的研究 被引量：20
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作者 姜泽群 李沐涵 +3 位作者 马艳霞 覃月穆 张旭 吴勉华 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期169-175,324,共8页
探究木犀草素诱导人肺癌细胞株H460凋亡的分子机制,为其治疗肺癌提供新的科学依据。选取处于对数生长期的H460细胞株,并分为对照组和不同剂量的木犀草素组。采用CCK-8法检测木犀草素对H460细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;PCR ... 探究木犀草素诱导人肺癌细胞株H460凋亡的分子机制,为其治疗肺癌提供新的科学依据。选取处于对数生长期的H460细胞株,并分为对照组和不同剂量的木犀草素组。采用CCK-8法检测木犀草素对H460细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;PCR array检测肺癌相关基因mRNA表达;Western-blot检测p53、p21、Bax、Bcl-2表达量变化;qRT-PCR法检测microRNA-34a(miR-34a)的表达水平;本实验还检测了过表达miR-34a-5p后对H460细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。结果显示,木犀草素能有效抑制人肺癌H460细胞的增殖,并促进其凋亡,其机制可能是通过激活p53信号通路,上调miR-34a-5p,最终影响凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达来实现的。 展开更多
关键词 木犀草素 肺癌 H460细胞凋亡 miR-34a-5p p53
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miR-34a-5p在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞侵袭迁移的影响和机制 被引量：10
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作者 李鹏 杨荣华 +2 位作者 张明华 肖鑫 汤建儿 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第4期403-410,共8页
目的:研究miR-34a-5p在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞侵袭迁移的影响和机制。方法:收集50例膀胱癌组织及对应的癌旁组织,qRT-PCR检测miR-34a-5p表达差异。在膀胱癌细胞中转染miR-34a-5p mimics,qRT-PCR、Transwell小室和Western b... 目的:研究miR-34a-5p在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞侵袭迁移的影响和机制。方法:收集50例膀胱癌组织及对应的癌旁组织,qRT-PCR检测miR-34a-5p表达差异。在膀胱癌细胞中转染miR-34a-5p mimics,qRT-PCR、Transwell小室和Western blot分别检测miR-34a-5p水平、侵袭迁移数目和E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。靶基因预测软件发现肿瘤蛋白D52(TPD52)可能为miR-34a-5p的靶基因,构建荧光素酶报告载体鉴定靶基因。Western blot检测miR-34a-5p mimics对膀胱癌细胞中TPD52表达的影响。以qRT-PCR检测膀胱癌组织和癌旁组织中TPD52表达变化,分析膀胱癌组织中TPD52表达水平与miR-34a-5p表达水平的相关性。将miR-34a-5p mimics和pcDNA3.1-TPD52共转染至膀胱癌细胞中,按照上述方法检测细胞中TPD52蛋白、侵袭迁移数目及E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达变化。结果:miR-34a-5p在膀胱癌组织中表达水平降低,miR-34a-5p mimics提高膀胱癌细胞中miR-34a-5p表达水平,降低膀胱癌细胞侵袭和迁移能力,降低膀胱癌细胞中N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平,提高E-cadherin蛋白表达水平。miR-34a-5p靶向调控TPD52表达,并且miR-34a-5p mimics抑制细胞中TPD52蛋白表达。TPD52在膀胱癌组织中高表达,其在膀胱癌组织中的表达水平与miR-34a-5p呈负相关。与共转染miR-34a-5p mimics和pcDNA3.1的细胞比较,miR-34a-5p mimics和pcDNA3.1-TPD52共转染提高膀胱癌细胞中TPD52蛋白表达水平,提高膀胱癌细胞侵袭和迁移能力,促进细胞中N-cadherin、Vimentin蛋白表达,降低E-cadherin蛋白表达水平。结论:miR-34a-5p在膀胱癌组织中低表达,上调miR-34a-5p靶向TPD52抑制膀胱癌细胞侵袭和迁移。 展开更多
关键词 膀胱癌 miR-34a-5p 侵袭 肿瘤蛋白D52
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MicroRNA 34a-5p对成骨细胞炎症反应及分化的影响 被引量：6
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作者 王贵玲 杨谛 +2 位作者 郭佳杰 于雅琼 仇丽鸿 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第11期1139-1142,共4页
目的:探究microRNA 34a-5p(miR-34a-5p)对成骨细胞炎症反应及分化的调节作用,并初步探究其相关机制。方法:脂质体法瞬时转染人成骨样细胞系MG63使细胞中miR-34a-5p表达增强,同时设通用阴性对照(NC)组。牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas end... 目的:探究microRNA 34a-5p(miR-34a-5p)对成骨细胞炎症反应及分化的调节作用,并初步探究其相关机制。方法:脂质体法瞬时转染人成骨样细胞系MG63使细胞中miR-34a-5p表达增强,同时设通用阴性对照(NC)组。牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,P.e)来源的不同浓度脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用于MG63后,检测细胞内miR-34a-5p表达;取20mg/L P.e-LPS作用24h后,检测细胞内IL-6表达。成骨诱导48h后,检测细胞中成骨分化标志物以及Notch1受体的表达。结果:P.e-LPS作用于MG63细胞后,miR-34a-5p表达被抑制(P<0.05)。MiR-34a-5p转染细胞后,与NC组相比,细胞内IL-6表达减少(P<0.01);20mg/L P.e-LPS作用下,miR-34a-5p组IL-6表达较NC组下降更为明显(P<0.01)。成骨细胞诱导分化48h后,miR-34a-5p组中分化标志物表达较NC对照组均显著增加(P<0.05),而Notch1受体表达被抑制(P<0.05)。结论:MiR-34a-5p可能通过Notch1信号通路,发挥抑制成骨细胞炎症和促进成骨分化的作用。 展开更多
关键词 MICRORNA 34a-5p 成骨细胞 炎症 分化
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miR-34a-5p通过调控CDK6表达和PI3K/AKT信号通路调节滋养层细胞的增殖、浸润和凋亡 被引量：14
14
作者 李勤 许娟秀 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期79-86,共8页
目的探讨miR-34a-5p及CDK6对滋养层细胞增殖,浸润和凋亡的作用和下游机制以及二者的调节关系。方法培养滋养层细胞HTR-8/Svneo和人绒毛膜癌细胞系BeWo和JEG-3HTR-8/Svneo,使用RTqPCR法检测3种细胞中miR-34a-5p的表达差异。根据对HTR-8/S... 目的探讨miR-34a-5p及CDK6对滋养层细胞增殖,浸润和凋亡的作用和下游机制以及二者的调节关系。方法培养滋养层细胞HTR-8/Svneo和人绒毛膜癌细胞系BeWo和JEG-3HTR-8/Svneo,使用RTqPCR法检测3种细胞中miR-34a-5p的表达差异。根据对HTR-8/Svneo细胞的不同处理进行如下分组:无处理的HTR-8/Svneo细胞(对照组);miR-34a-5p拟似物mimic转染细胞(mimic组),pcDNA-CDK6和mimic共转染HTR-8/Svneo细胞(pcDNA-CDK6+mimic组),miR-34a-5p抑制剂inhibitor转染HTR-8/Svneo细胞(inhibitor组)。MTT法检测细胞增殖,ELISA法测定caspase 3活性检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞浸润能力;Western blot检测细胞周期依赖性蛋白激酶CDK6,凋亡标记物cleaved-caspase 3,浸润标记物MMP-9的表达;荧光素酶报告基因实验确认miR-34a-5p对CDK-6的直接靶向关系。结果过表达miR-34a-5p抑制HTR-8/Svneo细胞的增殖活性(P=0.000)和浸润能力(P=0.049),下调细胞中MMP-9(P=0.004)和CDK6(P=0.014)的表达水平,上调caspase 3活性(P=0.018)和cleaved caspase 3的表达水平(P=0.003);CDK6是miR-34a-5p的靶基因,过表达CDK6削弱miR-34a-5p对细胞增殖(P=0.000)、凋亡(P=0.015)和浸润(P=0.046)的作用;使用IFG-1激活PI3K/AKT通路部分逆转miR-34a-5p对细胞增殖(P=0.011)、凋亡(P=0.004)和浸润(P=0.002)的作用。结论 miR-34a-5p通过调控CDK6表达和PI3K/AKT信号通路激活调节滋养层细胞的增殖,浸润和凋亡。 展开更多
关键词 滋养层细胞 miR-34a-5p 细胞周期依赖性激酶6 增殖活性 凋亡 浸润
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miR-34a-5p抑制K562细胞红系分化 被引量：4
15
作者 赵华路 卜雯婧 +3 位作者 李玉霞 翟頔 温馨 余佳 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第2期167-173,共7页
目的探索miR-34a-5p对K562细胞红系分化的影响。方法分别用miR-34a-5p模拟物和反义抑制寡核苷酸转染K562细胞,用real-time PCR法检测过表达或干扰效率,并进一步用流式细胞术和联苯胺染色法检测K562细胞向红系的分化情况;通过Western blo... 目的探索miR-34a-5p对K562细胞红系分化的影响。方法分别用miR-34a-5p模拟物和反义抑制寡核苷酸转染K562细胞,用real-time PCR法检测过表达或干扰效率,并进一步用流式细胞术和联苯胺染色法检测K562细胞向红系的分化情况;通过Western blot方法检测miR-34a-5p的靶基因。结果 miR-34a-5p在K562细胞红系分化过程中呈现表达下降趋势;在K562细胞中过表达miR-34a-5p可抑制hemin诱导的红系分化(P<0.05);反之,干扰K562内源的miR-34a-5p表达会对K562红系分化产生促进作用(P<0.01);另一方面,miR-34a-5p通过靶向抑制c-MYB的表达抑制细胞向红系分化。结论 miR-34a-5p通过抑制c-MYB在K562细胞早期红系分化过程中发挥促进作用。 展开更多
关键词 miR-34a-5p K562 C-MYB 红系分化
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血清miR-330-5p、miR-34a-5p、VEGF水平与急性缺血性脑卒中患者脑侧支循环分级的相关性 被引量：5
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作者 段毅 王坤 +2 位作者 王军英 杨欢欢 赵平平 《疑难病杂志》 CAS 2021年第11期1111-1115,共5页
目的分析血清微小RNA-330-5p(miR-330-5p)、miR-34a-5p、血管内皮生长因子(VEGF)水平与急性缺血性脑卒中患者脑侧支循环分级的相关性。方法选取2019年7月—2021年1月在石家庄市第三医院神经内科住院治疗且建立脑侧支循环的急性缺血性脑... 目的分析血清微小RNA-330-5p(miR-330-5p)、miR-34a-5p、血管内皮生长因子(VEGF)水平与急性缺血性脑卒中患者脑侧支循环分级的相关性。方法选取2019年7月—2021年1月在石家庄市第三医院神经内科住院治疗且建立脑侧支循环的急性缺血性脑卒中患者104例为研究组,数字减影血管造影(DSA)检测脑侧支循环情况,根据开放层次分为一级侧支循环亚组(一级亚组)36例,二级侧支循环亚组(二级亚组)51例,三级侧支循环亚组(三级亚组)17例,同期选取医院健康体检者40例为健康对照组。检测血清miR-330-5p、miR-34a-5及VEGF水平,Pearson法分析急性缺血性脑卒中患者血清miR-330-5p、miR-34a-5p与VEGF水平的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)评价血清miR-330-5p、miR-34a-5p、VEGF水平对急性缺血性脑卒中患者三级脑侧支循环建立的预测价值。结果研究组血清miR-330-5p、miR-34a-5p、VEGF水平均高于健康对照组(t/P=17.045/0.000、26.347/0.000、6.736/0.000);一级亚组、二级亚组、三级亚组血清miR-330-5p、miR-34a-5p、VEGF水平依次升高(F/P=54.260/0.000、161.507/0.000、11.309/0.000);Pearson分析结果显示,急性缺血性脑卒中患者血清miR-330-5p、miR-34a-5p与VEGF水平均呈正相关(r/P=0.674/0.000、0.624/0.000);ROC分析结果显示,血清miR-330-5p、miR-34a-5p、VEGF水平及三者联合预测急性缺血性脑卒中患者三级脑侧支循环建立的曲线下面积(AUC)分别为0.874、0.903、0.870、0.951,三者联合诊断效能更高。结论血清miR-330-5p、miR-34a-5p、VEGF水平随急性缺血性脑卒中患者脑侧支循环分级增加而升高,对三级脑侧支循环的建立有一定的预测价值。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 微小RNa-330-5p 微小RNa-34a-5p 血管内皮生长因子 脑侧支循环分级 相关性
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长链非编码RNA XIST通过靶向结合miR-34a-5p调控鼻咽癌增殖 被引量：2
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作者 董洁 彭涛 +2 位作者 宋鹏 尹述成 周绪红 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2020年第6期938-943,共6页
目的:探讨长链非编码RNA XIST在人鼻咽癌发生中的作用与机制。方法:用RT-PCR法检测人鼻咽癌患者和健康人群中XIST相对表达水平;用RT-PCR法检测鼻咽癌细胞和健康人群中XIST相对表达水平,筛选出XIST表达量较多的细胞株,进行后续的实验;CK... 目的:探讨长链非编码RNA XIST在人鼻咽癌发生中的作用与机制。方法:用RT-PCR法检测人鼻咽癌患者和健康人群中XIST相对表达水平;用RT-PCR法检测鼻咽癌细胞和健康人群中XIST相对表达水平,筛选出XIST表达量较多的细胞株,进行后续的实验;CKK-8和克隆形成实验测定敲击和过表达XIST对各组细胞的增殖能力的影响;采用双荧光素酶报告基因实验和RT-PCR验证XIST与miR-34a-5p的直接作用关系。结果:与配对的正常鼻咽组织相比,XIST在鼻咽癌癌组织中表达显著升高(P<0.05),且高表达XIST与较低的总生存相关(P<0.05)。6种鼻咽癌细胞系中XIST表达量均高于正常鼻咽细胞(P<0.05)。敲击XIST显著降低了鼻咽癌细胞的增殖能力(P<0.05),过表达XIST促进了鼻咽癌细胞的增殖(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实XIST能够与miR-34a-5p特异性结合(P<0.05)。敲击和过表达实验证明XIST与miR-34a-5p负相关性(P<0.05)。结论:XIST能够发挥miRNAs分子海绵的功能,靶向结合miR-34a-5p,促进鼻咽癌的增殖。 展开更多
关键词 鼻咽癌 XIST miR-34a-5p 增殖
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膝关节骨性关节炎患者关节液中miR-34a-5p、miR-149-5p表达水平及临床意义 被引量：4
18
作者 王皓 凃峰 +1 位作者 赵文斌 张麟 《疑难病杂志》 CAS 2023年第3期311-315,共5页
目的 分析膝关节骨性关节炎(KOA)患者关节液中miR-34a-5p、miR-149-5p的表达及其临床意义。方法 收集2020年1月—2022年6月武汉市第一医院骨科就诊的KOA患者90例的临床资料,按X线片Kellgren-Lawrence(KL)标准分级分为轻度KOA组(1~2级患... 目的 分析膝关节骨性关节炎(KOA)患者关节液中miR-34a-5p、miR-149-5p的表达及其临床意义。方法 收集2020年1月—2022年6月武汉市第一医院骨科就诊的KOA患者90例的临床资料,按X线片Kellgren-Lawrence(KL)标准分级分为轻度KOA组(1~2级患者)和重度KOA组(3~4级患者),各45例,另选取同期医院健康体检者45例作为健康对照组。利用qRT-PCR检测各组关节液中miR-34a-5p、miR-149-5p的表达量,通过ELISA法检测各组关节液中IL-1β的表达量,Spearman分析关节液中miR-34a-5p、miR-149-5p表达水平与IL-1β、KL分级的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)分析关节液中miR-34a-5p、miR-149-5p表达对KOA严重程度的诊断价值。结果 膝关节液中miR-34a-5p、IL-1β表达水平比较,重度KOA组>轻度KOA组>健康对照组(F/P=19.21/<0.001、14.86/<0.001);膝关节液中miR-149-5p表达水平比较,重度KOA组<轻度KOA组<健康对照组(F/P=63.81/<0.001)。Spearman相关性分析显示,miR-34a-5p表达水平与IL-1β、KL分级呈显著正相关(r/P=0.835/<0.001、0.835/<0.001),miR-149-5p的表达水平与IL-1β、KL分级呈显著负相关(r/P=-0.828/<0.001、-0.943/<0.001)。ROC曲线分析显示,miR-34a-5p、miR-149-5p及二者联合预测KOA严重程度的曲线下面积分别为0.902、0.850、0.976,二者联合预测KOA严重程度的价值高于单项指标(Z/P=240.70/0.046,224.13/0.005)。结论 KOA患者关节液中miR-34a-5p、miR-149-5p的表达异常,且与KOA的临床分级和IL-1β显著相关,可作为诊断和监测KOA疾病活动的潜在标志物。 展开更多
关键词 膝关节骨性关节炎 微小RNa-34a-5p 微小RNa-149-5p 关节液
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Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭 被引量：2
19
作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 吴维 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2921-2929,共9页
目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(rea... 目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。 展开更多
关键词 膀胱癌 Linc01419 miR-34a-5p E2F3
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miR-34a-5p对胃腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制 被引量：2
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作者 朱金峰 曾薇 王海江 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第36期21-24,共4页
目的探讨miR-34a-5p对胃腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 (1)采用生物信息学技术预测Bcl-2是否为miR-34a-5p的靶基因。(2)体外培养人正常胃黏膜上皮细胞RGM-1、人胃腺癌细胞SGC7901,采用qRT-PCR法检测两种细胞miR-34a-5p、Bcl-2 m... 目的探讨miR-34a-5p对胃腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 (1)采用生物信息学技术预测Bcl-2是否为miR-34a-5p的靶基因。(2)体外培养人正常胃黏膜上皮细胞RGM-1、人胃腺癌细胞SGC7901,采用qRT-PCR法检测两种细胞miR-34a-5p、Bcl-2 mRNA表达。(3)将SGC7901细胞随机分为观察组和对照组,观察组转染miR-34a-5p mimic质粒,对照组转染scramble质粒。转染48 h,采用qRT-PCR法、Western blotting法检测Bcl-2 mRNA和蛋白表达。(4)将SGC7901细胞随机分为阴性对照组、Bcl-2 WT组、Bcl-2 MT组,阴性对照组转染miR-34a-5p mimic和pRL-TK,Bcl-2 WT组转染miR-34a-5p mimic、Bcl-2野生型载体和pRL-TK,Bcl-2 MT组转染miR-34a-5p mimic、Bcl-2突变型载体和pRL-TK。转染48 h,采用双荧光素酶报告基因实验检测各组相对荧光素酶活性。(5)将SGC7901细胞随机分为阴性对照组、miR-34a-5p mimic组、pc DNA3.1-Bcl-2组、miR-34a-5p mimic+pc DNA3.1-Bcl-2组,阴性对照组转染scramble+pc DNA3.1-空载体,miR-34a-5p mimic组转染miR-34a-5p mimic,pc DNA3.1-Bcl-2组转染pc DNA3.1-Bcl-2,miR-34a-5p mimic+pc DNA3.1-Bcl-2组转染miR-34a-5p mimic+pc DNA3.1-Bcl-2。转染48 h,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果 (1)Bcl-2为miR-34a-5p的靶基因。(2)SGC7901细胞miR-34a-5p mRNA相对表达量低于RGM-1细胞(P<0.01),Bcl-2 mRNA相对表达量高于RGM-1细胞(P<0.01)。(3)观察组Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.01)。(4)Bcl-2 WT组相对荧光素酶活性低于阴性对照组和Bcl-2 MT组(P均<0.01)。(5)miR-34a-5p mimic组细胞凋亡率高于阴性对照组,pc DNA3.1-Bcl-2组、miR-34a-5p mimic+pc DNA3.1-Bcl-2组低于阴性对照组及miR-34a-5p mimic组,组间比较P均<0.01。结论 miR-34a-5p可通过靶向调控Bcl-2抑制胃腺癌细胞凋亡,进而参与胃腺癌的发生、发展。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNa-34a-5p B细胞淋巴瘤2 细胞凋亡
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