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microRNA-574-3p抑制结肠癌细胞增殖的机制研究
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作者 刘振方 孟祥彩 +2 位作者 武玉 刘晓飞 米永鹏 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期30-35,共6页
目的观察微小RNA-574-3p(micro RNA-574-3p,mi R-574-3p)对结肠癌细胞增殖的影响,并探讨其潜在的作用机制。方法采用结肠癌细胞HCT116作为实验对象,细胞转染mi R-574-3p mimic和阴性对照分别作为mi R-574-3p mimic组和阴性对照组,同时... 目的观察微小RNA-574-3p(micro RNA-574-3p,mi R-574-3p)对结肠癌细胞增殖的影响,并探讨其潜在的作用机制。方法采用结肠癌细胞HCT116作为实验对象,细胞转染mi R-574-3p mimic和阴性对照分别作为mi R-574-3p mimic组和阴性对照组,同时以正常HCT116细胞作为空白对照组。RT-qPCR检测细胞mi R-574-3p表达;CCK-8法检测细胞增殖活力;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot法检测Cyclin A1、CDK2、PCNA、Cdc25A及P53蛋白表达变化。结果与阴性对照组相比,mi R-574-3p mimic组mi R-574-3p表达明显上调(P<0.01),且在36~72 h细胞活力明显降低(P<0.01)。与阴性对照组相比,mi R-574-3p mimic组细胞克隆形成率显著降低(P<0.01),同时S期细胞比例显著增加(P<0.01)。相较于阴性对照组,mi R-574-3p mimic组Cyclin A1、CDK2、PCNA、Cdc25A蛋白表达显著下调(P<0.01),P53蛋白表达明显上调(P<0.01)。阴性对照组与空白对照组上述各指标均无明显差异。结论mi R-574-3p可抑制结肠癌HCT116细胞增殖,这可能与下调Cyclin A1、CDK2、PCNA、Cdc25A及上调P53蛋白表达,最终诱导细胞S期阻滞有关。 展开更多
关键词 结肠癌 微小RNA-574-3p 细胞周期 增殖
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MicroRNA-486-3p调控小鼠巨噬细胞差异表达基因筛选及鉴定
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作者 刘鸿雁 吴双双 +6 位作者 陈书婕 岑玉威 马一瑄 岳佳颖 魏书宇 王北艳 马金柱 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第5期90-96,共7页
为分析MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞抵抗金黄色葡萄球菌感染过程中的调控作用,使用金黄色葡萄球菌感染MicroRNA-486-3p基因敲除型和野生型小鼠原代腹腔巨噬细胞24 h后,通过mRNA-Seq方法分析mRNA表达水平,筛选MicroRNA-486-3p调控巨噬... 为分析MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞抵抗金黄色葡萄球菌感染过程中的调控作用,使用金黄色葡萄球菌感染MicroRNA-486-3p基因敲除型和野生型小鼠原代腹腔巨噬细胞24 h后,通过mRNA-Seq方法分析mRNA表达水平,筛选MicroRNA-486-3p调控巨噬细胞的差异表达基因,利用RT-qPCR对遴选的差异基因加以验证。测序结果分析显示,差异表达基因共有744个,其中385个上调差异基因,359个下调差异基因,GO分析表明差异基因参与细胞代谢、增殖和免疫反应等生物作用,KEGG富集分析显示差异基因主要与PI3K-Akt、MAPK、NF-κB等信号通路活化相关,RT-qPCR验证结果显示遴选的差异基因与m RNA-Seq分析的下调趋势相符。上述结果表明,MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞感染金黄色葡萄球菌过程中具有调控作用,为今后深入研究MicroRNA-486-3p调控巨噬细胞免疫功能机制提供了重要参考。 展开更多
关键词 microrna-486-3p MRNA-SEQ 巨噬细胞 差异表达基因 金黄色葡萄球菌
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MicroRNA-132-3p靶向Nrf2加重脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的机制研究
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作者 马寒玉 赵宇浩 +3 位作者 张铭 李真 王飞 陈书艳 《中国现代医学杂志》 2025年第6期24-31,共8页
目的探讨microRNA-132-3p(miR-132-3p)靶向Nrf2加重脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的机制。方法用LPS刺激HUVECs建立体外脓毒症细胞模型,引起内皮细胞损伤。采用CCK-8法测定细胞活力,EdU法检测细胞增殖能力。转染miR-13... 目的探讨microRNA-132-3p(miR-132-3p)靶向Nrf2加重脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的机制。方法用LPS刺激HUVECs建立体外脓毒症细胞模型,引起内皮细胞损伤。采用CCK-8法测定细胞活力,EdU法检测细胞增殖能力。转染miR-132-3p模拟物/抑制剂后,检测细胞迁移能力、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。通过荧光素酶报告基因验证miR-132-3p与其靶基因的结合。结果对照组细胞活力、细胞阳性比高于LPS组(P<0.05)。LPS组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较对照组升高(P<0.05),SOD水平较对照组降低(P<0.05)。LPS组miR-132-3p mRNA相对表达量较对照组升高(P<0.05),Nrf2 mRNA相对表达量较对照组降低(P<0.05)。LPS组Nrf2蛋白相对表达量较对照组降低(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组细胞活力比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组细胞活力较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组细胞活力较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组迁移细胞数比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组迁移细胞数较LPS组减少(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组迁移细胞数较LPS组增多(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组细胞划痕愈合率比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组细胞划痕愈合率较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组细胞划痕愈合率较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA和SOD水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);LPS+miR-132-3p模拟物组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较LPS组升高(P<0.05),SOD水平较LPS组降低(P<0.05);LPS+miR-132-3p抑制剂组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较LPS组降低(P<0.05),SOD水平较LPS组升高(P<0.05)。对照组与阴性对照组Nrf2-WT的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05),miR-132-3p模拟物抑制Nrf2-WT的荧光素酶活性(P<0.05),miR-132-3p抑制剂增强Nrf2-WT的荧光素酶活性(P<0.05)。各组Nrf2-MUT的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组Nrf2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组Nrf2 mRNA相对表达量较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组Nrf2 mRNA相对表达量较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组Nrf2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组Nrf2蛋白相对表达量较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组Nrf2蛋白相对表达量较LPS组升高(P<0.05)。结论miR-132-3p通过下调Nrf2的表达加重了LPS诱导的内皮细胞损伤,miR-132-3p可能是治疗脓毒症的潜在的新靶点。 展开更多
关键词 脓毒症 microrna-132-3p 内皮细胞 脂多糖 核因子红细胞2相关因子2
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CircAKT1调节miR-574-3p/AMD1轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 张小龙 王军委 +5 位作者 李岩 刘雪 刘峥 张继光 刘仟 赵荣芳 《热带医学杂志》 2025年第6期757-763,F0002,共8页
目的探讨环状RNA丝氨酸/苏氨酸激酶1(CircAKT1)调节微小RNA-574-3p(miR-574-3p)/腺苷甲硫氨酸脱羧酶(AMD1)轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响,并分析其分子机制。方法以肝癌细胞系Huh-7作为研究对象,将Huh-7细胞分为对照(NC)组、si-NC组... 目的探讨环状RNA丝氨酸/苏氨酸激酶1(CircAKT1)调节微小RNA-574-3p(miR-574-3p)/腺苷甲硫氨酸脱羧酶(AMD1)轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响,并分析其分子机制。方法以肝癌细胞系Huh-7作为研究对象,将Huh-7细胞分为对照(NC)组、si-NC组、si-CircAKT1组、miR-NC组、miR-574-3p模拟物(miR-574-3p mimic)组、si-CircAKT1+inhibitorNC组、si-CircAKT1+miR-574-3pinhibitor组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中CircAKT1、miR-574-3p、AMD1 mRNA的表达;蛋白免疫印迹(Western blot)检测AMD1蛋白表达;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测Huh-7细胞增殖;流式细胞术检测Huh-7细胞凋亡;划痕实验检测Huh-7细胞迁移能力;Transwell法检测Huh-7细胞侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证CircAKT1与miR-574-3p、miR-574-3p与AMD1之间的靶向关系。结果肝癌细胞系Huh-7中miR-574-3p表达低于正常肝细胞LO2,CircAKT1、AMD1 mRNA表达高于正常肝细胞LO2,差异均有统计学意义(t=10.729、9.783、8.941,P均<0.05)。与NC组、si-NC组比较,si-CircAKT1组细胞CircAKT1、AMD1 mRNA及蛋白表达、光密度(OD)值、划痕愈合率、侵袭细胞数降低,miR-574-3p表达、凋亡率升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);与si-CircAKT1组、si-CircAKT1+inhibitor NC组比较,si-CircAKT1+miR-574-3p inhibitor组细胞AMD1 mRNA及蛋白表达、OD值、划痕愈合率、侵袭细胞数升高,miR-574-3p表达、凋亡率降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与NC组、miR-NC组比较,miR-574-3p mimic组细胞OD值、划痕愈合率、侵袭细胞数、AMD1蛋白表达降低,凋亡率升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Target Scan Human网址预测miR-574-3p与AMD1、CircAKT1存在结合位点;miR-574-3p mimic组共转染CircAKT1-WT、AMD1-WT后的细胞荧光素酶活性显著低于miR-NC组,差异均有统计学意义(t=8.383、7.405,P均<0.05)。结论沉默CircAKT1可以通过调节miR-574-3p/AMD1轴,抑制肝癌细胞Huh-7的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 环状RNA丝氨酸/苏氨酸激酶1 微小RNA-574-3p/腺苷甲硫氨酸脱羧酶轴 肝癌 恶性生物学行为
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miR-574-3p、FAM3C在食管癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系 被引量:1
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作者 杨志强 常国涛 +2 位作者 史文松 马晓斌 钱河 《现代肿瘤医学》 2025年第3期427-432,共6页
目的:探究微小RNA(miR)-574-3p、序列相似家族3成员C(family with sequence similarity 3 member C,FAM3C)在食管癌组织中的表达,并分析二者与患者临床病理特征的关系。方法:选取2018年5月至2020年5月于本院行手术治疗的90例食管癌患者... 目的:探究微小RNA(miR)-574-3p、序列相似家族3成员C(family with sequence similarity 3 member C,FAM3C)在食管癌组织中的表达,并分析二者与患者临床病理特征的关系。方法:选取2018年5月至2020年5月于本院行手术治疗的90例食管癌患者,收集术中留取的癌组织和癌旁组织标本。使用qRT-PCR法检测组织中miR-574-3p、FAM3C mRNA相对表达量;使用免疫组织化学法检测组织中FAM3C蛋白表达情况;采用Spearman等级相关分析食管癌组织中miR-574-3p、FAM3C的相关性;Kaplan-Meier法分析miR-574-3p、FAM3C与预后的关系。结果:食管癌患者癌组织中miR-574-3p低表达,FAM3C mRNA、FAM3C蛋白高表达(P<0.05)。食管癌组织中miR-574-3p、FAM3C蛋白表达水平具有负相关性(r=-0.420,P<0.05)。Pearson相关性分析显示,食管癌组织中miR-574-3p、FAM3C mRNA表达具有负相关性(r=-0.731,P<0.05)。miR-574-3p、FAM3C蛋白均与TNM分期、浸润程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。miR-574-3p高表达组3年累积生存率为83.72%,显著高于miR-574-3p低表达组(53.19%);FAM3C高表达组3年累积生存率为56.86%,显著低于FAM3C低表达组(82.05%),差异均有统计学意义(log rankχ^(2)=10.175、7.290,P<0.05)。结论:食管癌组织中miR-574-3p表达水平较低,FAM3C表达水平较高,且二者具有负相关性,与临床病理特征中的TNM分期、浸润程度、淋巴结转移以及患者3年累积生存率有关。 展开更多
关键词 食管癌 微小RNA-574-3p 序列相似家族3成员C 临床病理特征
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Loss-of-function mutations of microRNA-142-3p promote ASH1L expression to induce immune evasion and hepatocellular carcinoma progression
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作者 Xing-Hui Yu Yan Xie +8 位作者 Jian Yu Kun-Ning Zhang Zhou-Bo Guo Di Wang Zhao-Xian Li Wei-Qi Zhang Yu-Ying Tan Li Zhang Wen-Tao Jiang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2025年第1期126-145,共20页
BACKGROUND Hepatocellular carcinoma(HCC)has been a pervasive malignancy throughout the world with elevated mortality.Efficient therapeutic targets are beneficial to treat and predict the disease.Currently,the exact mo... BACKGROUND Hepatocellular carcinoma(HCC)has been a pervasive malignancy throughout the world with elevated mortality.Efficient therapeutic targets are beneficial to treat and predict the disease.Currently,the exact molecular mechanisms leading to the progression of HCC are still unclear.Research has shown that the microRNA-142-3p level decreases in HCC,whereas bioinformatics analysis of the cancer genome atlas database shows the ASH1L expression increased among liver tumor tissues.In this paper,we will explore the effects and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L affect the prognosis of HCC patients and HCC cell bioactivity,and the association between them.AIM To investigate the effects and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L on the HCC cell bioactivity and prognosis of HCC patients.METHODS In this study,we grouped HCC patients according to their immunohistochemistry results of ASH1L with pathological tissues,and retrospectively analyzed the prognosis of HCC patients.Furthermore,explored the roles and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L by cellular and animal experiments,which involved the following experimental methods:Immunohistochemical staining,western blot,quantitative real-time-polymerase chain reaction,flow cytometric analysis,tumor xenografts in nude mice,etc.The statistical methods involved in this study contained t-test,one-way analysis of variance,theχ^(2)test,the Kaplan-Meier approach and the log-rank test.RESULTS In this study,we found that HCC patients with high expression of ASH1L possess a more recurrence rate as well as a decreased overall survival rate.ASH1L promotes the tumorigenicity of HCC and microRNA-142-3p exhibits reduced expression in HCC tissues and interacts with ASH1L through targeting the ASH1L 3′untranslated region.Furthermore,microRNA-142-3p promotes apoptosis and inhibits proliferation,invasion,and migration of HCC cell lines in vitro via ASH1L.For the exploration mechanism,we found ASH1L may promote an immunosuppressive microenvironment in HCC and ASH1L affects the expression of the cell junction protein zonula occludens-1,which is potentially relevant to the immune system.CONCLUSION Loss function of microRNA-142-3p induces cancer progression and immune evasion through upregulation of ASH1L in HCC.Both microRNA-142-3p and ASH1L can feature as new biomarker for HCC in the future. 展开更多
关键词 Hepatocellular carcinoma microrna-142-3p ASH1L Immune evasion Tumor immune microenvironment Apoptosis
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LncRNA ZEB2-AS1调控miR-574-3p/ZEB1轴对卵巢癌细胞迁移及侵袭的影响 被引量:3
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作者 梁殿迅 郭哲 +5 位作者 朱军义 许静 姜平 孙慧霞 李和丽 王秋宇 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期2228-2233,共6页
目的探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)锌指E盒结合同源盒蛋白2反义RNA(LncRNA ZEB2-AS)1对卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3、SW626、A2780)和正常人卵巢上皮细胞(HOSEpiC),实时荧光定量聚... 目的探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)锌指E盒结合同源盒蛋白2反义RNA(LncRNA ZEB2-AS)1对卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3、SW626、A2780)和正常人卵巢上皮细胞(HOSEpiC),实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p和锌指E盒结合蛋白(ZEB)1的水平。取对数生长期的SW626细胞,分为对照组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-ZEB2-AS1组、si-NC组、si-ZEB2-AS1组、si-ZEB2-AS1+inhibitor-NC组、si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组。qRT-PCR检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western印迹检测细胞ZEB1和迁移、侵袭相关蛋白的表达;双荧光素酶报告基因检测验证ZEB1与miR-574-3p的靶向关系。结果与正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC相比,人卵巢癌SKOV3、SW626、A2780细胞中ZEB2-AS1、ZEB1水平明显升高,miR-574-3p水平明显降低(P<0.05),且SW626细胞中ZEB2-AS1表达水平最高。转染后,与对照组相比,pcDNA3.1-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(VIM)、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(P<0.05);si-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显降低,E-cadherin表达明显增加(P<0.05)。与si-ZEB2-AS1组相比,si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(P<0.05)。双荧光素酶结果显示,高表达miR-574-3p可明显抑制ZEB1 WT的荧光素酶活性(P<0.05)。结论在卵巢癌中,LncRNA ZEB2-AS1过表达可能通过下调miR-574-3p,上调ZEB1的表达,进而诱导上皮-间质转化(EMT),促进卵巢癌细胞的迁移与侵袭。 展开更多
关键词 卵巢癌 长链非编码核糖核酸锌指E盒结合同源盒蛋白2反义RNA 1 上皮-间质转化 microrna-574-3p 锌指E盒结合蛋白1
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三阴性乳腺癌组织长链非编码RNA-P21、microRNA-17-3p的表达及其临床意义 被引量:13
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作者 刘凡 施文瑜 +1 位作者 刘益飞 王国华 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期16-22,共7页
目的探讨三阴性乳腺癌组织中长链非编码RNA-P21(LncRNA-P21)、microRNA-17-3p(miR-17-3p)的表达,分析其与三阴性乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系。方法选取2016年1月—2017年5月南通大学附属医院收治的106例三阴性乳腺癌患者经手... 目的探讨三阴性乳腺癌组织中长链非编码RNA-P21(LncRNA-P21)、microRNA-17-3p(miR-17-3p)的表达,分析其与三阴性乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系。方法选取2016年1月—2017年5月南通大学附属医院收治的106例三阴性乳腺癌患者经手术切除的癌组织和癌旁组织(距离癌组织至少5 cm)标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中LncRNA-P21和miR-17-3p的表达;收集患者的临床病理特征资料,分析LncRNA-P21、miR-17-3p表达与临床病理特征的关系;术后随访5年,采用Kaplan-Meier法绘制不同LncRNA-P21、miR-17-3p表达三阴性乳腺癌患者的生存曲线;Cox回归分析影响三阴性乳腺癌患者预后的因素。结果癌组织LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05);癌组织miR-17-3p mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移、Ki-67≥30%三阴性乳腺癌组织中LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于临床Ⅰ、Ⅱ期,无腋窝淋巴结转移和Ki-67<30%(P<0.05);临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移、Ki-67≥30%三阴乳腺癌组织中miR-17-3p mRNA相对表达量高于临床Ⅰ、Ⅱ期,无腋窝淋巴结转移和Ki-67阴性表达(P<0.05)。不同年龄、肿瘤直径、分化程度、绝经状态的三阴性乳腺癌患者LncRNA-P21、miR-17-3p mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。三阴性乳腺癌组织中LncRNA-P21表达与miR-17-3p表达呈负相关(r=-0.570,P<0.05)。LncRNA-P21低表达组5年无病生存期(DFS)和总生存期(OS)生存率低于LncRNA-P21高表达组(P<0.05),miR-17-3p高表达组5年DFS、OS生存率低于miR-17-3p低表达组(P<0.05)。单因素Cox回归分析结果显示,分化程度、TNM分期、腋窝淋巴结转移、LncRNA-P21、miR-17-3p是三阴性乳腺癌患者预后的影响因素(P<0.05);多因素Cox风险比例回归分析结果显示,腋窝淋巴结转移、miR-17-3p是三阴性乳腺癌患者预后不良的危险因素(P<0.05),LncRNA-P21是保护因素(P<0.05)。结论三阴性乳腺癌组织LncRNA-P21表达下调,miR-17-3p表达上调,且与乳腺癌Ki-67≥30%、临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移及预后不良有关。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 长链非编码RNA-p21 microrna-17-3p 病理 预后
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活动性肺结核外周血miR-28-3p与miR-93-5p及miR-574-5p表达及临床意义 被引量:2
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作者 耿晓平 王鲜茹 +3 位作者 丁雅芳 齐真真 王贯省 周元元 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1617-1622,共6页
目的探讨活动性肺结核患者外周血微小RNA-28-3p(miR-28-3p)、miR-93-5p和miR-574-5p表达水平及其临床意义。方法选取2017年11月-2019年11月于河南科技大学第一附属医院行肺结核筛查的300例患者,根据肺结核诊断情况分为活动性肺结核组13... 目的探讨活动性肺结核患者外周血微小RNA-28-3p(miR-28-3p)、miR-93-5p和miR-574-5p表达水平及其临床意义。方法选取2017年11月-2019年11月于河南科技大学第一附属医院行肺结核筛查的300例患者,根据肺结核诊断情况分为活动性肺结核组136例与非活动性肺结核组164例,另选取同期医院体检的102名健康人为对照组。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外周血miR-28-3p、miR-93-5p和miR-574-5p水平,分析活动性肺结核与非活动性肺结核患者外周血miR-28-3p、miR-93-5p和miR-574-5p表达并观察活动性肺结核治疗前后其水平变化,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-28-3p、miR-93-5p和miR-574-5p表达水平对区分活动性肺结核疾病预测价值。结果活动性肺结核组吸烟、咳嗽、咯血、肺内空洞、淋巴结肿大占比高于非活性肺结核组(P<0.001),而钙化结节、支气管扩张占比低于非活动性肺结核组(P<0.001);活动性肺结核组干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、IL-12、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)与外周血miR-28-3p、miR-93-5p、miR-574-5p相对表达水平高于非活动性肺结核组与对照组(P<0.05),活动性肺结核组治疗后外周血miR-28-3p、miR-93-5p、miR-574-5p相对表达水平均低于治疗前(P<0.05);miR-28-3p、miR-93-5p、miR-574-5p的预测活动性肺结核疾病曲线下面积(AUC)分别为0.906、0.818、0.872(P<0.05),且miR-28-3p的AUC高于miR-93-5p(P=0.002)。结论活动性肺结核患者外周血miR-28-3p、miR-93-5p、miR-574-5p表达水平升高且治疗后呈下降趋势,对区分活动性肺结核存在一定的预测价值。 展开更多
关键词 肺结核 微小RNA-28-3p 微小RNA-93-5p 微小RNA-574-5p 临床意义
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microRNA-219-2-3p在胃癌中的表达及其作用机制初探 被引量:5
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作者 金锦莲 吴发明 +2 位作者 周海燕 谢晓晶 王新宇 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期1729-1731,共3页
目的探讨microRNA-219-2-3p(miR-219-2-3p)与胃癌的相关性及机制。方法运用实时聚合酶链反应(real timeRT PCR)检测82份配对的胃癌组织和周围正常组织样本中的miR-219-2-3p的表达水平。在胃癌细胞株MGC803中过表达miR-219-2-3p后,测定... 目的探讨microRNA-219-2-3p(miR-219-2-3p)与胃癌的相关性及机制。方法运用实时聚合酶链反应(real timeRT PCR)检测82份配对的胃癌组织和周围正常组织样本中的miR-219-2-3p的表达水平。在胃癌细胞株MGC803中过表达miR-219-2-3p后,测定细胞增殖活性,并在细胞株和胃癌组织标本中采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定与肿瘤增殖相关的蛋白ERK1/2表达水平。结果 miR-219-2-3p在晚期胃癌组织中的表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。在胃癌细胞株MGC803中过表达miR-219-2-3p后细胞增殖受显著抑制(P<0.05)。过表达miR-219-2-3p后,MGC803细胞中的ERK磷酸化水平显著下降,总ERK表达量不变。在组织标本中,胃癌组织的ERK磷酸化(p-ERK)水平明显高于周围癌旁组织。结论 miR-219-2-3p可能通过参与调控ERK1/2信号通路而在胃癌发生和发展中起抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 microrna-219-2-3p 细胞分裂
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MicroRNA-122-5p、microRNA-33a-3p在胃癌患者中的表达及与临床病理特征和预后的关系 被引量:4
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作者 张伟 蔡振花 +5 位作者 周瑞轻 刘小慧 江麒麟 刘红波 董永杰 冯运章 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期17-22,共6页
目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反... 目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)技术检测血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量,同时分析两者与胃癌患者临床病理特征的关系;绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析miR-122-5p、miR-133a-3p的表达与胃癌患者预后的关系。结果胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量低于健康体检者(P<0.05);有淋巴结转移、分化程度低、浸润至浆膜层的患者血清miR-122-5p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度、浸润至黏膜下各层的患者(P<0.05);有淋巴结转移、低分化程度、浸润至浆膜层、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的患者血清miR-133a-3p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度,浸润至黏膜下各层,TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线结果显示,miR-122-5p低表达胃癌患者5年生存率低于miR-122-5p高表达胃癌患者(P<0.05);miR-133a-3p低表达胃癌患者的5年生存率低于miR-133a-3p高表达胃癌患者(P<0.05)。结论胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量呈低表达,并且两者与胃癌的恶性程度和患者不良预后密切相关,血清miR-122-5p、miR-133a-3p可能成为胃癌患者预后预测的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 胃肿瘤 microrna-122-5p microrna-133a-3p 临床病理特征 预后
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MicroRNA-144-3p对肝癌细胞增殖、侵袭转移的影响及其机制 被引量:10
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作者 赵立涵 刘立 +2 位作者 蒋波 甄根深 李娜 《临床和实验医学杂志》 2018年第14期1493-1496,共4页
目的探讨microRNA-144-3p(miR144-3p)对Hep G2细胞侵袭、凋亡的影响及机制。方法选取对数生长期的Hep G2细胞,加入不同浓度的miR144-3p(1μM、10μM、20μM)进行处理,同时设置对照组(加入miRNA无关序列)。培养48 h后检测细胞增殖、侵袭... 目的探讨microRNA-144-3p(miR144-3p)对Hep G2细胞侵袭、凋亡的影响及机制。方法选取对数生长期的Hep G2细胞,加入不同浓度的miR144-3p(1μM、10μM、20μM)进行处理,同时设置对照组(加入miRNA无关序列)。培养48 h后检测细胞增殖、侵袭、凋亡情况,并进行肝癌衍生生长因子(HDGF)的表达检测。结果 miR144-3p处理48 h后,miR144-3p能够呈剂量依赖性地抑制细胞增殖,能够呈剂量依赖性地增加细胞凋亡指数,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。miR144-3p在1~20μM浓度范围能显著抑制Hep G2细胞的穿透能力,呈剂量依赖关系(P<0.05)。miR144-3p能够呈剂量依赖性抑制HDGF的mRNA与蛋白表达水平,其表达水平显著低于对照组(P<0.05)。结论 miR144-3p能抑制肝癌Hep G2细胞的增殖、侵袭与转移,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制HDGF基因与蛋白表达有关。 展开更多
关键词 肝癌 microrna-144-3p HEpG2细胞 侵袭转移 肝癌衍生生长因子
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难治性癫痫患者神经调节蛋白1、microRNA-221-3p表达与认知功能的关系 被引量:7
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作者 庄婵芝 潘志雄 +4 位作者 何素丽 陈翔 谢泽娟 陈嘉迪 何文贞 《实用临床医药杂志》 CAS 2021年第22期50-54,共5页
目的探讨难治性癫痫患者血清神经调节蛋白1(NRG1)、microRNA-221-3p(miR-221-3p)表达水平与认知功能障碍(CD)的关系。方法选取64例难治性癫痫患者(难治性癫痫组)和58例抗癫痫药物控制良好患者(药物控制良好组)作为研究对象,另选取同期本... 目的探讨难治性癫痫患者血清神经调节蛋白1(NRG1)、microRNA-221-3p(miR-221-3p)表达水平与认知功能障碍(CD)的关系。方法选取64例难治性癫痫患者(难治性癫痫组)和58例抗癫痫药物控制良好患者(药物控制良好组)作为研究对象,另选取同期本院70例健康体检者纳入对照组。采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估难治性癫痫患者的认知功能受损程度,并根据MoCA总分将难治性癫痫患者分为CD组40例和非CD组24例。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-221-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清NRG1水平,并采用Pearson相关性分析探讨miR-221-3p、NRG1水平与MoCA总分的相关性,采用多因素Logistic回归分析探讨难治性癫痫患者发生CD的影响因素。结果难治性癫痫组血清miR-221-3p、NRG1水平高于对照组、药物控制良好组,差异有统计学意义(P<0.05);CD组血清miR-221-3p、NRG1水平高于非CD组,MoCA总分、空间与执行能力评分、语言评分、延迟记忆评分、计算力与定向评分低于非CD组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,难治性癫痫CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平均与MoCA总分呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,NRG1、miR-221-3p均为难治性癫痫患者发生CD的影响因素(P<0.05)。结论难治性癫痫合并CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平较高,且miR-221-3p、NRG1均与难治性癫痫患者CD进程密切相关。 展开更多
关键词 难治性癫痫 神经调节蛋白1 microrna-221-3p 认知功能 相关性
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miR-574-3p通过下调CBX2增强了卵巢癌A2780细胞对紫杉醇的敏感性 被引量:6
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作者 谢文阳 熊员焕 郭桃英 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期950-956,共7页
目的探讨miR-574-3p通过染色体盒同源物2(chromobox homolog 2,CBX2)调控卵巢癌A2780细胞对紫杉醇敏感性的影响。方法采用RT-qPCR方法检测miR-574-3p在正常卵巢上皮IOSE386和IOSE397细胞以及卵巢癌A2780细胞和紫杉醇耐药A2780/Tax细胞... 目的探讨miR-574-3p通过染色体盒同源物2(chromobox homolog 2,CBX2)调控卵巢癌A2780细胞对紫杉醇敏感性的影响。方法采用RT-qPCR方法检测miR-574-3p在正常卵巢上皮IOSE386和IOSE397细胞以及卵巢癌A2780细胞和紫杉醇耐药A2780/Tax细胞中的表达水平。CCK-8检测A2780/Tax细胞增殖活力;Transwell实验检测A2780/Tax细胞侵袭情况;双荧光素酶报告基因验证miR-574-3p与CBX2的调控关系;Western blot检测CBX2蛋白的表达。结果miR-574-3p在A2780细胞和A2780/Tax细胞中低表达,且在紫杉醇耐药A2780/Tax细胞中表达最低。过表达miR-574-3p可显著抑制A2780/Tax细胞增殖和侵袭。双荧光素酶报告基因结果证实miR-574-3p靶向下调CBX2的表达水平。证实过表达miR-574-3p通过下调CBX2抑制A2780/Tax细胞增殖和侵袭。结论miR-574-3p靶向下调CBX2增强了A2780细胞对紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 卵巢癌 A2780细胞 miR-574-3p CBX2 紫杉醇 化疗敏感性
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幽门螺杆菌感染性胃癌组织microRNA-17、microRNA-490-3p的表达及其与临床病理特征和预后的关系 被引量:9
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作者 李丽萍 贾筠 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期23-29,共7页
目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染性胃癌组织microRNA-17(miR-17)、microRNA-490-3p(miR-490-3p)的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2012年1月—2014年6月东莞市人民医院收治的146例Hp阳性及阴性胃癌患者的癌组织及癌旁组织。... 目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染性胃癌组织microRNA-17(miR-17)、microRNA-490-3p(miR-490-3p)的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2012年1月—2014年6月东莞市人民医院收治的146例Hp阳性及阴性胃癌患者的癌组织及癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测癌组织及癌旁组织中miR-17、miR-490-3p的表达。分析Hp阳性胃癌患者癌组织miR-17、miR-490-3p表达与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线评估miR-17、miR-490-3p表达与Hp阳性胃癌患者术后5年生存率的关系;Cox回归模型分析影响Hp阳性胃癌患者预后的危险因素。结果Hp阳性及阴性胃癌患者的癌组织中miR-17 mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05),miR-490-3p mRNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05)。经Pearson相关分析,miR-17和miR-490-3p在不同胃癌组织中的表达无相关性(P>0.05)。不同肿瘤直径、淋巴结转移、远处转移及TNM分期的Hp阳性胃癌患者癌组织miR-17 mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同肿瘤直径、淋巴结转移及远处转移的Hp阳性胃癌患者癌组织miR-490-3p mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,miR-17高表达Hp阳性胃癌组、miR-490-3p低表达Hp阳性胃癌组术后5年生存率均分别低于miR-17低表达Hp阳性胃癌组、miR-490-3p高表达Hp阳性胃癌组(P<0.05)。有远处转移、较高的TNM分期、miR-17高表达、miR-490-3p低表达是影响Hp阳性胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论Hp阳性胃癌组织miR-17表达增加、miR-490-3p表达降低,与患者较差临床病理参数和不良预后有关,监测癌组织miR-17、miR-490-3p表达可能有利于患者的预后判断。 展开更多
关键词 胃癌 幽门螺杆菌 microrna-17 microrna-490-3p 预后 临床病理特征
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MicroRNA-338-3p通过下调SMO表达抑制结直肠癌细胞的侵袭与迁移 被引量:2
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作者 区文弢 孙凯 +2 位作者 吴承堂 雷尚通 张晓槟 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期25-30,共6页
目的探讨microRNA-338-3p(miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制。方法脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实... 目的探讨microRNA-338-3p(miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制。方法脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达状况,运用半定量RT-PCR及Westernblot分析Smoothened(SMO)mRNA及蛋白表达状况,Transwell侵袭、迁移实验检测转染前后细胞体外侵袭迁移能力;在经anti-SMO-siRNA预先处理的SW480细胞中转染miR-338-3p-inhibitor,检测转染细胞中SMO蛋白的表达变化以及侵袭能力的改变。结果通过生物信息学网站预测SMO可能是miR-338-3p的作用靶基因;SW620细胞中miR-338-3p表达水平较SW480细胞减低,而SMO蛋白增高。转染pre-miR-338-3p至SW620细胞,miR-338-3p表达上调,SMO蛋白表达降低,且肿瘤细胞的侵袭及迁移能力下降;而转染miR-338-3p-inhibitor至SW480细胞后,miR-338-3p表达下降,SMO蛋白表达上升,肿瘤细胞侵袭、迁移能力增强,且此种增强效应可被an-ti-SMO-siRNA所部分逆转,说明miR-338-3p确实是通过抑制SMO而发挥抗癌作用。结论 MiR-338-3p通过下调SMO表达而抑制结直肠癌细胞侵袭与迁移。 展开更多
关键词 结直肠癌 microrna-338-3p SMO SHH信号通路 侵袭 迁移
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健脾清热活血方介导microRNA-222-3p调控TGF-β1、CDKN1B/p27表达防治结肠癌的离体研究 被引量:6
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作者 张涛 张馨月 +2 位作者 卢鑫 黄晓燕 林逸婷 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1863-1867,共5页
目的通过检测健脾清热活血方基于microRNA-222-3p调控TGF-β通路对结肠癌HCT-116细胞迁移的变化以及TGF-β1、CDKN1B/p27的表达,探讨该方防治结肠癌的效用及可能机制。方法参照血清药理学方法,制备大鼠含药血清。应用RNAi技术构建稳定沉... 目的通过检测健脾清热活血方基于microRNA-222-3p调控TGF-β通路对结肠癌HCT-116细胞迁移的变化以及TGF-β1、CDKN1B/p27的表达,探讨该方防治结肠癌的效用及可能机制。方法参照血清药理学方法,制备大鼠含药血清。应用RNAi技术构建稳定沉默miR-222结肠癌HCT-116细胞系。离体实验随机分为空白对照组(HCT-116)、阴性对照组(NC)、阳性对照组(miR-222-3p沉默)、治疗组(miR-222-3p沉默+低/中/高剂量中药)。Transwell法检测细胞迁移能力,应用现代分子生物学技术检测TGF-β1、CDKN1B/p27表达。结果成功构建TUD-hsa-miR-222-3p Inhibitor慢病毒载体并获得miR-222稳定沉默的结肠癌HCT-116细胞系,与正常组及NC组对比,miR-222沉默后HCT-116细胞迁移能力明显下降,有显著差异(P<0.05);在治疗组中HCT-116细胞迁移数目较sh-miR222-3p组减少更为显著(P<0.05)。对于TGF-β1/CDKN1B/p27mRNA表达,与阳性对照组比较,治疗组CDKN1B/p27mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。WB结果显示,与阳性对照组相比,治疗组TGF-β1/CDKN1B/p27蛋白表达均下调,有统计学意义(P<0.05)。结论健脾清热活血方可能通过抑制miRNA-222-3p减少TGF-β1、CDKN1B/p27表达,降低细胞迁移能力,诱导结肠癌细胞凋亡,达到防治结肠癌的效用。 展开更多
关键词 健脾清热活血方 microrna-222-3p RNA干扰 转化生长因子-Β1 结肠癌
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LncRNA MALAT-1靶向microRNA-370-3p调节Akt通路对肺癌细胞生物学行为影响的机制研究 被引量:1
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作者 李亮 李建忠 +2 位作者 张丹杰 马跃峰 李少民 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期38-47,共10页
目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT... 目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT-1(转染si-MALAT-1)或过表达miR-370-3p(转染miR-370-3p mimic),抑制LncRNA MALAT-1和干扰miR-370-3p(同时转染si-MALAT-1和antimiR-370-3p),观察A549细胞的生物学行为和Akt通路蛋白的表达。qRT-PCR检测LncRNA MALAT-1、miR-370-3p mRNA的表达;MMT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;Western blotting检测Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白相对表达量。构建MALAT-1野生型(MALAT-1WT_1uc)与突变型(MALAT-1MUT_1uc)荧光素酶报告基因质粒并分别与miR-370-3p、miR-NC转染至A549细胞,观察荧光结合强度并检测miR-370-3p的表达。结果 抑制LncRNA MALAT-1或过表达miR-370-3p能抑制A549细胞迁移、侵袭,促进细胞凋亡,减少A549细胞活性(P <0.05),并下调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。与单纯抑制LncRNA MALAT-1比较,抑制LncRNA MALAT-1并干扰miR-370-3p能促进A549细胞迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,增加A549细胞活性(P <0.05),并上调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。TargetScan靶基因预测发现LncRNA MALAT-1与miR-370-3p存在结合位点,荧光素酶报告基因实验验证发现,与MALAT-1WT_1uc+Control组和MALAT-1WT_1uc+miR NC组比较,MALAT-1WT_1uc+miR-370-3p组相对荧光强度下降(P <0.05),MALAT-1MUT_1uc+miR-370-3p荧光强度无变化(P>0.05),进一步qRT-PCR结果发现,与Control组比较,si-MALAT-1组的miR-370-3p mRNA相对表达量升高(P <0.05),与si-MALAT-1组比较,si-MALAT-1+anti-miR-370-3p组的miR-370-3pmRNA相对表达量降低(P <0.05)。结论LncRNA MALAT-1可以靶向负调控miR-370-3p。抑制LncRNA MALAT-1可以上调miR-370-3p的表达,抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,促进A549细胞的凋亡,并下调Akt通路蛋白的磷酸化。 展开更多
关键词 肺癌 microrna-370-3p 长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1 荧光素酶报告基因实验 AKT
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microRNA-22-3p低表达上调幼年哮喘气道重塑大鼠的NK1R表达 被引量:1
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作者 宋建刚 高永伟 +3 位作者 刘庆 贾鲲鹏 庞随军 李元霞 《西部医学》 2021年第1期4-9,共6页
目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照... 目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照组注射生理盐水并吸入空气;模型组应用卵白蛋白(OVA)雾化吸入法建立哮喘大鼠模型;模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组,在大鼠每次激发前1 h内分别尾静脉注射1 mL的mimic、mimic-NC、inhibitor、inhibitor-NC。H&E染色法观察小鼠气道重塑变化,RT-qPCR检测miR-22-3p的水平变化。荧光素酶基因报告检测方法在大鼠气道平滑肌细胞RASMCs中验证miR-22-3p靶向NK1R。使用Western blot和免疫组织化学法检测NK1R的表达水平。结果与对照组比较,模型组发生明显的气道重塑现象,且气道组织中miR-22-3p水平降低(P<0.05)。在RASMCs细胞中,NK1R的3′UTR和miR-22-3p的直接结合,导致荧光素酶活性强度降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组的NK1R的mRNA和蛋白的表达水平明显上调(P<0.01)。与模型+mimic-NC组比较,模型+mimic组miR-22-3p的水平上调,而NK1R的表达下调(均P<0.05)。与模型+inhibitor-NC组比较,模型+inhibitor组miR-22-3p的水平下调,而NK1R水平上调(均P<0.05)。结论哮喘诱发大鼠气道NK1R的表达增加,miR-22-3p直接靶向调节抑制哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平,下调miR-22-3p解除对NK1R的抑制从而上调NK1R水平。 展开更多
关键词 microrna-22-3p 幼年大鼠 哮喘 神经激肽受体1 气道平滑肌重塑
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microRNA-124-3p靶向调控STAT3抑制神经细胞中肠道病毒71型的复制 被引量:1
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作者 路燕 徐明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期224-229,共6页
目的构建microRNA-124-3p表达上调和下调的SK-N-SH细胞,探讨microRNA-124-3p对肠道病毒71型(EV71)在SK-N-SH中的复制机制。方法构建过表达miRNA的miRNA mimic和敲低miRNA的miRNA inhibitor。检测miRNA-124-3p,EV71核酸,细胞病变效应(CP... 目的构建microRNA-124-3p表达上调和下调的SK-N-SH细胞,探讨microRNA-124-3p对肠道病毒71型(EV71)在SK-N-SH中的复制机制。方法构建过表达miRNA的miRNA mimic和敲低miRNA的miRNA inhibitor。检测miRNA-124-3p,EV71核酸,细胞病变效应(CPE),病毒滴度TCID_(50),Ratio值,VP1、STAT3、P-STAT3、CC-ND2、MMP2蛋白表达。结果与miR-124-3p mimic NC组比,miR-124-3p mimic组miR-124-3p上升,LgTCID_(50)降低,EV71核酸的复制受抑,转染野生型miRSTAT3-WT质粒细胞活性被上调的miRNA-124-3p抑制,STAT3、P-STAT3、CC-ND2和MMP2降低(均P<0.05),与miR-124-3p inhibitorNC组比,miR-124-3p inhibitor组miR-124-3p降低,CPE增高,STAT3、P-STAT3、CC-ND2和MMP2升高(均P<0.05)。结论EV71感染SK-N-SH神经细胞,复制受抑,与microRNA-124-3p靶向抑制STAT通路分子STAT3、P-STAT3、CCND2和MMP2有关。 展开更多
关键词 microrna-124-3p 肠道病毒 信号传导及转录激活因子3
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